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LncRNA SNHG5/miR-26a-5p/MTDH信号轴促进结直肠癌转移的机制研究

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中国癌症杂志 2023年第7期33卷 673-685页

作者：冶俊玲郑小影郭新建陈瑞慧杨柳苟笑丹蒋汉梅青海大学附属医院病理科青海西宁810001 青海大学附属医院消化内科青海西宁810001

背景与目的:长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因5(long non-coding RNA small nucleolar RNA host gene 5,lncRNA SNHG5)在多种癌症中发挥促癌作用,但其对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的影响和调节机制尚不清楚。本研究旨在探究lncRNA SNHG5/miR-26a-5p/异粘蛋白(metadherin,MTDH)信号轴促进CRC转移的机制。方法:分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中的数据,探索CRC中异常表达的lncRNA并进行生存分析。收集2020年10月—2021年10月经手术切除的100例CRC、癌旁组织样本及患者的完整临床资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测lncRNA SNHG5、miR-26a-5p表达水平,采用免疫组织化学法检测MTDH的表达水平,分析lncRNA SNHG5在CRC中的相对表达水平与临床病理学特征及生存期的关系。通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测、克隆形成、划痕、transwell实验及体内异种移植实验检测lncRNA SNHG5对CRC细胞增殖、迁移及侵袭的影响,通过蛋白质印迹法(Western blot)和免疫组织化学检测CRC细胞转移、上皮-间充质转化相关分子表达水平与lncRNA SNHG5表达水平的关系。通过RNA下拉实验、双荧光素酶报告基因检测、RNA免疫共沉淀实验探究SNHG5与miR-26a-5p、MTDH与miR-26a-5p在物理上的相互作用,通过CCK-8、EdU、transwell实验验证三者在功能上的相互关系,采用Western blot检测分析SNHG5、miR-26a-5p、MTDH表达对迁移、侵袭相关分子的影响。结果:TCGA数据库分析结果显示,lncRNA SNHG5在CRC中显著上调。RTFQ-PCR和免疫组织化学检测结果显示,CRC组织中lncRNA SNHG5、MTDH水平显著上调(P<0.05),miR-26a-5p水平下降(P<0.05),SNHG5高表达的样本中MTDH水平也较高。浆膜及浆膜外浸润、远处转移、淋巴结转移、TNMⅢ期的CRC组织lncRNA SNHG5表达量高于浆膜下浸润、无远处转移、无淋巴结转移、TNMⅠ~Ⅱ期的组织,差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析结果显示,lncRNA SNHG5高表达与总生存率显著相关(P<0.05)。过表达lncRNA SNHG5能够提升CRC细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力,促进移植瘤生长和肺转移,提高Ki-67增殖指数和波形蛋白(vimentin)的相对表达水平(P<0.05),降低E钙粘蛋白(E-cadherin)的相对表达水平(P<0.05),而抑制lncRNA SNHG5表达后CRC细胞的发展受到抑制。RNA下拉实验、双荧光素酶报告基因检测、RNA免疫共沉淀实验证实SNHG5与miR-26a-5p、MTDH及miR-26a-5p存在物理上的相互作用,在lncRNA SNHG5过表达细胞中上调miR-26a-5p或下调MTDH表达可部分逆转lncRNA SNHG5对CRC细胞增殖、迁移、侵袭及相关分子表达水平的影响。结论:LncRNA SNHG5在CRC组织和细胞中表达上调,其高表达与肿瘤进展及生存不良有关,可作为miR-26a-5p的分子海绵调节MTDH表达促进SW620细胞增殖和转移。

关键词：长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因5 miR-26a-5p 异黏蛋白结直肠癌转移

结直肠癌中RASSF7表达及其对结直肠癌细胞生物学特性的影响

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临床与实验病理学杂志 2022年第9期38卷 1030-1034页

作者：郑小影郭新建陈瑞慧王丰梅冶俊玲慧芳青海大学附属医院病理科西宁810001

目的探讨Ras相关结构域家族成员7(Ras-association domain family 7,RASSF7)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中的表达及对CRC细胞系生物学特性的影响。方法应用免疫组化法检测RASSF7在80例CRC组织中的表达,并分析其与各临床病理... 详细信息

目的探讨Ras相关结构域家族成员7(Ras-association domain family 7,RASSF7)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中的表达及对CRC细胞系生物学特性的影响。方法应用免疫组化法检测RASSF7在80例CRC组织中的表达,并分析其与各临床病理特征的关系;Western blot实验检测RASSF7在CRC细胞系中的表达,选出RASSF7高、低表达的CRC细胞株各一种,应用RASSF7过表达质粒和敲除质粒瞬时转染CRC细胞,MTT和Transwell实验分别检测RASSF7对CRC细胞增殖及侵袭的影响。结果免疫组化结果显示:CRC组织中RASSF7高表达50例,低表达30例,CRC组织中RASSF7表达明显高于癌旁正常组织,RASSF7高表达与患者年龄(P=0.238)、性别(P=0.065)及肿瘤分化程度(P=0.238)无关,而与TNM分期(P<0.001)及淋巴结转移(P=0.030)相关;RASSF7过表达可促进CRC细胞的增殖及侵袭能力(P<0.01),而敲除RASSF7则作用相反(P<0.01)。结论RASSF7在CRC中可能发挥促癌基因的作用,其高表达可显著促进CRC细胞的增殖及侵袭能力。

关键词：结直肠肿瘤 RASSF7 增殖侵袭免疫组织化学

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ASAP1与FAK在肿瘤中的研究进展

临床医学进展 2023年第4期13卷 6450-6456页

作者：范静王丰梅郑小影徐梦蝶冶俊玲青海大学附属医院病理科青海西宁

肿瘤的发生机制复杂,而肿瘤的播散更是一个多方面参与的过程,其中细胞骨架的失调及细胞外基质的破坏、上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)扮演的角色至关重要。ASAP1 (Arf糖激化因子GTP酶活化蛋白)通过定位于细胞膜... 详细信息

肿瘤的发生机制复杂,而肿瘤的播散更是一个多方面参与的过程,其中细胞骨架的失调及细胞外基质的破坏、上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)扮演的角色至关重要。ASAP1 (Arf糖激化因子GTP酶活化蛋白)通过定位于细胞膜内外,调整细胞骨架,改变细胞极性,最终导致肿瘤转移。黏着斑激酶(Focal adhesion kinas, FAK)可以与ASAP1结合形成复合物,参与调节细胞外基质(Extracellular matrix, ECM)的成分,影响肿瘤细胞微环境及细胞骨架重组,从而促进肿瘤细胞的转移。本文简要回顾了两种蛋白在一些肿瘤中的表达及新进展,希望能在肿瘤诊断及治疗上提供参考。

关键词： ASAP1 FAK 文献综述

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乳腺肿块的高频彩超诊断与病理基础分析

中国超声医学杂志 2008年第10期24卷 891-893页

作者：马淑梅陈焕新冶俊玲青海大学附属医院超声科

目的探讨高频彩超诊断乳腺良恶性肿块的声像图特征及其诊断价值。方法对经病理证实的乳腺良性肿块22例和恶性肿块20例的高频彩超声像图进行回顾性分析。结果本组大多数恶性肿块形态不规则,边界不清,内部回声不均匀,以低回声为主,部分后... 详细信息

目的探讨高频彩超诊断乳腺良恶性肿块的声像图特征及其诊断价值。方法对经病理证实的乳腺良性肿块22例和恶性肿块20例的高频彩超声像图进行回顾性分析。结果本组大多数恶性肿块形态不规则,边界不清,内部回声不均匀,以低回声为主,部分后方有衰减,肿块纵横比>1。彩色多普勒血流分级大多数为-级;PI值>1.2,RI值>0.70。8例(36.3%)同侧腋窝淋巴结肿大,血流丰富。乳腺良性肿块大多表现为:形态规则,边缘光整,内部回声均匀,侧缘回声减弱,纵横比<1;彩色多普勒血流分级大多数为0-级;PI值<1.2RI值<0.70。结论高频彩超对乳腺肿块的检出率高,高频二维超声特征接合彩色多普勒表现对乳腺良恶性肿瘤的鉴别诊断具有较高的临床应用价值。

关键词：高频彩超乳腺肿块病理

子宫内膜样腺癌中酪氨酸蛋白激酶受体A7和星形胶质细胞上调基因-1的表达及相关性

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中国老年学杂志 2018年第10期38卷 2374-2376页

作者：金艳霞张晓兰冶俊玲青海大学附属医院肿瘤妇科青海西宁810001 青海大学附属医院病理科

目的应用免疫组化方法检测子宫内膜样腺癌中酪氨酸蛋白激酶受体(Eph)A7和星形胶质细胞上调基因(AEG)-1的表达特征,探讨二者与临床病理特征的关系。方法观察组为57例确诊为子宫内膜样腺癌并行手术根治的患者,对照组1为子宫内膜复杂性增... 详细信息

目的应用免疫组化方法检测子宫内膜样腺癌中酪氨酸蛋白激酶受体(Eph)A7和星形胶质细胞上调基因(AEG)-1的表达特征,探讨二者与临床病理特征的关系。方法观察组为57例确诊为子宫内膜样腺癌并行手术根治的患者,对照组1为子宫内膜复杂性增生伴不典型增生21例,对照组2为子宫内膜复杂性增生不伴不典型增生21例,对照组3为子宫脱垂后行子宫全切后15例,均留取术后子宫内膜的蜡块组织,Eph A7和AEG-1的表达均应用免疫组化SP法检测。结果 4组Eph A7和AEG-1表达的阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。观察组Eph A7和AEG-1表达与肿瘤增殖指数、肿瘤最大径相关;AEG-1表达与肿瘤浸润深度密切相关。二者均与年龄、肿瘤分化程度及淋巴结转移无明显相关性。相关分析显示观察组Eph A7和AEG-1表达呈正相关。结论 Eph A7和AEG-1在子宫内膜样腺癌中的表达升高,二者具有正向协同作用,共同促进肿瘤的形成和进展。

关键词：子宫内膜样腺癌酪氨酸蛋白激酶受体A7 星形胶质细胞上调基因-1

食管鳞癌组织中β微管蛋白Ⅲ、Stathmin和P糖蛋白的表达与预后

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世界华人消化杂志 2012年第27期20卷 2613-2617页

作者：冶俊玲韩静绮郭新建王丰梅青海大学附属医院病理科青海省西宁市810001

目的:探讨食管鳞癌组织中β微管蛋白Ⅲ(β-tubulin Ⅲ)、Stathmin和P糖蛋白(P-gp)的表达与预后及紫杉醇化疗疗效的关系.方法:回顾性分析76例食管鳞癌患者的临床病历资料,采用免疫组织化学方法检测76例鳞癌组织和40例正常食管黏膜组织中... 详细信息

目的:探讨食管鳞癌组织中β微管蛋白Ⅲ(β-tubulin Ⅲ)、Stathmin和P糖蛋白(P-gp)的表达与预后及紫杉醇化疗疗效的关系.方法:回顾性分析76例食管鳞癌患者的临床病历资料,采用免疫组织化学方法检测76例鳞癌组织和40例正常食管黏膜组织中β-tubulin Ⅲ、Stathmin和P-gp蛋白的表达,对64例根治术后用含紫杉醇药物行辅助化疗患者的疗效与3种蛋白的表达关系进行分析.结果:食管鳞癌组织中β-tubulin Ⅲ、Stathmin和P-gp蛋白表达阳性率分别为63.2%、54.0%和64.5%,明显高于正常黏膜中的10%、10%和20%(均P=0.000),并且β-tubulin Ⅲ、Stathin及P-gp在低分化、有淋巴结转移及Ⅲ、Ⅳ期肿瘤中阳性率均明显升高,分别为66.7%、77.8%、74.1%;76.9%、69.2%、61.5%;69.2%、61.5%、69.2%(均P<0.05).64例术后用含紫杉醇化疗的患者中β-tubulin Ⅲ、Stathmin及P-gp蛋白阳性组的化疗有效率明显低于阴性组(P值分别为0.024、0.024、0.012).结论:食管癌中β-tubulin Ⅲ、Stathmin和P-gp蛋白阳性率表达均明显升高,预示肿瘤的恶性程度较高且预后差.

关键词：食管鳞癌 β微管蛋白Ⅲ Stathmin P糖蛋白紫杉醇

CK19、Galectin-3、MC和TPO在甲状腺微小乳头状癌中的表达及意义

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青海医药杂志 2012年第7期42卷 2-5页

作者：冶俊玲青海大学附属医院病理科 810001

目的:探讨细胞角蛋白19(CK19)、β-半乳糖苷结合蛋白(Galectin-3)、间皮表面微绒毛抗原(MC)及糖基化血红素蛋白(TPO)在甲状腺微小乳头状癌和良性乳头状增生中的表达及其在诊断与鉴别诊断中的意义。方法:采用免疫组化SP法检测34例甲状腺... 详细信息

目的:探讨细胞角蛋白19(CK19)、β-半乳糖苷结合蛋白(Galectin-3)、间皮表面微绒毛抗原(MC)及糖基化血红素蛋白(TPO)在甲状腺微小乳头状癌和良性乳头状增生中的表达及其在诊断与鉴别诊断中的意义。方法:采用免疫组化SP法检测34例甲状腺微小乳头状癌与31例良性乳头状增生中CK19、Galectin-3、MC和TPO的表达。结果:CK19、Galectin-3、MC和TPO的阳性表达分别为97.1%,97.1%,94.1%,11.8%;在31例甲状腺良性乳头状增生性病变中CK19、Galectin-3、MC和TPO的阳性表达分别为25.8%、22.6%、3.2%、100.0%。CK19、Galectin-3、MC和TPO在甲状腺微小乳头状癌和良性乳头状增生性病变中的表达差异有显著性(P<0.01)。四种抗体在鉴别诊断中的敏感性分别为97.1%、97.1%、94.1%、88.2%;特异性分别为74.2%、77.4%、96.8%、100.0%;准确度分别为86.2%、87.7%、95.4%、93.8%。结论:CK19、Galectin-3、MC及TPO是诊断甲状腺微小乳头状癌的重要标志。联合检测四种抗体在甲状腺微小乳头状癌与甲状腺良性乳头状增生的鉴别诊断中具有重要价值。

关键词：甲状腺微小乳头状癌甲状腺良性乳头状增生 CK19 Galectin-3 MC TPO 免疫组化

趋化因子CXCL4L1及其受体CXCR3在胰腺癌转移中的作用机制

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中国老年学杂志 2020年第11期40卷 2402-2405页

作者：韩静绮张易青冶俊玲郭新建王丰梅青海大学附属医院病理科青海西宁810001

目的观察CXC趋化因子配体(CXCL)4L1及其受体CXCR3在胰腺癌中的表达,并探讨二者在胰腺癌转移中的作用。方法 RT-PCR检测CXCL4和CXCL4L1胰腺腺癌细胞BxPC3和胰腺导管癌细胞Panc-1中的mRNA水平,免疫荧光检测CXCL4L1在BxPC3细胞和经成肌纤... 详细信息

目的观察CXC趋化因子配体(CXCL)4L1及其受体CXCR3在胰腺癌中的表达,并探讨二者在胰腺癌转移中的作用。方法 RT-PCR检测CXCL4和CXCL4L1胰腺腺癌细胞BxPC3和胰腺导管癌细胞Panc-1中的mRNA水平,免疫荧光检测CXCL4L1在BxPC3细胞和经成肌纤维细胞共培养的BxPC3细胞中的表达,CXCR3在BxPC3和Panc-1细胞中的表达。免疫组化检测CXCL4L1及其受体CXCR3在胰腺腺癌组织和肺转移的组织中的表达。结果 CXCL4在胰腺腺癌细胞BxPC3和胰腺导管癌细胞Panc-1中均有表达,但差异无统计学意义(P>0.05),且CXCL4L1在胰腺导管癌细胞Panc-1中mRNA相对表达量显著高于胰腺腺癌细胞BxPC3(P<0.05);CXCL4L1的相对荧光表达量在BxPC3与成肌纤维细胞共培养时显著高于单独BxPC3细胞培养时的相对荧光表达量(P<0.05);CXCR3在胰腺导管癌细胞Panc-1的相对荧光表达量显著高于胰腺腺癌细胞BxPC3(P<0.05);免疫组化检测结果显示,CXCL4L1在肺转移的胰腺导管癌组织中的阳性表达显著高于胰腺导管癌原发肿瘤组织,CXCR3在肺转移组织中的阳性表达显著高于胰腺导管癌原发肿瘤组织(均P<0.05)。结论趋化因子CXCL4L1和CXCR3受体在胰腺癌肺转移的组织中高表达,其可能对胰腺癌的转移具有促进作用。

关键词： CXCL4L1 CXCR3 胰腺腺癌转移

UroplakinⅢ与Twist在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义

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标记免疫分析与临床 2012年第4期19卷 207-209页

作者：冶俊玲贺萍青海大学附属医院病理科青海西宁810001 武警青海总队医院神经内科青海西宁810000

目的探讨UroplakinⅢ(UPⅢ)、Twist在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测UPⅢ和Twist的表达。结果 UPⅢ在140例膀胱尿路上皮癌组的表达阳性率为15.7%(22/140)低于70例正常膀胱粘膜组71.4%(50/70),差异有统计... 详细信息

目的探讨UroplakinⅢ(UPⅢ)、Twist在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测UPⅢ和Twist的表达。结果 UPⅢ在140例膀胱尿路上皮癌组的表达阳性率为15.7%(22/140)低于70例正常膀胱粘膜组71.4%(50/70),差异有统计学意义(P0.05)。结论 UPⅢ表达缺失及Twist的阳性表达均与膀胱尿路上皮癌的病理分级,TNM分期及淋巴管浸润有相关性,联合检测两者对诊断及评估预后膀胱尿路上皮癌有实用价值。

关键词：膀胱尿路上皮癌免疫组化 UroplakinⅢ Twist