检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

永生化尼罗罗非鱼巨噬细胞系的建立及鉴定

水产学报 2018年第3期42卷 376-387页

作者：张永德潘传燕余艳玲冯鹏霏罗洪林广西水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室

为获得具有单一克隆特性的能稳定传代培养的罗非鱼巨噬细胞系,本研究从尼罗罗非鱼腹腔中分离纯化巨噬细胞,采用EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染,筛选单克隆细胞的方法建立了尼罗罗非鱼巨噬细胞系,并对其进行了EBV感染鉴定、电镜观... 详细信息

为获得具有单一克隆特性的能稳定传代培养的罗非鱼巨噬细胞系,本研究从尼罗罗非鱼腹腔中分离纯化巨噬细胞,采用EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染,筛选单克隆细胞的方法建立了尼罗罗非鱼巨噬细胞系,并对其进行了EBV感染鉴定、电镜观察、端粒酶活性检测、致癌性评估、核型分析以及分子生物学鉴定。研究表明,EBV已整合到尼罗罗非鱼巨噬细胞中且稳定表达,经30代稳定传代,该细胞系仍维持较好的增殖状态;该细胞系表面不平滑,有明显的钝圆形突起和细长的伪足,表现为典型的巨噬细胞形态;端粒酶活性显著高于未经感染的巨噬细胞,而与He La细胞差异不显著,且该细胞系不具有致癌性,说明永生化细胞系构建成功。核型分析结果发现,该细胞系具有44条染色体,其核型公式为2 n=2 x=44=4 sm+17 st+1 t。PCR检测发现,该细胞系存在CD33和CD205的转录本,这些都是单核巨噬细胞的标志物,经18S r RNA检测证明该细胞系来自尼罗罗非鱼巨噬细胞。永生化尼罗罗非鱼巨噬细胞系已被成功建立,该细胞系为研究罗非鱼链球菌HSP70-肽疫苗的高保护率,以及罗非鱼的免疫防御机制提供了工具。

关键词：尼罗罗非鱼巨噬细胞永生化细胞系

投喂频率和水平对长吻鮠幼鱼消化酶和肝胰脏脂肪代谢酶活性的影响

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

云南农业大学学报（自然科学版） 2019年第5期34卷 779-784页

作者：刘康何金钊冯鹏霏马华威罗旭广西壮族自治区水产引育种中心广西南宁530031 广西壮族自治区水产科学研究院广西南宁530031

【目的】研究不同投喂频率(2次/d、3次/d)和水平(即每日投喂量占试验鱼体重的比例,2%、4%、6%、8%、10%)对长吻鮠幼鱼消化酶和肝胰脏脂肪代谢酶活性的影响,为长吻鮠的人工养殖提供更健康的养殖模式。【方法】采用SPSS 17.0软件进行双因... 详细信息

【目的】研究不同投喂频率(2次/d、3次/d)和水平(即每日投喂量占试验鱼体重的比例,2%、4%、6%、8%、10%)对长吻鮠幼鱼消化酶和肝胰脏脂肪代谢酶活性的影响,为长吻鮠的人工养殖提供更健康的养殖模式。【方法】采用SPSS 17.0软件进行双因素方差分析后采用Duncan多重比较检验,显著水平为0.05。【结果】(1)当每日投喂频率为3次、投喂水平为6%时,长吻鮠幼鱼消化酶中的肠道蛋白酶、肠道淀粉酶和胰蛋白酶的活性最高,显著高于每日投喂频率为2次、投喂水平为10%的试验组以及每日投喂频率为3次、投喂水平为2%和10%的试验组(P<0.05)。(2)当每日喂频率为3次、投喂水平为6%时,肝胰脏脂肪代谢酶中的肉毒碱脂酰转移酶(CACT)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂蛋白酯酶(LPL)和肝脂酶(HL)的活性最高,显著高于每日投喂频率为2次、投喂水平为2%的试验组以及每日投喂频率为3次、投喂水平为8%和10%的试验组(P<0.05)。【结论】最适宜投喂频率和水平分别是3次/d和6%,更适合长吻鮠幼鱼的健康养殖。

关键词：长吻鮠投喂频率投喂水平消化酶脂肪代谢酶

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

罗氏沼虾幼体培育试验

安徽农业科学 2011年第10期39卷 5905-5906页

作者：江林源黄光华卢小花冯鹏霏邓潜广西水产研究所广西南宁530021 国家级广西南宁罗氏沼虾良种场广西南宁530021

[目的]研究罗氏沼虾幼体培育技术。[方法]在127.3 m3水体中投放2 700×104 ind罗氏沼虾幼体,采取控制鱼苗密度、加强水质调控、不用抗生素的群落生态法进行培育,并观察培育效果。[结果]经25 d左右培育,90%幼体变态,获淡化虾苗1 721.3×1... 详细信息

[目的]研究罗氏沼虾幼体培育技术。[方法]在127.3 m3水体中投放2 700×104 ind罗氏沼虾幼体,采取控制鱼苗密度、加强水质调控、不用抗生素的群落生态法进行培育,并观察培育效果。[结果]经25 d左右培育,90%幼体变态,获淡化虾苗1 721.3×104 ind,单位水体产量为13.5×104 ind/m3。平均育苗成活率为63.7%,平均运输成活率为85.9%。苗种达到DB45/T515-2008要求。[结论]生态法可对罗氏沼虾实现健康育苗。罗氏沼虾生态方法育苗切实可行。

关键词：罗氏沼虾健康育苗生态法

维普期刊数据库博看期刊

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

浅析广西水库渔业发展现状

广西水产科技 2016年第4期 3-6页

作者：吕敏甘晖冯鹏霏广西水产科学研究院南宁530021 广西水产畜牧学校南宁530021

本文介绍了广西水库渔业发展现状和存在的问题，提出发展库区渔业的措施及今后的发展前景。

关键词：水库渔业现状措施

尼罗罗非鱼Hsc70的原核表达和多克隆抗体制备

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

浙江农业学报 2019年第8期31卷 1272-1279页

作者：潘传燕林勇冯鹏霏张永德罗洪林广西水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室

通过原核表达系统表达尼罗罗非鱼热休克蛋白Hsc70,纯化该蛋白并制备其多克隆抗体。对尼罗罗非鱼热休克蛋白进行生物信息学分析,设计特异性引物,扩增出Hsc 70基因,通过双酶切与pET-28a构建重组质粒表达载体,并转入大肠埃希菌B21中通过诱... 详细信息

通过原核表达系统表达尼罗罗非鱼热休克蛋白Hsc70,纯化该蛋白并制备其多克隆抗体。对尼罗罗非鱼热休克蛋白进行生物信息学分析,设计特异性引物,扩增出Hsc 70基因,通过双酶切与pET-28a构建重组质粒表达载体,并转入大肠埃希菌B21中通过诱导剂IPTG进行原核诱导表达,表达产物用SDS-PAGE鉴定并用镍柱进行纯化。将纯化后的重组蛋白免疫日本大耳兔制备多克隆抗体,用ELISA测定抗体效价,Western blot检测抗体特异性。结果表明,原核表达系统成功表达了尼罗罗非鱼热休克蛋白Hsc70,重组蛋白分子量约为75 ku,主要以包涵体形式表达。经镍柱纯化得到高纯度的Hsc70;该蛋白免疫日本大耳兔获得特异性多克隆抗体,效价为1∶2 048 000;Western blot检测到一条75 ku的特异性条带,表明该抗体能特异性地识别尼罗罗非鱼Hsc70蛋白。尼罗罗非鱼Hsc70蛋白在大肠埃希菌中成功表达,制备的重组蛋白和多克隆抗体为深入研究尼罗罗非鱼Hsc70的功能提供了分子工具。

关键词：尼罗罗非鱼 Hsc70 原核表达多克隆抗体

尼罗罗非鱼PPARo的原核表达及其多抗制备和纯化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

福建农业学报 2019年第9期34卷 1053-1058页

作者：潘传燕冯鹏霏张永德罗洪林广西水产科学研究院/广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室，广西南宁 530021

【目的】为研究尼罗罗非鱼过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)的表达情况,通过大肠杆菌表达系统表达PPARδ,纯化重组蛋白并获得多克隆抗体。【方法】对PPARδ进行生物信息学分析后设计特异性引物,扩增PPARδ,将其克隆至原核表达载体p... 详细信息

【目的】为研究尼罗罗非鱼过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)的表达情况,通过大肠杆菌表达系统表达PPARδ,纯化重组蛋白并获得多克隆抗体。【方法】对PPARδ进行生物信息学分析后设计特异性引物,扩增PPARδ,将其克隆至原核表达载体pET-B2m中,构建重组表达载体;重组质粒转入大肠杆菌B21并用IPTG进行诱导表达,用SDS-PAGE鉴定表达产物。用镍柱纯化重组蛋白后免疫日本大耳兔制备多克隆抗体,用间接ELISA技术检测抗体效价,Western Blot鉴定抗体的特异性。【结果】成功构建了原核表达载体pET-B2m-PPARδ,实现了重组蛋白的原核表达和纯化,重组蛋白以包涵体蛋白和可溶性蛋白2种形式存在,分子量约为90 kD;制备的多克隆抗体效价为1∶2048000,Western Blot检测结果表明该抗体能特异性识别尼罗罗非鱼PPARδ。【结论】成功实现了尼罗罗非鱼PPARδ重组蛋白的融合表达,在大肠杆菌中高效表达后纯化重组蛋白,免疫日本大耳兔获得了效价高、特异性强的多克隆抗体,为尼罗罗非鱼PPARδ的功能研究奠定了基础。

关键词：尼罗罗非鱼 PPARo 原核表达多克隆抗体

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

罗氏沼虾幼体质量对育苗影响的研究

科学养鱼 2011年第1期33卷 7-8页

作者：卢小花江林源黄光华冯鹏霏邓潜莫肇誉广西水产研究所 530021 广西壮族自治区科学技术协会

罗氏沼虾引进我国的30多年来,养殖规模不断扩大。据统计,2009年全国养殖面积约60万亩,养殖产量约为20万吨,约有200多家罗氏沼虾育苗场,罗氏沼虾的年育苗量在400亿尾左右。2010年长三角地区的育苗遭遇重大的挫折,导致全国的罗氏沼虾闹＂... 详细信息

罗氏沼虾引进我国的30多年来,养殖规模不断扩大。据统计,2009年全国养殖面积约60万亩,养殖产量约为20万吨,约有200多家罗氏沼虾育苗场,罗氏沼虾的年育苗量在400亿尾左右。2010年长三角地区的育苗遭遇重大的挫折,导致全国的罗氏沼虾闹＂苗荒＂,

关键词：罗氏沼虾育苗场幼体质量养殖规模长三角地区养殖面积