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大连医科大学学报 2024年第4期46卷 368-372页

作者：刘鸽冯鑫妍生杰王丽华大连医科大学附属第二医院肾内科辽宁大连116027

1临床资料患者,女,66岁。因“双下肢水肿伴尿泡沫增多1周”为主诉于2019年7月10日第1次入住大连医科大学附属第二医院肾内科。患者于1周前发现双下肢对称性水肿,呈凹陷性,伴尿泡沫增多,无排尿不适,无腰痛,自诉血压正常,就诊于我院门诊... 详细信息

1临床资料患者,女,66岁。因“双下肢水肿伴尿泡沫增多1周”为主诉于2019年7月10日第1次入住大连医科大学附属第二医院肾内科。患者于1周前发现双下肢对称性水肿,呈凹陷性,伴尿泡沫增多,无排尿不适,无腰痛,自诉血压正常,就诊于我院门诊查尿常规:蛋白尿(3+),无镜下血尿,24 h尿蛋白量3 600 mg,为进一步诊治入住肾内科病房。患者发病以来无发热,无口干、眼干、脱发,无关节肿痛,无咳嗽、咳痰,无胸闷、气短,无恶心、呕吐,无腹痛、腹胀、腹泻,无尿频、尿急、尿痛,无紫外线过敏及口腔溃疡,无新发皮疹等不适主诉,食欲睡眠可,近期体重增加约3 kg。

关键词：膜性肾病抗肾小球基底膜病新月体肾炎

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生物学实验中常用试剂对抗原抗体反应影响及可能造成的实验信息丟失和错误的定量分析

生物学实验中常用试剂对抗原抗体反应影响及可能造成的实验信息丟...

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作者：冯鑫妍大连医科大学

学位级别：硕士

目的:对生物学实验Western Blot中常用试剂SDS及免疫组织化学技术组织前处理过程和乙醇对抗原、抗体活性及DNA影响进行定量分析,间接反映其对抗原抗体反应可能造成的实验信息的丢失和错误,并试图寻找替代试剂。方法:1、采用双向免疫扩... 详细信息

目的:对生物学实验Western Blot中常用试剂SDS及免疫组织化学技术组织前处理过程和乙醇对抗原、抗体活性及DNA影响进行定量分析,间接反映其对抗原抗体反应可能造成的实验信息的丢失和错误,并试图寻找替代试剂。方法:1、采用双向免疫扩散实验,通过观察沉淀线及确定抗原效价定量分析SDS处理血清后对血清抗原的影响。2、采用免疫散射比浊技术,定量分析SDS处理血清后对IgA、IgM、IgG抗原的影响。3、采用电化学发光技术,定量分析SDS处理乙肝表面抗原阳性血清后对乙肝表面抗原的影响。4、采用免疫固定电泳技术,分析SDS处理血清后对免疫球蛋白抗原结构的影响。5、采用凝集实验,通过比较凝集效价及凝集强度定量分析免疫组织化学组织前处理过程和所应用试剂处理颗粒型抗原后对颗粒型抗原的影响。6、采用酶联免疫吸附试验,定量分析SDS及乙醇处理乙肝表面抗体阳性血清后对乙肝表面抗体的影响;定量分析SDS对不同类型患者伤寒及卵清抗体的影响有无差异。7、采用荧光定量PCR技术,将DNA模板经SDS及乙醇处理,通过对GAPDH及CRP基因的扩增,比较Ct值,计算实验组与对照组Ct值之差,即△Ct值,及抑制率,定量分析sds及乙醇对dna的影响。8、通过酶联免疫吸附试验及荧光定量pcr技术测定sds及十二烷基麦芽糖苷(ddm)对乙肝表面抗体及dna的影响,并进行比较,探讨ddm在蛋白质提取时,对sds的替代作用。结果:1、双向免疫扩散实验结果显示:对照组抗原效价为1:256,sds37℃实验组抗原效价为1:4,sds100℃实验组抗原已破坏,结果无沉淀线产生。2、免疫散射比浊实验结果显示:sds37℃实验组iga、igm、igg较对照组略有上升,sds100℃实验组iga、igg抑制率在90%以上,igm为30%。3、电化学发光实验结果显示:sds37℃实验组乙肝表面抗原抑制率为70%,sds100℃实验组为96%。4、免疫固定电泳技术结果显示:经sds处理后,免疫球蛋白抗原结构被破坏。5、凝集实验结果显示:免疫组织化学技术组织前处理过程对抗原的抑制率为72.2%。各试剂单独处理抗原与对照组相比结果为:75%以上的高浓度乙醇对抗原活性的抑制率约为70%,甲醛抑制率约为20%,二甲苯约为10%。6、酶联免疫吸附试验结果显示:sds对乙肝表面抗体的半数抑制浓度为0.92%(32mmol/l);30%乙醇对hbsab无明显抑制作用;0.1%sds对伤寒抗体及卵清抗体具有一定的抑制作用,但是在对icu患者与健康体检者及不同年龄组健康体检者之间对这两种抗体的抑制作用无明显差异。7、荧光定量pcr技术结果显示:sds及乙醇处理dna模板后,gapdh及crp扩增的ct值随sds及乙醇浓度的增加而增加,0.05%(1.74mmol/l)sds处理后,无扩增曲线。8、sds及ddm对乙肝表面抗体的半数抑制浓度分别为0.92%(32mmol/l)和1.90%(37mmol/l);致使基因不能被扩增出来的处理浓度,sds为0.05%(1.74mmol/l),ddm在5%(98mmol/l)左右。结论:1、sds、免疫组织化学技术组织前处理过程及该过程所应用试剂对抗原、抗体活性及dna均具有一定的抑制作用,可能造成抗原抗体反应信息的丢失及结果的错误。2、DDM对DNA的抑制作用较小,优于SDS。

关键词： SDS 抗原活性免疫组织化学技术 DDM

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类风湿因子阴性及不同滴度阳性的类风湿关节炎患者的实验室及临床特征分析

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大连医科大学学报 2022年第5期44卷 415-419页

作者：邢雪刘佳庆冯鑫妍大连医科大学附属第二医院检验科辽宁大连116027 大连医科大学基础医学院免疫学教研室辽宁大连116044 大连医科大学附属第二医院肾内科辽宁大连116027

目的分析类风湿因子(rheumatoid factor,RF)阴性及不同滴度阳性的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的实验室及临床特征差异。方法研究共纳入从2019年1月至2020年5月于大连医科大学附属第二医院住院的RA患者123例,这些患者3个... 详细信息

目的分析类风湿因子(rheumatoid factor,RF)阴性及不同滴度阳性的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的实验室及临床特征差异。方法研究共纳入从2019年1月至2020年5月于大连医科大学附属第二医院住院的RA患者123例,这些患者3个月内均未应用糖皮质激素及免疫抑制剂等可能影响本研究结果的药物。将患者分为RF阴性组、RF低滴度组(≤上限3倍)和RF高滴度组(>上限3倍)。比较三组的一般资料、实验室指标(血液学、免疫学、血糖和血脂指标)、影像学资料(骨侵蚀或骨破坏)、部分临床合并症,包括间质性肺疾病(interstitial lung disease,ILD)、干燥综合征(sjogren syndrome,SS)、甲状腺疾病(甲状腺结节、甲状腺炎症等)。结果三组患者的年龄、性别、病程、DAS28评分、ESR及CRP差异均无统计学意义(P>0.05)。三组患者外周血WBC水平有统计学差异(P=0.028),两两比较显示RF阴性组高于RF高滴度组(P=0.012)。三组患者的C3水平、IgM水平及抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)水平差异均有统计学意义(P=0.036,P=0.005,P0.05)。结论RF阴性的RA患者仍处于炎症高反应状态,应该及早关注实验室指标及影像学异常,早期预测心脑血管疾病和代谢综合征等危险因素,帮助早期诊断和精准化干预治疗。

关键词：类风湿关节炎类风湿因子滴度实验室指标

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