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水牛腔前卵泡分离培养的初步研究

水牛腔前卵泡分离培养的初步研究

作者：冯贵雪广西大学

学位级别：硕士

本研究对水牛卵泡在卵巢中的分布规律及组织学特征、水牛腔前卵泡的分离与培养方法进行了系统研究。 (1)用常规石蜡切片法研究水牛卵泡在卵巢中的分布规律与结构特征。结果表明，各级卵泡的分布具有明显的区域性：原始卵泡位于卵巢... 详细信息

本研究对水牛卵泡在卵巢中的分布规律及组织学特征、水牛腔前卵泡的分离与培养方法进行了系统研究。 (1)用常规石蜡切片法研究水牛卵泡在卵巢中的分布规律与结构特征。结果表明，各级卵泡的分布具有明显的区域性：原始卵泡位于卵巢皮质的最外层，形成原始卵泡层，初级卵泡位子皮质的中层，次级卵泡位于富含血管的皮质最内层;原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡的直径分别为36.9±7.7，48.7±8.9和91.9±27.3μm;与之对应卵母细胞的直径分别为19.6±6.0，27.3±7.1，49.1±17.4μm;原始卵泡和初级卵泡的颗粒细胞数为10.8±2.3个和18.1±3.1个。 (2)对水牛腔前卵泡的分离方法进行了系统摸索。结果发现，梳刮法(M1)可从每个水牛卵巢分离得到腔前卵泡152.4±44.8枚、显著多于剪碎法(M2，32.6±14.8)和显微分离法(M3，9.0±3.4)。进一步试验发现，M1所用工具的针距以500～750μm较为合适。电镜分析结果表明，M1法不损伤卵泡的基膜。用该法分离黄牛腔前卵泡，每个卵巢可得到腔前卵泡1195.2±685.0枚。由此表明，M1能有效分离水牛和黄牛的腔前卵泡。 (3)探讨了维生素C、FSH和EGF对水牛腔前卵泡发育的影响。结果发现，维生素C能维持后期卵泡的形态，对卵泡增长及存活没有影响，FSH能促进卵泡的体外增长，但对卵泡形态及存活没有影响，当与维生素C协同作用时，促卵泡增长的作用增强;EGF能促进培养初期水牛腔前卵泡的增长，且与FSH有协同作用。 (4)探讨了不同大小水牛腔前卵泡(60～180μm)的体外培养效果。发现随着卵泡的直径增加，体外存活率升高，增长的幅度上升，异常率下降。 (5)比较了普通培养法、二维培养法(琼脂糖铺底)和三维培养法(琼脂糖包埋)的水牛腔前卵泡培养效果。结果发现，三维培养法适宜培养60～100μm的卵泡，而二维法有利于100～140μm卵泡的体外发育。

关键词：水牛,腔前卵泡,分离,培养,组织学

126周期体外受精—胚胎移植临床结局与分析

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广西医科大学学报 2006年第6期23卷 958-959页

作者：张波冯贵雪周红刘茵广西壮族自治区妇幼保健院生殖中心南宁530003

目的:了解影响体外受精—胚胎移植(IVF-ET)结局的因素。方法:用常规IVF-ET技术对123例妇女进行了126周期的治疗,对比分析妊娠组与非妊娠组的不孕原因、治疗方案、用药情况、注射绒毛膜促性腺激素(HCG)日的相关激素水平、获卵数、受精率... 详细信息

目的:了解影响体外受精—胚胎移植(IVF-ET)结局的因素。方法:用常规IVF-ET技术对123例妇女进行了126周期的治疗,对比分析妊娠组与非妊娠组的不孕原因、治疗方案、用药情况、注射绒毛膜促性腺激素(HCG)日的相关激素水平、获卵数、受精率、卵裂率、移植胚胎数、冷冻率、内膜厚度等指标对妊娠结局的影响。结果:非妊娠组HCG日的雌二醇(E2)及孕激素(P)水平高于妊娠组(P<0·001);两组间E2/P比值差异有统计学意义(P<0·05)。结论:HCG日的E2、P水平和E2/P比值与IVF-ET结局相关。

关键词：体外受精-胚胎移植 E2 P E2/P比值

Xbar质控规则在每月精液分析室内质量保证中的应用

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中国男科学杂志 2014年第8期28卷 35-38,42页

作者：舒金辉冯贵雪甘贤优张波广西壮族自治区妇幼保健院生殖中心南宁530003

目的：探讨通过Xbar图监控精液分析中各主要检测参数月均值的变化来实施实验室内部质控的有效性。方法应用Excel表格图表工具，以本实验室内2010年6月至2010年12月（共7个月）所有被检患者的精子浓度、前向运动精子百分率、不动精子百... 详细信息

目的：探讨通过Xbar图监控精液分析中各主要检测参数月均值的变化来实施实验室内部质控的有效性。方法应用Excel表格图表工具，以本实验室内2010年6月至2010年12月（共7个月）所有被检患者的精子浓度、前向运动精子百分率、不动精子百分率、精子正常形态率月均值的均值作为靶值，以靶值±2×标准误、靶值±3×标准误为警戒限和处置限绘制Xbar图。按照Xbar图的基本质控规则对各指标随后的月均值进行监测。控制限的设置随着观测值的不断增加，定期进行必要的修改。结果（1）精子浓度：2010年10月至2011年6月连续9个月均值均在控制限上侧，提示存在系统误差。（2）前向运动精子百分率：从2010年6月至2011年6月均值监控良好，而2011年6月至2012年12月活力连续偏低。（3）不动精子百分率：2011年8月份均值超过警戒限，其余均在控制限范围内。（4）精子正常形态率：2010年6月至2011年12月正常形态率均值均在10%左右；2012年连续7个月均值均在控制限以下，提示需警惕系统性误差。结论精液参数月均值Xbar图是一个简单实用、比较敏感直观的男科实验室内部质量保证方法。

关键词：精液质量控制

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不同促排卵启动时机对IVF-ET的影响

中国计划生育学杂志 2009年第8期17卷 485-487页

作者：周红张波冯贵雪方伟芬刘茵广西壮族自治区妇幼保健院生殖中心南宁530003

目的:探讨黄体中期应用长效促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)控制性超促排卵的启动时机对体外受精-胚胎移植技术(IVF-ET)结局的影响。方法:分析2008年1～12月黄体中期应用长效GnRH-a1.25mg单次肌内注射实施控制性超促排卵的IVF-ET129例... 详细信息

目的:探讨黄体中期应用长效促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)控制性超促排卵的启动时机对体外受精-胚胎移植技术(IVF-ET)结局的影响。方法:分析2008年1～12月黄体中期应用长效GnRH-a1.25mg单次肌内注射实施控制性超促排卵的IVF-ET129例,根据降调节14d前后的不同启动时间段分两组,比较不同启动时机的促排卵效果及其对体外受精结局的影响。结果:两组卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率、种植率对比,差异均无统计学意义(P>0.05),而降调节≥14d启动组启动日的促黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)值较低,用药时间较短,用药剂量较少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在控制性超促排卵过程中,个体化用药有助于提高IVF-ET的结局。GnRH-a降调节后延迟启动时机有利于降低用药剂量及用药时间,继而可以减轻患者的经济负担和精神压力。

关键词：促排卵启动时机促性腺激素释放激素激动剂(GnRH—a) 体外受精-胚胎移植(IVF— ET)

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辅助生殖技术中单胚胎移植的伦理考量

医学与哲学（A） 2016年第10期37卷 29-31,40页

作者：林若芸张波冯贵雪广西壮族自治区妇幼保健院生殖中心广西南宁530003

人类辅助生殖技术已跨入以高效、安全为主题的时代,而因辅助生殖治疗造成高概率的多胎妊娠的伦理问题也更加突出。公众乃至专科工作者都低估多胎妊娠的复杂性和其潜在的对母婴的严重危害,在具体的工作中也存在保证妊娠率与并发医源性多... 详细信息

人类辅助生殖技术已跨入以高效、安全为主题的时代,而因辅助生殖治疗造成高概率的多胎妊娠的伦理问题也更加突出。公众乃至专科工作者都低估多胎妊娠的复杂性和其潜在的对母婴的严重危害,在具体的工作中也存在保证妊娠率与并发医源性多胎妊娠的矛盾,因此在临床工作中如何贯彻执行伦理原则依然存在诸多困惑。研究证实,降低多胎妊娠的根本性防控措施是施行单胚胎移植,基于此,从伦理学角度,对单胎移植能否解决医源性多胎妊娠进行探讨。

关键词：单胚胎移植多胎妊娠母婴安全性

小剂量长效GnRH-a黄体中期卵巢刺激方案的临床效果分析

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中国计划生育学杂志 2010年第5期18卷 298-301页

作者：周红张波冯贵雪周莉谭舒尹刘茵广西壮族自治区妇幼保健院生殖中心南宁530003 广西壮族自治区妇幼保健院

目的:探讨小剂量长效促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)黄体中期控制性卵巢刺激方案临床效果及对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的影响。方法:回顾性分析行IVF-ET治疗的患者资料,按照黄体中期使用的GnRH-a剂量不同分为两组,1组GnRH-a用量为1... 详细信息

目的:探讨小剂量长效促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)黄体中期控制性卵巢刺激方案临床效果及对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的影响。方法:回顾性分析行IVF-ET治疗的患者资料,按照黄体中期使用的GnRH-a剂量不同分为两组,1组GnRH-a用量为1.25mg(1/3支),共154周期;2组GnRH-a用量为0.94mg(1/4支),共100周期,比较临床效果和IVF-ET结局。结果:两组对象卵巢刺激的时间及用药量比较差异无统计学意义(P>0.05),启动日及人绒毛膜促性腺激素(hCG)日卵泡?素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌激素(E2)、孕激素(P)等水平两组差异无统计学意义(P>0.05)。两组启动日未达降调节标准比率差异有统计学意义(3.25%与10.00%,P5.0U/L的比率差异有统计学意义(1.95%与9.00%,P0.05);获卵数、优质胚胎率两组差异无统计学意义(P>0.05),1组的正常受精率较2组高,差异有统计学意义(P0.05);胚胎种植率、早期流产率两组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:1.25mg与0.94mg剂量GnRH-a在黄体中期控制性卵巢刺激方案中,可以得到几乎相同妊娠结局,对于卵巢正常反应的人群,1.25mg剂量的效果更好些。

关键词：促性腺激素释放激素激动剂降调节体外受精-胚胎移植控制性卵巢刺激

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水牛腔前卵泡的分布及形态学研究

黑龙江畜牧兽医 2007年第4期 11-13页

作者：冯贵雪杨素芳石德顺潘红平广西大学动物繁殖研究所广西壮族自治区妇幼保健院广西南宁530003

用常规石蜡切片法研究水牛卵泡在卵巢中的分布规律与结构特征。结果表明：各级卵泡的分布具有明显的区域性；原始卵泡位于卵巢皮质的最外层，形成原始卵泡层，初级卵泡位于皮质的中层，次级卵泡位于富含血管的皮质最内层；原始卵泡、初... 详细信息

用常规石蜡切片法研究水牛卵泡在卵巢中的分布规律与结构特征。结果表明：各级卵泡的分布具有明显的区域性；原始卵泡位于卵巢皮质的最外层，形成原始卵泡层，初级卵泡位于皮质的中层，次级卵泡位于富含血管的皮质最内层；原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡的直径分别为（36．9±7．7）μm、（48．7±8．9）μm和（91．9±27．3）μm，与之对应卵母细胞的直径分别为（19．6±6．0）μm、（27．3±7．1）μm和（49．1±17．4）μm；原始卵泡和初级卵泡的颗粒细胞数为（10．8±2．3）个和（18．1±3．1）个；次级卵泡含有2～6层颗粒细胞，2～4层的颗粒细胞分布不均。

关键词：水牛腔前卵泡形态学

输卵管积水及其处理方法对冻融胚胎移植妊娠结局的影响

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中国计划生育学杂志 2010年第8期18卷 479-481页

作者：谭舒尹张波周红冯贵雪周莉刘茵广西壮族自治区妇幼保健院南宁530021

目的:讨论输卵管积水及其处理方法对冻融胚胎移植(FET)周期妊娠结局的影响。方法:对FET304个周期进行回顾性分析,观察组43周期,为FET周期中阴道B超检查提示输卵管积水者;对照组261周期,为B超检查无输卵管积水者。同时按积水的处理方式... 详细信息

目的:讨论输卵管积水及其处理方法对冻融胚胎移植(FET)周期妊娠结局的影响。方法:对FET304个周期进行回顾性分析,观察组43周期,为FET周期中阴道B超检查提示输卵管积水者;对照组261周期,为B超检查无输卵管积水者。同时按积水的处理方式将观察组分为3组:A组29例,FET前行积水抽吸术;B组3例,FET前行双侧输卵管近端结扎术;C组11例,采用药物理疗。结果:观察组种植率、妊娠率(8.43%,23.79%)低于对照组(16.28%,39.85%),差异有统计学意义(P0.05);A、B组与C组进行种植率、妊娠率、流产率、异位妊娠率的比较(6.67%,16.67%,13.04%;13.7%,33.33%,18.18%;3.45%,0%,0%;3.45%,0%,0%),差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:输卵管积水可明显降低FET种植率及妊娠率,而进行输卵管积水抽吸术未能明显改善FET的妊娠结局,行输卵管近端结扎术处理积水因例数较少,有待进一步探讨。

关键词：输卵管积水冷冻胚胎移植妊娠结局

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抗冻剂对水牛卵母细胞冷冻后孤雌发育的影响

西南大学学报（自然科学版） 2009年第12期31卷 8-13页

作者：杨素芳陈玉冯贵雪王晓丽陈自洪石德顺广西大学动物繁殖研究所南宁530005 广西壮族自治区妇幼保健院生殖中心南宁530003 广西大学动物科学技术学院南宁530005

试验主要探索了不同抗冻剂组合对水牛MⅡ期卵母细胞冷冻-解冻后孤雌发育潜力的影响.通过对3种抗冻剂组合(Ⅰ:20%乙二醇(EG)+20%二甲基亚砜(DMSO);Ⅱ:20%EG+20%1,2-丙二醇(PROH);Ⅲ:20%EG+20%PROH+10%DMSO)的毒性试验,发现试验组的形态... 详细信息

试验主要探索了不同抗冻剂组合对水牛MⅡ期卵母细胞冷冻-解冻后孤雌发育潜力的影响.通过对3种抗冻剂组合(Ⅰ:20%乙二醇(EG)+20%二甲基亚砜(DMSO);Ⅱ:20%EG+20%1,2-丙二醇(PROH);Ⅲ:20%EG+20%PROH+10%DMSO)的毒性试验,发现试验组的形态正常率均低于对照组(p0.05).并以抗冻剂Ⅰ组做冷冻液,探讨了解冻液中蔗糖梯度浓度(A:0.5,0.25,0.10mol/L与B:0.62,0.42,0.31mol/L)对卵母细胞冷冻-解冻效果的影响.B组的形态正常率显著高于A组(p0.05).最后比较了3种抗冻剂组合对卵母细胞冷冻-解冻后的孤雌激活发育效果.3组的形态正常率、分裂率和8-细胞率之间无显著差异(p>0.05),但均显著低于对照组(p0.05),Ⅱ组和Ⅲ组的囊胚率显著低于对照组(p<0.05).结果表明:采用抗冻剂组合Ⅰ冷冻水牛MⅡ期卵母细胞,解冻时采用B组解冻液去除抗冻剂,可以取得较好的冷冻保存效果.

关键词：水牛卵母细胞玻璃化冷冻抗冻剂孤雌激活