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乳腺癌多柔比星耐药细胞的生物学特性

肿瘤 2016年第10期36卷 1098-1106页

作者：孙月刘瑞娟庄静刘丽娟郝翠冯福彬臧传鑫赵文歌孙长岗潍坊医学院临床医学院研究生处山东潍坊261000 潍坊市中医院肿瘤科山东潍坊261000 青岛大学医学院脑血管病研究所山东青岛266000 山东中医药大学中医学院研究生处山东济南250000

目的 :探讨乳腺癌多柔比星(adriamycin,ADR)耐药细胞的生物学特性。方法 :以人乳腺癌MCF-7细胞为亲本细胞,建立对ADR耐药的人乳腺癌MCF-7/ADR细胞。应用刃天青法检测ADR对MCF-7/ADR和MCF-7细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory c... 详细信息

目的 :探讨乳腺癌多柔比星(adriamycin,ADR)耐药细胞的生物学特性。方法 :以人乳腺癌MCF-7细胞为亲本细胞,建立对ADR耐药的人乳腺癌MCF-7/ADR细胞。应用刃天青法检测ADR对MCF-7/ADR和MCF-7细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)值,应用平板克隆形成实验检测MCF-7/ADR和MCF-7细胞的克隆形成能力。FCM法和免疫荧光法分析MCF-7/ADR和MCF-7细胞中CD44+/CD24-和乙醛脱氢酶1(acetaldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)+干细胞亚群所占百分比,蛋白质印迹法检测ALDH1蛋白及调控干细胞的Hedgehog信号通路中Smo(Smoothened)和Gli1蛋白的表达。结果 :ADR对MCF-7/ADR细胞的IC50值明显高于MCF-7细胞(P<0.01),耐药倍数约为385倍。MCF-7/ADR细胞的克隆形成能力显著高于MCF-7细胞(P<0.01)。MCF-7/ADR细胞中CD44+/CD24-和ALDH1+干细胞亚群所占百分比显著高于MCF-7细胞(P值均<0.01)。MCF-7/ADR细胞中ALDH1蛋白及Hedgehog信号通路中Smo和Gli1蛋白的表达水平显著高于MCF-7细胞(P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论:乳腺癌ADR耐药细胞中CD44+/CD24-和ALDH1+干细胞亚群所占百分比以及Hedgehog干细胞调控信号通路相关蛋白Smo和Gli1的表达水平升高,可能与乳腺癌细胞对ADR的耐药相关。

关键词：乳腺肿瘤肿瘤干细胞抗药性,肿瘤抗原,CD44 抗原,CD24 ALDH1 Hedgehog信号通路

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姜黄素抑制肺癌细胞血管拟态形成机制探讨

中华肿瘤防治杂志 2015年第4期22卷 243-246页

作者：汪丛丛庄静冯福彬魏峻玉孙月吕庆亮韩海娥孙长岗潍坊医学院肿瘤学教研室山东潍坊261053 潍坊市中医院肿瘤中心山东潍坊261041 威海市文登中心医院肿瘤科山东威海264400

目的观察姜黄素对肺癌细胞A549血管拟态生成及细胞内Wnt/β-catenin信号通路相关基因表达的影响,探讨姜黄素抑制肿瘤血管形成的机制。方法体外培养A549细胞株,0、2.5、5、10、20和40μmol/L姜黄素处理细胞24h,应用MTT法检测姜黄素对细... 详细信息

目的观察姜黄素对肺癌细胞A549血管拟态生成及细胞内Wnt/β-catenin信号通路相关基因表达的影响,探讨姜黄素抑制肿瘤血管形成的机制。方法体外培养A549细胞株,0、2.5、5、10、20和40μmol/L姜黄素处理细胞24h,应用MTT法检测姜黄素对细胞增殖的影响,体外血管生成拟态实验检测各组细胞形成血管拟态能力,RT-PCR法检测细胞内β-catenin基因mRNA的转录水平;选取Wnt/β-catenin特异性抑制剂XAV939,蛋白质印迹法检测对照组、姜黄素组和XAV939组血管生成基因VE-cadherin蛋白的表达。结果姜黄素对肺癌A549细胞株有抑制作用,并呈剂量依赖性,IC50值约为17.5μmol/L。与对照组相比,姜黄素含药组血管拟态形成数目减少,呈剂量依赖性;随着姜黄素浓度增加,β-catenin基因mRNA表达水平显著降低,差异有统计学意义,P值均<0.05。蛋白质印迹法结果示,与对照组相比,姜黄素组VE-cadherin蛋白表达减少,P=0.047;与XAV939组相比差异无统计学意义,P=0.087。结论姜黄素可抑制肺癌细胞的血管拟态形成能力,其机制可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活性实现的,这将为临床治疗肺癌提供新的思路。

关键词：姜黄素肺癌血管生成拟态 Wnt/β-catenin 信号通路

卵巢癌组织ALDH1表达与预后相关性Meta分析

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中华肿瘤防治杂志 2018年第2期25卷 140-145页

作者：赵文歌臧传鑫张婷婷李佳冯福彬孙长岗潍坊医学院临床医学院山东潍坊261000 山东中医药大学中医学院山东济南250355 潍坊市中医院肿瘤一科山东潍坊261000

目的乙醛脱氢酶1(Aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)在卵巢癌患者中的预后价值仍是有争议的。因此,采用Meta分析方法评价ALDH 1表达水平与卵巢癌患者预后的相关性。方法利用计算机检索PubMed、EMBASE、中国知网、万方数据库资源系统、中... 详细信息

目的乙醛脱氢酶1(Aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)在卵巢癌患者中的预后价值仍是有争议的。因此,采用Meta分析方法评价ALDH 1表达水平与卵巢癌患者预后的相关性。方法利用计算机检索PubMed、EMBASE、中国知网、万方数据库资源系统、中国生物医学文献数据库和维普中文期刊全文数据库从建库至2017-07公开发表的中英文文献,纳入符合标准的文献,提取基本信息,并进行方法学质量评价。选用Stata 12.0对所提取的数据进行Meta分析,并进行亚组分析、敏感性分析及发表偏倚的检测。结果最终纳入13篇原始文献,共2 141个病例。对所有卵巢癌患者总生存率进行Meta分析,风险比(hazard ratio,HR)的合并值为1.50(95%CI:1.17~1.91),P=0.001。Begg’s检验显示不能说明发表偏倚存在,P=0.06。亚组分析结果示,ALDH1表达程度分组、组织学类型、染色标准、患者来源都可能影响ALDH1表达与卵巢癌患者预后的关系。结论 ALDH1高表达可能是卵巢癌患者不良预后的危险因素。

关键词：卵巢癌 ALDH1 预后 Meta分析

天花粉蛋白对肺癌A549细胞凋亡及细胞骨架微管结构改变的研究

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中国肿瘤临床 2014年第11期41卷 693-696页

作者：庄静孙长岗汪丛丛冯福彬吕庆亮王华庆吴勉华南京中医药大学南京市210023 山东省潍坊市中医院山东省潍坊医学院天津医科大学肿瘤医院

目的:探讨天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)对肺癌A549细胞株抑制增殖作用及诱导凋亡效应。方法:用不同剂量的TCS处理肺癌A549细胞,采用MTT法检测TCS对细胞增殖的抑制作用,透射电镜观察细胞骨架微管的变化,流式细胞术检测细胞周期和细胞... 详细信息

目的:探讨天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)对肺癌A549细胞株抑制增殖作用及诱导凋亡效应。方法:用不同剂量的TCS处理肺癌A549细胞,采用MTT法检测TCS对细胞增殖的抑制作用,透射电镜观察细胞骨架微管的变化,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率。结果:TCS使肺癌A549细胞呈凋亡型改变,细胞活性下降,且随着浓度的升高、时间的延长抑制率相应升高。结论:药理剂量的TCS可抑制肺癌A549细胞的增殖和分化,并通过细胞骨架的变化影响A549细胞的功能。

关键词：天花粉蛋白肺癌凋亡细胞骨架

蛋白质分子网络对接技术鬼臼毒素对精原细胞瘤作用靶点的预测

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中华肿瘤防治杂志 2017年第20期24卷 1440-1447页

作者：庄静刘丽娟魏峻玉周超冯福彬孙长岗于金明天津医科大学博士后流动站天津300070 山东大学附属山东省肿瘤医院放疗科山东省医学科学院山东济南250117 潍坊市中医院肿瘤中心山东潍坊261041

目的精原细胞瘤是最常见于睾丸的恶性肿瘤,而鬼臼毒素在对其治疗中效果明显,但对于鬼臼毒素的作用机制研究甚少,本研究通过蛋白质互作网络及分子对接技术以期发现鬼臼毒素作用于精原细胞瘤的分子机制。方法筛选在线人类孟德尔遗传数据库... 详细信息

目的精原细胞瘤是最常见于睾丸的恶性肿瘤,而鬼臼毒素在对其治疗中效果明显,但对于鬼臼毒素的作用机制研究甚少,本研究通过蛋白质互作网络及分子对接技术以期发现鬼臼毒素作用于精原细胞瘤的分子机制。方法筛选在线人类孟德尔遗传数据库OMIM中的精原细胞瘤遗传相关基因,应用Cytoscape软件和插件进行文本挖掘,建立精原细胞瘤的相关蛋白质相互作用网络,发现网络中可能包含的分子复合物并对其生物学过程、分子功能、细胞组分进行GO富集、分析;基于DAVID,富集分子复合物的生物学通路;通过SYBYL8.1软件对精原细胞瘤蛋白质网络进行拓扑属性分析,找出关键节点蛋白,并将其作为本研究的受体在SYBYL中与鬼臼毒素进行对接打分,找出鬼臼毒素的主要作用节点。结果人类孟德尔遗传数据库中精原细胞瘤基因有48个。可能包含6个关联积分值≥6的分子复合物。精原细胞瘤相关遗传靶基因集合分别富集在前列腺增生的负调控、Notch信号通路的负调控、前列腺芽形成的调节、干细胞的分化、雄性性腺发育和TGF-β信号转导通路等相关通路,应用分子对接技术发现鬼臼毒素干预精原细胞瘤的关键靶点。结论精原细胞瘤的发生发展是一个由多基因、多通路协同作用的复杂过程,而鬼臼毒素通过对精原细胞瘤关键节点蛋白的作用可有效干预其发展。

关键词：蛋白质相互作用网络精原细胞瘤在线人类孟德尔遗传数据库分子复合物分子对接技术

网络药理学与分子对接技术指导下土大黄苷对慢性粒细胞白血病作用机制研究

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中华肿瘤防治杂志 2016年第22期23卷 1477-1482页

作者：庄静刘丽娟周超刘瑞娟冯福彬孙长岗于金明天津医科大学博士后流动站天津300070 山东大学附属山东省肿瘤医院放疗科山东省医学科学院山东济南250117 潍坊市中医院肿瘤中心山东潍坊261041

目的近年来,蛋白质相互作用网络及分子对接技术成为中药现代化研究领域十分活跃的一部分,逐渐成为链接中药应用与现代化的重要纽带。本研究基于分子对接技术与网络药理学分析,探讨中药大黄活性成分土大黄苷与慢性粒细胞白血病(chronic m... 详细信息

目的近年来,蛋白质相互作用网络及分子对接技术成为中药现代化研究领域十分活跃的一部分,逐渐成为链接中药应用与现代化的重要纽带。本研究基于分子对接技术与网络药理学分析,探讨中药大黄活性成分土大黄苷与慢性粒细胞白血病(chronic myelocytic leukemia,CML)相关基因之间的相互作用,寻求土大黄苷作用与CML的可能机制。方法前期研究中构建了CML蛋白质相互作用网络,并筛选了CML关键靶点蛋白,作为本研究的受体;通过软件Chemoffice 8.0构建土大黄苷的分子结构,导入SYBYL软件中,进行一系列数据处理,作为本研究的配体。利用SYBYL 8.1软件的Surflex-Dock模块进行分子对接,用配体-受体亲和力的一致性评分函数进行打分,并对氢键及其结合部位进行观察、分析。进一步对分子对接结果进行文献验证。结果得到土大黄苷与CML19个相关基因之间的分子对接评分及氢键数,其中与JUN(2G01)受体对接得分及氢键数是最高的,说明土大黄苷与JUN(2G01)结合最好,可以推断JUN(2G01)是土大黄苷优先选择的作用受体。其次,得分较高的还有SRC(SRC)、JAK2(5AEP)、MAPK14(2YIX)、FRAP1(3OAW)、MAPK8(3PZE)和PARP1(1U5Y)等。结论大黄活性成分土大黄苷对CML的作用机制是多靶点、多途径相互作用的,其作用受体可能与JUN、SRC、JAK2、MAPK14、FRAP1、MAPK8和PARP1等基因相关。

关键词：网络药理学分子对接慢性粒细胞白血病土大黄苷蛋白质相互作用

重组人粒细胞集落刺激因子漱口液在鼻咽癌放射治疗患者中的应用

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齐鲁护理杂志 2016年第10期22卷 36-37页

作者：张彩虹冯福彬姚淑贞孙长岗潍坊市中医院山东潍坊261041

目的:探讨重组人粒细胞集落刺激因子漱口液在鼻咽癌放射治疗患者中的应用效果。方法:将50例鼻咽癌放射治疗患者随机分成实验组和对照组各25例,对照组使用常规漱口液,实验组使用重组人粒细胞集落刺激因子漱口液,比较两组临床效果。结果:... 详细信息

目的:探讨重组人粒细胞集落刺激因子漱口液在鼻咽癌放射治疗患者中的应用效果。方法:将50例鼻咽癌放射治疗患者随机分成实验组和对照组各25例,对照组使用常规漱口液,实验组使用重组人粒细胞集落刺激因子漱口液,比较两组临床效果。结果:两组患者临床疗效比较差异无统计学意义(P>0.05);实验组患者口腔黏膜损伤程度轻于对照组(P<0.01);实验组患者放射耐受剂量高于对照组(P<0.01)。结论:重组人粒细胞集落刺激因子漱口液可减轻鼻咽癌放射治疗患者的口腔黏膜放射性损伤,提高患者放疗耐受剂量。

关键词：鼻咽癌放射治疗口腔黏膜损伤重组人粒细胞集落刺激因子

儿童友好型社区户外公共空间更新策略研究 ——以合肥市丽都社区A小区为例

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儿童友好型社区户外公共空间更新策略研究 ——以合肥市丽都社区A...

作者：冯福友安徽建筑大学

学位级别：硕士

随着生育政策的持续优化和儿童权利意识的日益增强,儿童友好型社区在城市规划与建设领域逐渐成为业界及社会的关注焦点。儿童友好型社区的建设不仅关乎儿童的身心健康和全面发展,还涉及到社区居民的生活质量和社会发展的可持续性。儿童... 详细信息

随着生育政策的持续优化和儿童权利意识的日益增强,儿童友好型社区在城市规划与建设领域逐渐成为业界及社会的关注焦点。儿童友好型社区的建设不仅关乎儿童的身心健康和全面发展,还涉及到社区居民的生活质量和社会发展的可持续性。儿童是社区的未来,他们的需求和权益应该得到充分的重视和保护。社区户外公共空间作为城市更新的重要组成之一,提供了儿童成长所需的安全、健康和有益的环境,促进了儿童的身心发展和社交互动。通过对儿童群体及公共空间的研究背景、国内外的研究现状进行综合分析,突显出从儿童视角探索社区户外公共空间需求的研究缺口和紧迫性,据此明确了研究的问题和目标。并深入阐释了相关理论,从儿童的生理、心理和行为三个维度出发,细致剖析儿童群体的特殊性及其对社区户外公共空间的具体需求,为后续的需求分析奠定了坚实的理论基础。通过对合肥市丽都社区的实地考察,揭示了该社区在建设上存在的问题及其特点,并据此界定了研究范围。在此基础上,结合文献分析、问卷调查及专家咨询方法,构建了包含5个准则层和25个方案层的需求指标体系,应用Kano模型对需求指标进行分类及优先排序,旨在精准把握儿童群体对社区户外公共空间的需求,从而提出了具有针对性的更新策略。研究结果表明:一是儿童和家长认为该区域的必备型需求是无障碍设计、监控及安保设施等6个指标;二是期望型需求敏感度较高的是亲子互动和增加游戏设施;三是魅力型需求敏感度较高的是自然体验、街道绿化和活动举办。实践运用以合肥市丽都社区A小区更新设计为例,引入高敏感度的需求指标,并依据路线、空间、活动三个方面的更新策略。通过量化方法指导丽都社区A小区户外公共空间更新的前期总结、总体规划布局和节点空间设计,有利于解决当前国内城市更新建设中普遍存在的忽视儿童群体需求的问题。为社区户外公共空间环境设计与现有环境更新提供了实践性指导,为促进儿童友好型社区和城市的建设与发展起到了显著的推动作用。图[77]表[13]参[70]

关键词：儿童友好社区户外公共空间 Kano模型更新策略

天花粉蛋白对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADR及干细胞标志物ALDH1蛋白表达的实验研究

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潍坊医学院学报 2013年第3期35卷 185-187,I0002页

作者：姜真孙长岗庄静唐世锋刘瑞娟韩海娥冯福彬潍坊医学院内科学教研室山东潍坊261053 潍坊市中医院肿瘤中心

目的探讨天花粉蛋白对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7／ADR及干细胞标志物ALDH1蛋白表达的影响。办法主要采用MTT法检测不同浓度的天花粉蛋白（TCS）对MCF-7／ADR细胞增殖的抑制作用；流式细胞术（FCM）检测MCF-7／ADR细胞的凋亡情况；四唑氮... 详细信息

目的探讨天花粉蛋白对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7／ADR及干细胞标志物ALDH1蛋白表达的影响。办法主要采用MTT法检测不同浓度的天花粉蛋白（TCS）对MCF-7／ADR细胞增殖的抑制作用；流式细胞术（FCM）检测MCF-7／ADR细胞的凋亡情况；四唑氮盐（MTT）比色试验、Western-Blot印迹法观察天花粉蛋白对乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7／ADR的耐药逆转作用。结果MTT分析结果显示，TCS在20-100mg／L浓度范围内有明显的抑制作用，存在剂量-效应和时间-效应关系。流式细胞术检测结果显示：20，40，80mg／L TCS作用48h后，MCF-7／ADR细胞凋亡率分剐为12．56％±0．70％，18．34％±1．01％，38．92％±1．79％，细胞凋亡率随药物浓度增加而增加，各实验组之间比较有显著性差异（P〈0．05）。（MTT）比色试验、Western-Blot印迹法结果发现：MCF-7中未测出ALDH1蛋白，在MCF-7／ADR空白对照和TCS20mg／L作用2d后检测出ALDHJ蛋白表达开始下降，MCF-7／ADR在TCS20mg/L作用3（1，4d后ALDH1蛋白表达明显下降，MCF-7／ADR在TCS 20mg/L作用5d后来检测到ALDHI蛋白的表达。结论天花粉蛋白（TCS）具有逆转乳腺癌细胞株MCF-7／ADR耐药性的作用，可明显下调ALDHI蛋白的表达。天花粉蛋白（TCS）可能通过下调ALDH1蛋白的表达，抑制乳腺癌干细胞的富集，来诱导MCF-7／ADR细胞凋亡，抑制MCF-7／ADR细胞的增殖。

关键词：天花粉蛋白乳腺肿瘤 MCF-7细胞 ALDH1蛋白