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内源性逆转录病毒在三种实验猪中的分布及序列特征研究

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内源性逆转录病毒在三种实验猪中的分布及序列特征研究

作者：冯天悦东北农业大学

学位级别：硕士

随着人类预期寿命的延长,等待官移植的人数快速增加,需要的器官日渐短缺,异种移植能为器官移植提供稳定的移植物来源,但同时存在某些特殊病原体如内源性逆转录病毒(endogenous retrovirus,ERV)跨物种传播的风险。猪繁育速度快,在遗传背... 详细信息

随着人类预期寿命的延长,等待官移植的人数快速增加,需要的器官日渐短缺,异种移植能为器官移植提供稳定的移植物来源,但同时存在某些特殊病原体如内源性逆转录病毒(endogenous retrovirus,ERV)跨物种传播的风险。猪繁育速度快,在遗传背景、解剖学特征、生理病理学、营养代谢等方面与人类高度相似,已成为得到广泛认可的异种移植器官移植供体。大多数动物所带有的人畜共患病病原体都可以通过微生物学质量控制监测培育SPF猪的方式消除,但该方法无法消除猪内源性逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)。PERV是逆转录病毒科(Retroviridae)哺乳动物C型反转录病毒属(Mammalian Type C Retroviridae)的RNA病毒,主要分为3种亚型:PERV-A、PERV-B、PERV-C。其中PERV-A和PERV-B的感染性相似,为多嗜性病毒,能感染除猪以外的多种其他动物或动物细胞,也能感染体外培养的人类细胞。PERV-C作为单一嗜性病毒,感染范围较窄,仅限于猪和猪细胞。但PERV可通过改变LTR结合转录因子结合位点的数量来适应宿主细胞,或通过重组形成重组病毒,使感染范围扩大,产生感染体外培养的人类细胞的能力。PERV在正常猪的基因组中存在多个基因组拷贝,难以用常规手段清除。同时,现有研究证明,与PERV-B相比,PERV-A更容易发生基因重组,产生感染范围更广的新PERV亚型,增加PERV跨物种传播的潜在风险。PERV的基因已整合在所有猪的基因组中,在一定条件下可以释放出具有感染性的病毒颗粒,存在潜在的感染风险,因此在选取合适异种移植供体猪时,需注意充分考虑该猪种的PERV背景。实验猪生理特性均一、遗传背景清楚、质量控制稳定,既是异种移植供体猪的优良选择,又是猪物种自身的模型动物,是研究PERV在猪群中分布特征与序列特征的合适材料。实验猪即包括大白猪、长白猪、杜洛克猪等体型较大的普通猪的品种品系,也包括明尼苏达小型猪、海福特小型猪、NIH小型猪,以及由中国本土地方猪种培育而来的贵州小型香猪、西双版纳近交系小耳猪、五指山小型猪、广西巴马小型猪等小型猪的品种品系。中国农业科学院哈尔滨兽医研究所采用屏障环境饲养、灭活疫苗免疫种猪等多种措施,已成功培育并保存有多种SPF(Specific Pathogen Free,SPF)级别的普通猪和小型猪,其中包括大白猪、长白猪、荣昌猪、五指山小型猪等。这些猪种已排除了包括猪瘟在内的14种病原微生物,且遗传背景清晰、供应稳定、重复性好,是质量优良的实验猪。本研究以哈尔滨兽医研究所培育并保存的SPF级大白猪、荣昌猪、五指山小型猪3种具有代表性的实验猪为研究材料,研究PERV在这3种猪种中的分布及序列特征,并分析差异。本研究首先针对3种PERV亚型,分别设计3种特异性引物,检测PERV 3种亚型在3种实验猪基因组中的存在及在组织中的转录情况。检测结果显示,PERV-A在3种实验猪的所有猪的基因组中均有存在,并在组织中转录,是分布最广泛的PERV亚型;PERV-B在3种实验猪的所有猪的基因组中均有存在,但只在部分猪的组织中检测到转录;PERV-C只在大白猪的基因组中存在,在部分大白猪的组织中转录,是分布范围最小的PERV亚型。其次,选择存在范围最广的PERV-A亚型,分别对3种实验猪的该亚型进行全基因序列分段扩增和克隆测序,进行序列分析,将它们的gag、pol、env基因分别翻译为蛋白质,分别预测它们的蛋白二级结构并进行分析,通过PERV的进化关系和同源关系推测猪种的亲缘关系。根据通过系统发育进化树分析和同源性分析结果,可推测本所大白猪与荣昌猪之间有较近的亲缘关系,且与韩国猪也存在一定亲缘关系;根据蛋白二级结构预测与分析,可知不同猪种PERV-A的Gag蛋白、Pol蛋白保守性较差,有多种结构,Env蛋白保守性较高。最后,使用荧光定量PCR法检测PERV 3种亚型在大白猪的不同组织中的转录情况,测得PERV-A亚型在SPF大白猪7种组织中均有转录,且在免疫器官和组织中转录量最高。综上所述,本研究首次鉴定了荣昌猪PERV全基因序列,推测了中国东北地区大白猪的引种来源,总结了五指山小型猪的遗传特征。本研究有助于PERV分子特性的探究,为评估不同猪种PERV的在异种移植中的安全性,并筛选合适猪种提供基础资料和参考。

关键词：内源性逆转录病毒实验猪分布序列分析

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山东民间剪纸艺术“娃娃”纹样研究

美术观察 2024年第1期 81-82页

作者：张雁冯益茹山东理工大学美术学院

“娃娃”纹样是山东地区民间剪纸中最具特色的纹样之一,它体现了人们对生殖繁衍的崇拜,也象征着民众对幸福生活的期望。“娃娃”纹样的产生与人们的日常生活和思想观念密切相关,其发展演变受到了山东地域文化、民间习俗等多方面影响,是... 详细信息

“娃娃”纹样是山东地区民间剪纸中最具特色的纹样之一,它体现了人们对生殖繁衍的崇拜,也象征着民众对幸福生活的期望。“娃娃”纹样的产生与人们的日常生活和思想观念密切相关,其发展演变受到了山东地域文化、民间习俗等多方面影响,是一种独特的东方美学符号。

关键词： “娃娃”纹样艺术特征寓意创新与发展

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电子产品复杂精密件柔性制造调度研究

电子产品复杂精密件柔性制造调度研究

作者：冯益铭电子科技大学

学位级别：硕士

随着我国逐渐聚焦高级、精密、尖端产品的制造,市场对电子产品复杂精密件的数量和种类的需求逐渐提高,这也使得国内某电子产品复杂精密件制造企业的在制品种类繁多、整体规模大、订单数量多,因此该企业规划了不同的柔性制造场景以提高... 详细信息

随着我国逐渐聚焦高级、精密、尖端产品的制造,市场对电子产品复杂精密件的数量和种类的需求逐渐提高,这也使得国内某电子产品复杂精密件制造企业的在制品种类繁多、整体规模大、订单数量多,因此该企业规划了不同的柔性制造场景以提高生产效率。但柔性的生产方式和巨大的需求量导致生产出现调度难度大、资源配置不合理、扰动频繁等现象,严重影响企业的生产效率。因此,很有必要开展面向电子产品复杂精密件柔性制造的生产调度研究。论文针对电子产品复杂精密件的两类柔性制造场景:人工工位和自动化工位并存的混合柔性作业车间、全自动化的柔性生产线,从静态调度和动态调度两个方面进行以下研究:首先,针对人工工位和自动化工位并存的混合柔性作业车间调度问题,以最大完工时间、最低生产成本、最小切换时间占比、最大设备运行负荷率作为优化目标,建立多目标下的混合部分柔性作业车间问题模型;分析人工工时的不确定分布概率,确立基于正态分布的波动工时;针对调度输入的产品因种类多、数量大导致调度计算时出现的“维数灾难”问题,设计了一种混入模拟退火算法的改进竞争粒子群算法,以提高算法在高维计算中的性能,并通过仿真验证了调度模型与求解算法的有效性。其次,针对全自动柔性生产线调度问题,建立基于灰色关联法和层次分析法的订单紧急程度确定机制,设计了调度订单的选择规则;以最大化订单按时交付的数量、最小化订单拖期时间作为优化目标;考虑全自动生产线特有的运输和切换约束,建立了全自动柔性生产线调度模型;修正改进竞争粒子群算法的解码方式,并仿真验证了该调度方法的有效性。最后,分析两类柔性制造场景存在的主要扰动类型,建立基于滑动窗口技术的基本调度模式,确立带有筛选机制的周期和事件混合驱动方式,建立包含尾插式调度、完全重调度和右移式插入重调度的组合式重调度方法,并通过仿真验证了该动态调度策略的有效性。本文为制造电子产品复杂精密件的混合柔性作业车间和全自动柔性生产线的调度问题提供一些基本的研究思路,为提高调度的适用性、稳定性提供了理论支持。

关键词：电子产品复杂精密件柔性生产调度改进竞争粒子群算法动态调度

PVN-NAcS催产素神经通路对配偶联系打断诱导的焦虑和抑郁样行为的调控作用

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PVN-NAcS催产素神经通路对配偶联系打断诱导的焦虑和抑郁样行为的...

作者：冯益钦陕西师范大学

学位级别：硕士

社会联系,如亲子联系和同胞联系等对动物的生长发育及身心健康非常重要。积极而长久的社会联系,不仅能缓解动物的情绪障碍,如焦虑、抑郁和自闭等,还能降低各种呼吸系统疾病和心血管疾病发生的风险。而对社会联系进行扰乱往往会给机体带... 详细信息

社会联系,如亲子联系和同胞联系等对动物的生长发育及身心健康非常重要。积极而长久的社会联系,不仅能缓解动物的情绪障碍,如焦虑、抑郁和自闭等,还能降低各种呼吸系统疾病和心血管疾病发生的风险。而对社会联系进行扰乱往往会给机体带来长期的负面影响,如造成焦虑和抑郁等情绪障碍。配偶联系作为个体成年以后最主要的一种社会联系,对其进行扰乱会对成年个体产生什么影响呢?由于具有单配制婚配制度的哺乳动物物种较少,仅有5%左右,目前相关研究依旧较少。催产素(Oxytocin,OT)是一种能够调节社会联系和行为的重要神经递质。下丘脑室旁核(Paraventricular Nucleus,PVN)是合成OT的主要脑区之一。OT在PVN合成以后,通过OT神经元投射到诸多脑区,如内侧前额皮质(Medial Prefrontal Cortex,m PFC)、伏隔核(Nucleus Accumbens,NAc)和内侧杏仁核(Medial Amygdala,Me A),并通过和OT受体(OT receptor,OTR)结合而发挥效应。相关研究表明,NAc的OT系统在情绪调节中扮演着重要作用。激活NAc的OT系统能缓解由应激诱导的焦虑和抑郁样行为。伏隔核壳部(Nucleus Accumbens shell,NAc S)分布着大量的OTR。OT能够通过PVN投射到NAc S的OT神经末梢在NAc S处释放,并通过结合OTR调控情绪和行为。但目前对PVN—NAc S的OT神经通路在配偶联系打断诱导的动物情绪障碍中发挥的作用尚不清楚。本研究以单配制雄性棕色田鼠为实验对象。首先,将雄性棕色田鼠和与其体重、大小和日龄相似的雌性棕色田鼠配对五天,然后将实验鼠随机分为两组:对照组和打断组。打断组雄鼠在配对五天后与雌鼠分开,单独饲养。对照组雄鼠配对后始终与配偶共同饲养。两周后进行行为学检测,包括旷场实验(Open Field Test,OFT)和悬尾实验(Tail Suspension Test,TST)。行为测试结束后,利用免疫荧光法检测配偶联系打断对NAc S神经元活性的影响。利用钙成像技术检测NAc S的钙活动变化,并通过光遗传结合钙成像技术,验证PVN—NAc S神经通路的功能活性。此外,利用化学遗传学和光遗传学技术特异性地验证PVN—NAc S OT神经通路在配偶联系打断诱导焦虑和抑郁样行为中发挥的作用。最后,通过化学遗传学联合药理学验证PVN—NAc S OT神经通路对配偶联系打断诱导的情绪障碍的调控作用。研究发现:1.配偶联系打断对雄性棕色田鼠行为的影响利用OFT检测棕色田鼠的焦虑样行为,结果发现,打断组雄鼠在旷场中央区域的活动时间比对照组显著减少,说明配偶联系打断能够诱导雄性棕色田鼠出现焦虑样行为。利用TST检测棕色田鼠的抑郁样行为,结果发现,打断组雄鼠在悬尾实验中挣扎的时间比对照组显著减少,说明配偶联系打断能够诱导雄性棕色田鼠出现抑郁样行为。2.配偶联系打断对雄性棕色田鼠NAc S神经元活性的影响利用免疫荧光法检测动物NAc S的c-Fos表达。结果发现,与对照组相比,打断组雄性棕色田鼠NAc S的c-Fos阳性神经元数量明显减少,说明配偶打断能够明显的降低NAc S的神经元活性。钙成像的结果也显示,打断组雄性棕色田鼠在悬尾测试中,挣扎行为出现时NAc S中神经元的钙活动明显降低,进一步验证了配偶联系打断对NAc S神经元活性的影响。3.PVN OT神经元对NAc S神经元活性的调节作用利用光遗传学和钙成像技术探究激活或者抑制PVN的OT神经元对NAc S神经元钙活动的影响。结果发现,激活PVN的OT神经元能够特异性地激活NAc S神经元的钙活动,而抑制PVN的OT神经元能够抑制NAc S神经元的钙活动。说明PVN和NAc S之间具有功能连通性。4.PVN—NAc S OT神经通路对配偶联系打断所诱导的焦虑和抑郁样行为的调控作用利用化学遗传学方法特异性激活或者抑制PVN—NAc S OT神经通路,结果发现,PVN—NAc S OT神经元的激活能增加打断组雄性棕色田鼠在旷场中央区域的活动时间以及在悬尾过程中的挣扎时间。而抑制PVN—NAc S OT神经通路的活性能减少对照组雄性棕色田鼠在旷场中央区域的活动时间和在悬尾过程中的挣扎时间。说明激活或者抑制PVN—NAc S OT神经通路能够特异性调控配偶联系打断所诱导的焦虑和抑郁样行为。利用光遗传学对化学遗传学的结果进行验证。结果发现光激活PVN OT神经元在NAc S的末端投射,能够增加打断组雄性棕色田鼠在旷场中央区域的活动时间以及在悬尾过程中的挣扎时间,而在光刺激消失以后,雄性棕色田鼠在旷场中央区域的活动时间以及在悬尾过程中的挣扎时间又会恢复到基础水平。光抑制PVN OT神经元在NAc S的末端投射,能够减少对照组雄性棕色田鼠在旷场中央区域的活动时间以及在悬尾过程中的挣扎时间,光刺激消失以后,雄性棕色田鼠在旷场

关键词：棕色田鼠配偶联系打断情绪障碍催产素

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核心素养背景下高中历史教学策略分析

核心素养背景下高中历史教学策略分析

广东省教师继续教育学会第二届全国教学研讨会

作者：冯悦济宁市第二中学

新课程改革的实施,给高中历史教育带来了新的挑战。在历史学科的教学中,既要对学生进行基础教育,又要对其进行核心素养的培养。文章首先对高中历史教育中的核心素养进行了研究,并对其进行了探讨,然后对高中历史课程实施过程中,教师应采... 详细信息

新课程改革的实施,给高中历史教育带来了新的挑战。在历史学科的教学中,既要对学生进行基础教育,又要对其进行核心素养的培养。文章首先对高中历史教育中的核心素养进行了研究,并对其进行了探讨,然后对高中历史课程实施过程中,教师应采取的主要措施。

关键词：高中历史教学核心素养途径探析

来源： cnki会议评论

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综合测量纺织面料的红外发射率及光热吸收率

东华大学学报（自然科学版） 2022年第4期48卷 43-48页

作者：陈益松张悦东华大学服装与艺术设计学院上海200051 东华大学现代服装设计与技术教育部重点实验室上海200051

为了更全面地了解纺织面料的红外发射与光热吸收特性,基于传热学的基本原理演绎提出了一种面料红外发射率和光热吸收率同步测量的新方法,设计外光热辐射源照射和背向绝热试验装置,并对3类织物(棉机织物、棉针织物、色丁织物)进行测量。... 详细信息

为了更全面地了解纺织面料的红外发射与光热吸收特性,基于传热学的基本原理演绎提出了一种面料红外发射率和光热吸收率同步测量的新方法,设计外光热辐射源照射和背向绝热试验装置,并对3类织物(棉机织物、棉针织物、色丁织物)进行测量。测量数据显示面料的红外发射率为0.739~0.901,光热吸收率保持为41.96%~58.96%,不同颜色面料的红外发射率差别不大,而光热吸收率存在较大的差异,深色面料的光热吸收率要高于浅色面料。结果表明,该测量方法可在一般恒温环境下实现,无需特殊设备,操作方便,可广泛应用于纺织面料及其他相关材料的测量。

关键词：纺织面料光热辐射光热吸收率红外发射率面料色彩织物结构

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我国公共数字文化服务政策主题变迁与文本量化研究

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图书馆建设 2022年

作者：朱益平金悦樊丽珍南昌大学公共政策与管理学院江西省图书馆

研究公共数字文化服务政策主题变迁及政策工具体系结构，为优化公共数字文化服务效率提供建议。以我国1996-2021年中央出台的公共数字文化服务政策文本为研究对象，基于共词分析法和聚类分析法对政策文本的发展历程、主题变迁等进行系... 详细信息

研究公共数字文化服务政策主题变迁及政策工具体系结构，为优化公共数字文化服务效率提供建议。以我国1996-2021年中央出台的公共数字文化服务政策文本为研究对象，基于共词分析法和聚类分析法对政策文本的发展历程、主题变迁等进行系统分析与总结。利用内容分析法与Nvivo软件，从基本政策工具维度对样本政策进行量化分析，揭示公共数字文化服务体系发展的内在规律。结果表明，政策主题持续丰富且呈阶段性变迁，但总体呈现出领域分散、内容过度集中的特点。在政策执行过程中，供给型、环境型、需求型政策工具交叉综合应用，但供给型、需求型政策工具的使用率存在一定不足，具体政策工具种类的使用也存在明显差异。

关键词：公共数字文化服务主题变迁文本量化政策工具

独立促销还是联合促销?电商平台自营产品与第三方产品促销策略

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系统工程理论与实践 2023年

作者：陈建建冯楠冯海洋张晗悦天津大学复杂管理系统实验室天津大学管理与经济学部江西财经大学信息管理学院

近年来，电商平台自营商家与第三方商家经常选择独立促销或者联合促销增加产品销量. 与独立促销不同，以“跨店满减”为代表的联合促销活动一般由平台发起，但平台企业制定的联合促销力度所产生的成本由自营商家和第三方商家共同承... 详细信息

近年来，电商平台自营商家与第三方商家经常选择独立促销或者联合促销增加产品销量. 与独立促销不同，以“跨店满减”为代表的联合促销活动一般由平台发起，但平台企业制定的联合促销力度所产生的成本由自营商家和第三方商家共同承担. 考虑双边市场环境下不同促销模式的特点，构建三阶段博弈模型探讨佣金率、促销引起的市场扩张效应等因素对产品定价决策、最优联合促销成本分摊比例以及促销模式选择的影响. 结果表明: 1)当且仅当佣金率和平台的联合促销成本分摊比例均较高或者较低时，联合促销情形下的产品原价和促销力度均高于其独立促销情形. 当市场扩张效应较强时，消费者应该避免在促销活动期间购买产品. 2)无论在垄断还是竞争情境下，当且仅当第三方卖家开展促销活动的成本较高，其市场扩张效应较弱且联合促销成本分摊比例适中时，平台企业和第三方卖家实施联合促销策略优于独立促销策略和非促销策略. 3)在联合促销活动中，当佣金率较高时，第三方卖家将单独支付联合促销力度产生的成本; 否则，联合促销成本由平台和第三方卖家共同承担，当佣金率较低时，平台支付的联合促销成本分摊比例随着市场扩张效应的增强而减小.

关键词：双边平台自营产品联合促销策略市场扩张效应联合促销成本分摊比例

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孩子高低肩? 谨防是脊柱侧弯!

孩子高低肩? 谨防是脊柱侧弯!