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罗哌卡因局部浸润用于腹腔镜手术后镇痛

医药导报 2014年第11期33卷 1476-1478页

作者：盛芳冯永东华中科技大学同济医学院附属同济医院手术室武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科中心武汉430030

目的观察罗哌卡因局部浸润麻醉在胃肠外科腹腔镜手术中的辅助镇痛作用。方法将82例患者随机分成治疗组和对照组各41例。治疗组在腹腔镜手术开始前,于手术部位腹膜外局部注射0.75%盐酸罗哌卡因20 m L,对照组给予等剂量0.9%氯化钠注射液,... 详细信息

目的观察罗哌卡因局部浸润麻醉在胃肠外科腹腔镜手术中的辅助镇痛作用。方法将82例患者随机分成治疗组和对照组各41例。治疗组在腹腔镜手术开始前,于手术部位腹膜外局部注射0.75%盐酸罗哌卡因20 m L,对照组给予等剂量0.9%氯化钠注射液,比较两组术后疼痛程度、下床时间、通气时间、术后并发症、术后住院时间及住院费用等。结果与对照组比较,治疗组患者术后1,3,36和48 h活动状态下疼痛程度评分明显降低,术后下床活动时间提前1 d,术后住院时间缩短2 d。两组术后并发症及住院费用比较,差异无统计学意义。结论罗哌卡因腹膜外局部浸润麻醉可改善患者术后疼痛,促进早期下床活动,缩短住院时间,减少住院费用。

关键词：罗哌卡因浸润麻醉,局部镇痛胃肠外科腹腔镜手术

FuGENE6介导雌激素受体质粒HEGO5转染不同乳腺癌细胞株后受体的表达

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癌症 2004年第10期23卷 1166-1170页

作者：陶德定江敏冯永东吴剑宏龚建平华中科技大学同济医学院附属同济医院分子医学中心湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科湖北武汉430030

背景及目的:基因转染技术是研究乳腺癌细胞雌激素受体(estrogenreceptor,ER)的表达及其作用机制的重要手段。本研究检测不同人类乳腺癌细胞株以FuGENE6试剂为载体进行转染时的转染效率,以及ER质粒HEGO5转染后ER的表达情况。方法:不同乳... 详细信息

背景及目的:基因转染技术是研究乳腺癌细胞雌激素受体(estrogenreceptor,ER)的表达及其作用机制的重要手段。本研究检测不同人类乳腺癌细胞株以FuGENE6试剂为载体进行转染时的转染效率,以及ER质粒HEGO5转染后ER的表达情况。方法:不同乳腺癌细胞株先用pEGFP-N1质粒转染,流式细胞术(flowcytometry,FCM)对转染效率进行测定。将转染效率高的细胞株分别再用HEGO5转染,用FCM和Westernblot方法对ER的表达情况进行检测。结果:乳腺癌细胞株MM-231、MM330、MM134Ⅵ、MM175Ⅶ、MM157、MM361、MM436、MM453、UaCC812、UaCC893、BT-549、BT-20、HBL-100、Hs578t、MCF-7、T-47d、ZR-75-1的转染效率存在很大差异。细胞株HBL-100重复性转染实验的变异系数为5.1。几种转染效率较高的细胞株MCF-7、HBL-100、Hs578t、MM436、MM453和BT-20用HEGO5转染后,ER阳性的表达率介于12.9%～54.8%之间,与pEGFP-N1的转染效率相当;不同细胞ER的FCM和Westernblot检测结果一致。此外,ER的表达具有一定的细胞周期特异性。结论:FuGENE6试剂介导乳腺癌细胞进行转染时重复性好、结果稳定。HEGO5转染后ER的表达情况可分别用Westernblot和FCM进行定性、定量检测。

关键词： MM 转染效率 ER 乳腺癌细胞株表达 FCM 雌激素受体质粒 EGFP 介导

固定后乳腺癌细胞雌激素受体和孕激素受体的FCM和Westernblot检测

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癌症 2004年第3期23卷 339-341页

作者：陶德定江敏吴剑宏冯永东龚建平华中科技大学同济医学院附属同济医院分子医学中心湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科湖北武汉430030

背景与目的:雌激素受体(estrogenreceptor,ER)和孕激素受体(progesteronereceptor,PR)水平的定性、定量检测,对乳腺癌患者预后判断和内分泌治疗效果的评价具有重要意义。Westernblot法和流式细胞术(flowcytometry,FCM)是蛋白质定性、定... 详细信息

背景与目的:雌激素受体(estrogenreceptor,ER)和孕激素受体(progesteronereceptor,PR)水平的定性、定量检测,对乳腺癌患者预后判断和内分泌治疗效果的评价具有重要意义。Westernblot法和流式细胞术(flowcytometry,FCM)是蛋白质定性、定量分析的重要手段,但常规Westernblot法要求提取新鲜样本的蛋白质。本研究拟建立固定后乳腺癌细胞ER和PR的Westernblot检测方法,探索Westernblot法和FCM对同批固定样本ER、PR进行同步分析的可行性。方法:取不同乳腺癌细胞株对数生长期新鲜细胞和固定细胞的蛋白提取物,分别用ERα单克隆抗体1D5和PR单克隆抗体PgR636以Westernblot法对ER、PR的表达情况进行检测,并与同期固定细胞的FCM检测结果进行比较。结果:经Westernblot法检测,T-47d、MCF-7、ZR-75-1细胞可见分子量正确的ERα清晰条带,固定T-47d和ZR-75-1细胞的ERα条带较新鲜细胞的条带浓,MM231细胞ERα检测为阴性;T-47d和ZR-75-1细胞可见清晰且分子量正确的PR条带,固定细胞的PR条带较新鲜细胞的条带浓,MM231和MCF-7细胞PR检测为阴性;同期固定细胞ER、PR阳性表达的FCM检测结果与Westernblot检测结果一致。结论:不同乳腺癌细胞在经0.25%多聚甲醛(paraformaldehyde,PFA)和75%乙醇固定后,可用于ER、PR的FCM定量检测。

关键词：乳腺癌细胞雌激素受体 ER 孕激素受体 PR FCM Western blot 肿瘤

细胞周期蛋白B1在肿瘤细胞中的非时相性表达

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中华肿瘤杂志 2002年第3期24卷 215-218页

作者：申漫里冯永东高纯陶德定龚建平华中科技大学同济医学院附属同济医院分子医学中心武汉430030

目的　证实细胞周期蛋白B1(cyclinB1)在体内和体外生长的肿瘤细胞中的非时相性周期表达模式 ,研究cyclinB1在不同生长状态和条件下的G1期肿瘤细胞中的表达情况。方法　以MOLT 4细胞为对照 ,应用流式细胞术的DNA/cyclin双参数分析法 ,检... 详细信息

目的　证实细胞周期蛋白B1(cyclinB1)在体内和体外生长的肿瘤细胞中的非时相性周期表达模式 ,研究cyclinB1在不同生长状态和条件下的G1期肿瘤细胞中的表达情况。方法　以MOLT 4细胞为对照 ,应用流式细胞术的DNA/cyclin双参数分析法 ,检测体内和体外生长的肿瘤细胞中G1期cyclinB1的表达。对分选出的G1期细胞 ,以共聚焦显微镜观察G1期cyclinB1的表达 ;在不同体外生长情况下分选出G1期内亚细胞群体 ,以免疫印记法检测cyclinB1的表达。结果　在被阻滞生长的MOLT 4细胞、转化的T7细胞以及体内生长的肿瘤细胞中 ,均发现G1期有cyclinB1的非时相性表达。被药物阻断生长的MOLT 4细胞中 ,cyclinB1主要表达于G1晚期 ;而转化的T7细胞中 ,cyclinB1主要表达于G1早期。结论　在研究的不同细胞模型中 ,G1期细胞有cyclinB1的非时相性表达 ,cyclinB1可以在G1期的不同时间点被检测到。这一现象可能与细胞的失控性增殖和细胞凋亡的调控之间有密切联系。

关键词：细胞周期蛋白B1 细胞周期肿瘤细胞流式细胞术非时相性表达细胞凋亡

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CyclinE阈值降低促进细胞增殖

癌症 2004年第11期23卷 1244-1248页

作者：覃吉超陈晓曦陶德定冯永东胡俊波龚建平华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科中心/肿瘤研究所湖北武汉430030

背景与目的:许多研究表明高表达CyclinE使细胞增殖能力增加,也有研究报道CyclinE表达较低而细胞增殖并未降低,而在我们对临床肿瘤样本进行研究时发现大量低Cyclin表达(包括CyclinE)的细胞具有旺盛的增殖能力。为了解释这一现象,本研究... 详细信息

背景与目的:许多研究表明高表达CyclinE使细胞增殖能力增加,也有研究报道CyclinE表达较低而细胞增殖并未降低,而在我们对临床肿瘤样本进行研究时发现大量低Cyclin表达(包括CyclinE)的细胞具有旺盛的增殖能力。为了解释这一现象,本研究旨在探讨MOLT-4细胞中CyclinE阈值下降后细胞进入S期的增殖状况。方法:以低浓度咖啡因处理MOLT-4细胞2h、4h,构建CyclinE阈值降低模型,采用流式细胞术分析增殖细胞核抗原(proliferationcellnuclearantigen,PCNA)、增生抗原Ki67和光裂解诱导的选择性DNA断裂链(DNAstrandbreakinductionbphotolysis,SBIP)阳性细胞数。结果:低浓度咖啡因处理MOLT-4细胞2h、4h后,CyclinE阈值明显下降,PCNA、Ki67和SBIP阳性细胞数增加,并以咖啡因处理2h时变化最为明显。结论:CyclinE阈值由高水平迅速降低后细胞增殖陡然增加,CyclinE阈值在较低水平时细胞仍然可增殖。

关键词：细胞周期细胞周期蛋白阈值流式细胞术细胞增殖

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短肠综合征的治疗及进展

华中科技大学学报（医学版） 2021年第4期50卷 522-527页

作者：贾凌威王桂华冯永东华中科技大学同济医学院附属同济医院胃肠外科中心武汉430030

短肠综合征严重影响患者生存质量,妨碍正常社交,但病例少见,临床认识普遍不足。补充必须营养成分及促进肠道再适应、营养支持治疗、肠康复治疗以及各种形式的非移植手术是短肠综合征的有效治疗手段,近年来发展迅速。小肠移植是短肠综合... 详细信息

短肠综合征严重影响患者生存质量,妨碍正常社交,但病例少见,临床认识普遍不足。补充必须营养成分及促进肠道再适应、营养支持治疗、肠康复治疗以及各种形式的非移植手术是短肠综合征的有效治疗手段,近年来发展迅速。小肠移植是短肠综合征的挽救性治疗,但手术时间跨度大,移植后急性排斥仍是阻碍其发展的主要原因。该文就短肠综合征的病理生理机制和治疗进展展开综述,为临床医生根据患者病情开展个体化治疗提供理论依据。

关键词：短肠综合征营养支持肠康复治疗手术

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丁酸钠选择性诱导子宫颈癌细胞凋亡及其机制

中国医学科学院学报 2003年第4期25卷 401-405页

作者：奚玲吴明富冯永东王薇卢运萍周剑锋马丁华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科武汉430030

目的研究丁酸钠诱导子宫颈癌细胞株HeLa和原代培养的人胚肺成纤维细胞凋亡情况,建立丁酸钠选择性诱导子宫颈癌细胞凋亡模型,并探讨其诱导凋亡机制。方法倒置相差显微镜下观察细胞形态改变;MTT法检测药效动力学特征;流式细胞仪检测药物... 详细信息

目的研究丁酸钠诱导子宫颈癌细胞株HeLa和原代培养的人胚肺成纤维细胞凋亡情况,建立丁酸钠选择性诱导子宫颈癌细胞凋亡模型,并探讨其诱导凋亡机制。方法倒置相差显微镜下观察细胞形态改变;MTT法检测药效动力学特征;流式细胞仪检测药物作用前后细胞凋亡情况;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡特征性梯状条带,RT-PCR检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2转录水平。结果丁酸钠抑制细胞生长呈时效和量效关系,其对HeLa细胞的生长抑制作用较对人胚肺成纤维细胞的作用明显;亚G1峰和AnnexinV/PI、DNALadder结果显示,丁酸钠作用后HeLa细胞72h后出现的凋亡率显著高于人胚肺成纤维细胞;RT-PCR结果显示丁酸钠作用前后HeLa细胞中凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达水平无明显改变。结论一定浓度的丁酸钠可以选择性诱导子宫颈癌细胞株HeLa凋亡,而对正常人二倍体细胞毒性较小,并且这种凋亡诱导作用并非通过调控Bax和Bcl-2的转录水平而实现。

关键词：细胞凋亡丁酸钠流式细胞仪 Bax Bcl-2 子宫颈癌

人雌激素和孕激素受体的流式细胞术检测及几种不同抗体的应用

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临床检验杂志 2004年第5期22卷 328-331页

作者：陶德定江敏吴剑宏冯永东龚建平华中科技大学同济医学院附属同济医院分子医学中心武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科武汉430030

目的　建立人类雌激素受体 (ER)和孕激素受体 (PR)的流式细胞术检测方法 ,并比较几种不同抗体的应用情况。方法将乳腺癌细胞株MCF 7、T 4 7d用不同方法固定处理 ,比较它们与抗体特异性结合的差异 ,挑选最佳细胞固定方法。同时 ,以与MDA ... 详细信息

目的　建立人类雌激素受体 (ER)和孕激素受体 (PR)的流式细胞术检测方法 ,并比较几种不同抗体的应用情况。方法将乳腺癌细胞株MCF 7、T 4 7d用不同方法固定处理 ,比较它们与抗体特异性结合的差异 ,挑选最佳细胞固定方法。同时 ,以与MDA MB 2 31(MM2 31)细胞反应阳性率不大于 5 %为标准 ,对不同浓度的ER抗体 1D5和MA1 310、PR抗体 1A6和PgR6 36的反应特异性进行分析比较 ,并用于临床样本的检测。结果　经 0 .2 5 %多聚甲醛 (PFA)预固定、75 %乙醇固定、核分离液处理后的细胞 ,与抗体特异性反应的荧光强度最大 ;在 1～ 4 μg/ 10 0 μl浓度范围内 ,1D5与MM2 31反应阳性率低于 5 % ,与MCF 7反应阳性率大于 95 %。同浓度的MA1 310与MM2 31和MCF 7反应时的阳性细胞率相当 ;1A6 1∶10 0稀释 ,PgR6 36 1∶10～ 1∶2 0 0稀释 ,与MM2 31反应阳性率低于 5 % ,与T 4 7d反应阳性率大于 95 % ;用 1D5 (2 μg)、1A6和PgR6 36 (1∶10 0 )对 12例临床乳腺癌样本ER、PR检测结果分别为 (6 4 .36± 2 7.92 ) %、(5 3.95± 2 8.17) %和 (5 5 .6 3± 2 6 .93) %。结论　细胞经 0 .2 5 %PFA预固定、75 %乙醇固定、核分离液处理后 ,用一定浓度范围的 1D5、1A6和PgR6 36可分别对ER、PR进行流式细胞术定量检测。本研究方法可用于?

关键词：阳性率抗体 MM PR 流式细胞术 ER MCF-7 反应时结论最大

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联合放/化疗对细胞周期特异性凋亡的影响

肿瘤 2005年第1期25卷 10-14页

作者：喻春钊陶德定冯永东余源吴剑宏龚建平华中科技大学同济医学院附属同济医院分子医学中心肿瘤研究所外科武汉430030

目的　以急性T淋巴细胞白血病细胞株MOLT 4为模型,探讨作用于细胞周期相同或不同时相的放疗/化疗药物联合应用时是否具有抗癌增效作用、引起细胞凋亡的周期时相性是否发生改变及对细胞周期检测点(ckeckpoint)的影响。方法　分别将作用于... 详细信息

目的　以急性T淋巴细胞白血病细胞株MOLT 4为模型,探讨作用于细胞周期相同或不同时相的放疗/化疗药物联合应用时是否具有抗癌增效作用、引起细胞凋亡的周期时相性是否发生改变及对细胞周期检测点(ckeckpoint)的影响。方法　分别将作用于G1 期的X ray(10Gy)及药物金克(JinKe) (2.0g/L);S期的喜树碱(CPT) (0.25μmol/L)及阿糖胞苷(Ara C) (1.00μmol/L);G2 /M期的药物威猛(Vm 26) (0.5μg/mL)及长春花碱(Vinblastine, Vin) (0.05μg/mL)分别联合分组应用对其进行不同时间段的培养,采用流式细胞术中的API法对凋亡细胞进行定量并对凋亡细胞的周期时相性进行定位检测。结果　G1 期的药物JinKe和X ray(10Gy)联合应用时,具有协同作用,其作用点仍以G1 期细胞为主。S期的两种药物CPT和Ara C联合应用时,两者也具有协同作用,其细胞周期作用点仍以S期为主。作用于G2 /M期的两种药物VM 26和Vin联合应用时,两者还是具有协同作用,但其细胞周期作用点几乎发生在细胞周期的所有时相。作用于G1 期的药物JinKe和作用于S期的药物CPT联合应用, 具有增强效应, 联合应用时其细胞周期作用点以G1 期和S期细胞为主。作用于G1 期的药物金克和作用于G2 /M期的药物VM 26联合应用,两者具有增强效应。作用于G2

关键词：肿瘤 MOLT-4细胞药物疗法,联合放射疗法细胞周期细胞凋亡