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PEDV新疫苗候选株的筛选及其分子特征

PEDV新疫苗候选株的筛选及其分子特征

作者：季朝阳中国农业科学院

学位级别：硕士

猪流行性腹泻病毒(PEDV)是猪病毒性腹泻爆发的主要病原之一,并在世界各地广泛流行,严重威胁着养猪业的健康发展。根据遗传演化分析结果,可将PEDV分为G1型和G2型。目前现地流行毒株大部分属于G2型,经典疫苗毒株CV777属于G1型,尽管经典的P... 详细信息

猪流行性腹泻病毒(PEDV)是猪病毒性腹泻爆发的主要病原之一,并在世界各地广泛流行,严重威胁着养猪业的健康发展。根据遗传演化分析结果,可将PEDV分为G1型和G2型。目前现地流行毒株大部分属于G2型,经典疫苗毒株CV777属于G1型,尽管经典的PEDV弱毒疫苗和灭活苗对PEDV的防控起到了一定作用,但是不能完全有效地控制PEDV的流行。因此,筛选新型的PEDV疫苗候选毒株迫在眉睫。本实验室于2014年分离到1株PEDV流行毒株LNCT2株,通过全基因组演化分析表明,该分离毒株与目前国内的流行毒株亲缘关系较近,属于G2型PEDV毒株。通过噬斑纯化的方法获得抗原性单一的克隆毒株,利用血清中和试验测定不同克隆毒株的抗体滴度,筛选到了具有良好免疫原性的克隆毒株。采用体外连续传代的方法致弱病毒,并分析不同代次基因组的特征。为了验证低温传代对PEDV遗传演化的影响,采取了常温传代(NA)和低温传代(CA)两种方法进行病毒的致弱,利用生物信息学软件对两种传代方式的毒株进行全基因组的序列分析。结果表明,与常温传代毒株相比,低温传代可以促进PEDV的变异。对不同代次的LNCT2毒株全基因组进行克隆测序,分析比较其基因序列差异,结果表明LNCT2毒株在传代过程中氨基酸的突变率随着体外传代代次的增加而增加。为研究温度对病毒生物学特性的影响,本研究通过测定两种传代温度下病毒的滴度,发现病毒滴度随着代次的增加而升高,30代以后病毒滴度升高更快,两个克隆株病毒滴度在第100代时均达到了10 TCID/mL以上,表明温度对病毒滴度影响不大。此外,为了解LNCT2株与经典毒株CV777致弱过程中的差异,分析比较LNCT2株第100代(LNCT2-P100)与LNCT2第5代(LNCT2-P5)之间基因组的变异特征,结果显示,LNCT2株S蛋白和复制酶ORF1ab的氨基酸突变数量最多,且S蛋白出现了5个连续的氨基酸缺失,第100代未出现ORF3的缺失现象;而经典毒株CV777的S蛋白和复制酶ORF1ab氨基酸突变率明显比LNCT2高很多,表明两者在体外传代致弱过程中氨基酸的突变率存在显著差异。比较分析不同代次LNCT2-NA与LNCT2-CA的氨基酸序列,发现N蛋白均没有发生突变,而M蛋白虽然出现突变,但突变位点和突变后的氨基酸种类相同,说明PEDV N蛋白与病毒适应Vero E6细胞无关,且M蛋白对低温不敏感。为验证LNCT2-P100的毒力是否已经减弱,本研究选择常温传代的LNCT2-P100和LNCT2-P10株对1日龄的健康仔猪进行感染试验,攻毒剂量为2×10 TCID/头,试验结果显示,P10攻毒组仔猪均出现剧烈的呕吐和腹泻等临床症状,P100攻毒组仔猪未出现异常表现。剖检各组仔猪发现P10组仔猪小肠内充满黄色液体,肠壁明显变薄。组织病理学检测结果显示,P10攻毒组仔猪小肠绒毛脱落萎缩,IHC结果显示,P10攻毒组病毒主要分布在小肠绒毛的表面,P100和空白对照组仔猪均未检测到病毒。利用RT-q PCR的方法测定各组仔猪肠道内病毒的载量,结果显示P10组仔猪小肠各段均能检测到病毒的核酸,P100组和空白对照组仔猪小肠绒毛完整且没有检测到病毒的核酸。总之,本研究通过噬斑克隆、血清抗体中和试验筛选到一株疫苗候选株。通过分析LNCT2毒株在体外传代过程中全基因组的遗传演化特征,发现基因的突变频率随着病毒体外传代次数的增加而增加。不同代次LNCT2-NA与LNCT2-CA的氨基酸序列分析结果显示PEDV N蛋白与病毒适应Vero E6细胞无关,且M蛋白对低温不敏感。动物试验结果表明LNCT2-P100口服接种仔猪后没有出现临床症状。基因组测序结果显示LNCT2致弱后ORF3基因没有出现缺失突变,揭示了PEDV的致弱可通过多种分子机制实现;低温传代可以促进PEDV基因组的变异。以上研究结果为研发新型高效的PEDV弱毒疫苗和了解PEDV毒力差异的分子机制奠定了基础。

关键词：猪流行性腹泻病毒病毒致弱疫苗候选株基因组分析

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养成好习惯,锦上添花

高中生（高考） 2023年第2期 23-26页

作者：段贤校黄俊翔辛朝阳湖南武冈市一中大连理工大学清华大学

同学们在做题的时候有没有如下情况?加号写成减号了,题目看错了,多写或少写一个0了,答案誊写错了,计算算错了,没有分类讨论,题目没读完就开始做题,等等。这些情况归纳起来,就是做题习惯不好。做题习惯与智商关系不大,但与高考得分关系... 详细信息

同学们在做题的时候有没有如下情况?加号写成减号了,题目看错了,多写或少写一个0了,答案誊写错了,计算算错了,没有分类讨论,题目没读完就开始做题,等等。这些情况归纳起来,就是做题习惯不好。做题习惯与智商关系不大,但与高考得分关系挺大。同学们千万要警惕,不能像漫画中的皓然同学那样成为“随意先生”。

关键词：锦上添花做题习惯分类讨论养成好习惯高考多写

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潮间带古菌介导的甲烷厌氧氧化过程研究

潮间带古菌介导的甲烷厌氧氧化过程研究

作者：蔡朝阳浙江大学

学位级别：硕士

潮间带生态系统富含有机质,在厌氧条件下分解产生大量的甲烷和含氮无机物,潮间带在海洋生态系统碳氮循环中扮演重要角色。在海洋生态系统中甲烷主要通过硫酸盐型甲烷厌氧氧化（SAMO）过程去除,SAMO过程由甲烷厌氧氧化古菌（ANMEs）与硫... 详细信息

潮间带生态系统富含有机质,在厌氧条件下分解产生大量的甲烷和含氮无机物,潮间带在海洋生态系统碳氮循环中扮演重要角色。在海洋生态系统中甲烷主要通过硫酸盐型甲烷厌氧氧化（SAMO）过程去除,SAMO过程由甲烷厌氧氧化古菌（ANMEs）与硫酸盐还原细菌（SRB）共同完成,而其他甲烷厌氧氧化过程一直被忽略。研究发现,除归属于NC10门的细菌M.oxyfera和M.sinica能通过亚硝酸盐型厌氧甲烷氧化（N-DAMO）反应去除潮间带产生的甲烷,归属于ANME-2d的古菌M.nitrorucens也可以通过逆向产甲烷途径耦合硝酸盐的还原去除潮间带中的甲烷和硝酸盐（Nr-DAMO）。ANMEs古菌及ANME-2d古菌在自然生境中分布广泛,而关于两类古菌在潮间带生态系统中分布及活性的研究较少。本文就ANMEs古菌及ANME-2d古菌在潮间带生态系统中的数量、多样性、群落结构、活性、相关环境影响因子及其在甲烷氧化中的相对贡献做了详细研究,主要研究结果如下:1.探索了舟山潮间带生态系统中ANME-2d古菌及NC10门细菌的数量、多样性、群落组成、活性及主要影响因子。1)稳定同位素示踪发现,在不同潮间带采样点潜在Nr-DAMO活性为0-1.57 nmol 13CO2 g’1（dry sediment）day-1。Nr-DAMO过程在甲烷厌氧氧化过程中对甲烷去除的贡献率为22.3%-60.6%,表明Nr-DAMO过程在潮间带生态系统中是之前被忽略的重要甲烷汇。2)系统发育分析表明,舟山潮间带沉积物中的ANME-2d古菌具有较高的多样性。通过qPCR,检测到不同潮间带采样点ANME-2d古菌的16S rRNA基因拷贝数分别为 4.34×104-1.18×105 copies g-1（dry sediment）。3)皮尔逊相关性分析及RDA分析表明,硝氮与硫酸盐是该区域影响ANME-2d古菌多样性及Nr-DAMO活性的主要环境因子。2.探索了舟山潮间带生态系统中ANMEs古菌的数量、多样性、群落组成、活性及主要影响因子。1)稳定同位素示踪发现,由ANMEs古菌介导的SAMO过程的潜在甲烷厌氧氧化活性为0-0.77 nmol 13CO2 g-1（dry sediment）day-1,占总甲烷厌氧氧化过程的比例为0.345,表明SAMO过程是潮间带生态系统重要的不可忽视的甲烷汇。2)通过定量PCR和Illumina高通量测序发现,在舟山潮间带沉积物中含有大量的ANMEs古菌,其16S rRNA基因拷贝数为9.10× 105-1.13×107 copies（g dry sediment）-1。潮间带生境中ANMEs古菌多样性较高,这是由潮间带独特的环境条件决定的。3)皮尔逊相关性分析及RDA分析表明,温度、ORP、硫酸盐及TOM是影响潜在SAMO活性、ANMEs古菌数量和群落组成的主要环境因子。3.探索了模拟生境中ANME-2d古菌及ANMEs古菌的数量、多样性、群落组成、活性及主要影响因子。1)稳定同位素示踪发现,模拟生境中潜在Nrr-DAMO活性为0.16-1.4913CO2 g-1（dry sediment）day-1;潜在 SAMO 活性为 0.00-2.78 13CO2 g-1（dry sediment）day-1,占总甲烷厌氧氧化过程的比例分别为21.28%-56.15%与19.90%-53.12%,表明Nr-DAMO过程及SAMO过程在模拟土柱生态系统中对甲烷的去除同样具有重要作用。2)定量PCR和Illumina高通量测序发现,在模拟生境样品中含有大量的甲烷厌氧氧化古菌。其中ANMEs古菌及ANME-2d古菌的16S rRNA基因拷贝数分别为 1.11 ×106-2.13×107 copies（g dry sediment）-1及 1.07×104-2.60×105 copies（gdrysediment）1。模拟生境中甲烷厌氧氧化古菌多样性较高,氧气浓度是影响其多样性及数量的重要因素。3)皮尔逊相关性分析及RDA分析表明,模拟实验验证了在原位潮间带生境中沉积物溶解氧浓度、硫酸盐、硝氮及TOM是影响甲烷厌氧氧化古菌数量、活性及群落结构的主要影响因素。

关键词： ANME-2d古菌 ANMEs古菌硝酸盐型甲烷厌氧氧化（Nr-DAMO）硫酸盐型甲烷厌氧氧化（SAMO）潮间带环境因子

上市公司盈余管理变化的实证研究 ——基于新会计准则实施

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上市公司盈余管理变化的实证研究 ——...

作者：聂朝阳中南大学

学位级别：硕士

从上个世纪初开始,随着资本主义市场的不断发展和完善,盈余管理问题已经逐渐成为业界讨论的热点。对于我国来说,改革开放程度的不断加深和社会主义市场经济的高速发展,也使得盈余管理问题越来越普遍、越来越严重。通过研究发现会计准则... 详细信息

从上个世纪初开始,随着资本主义市场的不断发展和完善,盈余管理问题已经逐渐成为业界讨论的热点。对于我国来说,改革开放程度的不断加深和社会主义市场经济的高速发展,也使得盈余管理问题越来越普遍、越来越严重。通过研究发现会计准则存在的漏洞和不完善性为上市公司管理者进行盈余管理提供了可乘之机。然而,为了实现我国会计准则与国际的趋同、进一步完善我国会计准则体系、减少我国上市公司管理者进行盈余管理的现象,国家财政部在2006年颁布了新的《企业会计准则》,并于2007年1月1日开始在所有上市公司施行。因此,一方面为了检验我国新《企业会计准则》实施对防控上市公司盈余管理的效果,另一方面为了进一步深入研究新准则实施后我国上市公司管理方式的变化情况,进而为监管部门提出相关盈余管理防控建议,本文提出了五个研究假设,并选择了我国A股上市公司作为研究样本进行了相关的实证研究,得到了如下研究结论：第一,自2007年开始实施新会计准则以来,我国上市公司进行盈余管理的程度有所降低。本文通过研究我国A股上市公司2004年到2006年及2007年到2011年两个时间段内上市公司进行盈余管理的程度发现,第一个时间段内上市公司进行盈余管理的现象要比第二个时间段内严重,特别是假设4的实证结果更加有力地说明了这一点。第二,ST企业比非ST企业进行盈余管理的可能性大。通过本文的实证研究发现,在2007年新会计准则实施之后，我国A股上市公司中的ST企业的可操控应计利润项目比非ST企业大,这充分说明在我国新会计准则实施之后,ST企业进行盈余管理的可能性比非ST企业要大,这一研究结论也提醒了监管者们要重点加强对非ST企业的管控。第三,公允价值计量模式成为了新会计准则实施后上市公司管理者们进行盈余管理的重要手段,通过会计政策方式进行盈余管理的现象不再明显。本文通过对2011年的面板数据的研究发现,公允价值计量模式与企业可操控性应计利润项目之间存在显著的正相关关系,而会计变更与盈余管理之间的关系却不再显著,这一实证结果充分说明了我国新会计准则实施之后通过会计变更手段进行盈余管理的方式已经被公允价值计量模式取代。从而也从另一个角度提醒了国家有关监管部门要加强对上市公司公允价值计量项目的审计和监管,有效地控制上市公司管理者运用公允价值计量模式进行盈余管理的可能性。

关键词：会计变更新会计准则公允价值盈余管理上市公司

秦岭河谷型乡镇产业结构与空间规划布局的关系研究

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秦岭河谷型乡镇产业结构与空间规划布局的关系研究

作者：田朝阳长安大学

学位级别：硕士

本文选题是在陕西省建设厅下达的《陕西省绿色乡镇建设评价标准》编辑背景下提出来的。秦岭河谷型乡镇属于陕西省众多乡镇中具有代表性的一种乡镇类型。当代中国进入了全面建设小康社会的关键时期，中国共产党第十八次全国代表大会提出... 详细信息

本文选题是在陕西省建设厅下达的《陕西省绿色乡镇建设评价标准》编辑背景下提出来的。秦岭河谷型乡镇属于陕西省众多乡镇中具有代表性的一种乡镇类型。当代中国进入了全面建设小康社会的关键时期，中国共产党第十八次全国代表大会提出了“新型城镇化”，确定了城镇化是我国现代化建设的历史任务，也是扩大内需的最大潜力所在。随着经济社会和城镇化水平的迅速提高，乡镇建设程中出现了各项建设占用大量耕地、土地利用率底、环境破坏严重和粗放式开发的现象，针对秦岭河谷型乡镇土地资源紧缺，空间发展局限的特点，优化乡镇用地布局，调整产业发展结构是缓解用地矛盾、提高土地综合利用的重要选择，是积极引导城镇化健康发展的重要手段，也是统筹城乡发展的基础。本课题选取陕西秦岭中、东段南麓，调研区域为商洛市若干乡镇和秦岭西段安康市若干具有代表性的乡镇。主要调研考察了乡镇的自然地形、用地现状、人文历史、人口发展等方面。在所调研的乡镇中发现用地布局不明晰，产业结构与乡镇其他用地布局相互交叉、自然资源利用不到位、周边环境污染等现象。根据其不同乡镇的空间结构特点，结合各个乡镇的产业类型，发现乡镇产业结构的不协调性以及影响乡镇形态的因素。结合最新国标的相关规划控制指标，运用产业结构理论、城镇空间形态理论、村镇规划理论、及可持续发展理论等相关研究，提出了该类乡镇空间形态的划分和规划的主要内容，分析了空间形态与产业结构相互关系。通过分析研究发现在乡镇规划中乡镇空间形态类型可划分为带形形态、集中型形态和分散组团型形态;乡镇的功能分区划分为生活居住区、工业区和服务区;乡镇的产业类型为种植型、农产品加工型、养殖型、旅游休闲型、乡镇工业型等几个类型;结合乡镇的具体情况，参照国家相关的规划标准，计算秦岭河谷型乡镇的用地技术指标;总结各个特点，提出了适宜于秦岭河谷型乡镇建设发展的“绿色农业+循环经济”、“农产品深加工+市场销售”、“工农商贸+观光休闲”的三种模式。以此为同类乡镇的规划建设起到一定的借鉴作用。

关键词：河谷型乡镇产业结构技术指标乡镇规划

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变速控制力矩陀螺的操纵律设计及其应用研究

变速控制力矩陀螺的操纵律设计及其应用研究

作者：程朝阳国防科技大学

学位级别：硕士

随着卫星技术的发展和空间任务的迫切需求,具有敏捷机动能力的卫星得到了广泛的研究,特别以敏捷微小卫星和地球成像观测卫星为主。控制力矩陀螺因其强大的力矩输出和动量存储能力,成为敏捷航天器姿态控制的一种高效执行机构。相比于单... 详细信息

随着卫星技术的发展和空间任务的迫切需求,具有敏捷机动能力的卫星得到了广泛的研究,特别以敏捷微小卫星和地球成像观测卫星为主。控制力矩陀螺因其强大的力矩输出和动量存储能力,成为敏捷航天器姿态控制的一种高效执行机构。相比于单框架控制力矩陀螺,只增加转子调速功能的变速控制力矩陀螺能够有效的解决单框架控制力矩陀螺固有的几何奇异问题,而且其力矩放大能力强,满足敏捷卫星的机动要求。因此,本文以变速控制力矩陀螺为研究对象,从变速控制力矩陀螺的操纵律设计、变速控制力矩陀螺故障失效时的可重构性以及基于变速控制力矩陀螺的航天器姿态机动方法三个方面展开研究。主要工作如下:研究了变速控制力矩陀螺系统的奇异性并设计了变速控制力矩陀螺系统的操纵律。1)通过数学分析和理论推导分析了变速控制力矩陀螺奇异的基本原理,深入而全面的研究了变速控制力矩陀螺的奇异问题。2)设计了基于双控模块的自适应混合操纵律,针对变速控制力矩陀螺的奇异性和力矩输出特点,将变速控制力矩陀螺的力矩输出模块分开求解,同步输出。研究了变速控制力矩陀螺系统故障失效时的可重构性。1)分析了变速控制力矩陀螺故障失效类型,从可控性和功耗约束出发,提出了基于功耗约束的变速控制力矩陀螺可重构性评价方法。2)从失效动力学模型、构型角动量和重构操纵律三个方面,提出了变速控制力矩陀螺的可重构性设计方法。研究了基于变速控制力矩陀螺的航天器姿态机动方法。1)构建了应用变速控制力矩陀螺作为执行机构的航天器姿态机动优化目标函数,提出了伪谱法的航天器姿态机动路径规划策略。2)考虑变速控制力矩陀螺的特点,分别设计了基于Gauss伪谱法的单次姿态机动任务最优轨迹规划算法和连续姿态机动任务的最优轨迹规划算法。其中,在单次姿态机动任务中,设计了以CMG子模块输出力矩为主,RW子模块输出力矩为辅的轨迹规划策略;在连续姿态机动任务中,充分考虑各阶段姿态机动的特点,设计了模式调度的路径规划策略。3)根据变速控制力矩陀螺故障失效的动力学模型,设计了基于Gauss伪谱法的变速控制力矩陀螺故障失效时的航天器姿态机动最优路径规划算法。4)考虑到执行机构的状态和对控制器和操纵律的影响,提出了基于势函数法的变速控制力矩陀螺系统控制算法。论文针对变速控制力矩陀螺的研究成果对于提高微小卫星的敏捷性、满足多目标捕获、大角度快速机动等方面具有一定的理论意义和实际研究价值。

关键词：敏捷微小卫星变速控制力矩陀螺姿态控制奇异性可重构性

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危险的打鼾

丛书名：珍爱生命丛书

2004年

作者：睢明河王朝阳

本书运用通俗、简明的文字，介绍了打鼾的原因、症状、诊断，有关的解剖和生理知识、危害，及治疗、预防与保健等。

ISBN: (纸本)7502347011

本书运用通俗、简明的文字，介绍了打鼾的原因、症状、诊断，有关的解剖和生理知识、危害，及治疗、预防与保健等。

关键词：基本知识睡眠综合征呼吸暂停

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多塔自锚式悬索桥随机地震反应分析

多塔自锚式悬索桥随机地震反应分析

作者：朱朝阳华中科技大学

学位级别：硕士

在一定跨径范围内,自锚式悬索桥以其独特的优点成为城市中小跨径极具竞争力的桥型。本文根据随机振动的基本理论,结合螺洲大桥工程背景,运用有限元软件ANSYS对其进行建模分析,研究多塔自锚式悬索桥在随机地震激励下的内力响应特性。论... 详细信息

在一定跨径范围内,自锚式悬索桥以其独特的优点成为城市中小跨径极具竞争力的桥型。本文根据随机振动的基本理论,结合螺洲大桥工程背景,运用有限元软件ANSYS对其进行建模分析,研究多塔自锚式悬索桥在随机地震激励下的内力响应特性。论文主要工作包括以下几个方面: 1、研究桥梁在随机地震激励下的响应功率谱计算、规范反应谱曲线转换为当量功率谱曲线方法。探讨考虑行波效应和空间相干效应的随机地震分析方法,利用根据随机振动理论所求得的各个响应功率谱和方差,来定量估计桥梁结构在地震作用下的内力响应。 2、以螺洲多塔自锚式悬索桥为工程背景,利用有限元分析软件ANSYS建立该桥的空间动力模型,分析比较不考虑桩土共同作用和考虑桩土共同作用下该桥的动力特性。计算分析多塔自锚式悬索桥在各向一致随机地震激励作用下两种情况的内力响应特性。 3、通过改变视波速和相干效应影响区间分析比较行波效应、部分相干效应等空间效应对多塔自锚式悬索桥随机地震响应的影响,研究各个计算参数的变化对该桥地震动力特性的影响。本文分析结果说明运用随机振动理论进行多塔自锚式悬索桥的随机地震反应分析,能够体现桥梁地震响应的概率特性,为工程实践提供一定的参考。

关键词：多塔自锚式悬索桥随机地震虚拟激励法功率谱行波效应相干效应

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企业并购理论与我国企业并购的特点

学术论坛 1996年第3期20卷 14-17页

作者：陈朝阳福建师范大学经济研究所

企业并购理论与我国企业并购的特点陈朝阳近年来我国企业兼并、收购现象不断发生，兼并、合并、收购等概念逐渐流行起来。为了研究和使用上的方便，我们把兼并、合并、收购统称为并购。这是因为三者有着共同的特征：第一，是以产权转让... 详细信息

企业并购理论与我国企业并购的特点陈朝阳近年来我国企业兼并、收购现象不断发生，兼并、合并、收购等概念逐渐流行起来。为了研究和使用上的方便，我们把兼并、合并、收购统称为并购。这是因为三者有着共同的特征：第一，是以产权转让和交易为基本标志，是企业产权的整合...

关键词：企业并购理论中中国国有企业产权制度并购价格