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RNAi介导的抗黄瓜花叶病毒和抗百合斑驳病毒载体的构建及百合的转化研究

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RNAi介导的抗黄瓜花叶病毒和抗百合斑驳病毒载体的构建及百合的转...

作者：冯慧颖中国农业科学院

学位级别：硕士

百合（Lilium L.）是一种集观赏、食用、药用价值于一身的重要经济作物。但百合极易感染黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus，CMV）和百合斑驳病毒（Lily mottle virus，LMoV），其严重阻碍观赏和食用百合的生产，给百合种植业带来极... 详细信息

百合（Lilium L.）是一种集观赏、食用、药用价值于一身的重要经济作物。但百合极易感染黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus，CMV）和百合斑驳病毒（Lily mottle virus，LMoV），其严重阻碍观赏和食用百合的生产，给百合种植业带来极大的经济损失。利用RNAi介导的病毒抗性原理，构建稳定、高效的表达载体以及得到抗CMV和LMoV的百合转基因植株，为获得百合抗病种质，培育抗病品种以及研究百合RNAi抗病毒的遗传规律打下基础。本研究选择CMV2b基因和LMoV cp基因的部分片段作为RNA干涉区段，构建含有目的基因片段反向重复序列的分别抗CMV、LMoV的RNAi植物表达载体。在本实验室现有的农杆菌介导的百合遗传转化体系基础上，进行体系优化并转化百合，获得抗CMV、LMoV的百合转基因植株。主要研究结果如下： 1.成功构建抗CMV、LMoV的RNAi抗病毒植物表达载体分别选择CMV2b基因271bp和LMoV cp基因428bp的区域作为RNA干涉区段，利用不同酶切位点的选择控制目的片段的插入方向，分别将得到各基因目标序列的正、反向片段与植物表达载体pFGC5941连接，最终得到含有目的基因片段反向重复序列的RNAi植物表达载体，即可用于农杆菌转化百合的分别抗CMV、LMoV的RNAi植物表达载体pFGC5941-C2和pFGC5941-L2。 2.对农杆菌介导的东方百合‘索邦’的遗传转化体系进行了优化植物表达载体pFGC5941中含有抗草铵膦标记基因，可以通过草铵膦筛选阳性株。经实验验证，确定以草铵膦浓度3.0mg/L作为农杆菌介导的东方百合‘索邦’的转化抗性筛选浓度。并利用超声波处理辅助农杆菌转化，本试验中当超声波功率为90W处理20s时，对农杆菌介导的百合遗传转化效率的提高效果最好。 3.通过草铵膦筛选，得到东方百合‘索邦’的抗性植株用重组农杆菌侵染东方百合‘索邦’无菌苗鳞片后，经草铵膦抗性初步筛选得到转化pFGC5941-C2和pFGC5941-L2载体的抗性苗，即为抗性植株。 4.对百合抗性植株进行分子检测，得到抗病毒转基因植株通过对草铵膦抗性筛选得到的转化植株进行PCR检测和RT-PCR检测，初步证明目的基因已经整合到百合的基因组中，并在转基因植株中获得了转录水平上的表达。最终得到2株含LMoVcp基因和1株含CMV2b基因的百合转基因植株。

关键词：百合黄瓜花叶病毒百合斑驳病毒 RNAi介导的病毒抗性载体构建遗传转化

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关于中韩动物俗语象征意义差异点的比较研究

关于中韩动物俗语象征意义差异点的比较研究

作者：冯慧颖山东大学

学位级别：硕士

俗语是一个民族在以往的生活过程中逐渐形成并为普通大众所广泛熟知的通俗的表现形式,它包含了很多文化要素和民族内涵。所以,对比中韩两国俗语,特别是具有代表性的动物俗语,是迅速、有效挖掘两国文化底蕴的重要手段。本文从分析中韩两... 详细信息

俗语是一个民族在以往的生活过程中逐渐形成并为普通大众所广泛熟知的通俗的表现形式,它包含了很多文化要素和民族内涵。所以,对比中韩两国俗语,特别是具有代表性的动物俗语,是迅速、有效挖掘两国文化底蕴的重要手段。本文从分析中韩两国动物俗语的象征意义入手,将象征意义差异较大的动物分为飞禽、走兽、鱼类三大部分,通过生存环境、历史文化、传说典故三方面阐明了两国俗语的差异及其产生原因,进而加深对两国文化的感悟和领会。俗语是人类对生活的感悟,是人类智慧的结晶,是人们对经验的总结和对愿望的寄托,内容涉及生产活动、生活经验和意识形态等广泛领域和内容。在众多的俗语中,本文选定了与人类关系最近、接触最为频繁的动物俗语为主要研究对象,理由有三。首先,动物与人类之间存在非常亲密的关系,人类根据动物的外形和习性赋予其一定的象征意义;若缺乏对动物俗语象征意义的准确把握和深层次理解,将会产生很多失误甚至引起对方误解。其次,动物俗语种类繁多、数量庞大,分别占中韩两国俗语总量的6.93%和10.98%,意义重大,可研究价值高;再次,动物俗语的象征意义表现形式多样、风趣活泼,容易激起对话者的兴趣。本文主要从以下几方面进行论述。在先行研究史探讨中,将以往对动物俗语的研究论文分为“以全体动物为研究对象”、“以个别动物为研究对象”“以动物象征意义为主要研究对象”三个方面,展现两国动物俗语的研究现状。在综合分析所有动物俗语象征意义的基础上,重点挑选差异较大的12种代表性动物进行分析研究;为保持动物俗语象征意义的完整性,本文在一笔带过共同点后重点分析象征意义的差异点。同时,将12种动物分为飞禽、走兽、鱼类进行对比研究;为便于理解和掌握,又将这三类动物分为与人类关系较密切的动物及与人类较疏远的动物。在分析动物俗语象征意义差异点的基础上,重点研究产生这一差异的原因。主要通过生存环境、历史文化、传统文学三方面深入分析动物象征意义的文化背景及俗语中动物形象所蕴含的文化要素,进而考察了两个民族之间的文化关系。本文旨在对现存的中韩动物俗语研究现状进行补充,通过对两国动物自然属性、地理环境、历史文化、传说、典故、风俗习惯、饮食文化等方面的分析,帮助两国语言学者更好地了解俗语象征意义的不同及两国民族性的差异,对理解两国社会的古往今来也有所裨益。

关键词：中韩俗语动物俗语象征意义文化差异民族性

人口老龄化下农村医养结合养老模式发展研究 ——以山东省A市S区为例

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人口老龄化下农村医养结合养老模式发展研究 ...

作者：冯慧颖山东大学

学位级别：硕士

我国已进入人口老龄化高速发展阶段,且呈现失能化、空巢化的趋势,老年人对医疗健康、生活照料和精神慰藉等方面的需求日益增加,养老服务面临着严重挑战。而随着城市化进程的加快,农村老年人大多独自居住,农村的养老形势十分严峻。对于... 详细信息

我国已进入人口老龄化高速发展阶段,且呈现失能化、空巢化的趋势,老年人对医疗健康、生活照料和精神慰藉等方面的需求日益增加,养老服务面临着严重挑战。而随着城市化进程的加快,农村老年人大多独自居住,农村的养老形势十分严峻。对于目前此种情况,基于老年人对养老服务和医疗服务的双重需求,医养结合养老模式成为缓解养老压力的新思路。在农村推进医养结合养老服务模式发展,不仅能提高农村老年人的生活质量和医疗品质,又可以完善现有的社会保障体系,推进全面小康社会的建设进程。为此,在人口老龄化的社会背景下,从医养结合视角出发,以山东省A市S区为例,采用文献分析、比较分析、访谈等方法研究农村医养结合养老模式的发展。首先,通过查阅相关文献和资料,界定医养结合的相关概念和研究的理论依据。其次,通过调查和走访,掌握S区农村地区养老情况与医疗现状,研究S区农村医养结合养老模式的发展历程及类型。第三,总结了 S 区医养结合养老模式在农村发展面临的问题,主要是医养机构入住率低、医养服务能力不足、医养机构不具备医保报销资格、社会主体参与度较低、老年人信息不共享等问题。第四,分析了造成上述问题的主要原因是:传统家庭养老观念根深蒂固、医养机构费用较高、专业服务人才队伍短缺、相关制度政策不完善、部门协作机制尚不健全。最后,在借鉴和总结国内外在农村医养结合养老模式发展经验的基础上,从引导树立健康养老观念,加强资金支持培育专业人才,构建多元社会主体参与机制,加强部门协作打造信息共享平台,建立服务评估监督体系,推进居家和中医药服务医养结合等方面,进一步提出推进农村医养结合养老模式发展的建议和对策,以满足农村老年人的养老和医疗需求,改善农村老年人的生存状况,为农村地区医养结合养老模式发展提供借鉴和参考。

关键词：医养结合养老人口老龄化农村养老

四版高中地理新教材呈现方式比较与教学建议——以“地球的演化”一节为例

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中学地理教学参考 2021年第15期 26-28页

作者：冯慧颖周海瑛哈尔滨师范大学教师教育学院黑龙江哈尔滨

为方便一线教师教学,对人教、湘教、中图、鲁教四版教材新增加的"地球的演化"相关内容从所处章节、教学内容导入、内容结构、课文素材呈现方式等方面进行对比分析,归纳出各版本教材的特点,最后根据学业质量标准提出了相应的教学建议。

关键词：高中地理新教材呈现方式比较教学建议

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汉韩同形汉字词异质化探究

韩国语教学与研究 2018年第4期 41-46页

作者：朱伟冯慧颖大连外国语大学

韩国语词汇中存在大量的汉字词,有些汉字词和汉语书写形式一致,即所谓"同形汉字词",但其词义可能会不同。汉韩同形汉字词虽然给韩国的汉语学习者带来方便,但是如果学习者不能充分认识其区别,就会很容易产生偏误,因此需要格外加以重视。... 详细信息

韩国语词汇中存在大量的汉字词,有些汉字词和汉语书写形式一致,即所谓"同形汉字词",但其词义可能会不同。汉韩同形汉字词虽然给韩国的汉语学习者带来方便,但是如果学习者不能充分认识其区别,就会很容易产生偏误,因此需要格外加以重视。本文通过对汉韩同形汉字词异质化的探究,区分其类型,探究其原因,期待能够探明韩国学生学习汉字词的方法,有助于教师对韩国学生的汉语教学。

关键词：同形汉字词异质化词义同形异义同形同义

百合肌动蛋白基因lilyActin的克隆与表达分析

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园艺学报 2013年第7期40卷 1318-1326页

作者：梁云袁素霞冯慧颖徐雷锋袁迎迎刘春明军中国农业科学院蔬菜花卉研究所北京100081

为了在百合功能基因表达研究中选择一个理想内参基因,依据岷江百合cDNA文库所获得的百合肌动蛋白(Actin)基因的EST序列,采用RACE技术进行该基因cDNA全长克隆,并利用实时荧光定量PCR分析其在不同组织中的表达模式,获得百合肌动蛋白基因c... 详细信息

为了在百合功能基因表达研究中选择一个理想内参基因,依据岷江百合cDNA文库所获得的百合肌动蛋白(Actin)基因的EST序列,采用RACE技术进行该基因cDNA全长克隆,并利用实时荧光定量PCR分析其在不同组织中的表达模式,获得百合肌动蛋白基因cDNA全长序列(GenBank登录号:JX826390),命名为lilyActin。该基因cDNA全长1367bp,其中,5′非编码区91bp,3′非编码区233bp,开放读码框1134bp,编码377个氨基酸。序列比对发现,该基因与其它15种植物肌动蛋白核苷酸序列的相似性均在80%以上,氨基酸序列的相似性达98%。进化分析显示,百合肌动蛋白与郁金香肌动蛋白的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果显示,该基因在百合的花蕾、叶片和鳞片组织中恒定表达,表明相对于其他物种的内参基因,lilyActin更适宜作为百合属植物的内参基因。

关键词：百合 Actin基因基因克隆表达分析内参基因

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强化施工现场管理促进文明施工

强化施工现场管理促进文明施工

作者：崔燕红冯慧颖焦作市铭源建筑有限公司

当前经济建设突飞猛进,工程建设规模大、发展快,同时建筑市场的全面放开,使得监督管理模式已经不能适应当前形势的要求,必须将科学发展观和安全发展贯穿在建设工程质量安全生产、文明施工工作中,切实把工安全生产、文明施工有机结合起来... 详细信息

当前经济建设突飞猛进,工程建设规模大、发展快,同时建筑市场的全面放开,使得监督管理模式已经不能适应当前形势的要求,必须将科学发展观和安全发展贯穿在建设工程质量安全生产、文明施工工作中,切实把工安全生产、文明施工有机结合起来,开创监督管理工作新局面。

关键词：文明施工施工管理环境保护

来源： cnki会议评论

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对数函数错解分析

数理天地（高中版） 2009年第11期 7-7,20页

作者：冯慧颖河北省威县第二中学 054700

例1 已知函数f（x）-loga（-x^2＋2mx-m^2＋36）在区间[-3，2）上是增函数，求实数m的取值范围．

关键词：对数函数错解分析取值范围增函数区间实数

山东省潍坊市审计局是如何搞好县长经济责任审计的？

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