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儿童溶血性贫血的诊断与治疗

实用儿科临床杂志 2007年第15期22卷 1126-1128页

作者：马廉冯学永汕头大学医学院第二附属医院儿科广东汕头515041

溶血性贫血可分为先天性(遗传性)和后天性(获得性),红细胞内在缺陷常为遗传性溶血性贫血,包括细胞膜、酶及血红蛋白等缺陷。而常见获得性溶血性贫血有自身免疫性贫血、感染引起的贫血及阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)。溶血性贫血确诊在... 详细信息

溶血性贫血可分为先天性(遗传性)和后天性(获得性),红细胞内在缺陷常为遗传性溶血性贫血,包括细胞膜、酶及血红蛋白等缺陷。而常见获得性溶血性贫血有自身免疫性贫血、感染引起的贫血及阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)。溶血性贫血确诊在很在程度上常取决于有关的实验室检查,但病史和体格检查能提供重要线索及其可能病因。溶血性贫血是一大类性质不同的疾病,其诊断与治疗不能一概而论,应因病而异。

关键词：贫血溶血性分类诊断治疗儿童

脐带血干细胞在中枢神经系统疾病应用的研究进展

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中国微侵袭神经外科杂志 2004年第7期9卷 326-328页

作者：冯学永马廉汕头大学医学院第二附属医院儿科广东汕头515041

脐带血(HUCB)干细胞在一定的诱导条件下可向神经样细胞分化,通过静脉注射、纹状体室管膜下层(SVZ)植入等途径,HUCB细胞可在中枢神经系统内成活并分化为神经样细胞,提示HUCB细胞有可能取代神经干细胞用于中枢神经系统疾病的细胞治疗和损... 详细信息

脐带血(HUCB)干细胞在一定的诱导条件下可向神经样细胞分化,通过静脉注射、纹状体室管膜下层(SVZ)植入等途径,HUCB细胞可在中枢神经系统内成活并分化为神经样细胞,提示HUCB细胞有可能取代神经干细胞用于中枢神经系统疾病的细胞治疗和损伤的修复,其具有广阔的应用前景。

关键词：脐带血干细胞神经样细胞中枢神经系统

人脐血及脐带间充质干细胞的分离培养及表面标记分析

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临床儿科杂志 2012年第6期30卷 577-580页

作者：冯学永马廉霍霞蒋纪恺刘小珊汕头大学医学院第二附属医院儿科广东汕头515041 汕头大学医学院第二附属医院转化医学中心广东汕头515041

目的探讨从人脐带血及脐带分离和培养间充质干细胞(MSCs)的方法,并分析MSCs的表面标记。方法人脐带血按常规方法制备单个核细胞,利用MSCs贴壁生长的特性,经培养、换液、传代纯化MSCs;分离脐带华尔通胶(Wharton's jelly),采用组织块贴壁... 详细信息

目的探讨从人脐带血及脐带分离和培养间充质干细胞(MSCs)的方法,并分析MSCs的表面标记。方法人脐带血按常规方法制备单个核细胞,利用MSCs贴壁生长的特性,经培养、换液、传代纯化MSCs;分离脐带华尔通胶(Wharton's jelly),采用组织块贴壁法获得脐带MSCs并传代。将传代的MSCs冻存,1个月后再复苏,观察复苏后MSCs的生长情况。利用FACScan流式细胞仪检测脐带血及脐带细胞表面抗原。结果经过传代后,贴壁细胞形态趋于同一。人脐血及脐带MSCs体外生长形态相似,类似成纤维细胞,可以稳定增殖和传代。经冷冻保存,复苏后仍能较好生长。人脐血及脐带来源的MSCs表面标记CD29、CD44、CD59高表达,而表面标记CD14、CD33、CD34和CD45低表达。结论人脐带血及脐带均可分离出MSCs,在体外能扩增纯化及冻存复苏,为组织工程提供丰富的细胞来源。

关键词：脐带血脐带间充质干细胞培养

腺病毒转染MafA诱导人脐带间充质干细胞表达胰腺细胞特异性基因

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中国组织工程研究 2017年第9期21卷 1368-1372页

作者：王鸿武倪萍赖秀蓝冯学永林丽敏马廉汕头大学医学院第二附属医院儿科广东省汕头市515041 汕头大学医学院附属肿瘤医院乳腺肿瘤科广东省汕头市515031 深圳大学妇幼保健院广东省深圳市518118 深圳市坪山新区妇幼保健院广东省深圳市518118

背景:人脐带间充质干细胞经化学药物或共培养等方法诱导后胰岛素分泌量低,转染胰腺发育特异性基因诱导干细胞向成熟β细胞分化是近年来的研究热点。目的:探讨MafA基因转染后人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的潜能。方法:腺病毒... 详细信息

背景:人脐带间充质干细胞经化学药物或共培养等方法诱导后胰岛素分泌量低,转染胰腺发育特异性基因诱导干细胞向成熟β细胞分化是近年来的研究热点。目的:探讨MafA基因转染后人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的潜能。方法:腺病毒携带外源性β细胞发育的关键转录因子Maf A(Ad-MafA-EGFP),转染入第3代人脐带间充质干细胞,诱导后7 d观察细胞的形态学变化,应用PCR检测细胞中胰腺细胞特异性基因(glucagon、Pdx1、Nkx2.2)的表达。结果与结论:(1)经Ad-Maf A-EGFP转染后,倒置相差显微镜下观察人脐带间充质干细胞形态未见明显变化;(2)荧光显微镜下观察Ad-MafA-EGFP已进入细胞内;(3)经Ad-MafA-EGFP诱导后,人脐带间充质干细胞中人源性胰腺前体细胞glucagon、Pdx1、Nkx2.2基因表达增高,为人脐带间充质干细胞进一步分化成熟胰腺β细胞提供实验依据。

关键词：脐带间质干细胞 Maf转录因子类胰岛素分泌细胞组织工程干细胞脐带脐血干细胞间充质干细胞 MafA 胰腺前体细胞

人脐带间充质干细胞经体内定植并向心肌样细胞分化的研究

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中国输血杂志 2009年第3期22卷 188-191页

作者：何红燕林晓波应文娟林丽敏冯学永王鸿武马廉汕头大学医学院第一附属医院外科广东汕头515041 汕头大学医学院第二附属医院儿科

目的探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)移植到大鼠心肌后能否存活并向心肌样细胞分化,为心肌细胞的移植探索新的细胞来源。方法从人脐带华尔通氏胶分离、培养MSCs,检测人脐带来源的MSCs的细胞表面标记。用5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)标记人脐带... 详细信息

目的探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)移植到大鼠心肌后能否存活并向心肌样细胞分化,为心肌细胞的移植探索新的细胞来源。方法从人脐带华尔通氏胶分离、培养MSCs,检测人脐带来源的MSCs的细胞表面标记。用5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)标记人脐带间充质干细胞,标记细胞移植到梗塞大鼠心肌,观察移植后2周细胞能否存活,移植细胞能否向心肌样细胞分化,表达心肌细胞标记物troponinI及troponinT。结果人脐带间充质干细胞移植到心肌梗塞模型大鼠心肌后细胞能存活,并表达心肌细胞标记物troponinI及troponinT。结论人脐带间充质干细胞移植至体内能存活并分化为心肌样细胞,人脐带间充质干细胞可能作为心肌细胞移植的来源。

关键词：人脐带间充质干细胞心肌样细胞分化移植

人脐带间充质干细胞向心肌样细胞分化的显微形态学研究

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中华显微外科杂志 2008年第3期31卷 212-213页

作者：何红燕林晓波应文娟林丽敏罗敏婕马桂霞冯学永汕头大学医学院第一附属医院外科广东省汕头市汕头大学医学院第二附属医院儿科

目的观察人脐带间充质干细胞（MSCs）向心肌样细胞分化过程中的显微形态学改变及其意义，为心肌细胞的移植探索新的细胞来源。方法从人脐带华尔通氏胶分离、培养MSCs，倒置相差显微镜、扫描电镜和透射电镜观察细胞分化前后细胞形态的变... 详细信息

目的观察人脐带间充质干细胞（MSCs）向心肌样细胞分化过程中的显微形态学改变及其意义，为心肌细胞的移植探索新的细胞来源。方法从人脐带华尔通氏胶分离、培养MSCs，倒置相差显微镜、扫描电镜和透射电镜观察细胞分化前后细胞形态的变化及超微结构，用免疫组化的方法检测分化的心肌样细胞是否表达心肌肌钙蛋白Ⅰ（troponinⅠ）、心肌肌钙蛋白T（troponinT）和心肌结蛋白（desmin）。结果扫描电镜观察到人脐带MSCs经5-aza和DMSO诱导后体积变大变长．呈杆状细胞且细胞浆中可见肌丝样结构出现：透射电镜可以观察分化的细胞浆中有肌丝的存在。同时分化的细胞表达心肌细胞的标记troponinⅠ、troponinT和desmin。结论人脐带间充质干细胞可以分化为心肌样细胞．可以作为心肌细胞移植的来源。

关键词：脐带间充质干细胞心肌样细胞移植

托泊替康为主联合方案治疗急性白血病患儿的疗效及耐受性

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实用儿科临床杂志 2006年第14期21卷 940-941页

作者：庄静文马廉林丽敏吴扬杨铭冯学永汕头大学医学院第二附属医院儿科广东汕头515041

目的探讨托泊替康为主的联合化疗方案在急性白血病儿童的应用,评价其疗效及耐受性。方法以托泊替康为主,联合阿糖胞苷、泼尼松、门冬酰胺酶、长春新碱或VM-26构成TVAPL或TEAVP方案治疗7例急性白血病患儿,患儿共接受托泊替康为主的联合... 详细信息

目的探讨托泊替康为主的联合化疗方案在急性白血病儿童的应用,评价其疗效及耐受性。方法以托泊替康为主,联合阿糖胞苷、泼尼松、门冬酰胺酶、长春新碱或VM-26构成TVAPL或TEAVP方案治疗7例急性白血病患儿,患儿共接受托泊替康为主的联合化疗方案26个疗程。结果7例均于治疗初期获缓解。随访无病生存4例,1例难治病例获完全缓解,2例复发病例死亡。患儿均出现不同程度的骨髓抑制,粒细胞缺乏中位时间为8.5 d。5例次出现发热及感染,脏器毒性反应轻微。结论托泊替康为主联合化疗方案对白血病儿童有较好的疗效,毒性反应轻微。

关键词：儿童白血病托泊替康

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儿科重症监护室成分输血应用情况分析

中国输血杂志 2014年第10期27卷 993-995页

作者：王鸿武林丽敏杨汉华陈秋蓉刘思征冯学永林广裕马廉汕头大学医学院第二附属医院儿科广东汕头515041

目的分析儿科重症监护室（PICU）成分输血的应用特点,总结成分输血的经验,指导临床科学、合理用血。方法对本院2011～2013年PICU成分输血资料进行回顾性分析。结果 1）PICU近3年收治患儿2 598例（危重组：2 111,极危重组：487）,成分... 详细信息

目的分析儿科重症监护室（PICU）成分输血的应用特点,总结成分输血的经验,指导临床科学、合理用血。方法对本院2011～2013年PICU成分输血资料进行回顾性分析。结果 1）PICU近3年收治患儿2 598例（危重组：2 111,极危重组：487）,成分输血732例,危重组输血率为22.7%（479/2 111）、极危重组输血率为52.0%（253/487）;治愈好转率输血组高于未输血组（P〈0.05）。2）用量占前3位的成分血分别是丙种球蛋白、血浆、人血白蛋白,分别占59.50%、11.76%、9.38%;成分输血应用率达100%。3）输血的病因前3位为重症感染、脏器功能衰竭、免疫性疾病,分别占39.15%、20.59%、13.33%,输血成分主要为丙种球蛋白、血浆、人血白蛋白;4）丙种球蛋白用量前3位病因分别为重症感染、脏器功能衰竭及免疫性疾病;血浆用量前3位病因分别为脏器功能衰竭合并凝血功能障碍、重症感染合并凝血功能障碍和原发性出凝血疾病;人血白蛋白用量前3位病因分别为重症感染（主要为重症脑炎）、脏器功能衰竭（严重低蛋白血症）和中毒意外。5）输血不良反应5例,发生率为0.70%,其中输红细胞发生不良反应2例,输血浆、丙种球蛋白、血小板输血不良反应各1例,主要表现为发热、过敏反应,经对症治疗均缓解,完成输注。结论成分输血是儿科危重症治疗的重要手段,患儿危重程度越高,输血率越大,合理输血对改善PICU患儿的预后、提高抢救成功有着重要的地位。

关键词：成分输血儿科重症监护

人脐带间充质干细胞的生物学特性及向神经样细胞分化的研究

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中华儿科杂志 2006年第7期44卷 513-517页

作者：马廉崔冰琳冯学永罗敏洁蒋学武杨立业谢庆东黄天华汕头大学医学院第二附属医院儿科 515041 汕头大学医学院生殖医学研究中心

目的研究人脐带华尔通胶来源的间充质干细胞(MSCs)的特性及向神经细胞分化的可能性,为神经移植寻找新的细胞来源。方法检测人脐带来源的MSCs的细胞表面标记;丹参和β巯基乙醇诱导人脐带来源的MSCs向神经细胞分化,用免疫细胞化学方法对... 详细信息

目的研究人脐带华尔通胶来源的间充质干细胞(MSCs)的特性及向神经细胞分化的可能性,为神经移植寻找新的细胞来源。方法检测人脐带来源的MSCs的细胞表面标记;丹参和β巯基乙醇诱导人脐带来源的MSCs向神经细胞分化,用免疫细胞化学方法对分化和未分化的细胞进行鉴定;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞的神经相关基因表达。结果从人脐带分离、培养的贴壁细胞,体外生长形态类似于成纤维细胞,可以维持在未分化状态稳定增殖,体外增殖超过10代。这类细胞MSCs的表面标记CD29、CD44、CD59、CD105呈现高表达,造血细胞表面标记CD14、CD33、CD34、CD28、CD45、CD117和与移植免疫排斥相关的表面标记CD80(B7-1)、CD86(B7-2)、CD40、CD40L不表达或低表达。丹参和β巯基乙醇均可诱导人脐带MSCs向神经样细胞分化,分化的细胞表达神经干细胞的标记巢蛋白(Nestin),神经元的标记β-Ⅲ类神经微管(β-TubulinⅢ)和神经微丝(NF),以及神经胶质细胞的标记胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。RT-PCR检测证实,经丹参诱导后的MSCs表达神经干细胞相关基因Nestin,诱导前和诱导后的MSCs均表达神经细胞基因Pleiotrophin,诱导后的表达明显增强。结论人脐带华尔通胶含有丰富的MSCs,易于培养扩增,其表达MSCs的表面标记,不表达或低表达造血细胞和与移植排斥相关的细胞标记。人脐带来源的MSCs能分化为神经细胞,表达神经细胞的相关标记和基因,这种细胞可能成为中枢神经系统细胞移植的一个干细胞来源。

关键词：脐带间质干细胞神经元细胞分化