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早幼粒细胞白血病锌指在哮喘患者外周血中的表达及意义

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中华急诊医学杂志 2022年第10期31卷 1389-1395页

作者：任晓婷施天昀李娜何燕超钱凌冯净净梅周芳揭志军复旦大学附属上海市第五人民医院呼吸与危重症医学科复旦大学社区健康研究中心(筹) 上海200240

目的检测早幼粒细胞白血病锌指结构(promyelocytic leukemia zinc fi nger,PLZF)在哮喘(asthma)患者外周血中的表达水平及临床意义。方法选取上海市第五人民医院2021年5月至2021年10月诊治的稳定期Asthma患者外周血标本为研究对象(n=40)... 详细信息

目的检测早幼粒细胞白血病锌指结构(promyelocytic leukemia zinc fi nger,PLZF)在哮喘(asthma)患者外周血中的表达水平及临床意义。方法选取上海市第五人民医院2021年5月至2021年10月诊治的稳定期Asthma患者外周血标本为研究对象(n=40),以及健康体检者为对照组(Control组,n=40),采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中细胞因子的含量,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测血浆中PLZF的mRNA表达。分离外周血的单个核淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),并使用流式细胞术检测PBMC中PLZF+细胞的水平和分布。采用SPSS 26.0及Graphpad Prism 7.0软件进行独立样本t检验、Mann-Whitney U检验、χ2检验、ROC曲线及Logistic回归等统计学分析。以P1,AUC=0.87,P<0.05)。结论哮喘患者外周血中PLZF增加,可能在哮喘疾病发展中起到重要作用,结果尚需更大样本实验数据进一步证实。

关键词：转录因子PLZF 哮喘 iNKT PBMC 外周血 ELISA qPCR 流式细胞术

呼吸道合胞病毒(RSV)对干扰素(IFN)信号通路STAT蛋白核转移的影响

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复旦学报（医学版） 2012年第3期39卷 277-282页

作者：揭志军冯净净宋志刚张悦郭雪君复旦大学附属上海市第五人民医院呼吸内科上海200240 上海交通大学医学院附属新华医院呼吸内科上海200092 上海市公共卫生临床中心生物安全部上海201508

目的研究呼吸合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠骨髓树突状细胞(bone marrowderived dendritic cells,BMDCs)后,对Ⅰ型和Ⅱ型干扰素(interferon,IFN)诱导的JAK/STAT通路蛋白活化后核转移的影响。方法从BALB/c小鼠的长骨中分离骨髓细胞,经过培养和刺激后得到BMDCs。将BMDCs接种于带小室的玻片上,以感染复数(multiplicity of infection,MOI)为1的RSV感染细胞,并设紫外线灭活的RSV(UV-RSV)和培养液(media)刺激为对照。在培养24h后,分别用100IU/mL的IFN-β刺激30min或0.64pmol/L的IFN-γ刺激45min,然后进行免疫荧光染色。在荧光显微镜下计数STAT蛋白核转移阳性细胞的百分比,比较各组间的差异。结果在未感染的BMDCs中,STAT1和STAT2蛋白主要存在于细胞质中,当用IFN-β刺激BMDCs后可见到明显的STAT1和STAT2蛋白向细胞核转移,核转移阳性细胞百分比分别为89.0%±4.6%和83.7%±5.1%,与未处理组(NT组)相比有明显差异(P0.05)。用IFN-γ刺激BMDCs后也可见到明显的STAT1蛋白向细胞核转移(阳性细胞为85.3%±6.4%);而RSV感染后与IFN-γ刺激组相比,STAT1核转移阳性细胞数(79.3%±4.9%)却未见明显减少(P>0.05)。结论 RSV感染BMDCs后,能特异性地抑制Ⅰ型IFN诱导的STAT1和STAT2蛋白的核转移,而对II型IFN诱导的STAT1蛋白的核转移却没有影响。

关键词：呼吸道合胞病毒骨髓树突状细胞干扰素信号通路核转移

成人社区获得性肺炎合并呼吸道病毒感染住院患者病毒谱及临床特征分析

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中国全科医学 2021年第26期24卷 3323-3329页

作者：何燕超张静冯净净梅周芳钱凌黄琦慧揭志军复旦大学附属上海市第五人民医院呼吸内科上海市200240

背景成人社区获得性肺炎(CAP)合并呼吸道病毒感染与单纯CAP在临床治疗上是否存在差异尚不清楚。本研究拟从分析CAP合并呼吸道病毒感染病毒谱和临床特征与单纯CAP的差异来探讨此问题。目的分析成人CAP合并呼吸道病毒感染患者的病毒谱特... 详细信息

背景成人社区获得性肺炎(CAP)合并呼吸道病毒感染与单纯CAP在临床治疗上是否存在差异尚不清楚。本研究拟从分析CAP合并呼吸道病毒感染病毒谱和临床特征与单纯CAP的差异来探讨此问题。目的分析成人CAP合并呼吸道病毒感染患者的病毒谱特点及其临床特征。方法选取2017年6月-2019年5月复旦大学附属上海市第五人民医院住院部收治的CAP患者223例,采集CAP患者的咽拭子,应用多重巢式反转录酶-聚合酶链式反应(nested multiplex RT-PCR)检测8种(10型)常见的呼吸道病毒。将CAP患者分为病毒阳性组和病毒阴性组,分析病毒阳性组CAP患者的临床特征。同时,采集病毒阳性、病毒阴性CAP患者及社区健康对照者的血清各24份,采用ELISA检测血清中白介素(IL)-6、IL-8、IL-10、干扰素(INF)-γ、干扰素诱导蛋白(IP)-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α的浓度。结果223例CAP患者中61例(27.35%)患者病毒检测阳性,其中单病毒感染58例(26.01%),多病毒感染3例。单病毒感染包括22例(9.87%)流感病毒A(Flu A)、14例(6.28%)鼻病毒(RhV)、9例(4.03%)流感病毒B(Flu B)、5例(2.24%)腺病毒(ADV)、2例(0.90%)冠状病毒(CoV)、2例(0.90%)呼吸道合胞病毒A(RSVA)、2例(0.90%)偏肺病毒(MPV)、1例(0.45%)博卡病毒(BoV)、1例(0.45%)呼吸道合胞体病毒B型(RSVB)。根据年龄分为非老年(≤65岁)组和老年(>65岁)组,两组病毒检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CAP患者四季均会有病毒感染,冬季为高发季节,感染病毒主要有Flu A、RhV、Flu B。按照呼吸道病毒检测结果分为病毒阳性组和阴性组,病毒阳性组死亡率高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05),其中病毒阳性组死亡患者均为合并流感病毒感染。进一步将呼吸道病毒阳性组分为流感组(包括Flu A和Flu B)和非流感组,发现流感组乳酸脱氢酶水平高于非流感组,流感组死亡率高于病毒阴性组(P<0.05)。影像学特征分析结果显示,病毒阳性组双肺病变、多肺叶病变、斑片状渗出影比例高于病毒阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清细胞因子水平分析结果显示,病毒阳性组IL-10水平高于病毒阴性组。结论上海闵行地区CAP患者合并呼吸道病毒感染较为常见,检出病毒以Flu A、RhV和Flu B为主,其临床特征无明显差异,合并流感病毒感染可能会导致死亡率增加,病毒阳性患者影像学多表现为双肺病变、多肺叶病变、斑片状渗出影,病毒阳性患者IL-10血清浓度明显升高,以上结果对于CAP合并呼吸道病毒感染有一定的参考价值。

关键词：社区获得性肺炎呼吸病毒感染疾病特征流感病毒A型流感病毒B型鼻病毒属

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Thl7在肺癌微环境中作用的研究进展

国际呼吸杂志 2013年第22期33卷 1732-1736页

作者：何燕超冯净净揭志军复旦大学附属上海市第五人民医院呼吸内科 200240

辅助性T细胞17（Thl7）是一种不同于Thl／Th2的CD4＋T细胞，它们具有不同的分化和调节机制，并特异性地分泌IL17A（也称为IL-17）和IL-17F等细胞因子。许多研究发现Thl7细胞及其分泌的细胞因子主要介导炎性反应、自身免疫性疾病和变态... 详细信息

辅助性T细胞17（Thl7）是一种不同于Thl／Th2的CD4＋T细胞，它们具有不同的分化和调节机制，并特异性地分泌IL17A（也称为IL-17）和IL-17F等细胞因子。许多研究发现Thl7细胞及其分泌的细胞因子主要介导炎性反应、自身免疫性疾病和变态反应等疾病的发生和发展。然而，最近一些研究发现Thl7细胞在肿瘤免疫中也起重要的作用。本文对Thl7在肿瘤免疫中的作用及其与肺癌关系的研究进展作一综述。

关键词： Th17细胞白介素17 肿瘤肺癌

IL-33在呼吸道合胞病毒(RSV)感染致哮喘急性发作中的作用

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复旦学报（医学版） 2020年第1期47卷 59-65页

作者：陈家君冯净净施天昀陈鸿军揭志军复旦大学附属上海市第五人民医院呼吸与危重症医学科上海200240 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241

目的研究IL-33在呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染致哮喘急性发作中的作用。方法将24只3周龄SPF级BALB/c雌性小鼠随机分为PBS组、RSV组、卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)组和OVA/RSV组,每组6只。首先应用OVA或PBS激发并... 详细信息

目的研究IL-33在呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染致哮喘急性发作中的作用。方法将24只3周龄SPF级BALB/c雌性小鼠随机分为PBS组、RSV组、卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)组和OVA/RSV组,每组6只。首先应用OVA或PBS激发并致敏小鼠,再感染RSV致哮喘急性发作。麻醉后处死小鼠。ELISA法测小鼠血清总IgE水平、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)及肺组织IL-33蛋白水平;瑞氏/吉姆萨染色后测BALF细胞总数及各细胞分类计数;取肺组织病理切片HE染色;real-time PCR测T辅助细胞2型(T helper 2,Th2)细胞因子、IL-33等mRNA表达。结果 OVA组与PBS组相比,血清IgE水平明显升高(P<0.05)。OVA/RSV组中BALF细胞总数较OVA组显著增加,主要表现为巨噬细胞和中性粒细胞的增加。病理切片HE染色可见OVA/RSV组小气道周围炎性细胞浸润更加明显。以上表明RSV感染OVA诱导哮喘急性发作的小鼠模型成功建立。real-time PCR显示:与OVA组相比,OVA/RSV组IL-13以及IL-33 mRNA表达显著增加(P<0.05),IL-5和ST2表达有所增加,但差异无统计学意义。ELISA结果显示:与OVA组相比,OVA/RSV组肺组织中IL-33浓度增高更加显著(P<0.05),BALF中IL-33浓度也有所增加,但差异无统计学意义。结论 IL-33可能通过启动Th2型免疫反应在RSV感染诱导哮喘急性发作小鼠模型中起重要作用。

关键词：呼吸道合胞病毒(RSV) 哮喘急性发作 IL-33 ST2

2014年至2019年上海市闵行区居民流行性感冒疫苗接种状况分析

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中华传染病杂志 2021年第7期39卷 436-439页

作者：张小华张莉萍陆佳胡小英冯净净施天昀揭志军复旦大学附属上海市第五人民医院呼吸与危重症医学科 200240 上海市闵行区疾病预防控制中心免疫预防科 201101 上海市闵行区江川社区卫生服务中心 200240

目的分析2014年至2019年上海市闵行区居民流行性感冒(以下简称流感)疫苗接种状况。方法收集2014年8月1日至2019年7月31日上海市闵行区疾病预防控制中心登记的居民的流感疫苗接种信息,比较不同年度、月份、年龄段,以及沪籍和非沪籍居民... 详细信息

目的分析2014年至2019年上海市闵行区居民流行性感冒(以下简称流感)疫苗接种状况。方法收集2014年8月1日至2019年7月31日上海市闵行区疾病预防控制中心登记的居民的流感疫苗接种信息,比较不同年度、月份、年龄段,以及沪籍和非沪籍居民流感疫苗的接种情况。组间比较采用χ^(2)检验。结果上海市闵行区2014年至2019年各年度全区居民流感疫苗接种率分别为2.75%(62158/2261615)、2.66%(60545/2275813)、2.38%(52572/2207101)、2.48%(55535/2235800)、1.87%(42927/2298327),2018/2019年度较上一年度下降0.61%,较2014/2015年度下降0.88%。非沪籍居民各年度流感疫苗接种率分别为3.54%(43124/1216493)、3.41%(41222/1210555)、3.00%(33531/1116373)、2.94%(33061/1124384)、1.68%(19464/1161183),沪籍居民分别为1.82%(19034/1045122)、1.81%(19323/1065258)、1.75%(19041/1090728)、2.02%(22474/1111416)、2.06%(23463/1137144),2014年至2018年各年度非沪籍居民流感疫苗接种率均高于沪籍居民(χ^(2)=6249.093、5540.756、3754.047、1945.718,均P<0.05),2018/2019年度沪籍居民高于非沪籍居民(χ^(2)=469.713,P<0.05)。各年度6个月至17岁居民的流感疫苗接种比例最高,分别为95.2%(59167/62158)、95.1%(57582/60545)、93.7%(49277/52572)、91.1%(50602/55535)和80.3%(34476/42927),其中以6个月至5岁儿童为主,各年度分别为85.0%(52806/62158)、87.0%(52648/60545)、86.1%(45247/52572)、84.8%(47081/55535)和70.2%(30140/42927)。年龄为18~59岁和≥60岁居民流感疫苗接种比例均较低,但是在2018/2019年度均有明显增长。接种月份主要分布在每年10月份至次年2月份,其他月份接种人群较少,5、6、7月份没有接种。结论近5年上海市闵行区居民流感疫苗接种率较低,且2018/2019年度较上一年度有所下降。年龄分布以6个月至5岁儿童为主,其他年龄段居民接种人数较少,但是在2018/2019年度年龄≥60岁老年人的接种人数较以前有所升高。

关键词：流感疫苗接种率居民

IL-33／ST2轴在呼吸道病毒感染免疫中的作用

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国际呼吸杂志 2016年第17期36卷 1329-1333页

作者：陈家君冯净净揭志军复旦大学附属上海市第五人民医院呼吸内科 200240

IL-33是IL-1家族的新成员，它能通过结合IL-1受体家族中的孤儿受体ST2发挥其生物学效应。很多研究证实呼吸道病毒感染可刺激机体多种细胞显著表达及分泌IL-33，IL-33作用于靶细胞表面ST2受体，从而启动T辅助细胞（Thelper，Th）2型免疫... 详细信息

IL-33是IL-1家族的新成员，它能通过结合IL-1受体家族中的孤儿受体ST2发挥其生物学效应。很多研究证实呼吸道病毒感染可刺激机体多种细胞显著表达及分泌IL-33，IL-33作用于靶细胞表面ST2受体，从而启动T辅助细胞（Thelper，Th）2型免疫反应，介导呼吸道病毒感染相关疾病。抗IL-33抗体或抗ST2抗体阻断IL-33／ST2轴及上述免疫反应，从而有可能为治疗呼吸道病毒感染相关疾病提供新靶点。

关键词：白细胞介素33 呼吸道病毒感染

流感病毒感染巨噬细胞对缺氧诱导因子-1α诱导炎症反应通路的机制研究

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微生物与感染 2021年第3期16卷 164-170页

作者：何燕超张静冯净净揭志军复旦大学附属上海市第五人民医院呼吸内科上海200240 复旦大学社区健康研究中心(筹) 上海200240

为探索缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)-1α诱导甲型流感病毒毒株感染小鼠巨噬细胞引起炎症反应的具体机制,本研究以甲型H1N1流感病毒(简称H1N1)株A/PR/8感染小鼠巨噬细胞RAW264.7后,在显微镜下观察其在感染后的表型变化,... 详细信息

为探索缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF)-1α诱导甲型流感病毒毒株感染小鼠巨噬细胞引起炎症反应的具体机制,本研究以甲型H1N1流感病毒(简称H1N1)株A/PR/8感染小鼠巨噬细胞RAW264.7后,在显微镜下观察其在感染后的表型变化,分别在不同时间段收集样本,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测HIF-1α、干扰素(interferon,IFN)-γ、白细胞介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α和M蛋白(M protein,MBP)mRNA的变化,通过蛋白质印迹法(Western blot,WB)检测HIF-1α、核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、促分裂原活化的蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)以及M蛋白的变化。随后,加入抑制剂2-MeOE-2(10nmol/L)进行抑制试验,采用PCR和WB检测HIF-1α表达被抑制后上述炎症因子mRNA表达水平及炎症蛋白通路的变化。结果显示,H1N1PR8感染小鼠巨噬细胞RAW264.7后,H1N1PR8复制率在24h达到峰值,HIF-1αmRNA在感染6h后开始升高,12h迅速上升,24h达到峰值。IFN-γ、IL-6、TNF-αmRNA变化趋势基本与HIF-1α一致,但在感染12h并未进入快速上升期。HIF-1α蛋白在感染后6h表达明显增多,24h达到峰值,与mRNA变化水平基本一致。NF-κB通路蛋白在感染12h后明显增多,48h开始减少。加入抑制剂2-MeOE-2后,培养感染细胞24h,抑制剂组IL-6、TNF-αmRNA水平较对照组显著下降(P<0.05),抑制剂组NF-κB通路蛋白较对照组表达下降。本研究结果表明,小鼠巨噬细胞被H1N1感染后,HIF-1α可能通过激活NF-κB通路促进IL-6、TNF-α等炎症因子的分泌参与炎症反应。

关键词：缺氧诱导因子-1α 流感病毒巨噬细胞核转录因子-κB

Th17细胞在病毒感染性疾病中作用的研究进展

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国际呼吸杂志 2011年第14期31卷 1081-1085页

作者：冯净净揭志军郭雪君上海交通大学医学院附属新华医院呼吸内科 200092 复旦大学附属上海市第五人民医院呼吸内科 200240

Th17细胞系是近年来发现的新的Th细胞系，通过分泌一些特征性的细胞因子，如白介素17发挥效应。最近的研究表明它参与多种人类免疫炎症反应性疾病，且发挥重要作用，而Th17细胞在病毒感染性疾病中的作用尚不清楚。现就Th17细胞在一些病... 详细信息

Th17细胞系是近年来发现的新的Th细胞系，通过分泌一些特征性的细胞因子，如白介素17发挥效应。最近的研究表明它参与多种人类免疫炎症反应性疾病，且发挥重要作用，而Th17细胞在病毒感染性疾病中的作用尚不清楚。现就Th17细胞在一些病毒感染性疾病中作用的研究进展进行总结。

关键词： Th17细胞白介素17 病毒感染性疾病