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转铁蛋白结构与功能的研究——鸭血清转铁蛋白含单一铁结合部位的结构域的制备和鉴定

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生物化学杂志 1988年第3期 244-251页

作者：侯宪玉冯佑民张友尚中国科学院上海生物化学研究所

分离纯化了鸭血清转铁蛋白、分子量78,000,N-末端为Ala,不能与人胎盘转铁蛋白受体结合。鸭血清转铁蛋白用胰蛋白酶酶解可以同时得到两个含单一铁结合部位的结构域,分别来自分子的N-端和C-端区域。获得的鸭血清转铁蛋白N-端结构域分子量... 详细信息

分离纯化了鸭血清转铁蛋白、分子量78,000,N-末端为Ala,不能与人胎盘转铁蛋白受体结合。鸭血清转铁蛋白用胰蛋白酶酶解可以同时得到两个含单一铁结合部位的结构域,分别来自分子的N-端和C-端区域。获得的鸭血清转铁蛋白N-端结构域分子量为33,200,C-端结构域分子量为34,900。

关键词：鸭血清转铁蛋白受体分子结构域铁结合部位

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重组单链胰岛素的连接肽与其生物功能的关系

中国科学（C辑） 2001年第5期31卷 458-464页

作者：黄一丁梁镇和冯佑民中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室上海200031

为研究重组单链胰岛素的生物活性与连接肽之间的关系, 用基因定点突变的方法分别以二肽A-K, 七肽A-A-A-A-A-A-K和十二肽A-A-A-A-A-A-A-A-A-A-A-K连接胰岛素的B30和A1, 得到3个单链胰岛素分子PIP, [A]5PIP和[A]10PIP. 它们的受体结合能... 详细信息

为研究重组单链胰岛素的生物活性与连接肽之间的关系, 用基因定点突变的方法分别以二肽A-K, 七肽A-A-A-A-A-A-K和十二肽A-A-A-A-A-A-A-A-A-A-A-K连接胰岛素的B30和A1, 得到3个单链胰岛素分子PIP, [A]5PIP和[A]10PIP. 它们的受体结合能力分别为胰岛素的0.14%, 14.3% 和11.1%, 体内生物活性与受体结合能力一致, 而它们的促生长活性分别为胰岛素的17%, 116.3%和38%. 结果表明: (ⅰ) 单链胰岛素也具有胰岛素的促代谢和促生长功能; (ⅱ) 单链胰岛素与胰岛素受体的结合能力与连接肽的长度和氨基酸组成密切相关, 其受体结合能力随连接肽的改变, 可由无到100%, 进一步说明胰岛素与其受体结合时, B链C端远离A链N端是必需的; (ⅲ) 单链胰岛素的促细胞生长能力也与连接肽长度和组成密切相关, 且比其自身的促代谢能力强.

关键词：单链胰岛素受体结合促细胞生长 GR2H6细胞株生物活性蛋白质激素连接肽

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糖及其衍生物对胰岛素与其受体相互作用的影响

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1982年第6期 97-100页

作者：张新堂王克夷冯佑民李士云张友尚中国科学院上海生物化学研究所

Cuatrecasas 报道除去细胞表面的神经氨酸并不影响被处理细胞与胰岛素的结合能力,但继神经氨酸后再除去半乳糖,就使被处理细胞与胰岛素的结合能力降低。前文报

关键词：胰岛素受体结合 Man 人胎盘多肽胰岛素受体衍生物

转铁蛋白结构与功能的研究——骆驼血清转铁蛋自的分离纯化及其含单一铁结合部位的结构域的制备和鉴定

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生物化学杂志 1988年第4期 289-295页

作者：侯宪玉冯佑民张友尚中国科学院上海生物化学研究所中国科学院上海生物化学研究所上海

分离纯化获得的骆驼血清转铁蛋白由分子量为73,000和63,000两个组分组成。两者至少N-端五肽顺序相同(Met-Pro-Asp-Lys-Thr)。骆驼血清转铁蛋白在生理pH下不能与人胎盘转铁蛋白受体结合。用胰蛋白酶酶解骆驼转铁蛋白可以同时得到两个合... 详细信息

分离纯化获得的骆驼血清转铁蛋白由分子量为73,000和63,000两个组分组成。两者至少N-端五肽顺序相同(Met-Pro-Asp-Lys-Thr)。骆驼血清转铁蛋白在生理pH下不能与人胎盘转铁蛋白受体结合。用胰蛋白酶酶解骆驼转铁蛋白可以同时得到两个合单一铁结合部位的结构域,分别来自转铁蛋白分子的N-端称N-端结构域(分子量34,700和40,700)和C-端称C-端结构域(分子量35,100)。在上述结果的基础上指出并讨论了反刍动物转铁蛋白在结构和功能上存在更多的共同性,而与其它哺乳动物的转铁蛋白有着明显的区别。

关键词：骆驼血清转铁蛋白受体,分子结构域铁结合部位反刍动物

胰岛素作用原理的研究——Ⅷ.人胎盘细胞膜胰岛素受体

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1982年第2期 43-49页

作者：冯佑民朱菊红张新堂张友尚中国科学院上海生物化学研究所

详细地研究了人胎盘细胞膜胰岛素受体的性质,进一步证实人胎盘细胞膜含有丰富的与胰岛素典型靶细胞上类似的胰岛素受体。

关键词：胰岛素受体人胎盘细胞膜作用原理

胰岛素作用原理的研究 Ⅴ.胰岛素的胰凝乳蛋白酶酶解片段的制备

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1979年第4期 365-372页

作者：顾嘉琍鲁子贤虞荣华冯佑民中国科学院上海生物化学研究所

天然胰岛素经胰凝乳蛋白酶酶解后,通过一系列分离、纯化和鉴定,表明在胰岛素分子上酶解的主要位置是A14酪氨酸,B16酪氨酸和B25苯丙氨酸的羧基所形成的肽键,其次是A19酪氨酸和B24苯丙氨酸的羧基所形成的肽键。从而获得了五个纯的片段。

关键词：胰岛素胰凝乳蛋白酶梯度洗脱多肽糜蛋白酶葡聚糖凝胶酶解产物 DEAE 层析法线性浓度柱层析生物化学与生物物理学报作用原理

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胰岛素折叠模型肽的构建及表达

浙江理工大学学报（自然科学版） 2009年第4期26卷 587-591页

作者：程龙霄黄启龙唐月华冯佑民浙江理工大学生命科学学院杭州310018 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所上海200031

类胰岛素生长因子-1能同时折叠形成两种热力学稳定的高级结构,胰岛素却只折叠形成一种热力学稳定的高级结构。为研究二者的不同折叠行为,该实验成功构建了3个模型肽:(desB1F)[B10E]PIP[、B5T,B10E]PIP和(desB1F)[B5T,B10E]PIP;发酵表达... 详细信息

类胰岛素生长因子-1能同时折叠形成两种热力学稳定的高级结构,胰岛素却只折叠形成一种热力学稳定的高级结构。为研究二者的不同折叠行为,该实验成功构建了3个模型肽:(desB1F)[B10E]PIP[、B5T,B10E]PIP和(desB1F)[B5T,B10E]PIP;发酵表达各模型肽,质谱鉴定证明表达正确。通过对比3个模型肽的表达量,推测它们折叠形成两种结构的倾向性依次为:(desB1F)[B5T,B10E]PIP>[B5T,B10E]PIP>(desB1F)[B10E]PIP。

关键词：胰岛素类胰岛素生长因子-1 定点突变蛋白质折叠

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单链猪的胰岛素原的平衡折叠-用一种简单方法来研究含二硫键蛋白质的体外折叠／解折叠

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胰岛素蛋白质工程：高活性［B10Asp］人胰岛素

华东六省一市生物化学与分子生物学学会2006年学术交流...

作者：赵杰黄启龙唐月华邵素清许根俊冯佑民浙江理工大学生命科学学院

1960年Anfinsen首先提出了一个重要的理论:“蛋白的一级序列决定了它的高级结构”,这一理论促进了蛋白质折叠在理论和实践方面的进步。但是新生肽是怎样进行折叠和解折叠的,这个过程还不太清楚。二硫键可以看作是研究折叠和解折叠的探针...

1960年Anfinsen首先提出了一个重要的理论:“蛋白的一级序列决定了它的高级结构”,这一理论促进了蛋白质折叠在理论和实践方面的进步。但是新生肽是怎样进行折叠和解折叠的,这个过程还不太清楚。二硫键可以看作是研究折叠和解折叠的探针,含有二硫键的蛋白质为折叠和解折叠的研究提供了有利条件。胰岛素是一个小分子球蛋白,对它的结构和功能研究比较透彻,因此可以作为模型蛋白质来研究体外折叠。我们实验室构建了单链胰岛素人的胰岛素原(HPI)、文昌鱼胰岛素类似肽(AILP) 和单链猪的胰岛素原(PIP),它们与胰岛素的三级结构相同或相似。

关键词：

来源： cnki会议评论

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生物化学杂志 1996年第5期12卷 511-515页

作者：唐月华刘卫东刘滨徐明华冯佑民中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室

用基因定位突变方法将胰岛素Ｂ链第１０位的Ｈｉｓ变为Ａｓｐ，获得高活力胰岛素──［Ｂ１０Ａｓｐ］人胰岛素。其受体结合能力和离体生物活力分别为猪胰岛素的２６２％和２３５％；体内生物活力也明显高于猪胰岛素；它的促细胞生长能... 详细信息

用基因定位突变方法将胰岛素Ｂ链第１０位的Ｈｉｓ变为Ａｓｐ，获得高活力胰岛素──［Ｂ１０Ａｓｐ］人胰岛素。其受体结合能力和离体生物活力分别为猪胰岛素的２６２％和２３５％；体内生物活力也明显高于猪胰岛素；它的促细胞生长能力为猪胰岛素的１７４％。

关键词：胰岛素蛋白质工程高活力胰岛素

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