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猪去氧胆酸人工抗原的合成及鉴定

中草药 2014年第23期45卷 3387-3391页

作者：赵妍屈会化张越冯会宾孙晔孔慧赵琰王庆国北京中医药大学基础医学院北京100029 北京中医药大学"经典方剂的应用基础研究"创新团队北京100029 北京中医药大学科研实验中心北京100029 北京中医药大学中药学院北京100102

目的合成并鉴定猪去氧胆酸(hyodeoxycholic acid,HDCA)人工抗原,为进一步制备其特异性抗体,建立相应的免疫分析方法,并为其应用到药理药效的研究中奠定基础。方法采用混合酸酐法合成HDCA人工抗原(HDCA-牛血清白蛋白),包被原(HDCA-鸡卵... 详细信息

目的合成并鉴定猪去氧胆酸(hyodeoxycholic acid,HDCA)人工抗原,为进一步制备其特异性抗体,建立相应的免疫分析方法,并为其应用到药理药效的研究中奠定基础。方法采用混合酸酐法合成HDCA人工抗原(HDCA-牛血清白蛋白),包被原(HDCA-鸡卵清白蛋白);应用硅胶薄层色谱法鉴定人工抗原、包被原合成是否成功;应用人工抗原与弗氏佐剂的乳化液背部皮下多点注射免疫BALB/c小鼠4次后,尾尖取血,通过酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法测定免疫小鼠抗血清的效价和特异性。结果薄层色谱法检测结果表明,HDCA与牛血清白蛋白(BSA)偶联成功;小鼠抗血清效价大于1∶8 000,竞争抑制曲线表明,血清中的抗体可与HDCA产生特异性结合。抗血清和甘草酸、黄芩苷、栀子苷等与其常配伍应用的中药化合物均无交叉反应,但与胆酸交叉反应率为90%。结论成功合成了HDCA-BSA,并可诱发小鼠产生相应特异性抗体。为进一步制备抗HDCA单克隆抗体及HDCA药理作用靶点的研究奠定了基础。

关键词：猪去氧胆酸人工抗原合成混合酸酐法薄层色谱酶联免疫吸附测定

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紫铆素人工抗原的合成与鉴定

中草药 2014年第3期45卷 337-340页

作者：万凤孔慧屈会化张越冯会宾赵琰王庆国北京中医药大学基础医学院北京100029 北京中医药大学"经典方剂的应用基础研究"创新团队北京100029 北京中医药大学科研实验中心北京100029 北京中医药大学中药学院北京100102

目的人工合成紫铆素(butin)的完全抗原并进行鉴定。方法采用氯乙酸钠(SMCA)与紫铆素中的羟基反应形成羧甲基醚衍生物(紫铆素-SMCA),再通过羧基与载体蛋白(BSA、OVA)偶联形成完全抗原,以TLC法鉴别是否偶联产生新的大分子化合物,并以紫外... 详细信息

目的人工合成紫铆素(butin)的完全抗原并进行鉴定。方法采用氯乙酸钠(SMCA)与紫铆素中的羟基反应形成羧甲基醚衍生物(紫铆素-SMCA),再通过羧基与载体蛋白(BSA、OVA)偶联形成完全抗原,以TLC法鉴别是否偶联产生新的大分子化合物,并以紫外扫描分析完全抗原的偶联比率,将得到的免疫原紫铆素-BSA按免疫程序免疫Balb/c小鼠。结果 TLC显示已经形成新的大分子化合物;紫外扫描法测定紫铆素-BSA的偶联比为6∶1,紫铆素-OVA的偶联比为5∶1。采用间接酶联免疫测定,产生的抗血清的稀释度可以达到1∶4 000。结论经过TLC法、紫外扫描法和免疫方法鉴定,成功合成了紫铆素人工抗原。

关键词：紫铆素人工抗原氯乙酸钠酶联免疫分析法 TLC

中医骨伤手法+中药汤剂治疗腰椎间盘突出症的价值分析

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临床医药文献电子杂志 2017年第50期4卷 9826-9827页

作者：冯会宾开封市第二中医院骨一科

目的分析中医骨伤手法+中药汤剂治疗腰椎间盘突出症的效果。方法将52例腰椎间盘突出症患者随机分为两组各26例,对照组行中医骨伤手法治疗,观察组行中医骨伤手法联合中药汤剂治疗,比较两组疗效。结果两组治疗总有效率差异不显著(P>0.05)... 详细信息

目的分析中医骨伤手法+中药汤剂治疗腰椎间盘突出症的效果。方法将52例腰椎间盘突出症患者随机分为两组各26例,对照组行中医骨伤手法治疗,观察组行中医骨伤手法联合中药汤剂治疗,比较两组疗效。结果两组治疗总有效率差异不显著(P>0.05);观察组疼痛程度评分明显低于对照组(P<0.05),腰椎评估分数明显高于对照组(P<0.05)。结论中医骨伤手法+中药汤剂治疗腰椎间盘突出症可明显减轻患者疼痛,改善腰椎状况,值得推广。

关键词：腰椎间盘突出症中医骨伤手法中药汤剂

人参皂苷Re人工抗原的合成及单克隆细胞株的筛选

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中国药学杂志 2014年第13期49卷 1104-1108页

作者：赛佳洋屈会化冯会宾孔慧王艳王雪茜赵琰王庆国北京中医药大学基础医学院北京100029 北京中医药大学"经典方剂的应用基础研究"创新团队北京100029 北京中医药大学科研实验中心北京100029 北京中医药大学中药学院北京100029

目的合成并鉴定人参皂苷Re(GRe)人工抗原,用于单克隆抗体的制备。方法采用高碘酸钠氧化法合成人参皂苷Re人工免疫抗原(GRe-BSA)和人工包被原(GRe-OVA);利用薄层色谱法及紫外光谱法鉴定人参皂苷Re人工免疫抗原和人参皂苷Re人工包被原;利... 详细信息

目的合成并鉴定人参皂苷Re(GRe)人工抗原,用于单克隆抗体的制备。方法采用高碘酸钠氧化法合成人参皂苷Re人工免疫抗原(GRe-BSA)和人工包被原(GRe-OVA);利用薄层色谱法及紫外光谱法鉴定人参皂苷Re人工免疫抗原和人参皂苷Re人工包被原;利用人参皂苷Re人工免疫抗原多次免疫BALB/c小鼠后,通过间接ELISA法测定免疫小鼠抗血清的效价和特异性。采用PEG法诱导小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,有限稀释法进行单克隆细胞株的筛选。结果紫外光谱和薄层色谱法检测结果表明,人参皂苷Re与BSA/OVA偶联成功;小鼠抗血清效价大于1∶60 000,竞争抑制曲线表明,血清中的抗人参皂苷Re抗体可与人参皂苷Re产生特异性结合。有限稀释法筛选出能分泌抗人参皂苷Re抗体的单克隆细胞株2F4-3H10。结论成功合成了人参皂苷Re人工免疫抗原和人参皂苷Re人工包被原,并可诱发小鼠产生相应特异性抗体;筛选出了人参皂苷Re单克隆细胞株,可用于腹水的大量制备及免疫组化技术的建立。

关键词：人参皂苷Re 高碘酸钠氧化法人工抗原单克隆抗体

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柴胡皂苷a人工抗原的合成及免疫原性鉴定

北京中医药大学学报 2015年第2期38卷 126-129,144页

作者：冯会宾赵琰赵灵灵单文超赵妍张越王庆国屈会化北京中医药大学北京100029

目的合成柴胡皂苷a(SSa)免疫抗原和包被抗原,为柴胡皂苷a单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立奠定基础。方法采用高碘酸钠氧化法分别合成柴胡皂苷a免疫抗原(SSa-BSA)和包被抗原(SSa-PLL);用紫外光谱和薄层色谱法鉴定人工抗原是否偶联... 详细信息

目的合成柴胡皂苷a(SSa)免疫抗原和包被抗原,为柴胡皂苷a单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立奠定基础。方法采用高碘酸钠氧化法分别合成柴胡皂苷a免疫抗原(SSa-BSA)和包被抗原(SSa-PLL);用紫外光谱和薄层色谱法鉴定人工抗原是否偶联成功,并免疫小鼠,通过ELISA方法测定血清中抗体效价,通过间接竞争ELISA(ic-ELISA)检测抗体特异性。结果薄层色谱法检测结果显示柴胡皂苷a与BSA/PLL偶联成功。小鼠经SSa-BSA免疫后,体内可产生抗柴胡皂苷a抗体,效价1∶80 000以上。结论与其他人工抗原的鉴定方法相比,薄层色谱法具有独特的优势。成功合成的柴胡皂苷a人工抗原可用于下一步的单克隆抗体制备以及相应免疫方法的建立。

关键词：柴胡皂苷a 人工抗原高碘酸钠氧化法免疫分析方法抗柴胡皂苷a抗体

康复理疗加中药汤共同治疗脑梗死后遗症的临床疗效观察

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中西医结合心血管病电子杂志 2017年第10期5卷 82-83页

作者：冯会宾开封市第二中医院骨一科

目的探讨脑梗死后遗症采用康复理疗与中药汤联合治疗的效果。方法按照1:1比例,将80例脑梗死后遗症患者分为研究组(康复理疗+中药汤)与对照组(单纯康复理疗)。对比治疗效果。结果研究组、对照组总有效率分别为92.5%(37/40)、70%(28/40),... 详细信息

目的探讨脑梗死后遗症采用康复理疗与中药汤联合治疗的效果。方法按照1:1比例,将80例脑梗死后遗症患者分为研究组(康复理疗+中药汤)与对照组(单纯康复理疗)。对比治疗效果。结果研究组、对照组总有效率分别为92.5%(37/40)、70%(28/40),差异有统计学意义(P<0.05);两组血液粘稠度指标对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脑梗死后遗症采用中药汤联合康复理疗治疗的效果理想,值得推广应用。

关键词：脑梗死后遗症中药汤康复理疗

透皮特性结合正交试验优选麻芥平喘巴布剂有效组分的提取工艺

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中国实验方剂学杂志 2013年第15期19卷 1-4页

作者：王晓曈王雪茜屈会化孙晔冯会宾赵琰孔慧王庆国北京中医药大学基础医学院北京100029 北京中医药大学经典方剂的应用基础研究创新团队北京100029 北京中医药大学科研实验中心北京100029

目的:优选麻芥平喘巴布剂的有效组分提取工艺。方法:以盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷的提取率和透过率为综合评价指标,采用正交试验优选提取工艺,提取物用Franz扩散池法进行体外透皮试验,HPLC测定伪麻黄碱、苦杏仁苷含量。结果:麻芥平喘有效... 详细信息

目的:优选麻芥平喘巴布剂的有效组分提取工艺。方法:以盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷的提取率和透过率为综合评价指标,采用正交试验优选提取工艺,提取物用Franz扩散池法进行体外透皮试验,HPLC测定伪麻黄碱、苦杏仁苷含量。结果:麻芥平喘有效组分的最佳提取工艺为加6倍量80%乙醇回流提取2次,每次1.5 h。结论:结合药效学指标优选的提取工艺符合实际应用需求,为麻芥平喘巴布剂的临床推广提供依据。

关键词：麻芥平喘巴布剂有效组分提取工艺伪麻黄碱苦杏仁苷透皮试验

基于抗大豆苷单克隆抗体的Ic-ELISA方法的建立

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药物分析杂志 2015年第4期35卷 587-590页

作者：贺娜娜屈会化冯会宾冯盛岚赵灵灵成金俊任雅君赵琰北京中医药大学中药学院北京100102 北京中医药大学"经典方剂的应用基础研究"创新团队北京100029 北京中医药大学科研实验中心北京100029 北京中医药大学基础医学院北京100029

目的：建立大豆苷的快速免疫分析检测方法。方法：该研究通过大豆苷单克隆抗体与葛根素、芦丁等共9种中药小分子的交叉反应证明该抗体具有特异性,并以制备出的大豆苷特异性单克隆抗体为基础,建立了大豆苷间接竞争酶联免疫分析方法（Ic-E... 详细信息

目的：建立大豆苷的快速免疫分析检测方法。方法：该研究通过大豆苷单克隆抗体与葛根素、芦丁等共9种中药小分子的交叉反应证明该抗体具有特异性,并以制备出的大豆苷特异性单克隆抗体为基础,建立了大豆苷间接竞争酶联免疫分析方法（Ic-ELISA）,并用此方法检测大豆中大豆苷的含量。结果：抗体与葛根素的交叉反应率为115%,与芦丁、甘草酸、栀子苷等小分子无交叉反应。该方法线性范围为10~10 000 ng·m L^-1,孔内差和板间差均小于6.3%,平均回收率为105.4%%。采用该方法检测大豆中大豆苷的含量,所得结果与HPLC法的结果一致。结论：该研究建立了大豆苷的Ic-ELISA方法,可为含大豆苷的中药及复方的质量控制分析提供更加快速灵敏的检测方法。

关键词：大豆苷单克隆抗体间接竞争酶联免疫分析大豆异黄酮 Ic-ELISA法含量测定快速免疫分析

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葛根芩连汤配伍浅析

葛根芩连汤配伍浅析