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番茄褪绿病毒P7蛋白致病性及分子机理初探

番茄褪绿病毒P7蛋白致病性及分子机理初探

作者：冯丽肖湖南大学

学位级别：硕士

番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV),是毛形病毒属(Crinivirus)的一员,由昆虫介体粉虱进行传播。近年来,ToCV在我国番茄产区,呈现爆发性扩展态势,给我国番茄安全生产造成严重威胁。生产上目前尚无ToCV抗性品种,研究ToCV的致病... 详细信息

番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV),是毛形病毒属(Crinivirus)的一员,由昆虫介体粉虱进行传播。近年来,ToCV在我国番茄产区,呈现爆发性扩展态势,给我国番茄安全生产造成严重威胁。生产上目前尚无ToCV抗性品种,研究ToCV的致病性及其分子机制,可为抗性育种提供理论依据。ToCV编码的P7蛋白是一个功能未知的小分子蛋白,并包含有一个跨膜结构域。本研究以P7蛋白为对象,探究其在ToCV侵染过程中所发挥的功能。本论文主要研究内容包括:采用特异性RT-PCR克隆ToCV P7基因,并将其构建至马铃薯X病毒载体(Potato virus X,PVX),获得P7基因异源病毒表达载体PVX:P7。利用农杆菌介导技术,在本氏烟植株中异源表达ToCV P7蛋白。PVX:P7接种本氏烟12 dpi,出现了严重的斑驳花叶以及皱缩现象。Western blotting以及RT-qPCR实验结果表明,与对照(PVX:GFP)相比,PVX:P7可以显著增加PVX CP在植物体内蛋白质和mRNA的积累。表明P7可以促进PVX侵染本氏烟,具有致病功能。P7蛋白超表达转基因番茄植株,转基因番茄矮小,叶片皱缩,结实率低。表明P7蛋白确实具有致病功能。将P7蛋白进行平均分段,分为N端和C端,其中跨膜结构域位于N端;分别构建重组PVX病毒载体,通过农杆菌接种本氏烟。寄主表型及PVX定量结果表明,P7蛋白的C端是P7蛋白行使致病功能的关键区域。利用酵母双杂交、双分子荧光互补(BiFC)和荧光素酶互补成像(LCI)等技术,研究发现P7蛋白可以发生自身相互作用。BiFC结果表明P7蛋白自身互作的亚细胞定位位于细胞质膜,这与P7蛋白的单独亚细胞定位相同。将P7蛋白分段,酵母双杂交结果表明P7蛋白发生自身相互作用的关键区域为P7蛋白的N端。为了探究P7蛋白致病性的分子机理,利用GFP-trap和LC-MS/MS技术,筛选与P7蛋白可能互作的寄主因子。筛选到两个在植物甲基循环中所必需的酶:腺苷激酶(Adenosine kinase,ADK)和S-腺苷甲硫氨酸合成酶(S-adenosylmethionine synthase,SAMS),推测P7蛋白可能影响植物甲基化,从而发挥其致病功能。将重组PVX病毒载体PVX:P7注射入16c-TGS烟草(35S启动子区域DNA被甲基化沉默,GFP基因不表达),发现P7蛋白可以抑制寄主转录水平的基因沉默(TGS),降低16c-TGS转基因烟草中35S启动子区域的DNA甲基化水平,恢复16c-TGS烟草中GFP的表达。

关键词：番茄褪绿病毒 P7蛋白致病因子自身互作 DNA甲基化

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华北农牧交错带畜牧业外部经济效应解析

草业学报 2009年第2期18卷 155-162页

作者：冯丽肖杜雄张立峰河北农业大学农学院河北保定071001 河北省作物生长调控重点实验室河北保定071001 农业部张北农业资源与生态环境重点野外科学观测试验站河北张家口076450

针对华北农牧交错带畜牧业现状与问题,选择代表性村庄,采用生产调查方法,对区域畜牧业外部经济效应进行了解析。结果表明,华北农牧交错区畜牧业是转化农业副产品、无偿利用草场、以残屑食物链增值和环境外部效益支撑的"数量"型畜牧业。... 详细信息

针对华北农牧交错带畜牧业现状与问题,选择代表性村庄,采用生产调查方法,对区域畜牧业外部经济效应进行了解析。结果表明,华北农牧交错区畜牧业是转化农业副产品、无偿利用草场、以残屑食物链增值和环境外部效益支撑的"数量"型畜牧业。通过降低日粮标准的"七成饱"饲养方式增加了近四成的载畜规模。畜牧业外部性表现为草地过牧、农田过收,草地是外部不经济性的主要承担者。放牧条件下以青玉米为代表的人工饲草投入,更大程度上加剧草地超载。低效畜牧业的扩张是建立在经济负外部性基础之上。依据畜牧业表象提出将区域畜牧业发展为第一产业主导产业是不切实际的。通过建立生态补偿机制、发展高效替代产业的途径解决区域畜牧业外部性问题值得探讨。

关键词：华北农牧交错带畜牧业承载力负外部性农牧关系

冀西北寒旱区砂质栗钙土水分入渗和径流特征研究

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安徽农业科学 2011年第15期39卷 8961-8964页

作者：冯丽肖张继宗王新路河北农业大学农学院河北省作物生长调控重点实验室河北保定071001 农业部张北农业资源与生态环境重点野外科学观测实验站河北张家口076450

针对冀西北高原寒旱区农业生产的水分限制特征,研究区域降水、入渗及径流特征。结果表明,冀西北寒旱区2°～6°常见坡耕地平均径流系数达6.16%,表明区域农田在通常年景下均有产流,构成滩梁地貌之间水土空间分异的基础。坡耕地产流为降... 详细信息

针对冀西北高原寒旱区农业生产的水分限制特征,研究区域降水、入渗及径流特征。结果表明,冀西北寒旱区2°～6°常见坡耕地平均径流系数达6.16%,表明区域农田在通常年景下均有产流,构成滩梁地貌之间水土空间分异的基础。坡耕地产流为降水汇集与回归补充地下水资源奠定物质基础。这一结果对指导区域降水资源化生产具有重要意义。

关键词：冀西北寒旱区地表径流砂质栗钙土土壤入渗

华北农牧交错带退耕区榆树幼林-南瓜间作的农田生态效应

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中国农业科学 2008年第9期41卷 2710-2719页

作者：杜雄窦铁岭冯丽肖张维宏张立峰河北农业大学农学院农业部张北农业资源与生态环境重点野外观测试验站河北农业大学植物保护学院

【目的】针对华北农牧交错区退耕林地大面积荒芜资源无效流失的问题,通过榆树幼林-南瓜带状间作,达到林地高效利用与生态-经济效益协同增进的目的。【方法】采用田间试验和室内理化分析相结合的方法。【结果】榆树幼林与南瓜间作后,瓜... 详细信息

【目的】针对华北农牧交错区退耕林地大面积荒芜资源无效流失的问题,通过榆树幼林-南瓜带状间作,达到林地高效利用与生态-经济效益协同增进的目的。【方法】采用田间试验和室内理化分析相结合的方法。【结果】榆树幼林与南瓜间作后,瓜蔓覆盖地面,显著提高了南瓜行间和榆树林地的土壤水分含量,林-瓜间作地水分的利用效率较单作提高了23.7%～163.3%;间作改变了南瓜行间杂草群落自然演替的方向,一年生杂草成为优势物种,其饲用营养物质的含量和产量较林带间杂草显著提高。间作比单作南瓜增产24.4%,榆树生物量累积提高28.4%,杂草增产144.4%,南瓜的经济效益也提高了23.2%。林-瓜间作比单作土地利用效率提高了132%。监测表明,榆树幼林-南瓜间作地的土壤输沙量与南瓜单作地、退耕榆林地间的差异均不显著,没有因南瓜地的土壤耕作而提高土壤的风蚀量。【结论】华北农牧交错带退耕区榆树幼林-南瓜带状间作是区域生态-经济效益兼顾、综合利用林地资源的有效技术模式。

关键词：华北农牧交错区退耕区域榆树幼林-南瓜带状间作生态-经济效益

农业合作生产对华北农牧交错区水资源存量和经济效益的影响

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自然资源学报 2009年第11期24卷 1902-1911页

作者：杜雄张永升冯丽肖窦铁岭张立峰河北农业大学农学院/河北省作物生长调控实验室河北保定071001 国家北方山区农业工程技术研究中心河北保定071001 河北农业大学张北实验站/农业部张北农业资源与生态环境重点野外观测试验站河北张家口076450

针对华北农牧交错区错季蔬菜生产对水资源消耗的争议，通过试验和调查研究相结合的方法，研究了农业“生产-消费”合作生产背景下区域发展错季蔬菜的耗水效果及其对农民收入、水资源存量的影响。结果表明，错季蔬菜生产田间耗水量为农... 详细信息

针对华北农牧交错区错季蔬菜生产对水资源消耗的争议，通过试验和调查研究相结合的方法，研究了农业“生产-消费”合作生产背景下区域发展错季蔬菜的耗水效果及其对农民收入、水资源存量的影响。结果表明，错季蔬菜生产田间耗水量为农区粮食作物的31．3％-93．3％，而水资源价值为农区粮食作物的4．2-10．7倍；与区域内粮油作物生产相比，错季蔬菜生产少耗水330-754m^3／hm^2，且其水资源价值为粮油作物的4．0～13．9倍。通过实施粮一菜交换的市场农业战略，区域能用0．175—0．196m。的水交易获得外区域1m^3的水资源，并且实现了研究区用0．93h0的菜地解决发展错季蔬菜前需要6．9～13．8hm。耕地才能解决的粮食问题。调查表明，通过高效地输出水资源，区域农民收入仅蔬菜一项比全国同期农村人均收入高出了23％。故华北农牧交错区发展错季蔬菜生产是节约和扩大本区域的水资源存量，促进农村脱贫致富、自我发展的有效途径。

关键词：华北农牧交错区农业合作生产水资源存量经济效益

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关于土木工程结构设计安全性的措施讨论

中文科技期刊数据库（全文版）工程技术 2022年第3期 135-138页

作者：冯丽肖河北建研建筑设计有限公司河北石家庄050000

现阶段,在我国社会经济飞速发展环境下,土木工程施工设计领域也取得快速进步。工程结构设计的安全性,在一定程度上直接影响到建筑物最终质量,并且和人民群众的人身财产安全息息相关。近几年来,人们的生活水准得到明显提高,从而对建筑物... 详细信息

现阶段,在我国社会经济飞速发展环境下,土木工程施工设计领域也取得快速进步。工程结构设计的安全性,在一定程度上直接影响到建筑物最终质量,并且和人民群众的人身财产安全息息相关。近几年来,人们的生活水准得到明显提高,从而对建筑物的安全性越发严格。因此,相关单位应当注重提升建筑结构设计安全性,为人们提供良好的生活空间。基于此,本篇文章主要将土木工程结构设计安全性原则分析作为出发点,并对目前结构设计中存有的不足进行具体分析,最终再提出几点有效解决对策,旨在为相关人员提供一定参考。

关键词：土木工程结构设计安全性

小麦中国春-Synthetic 6x代换系穗花分化与耐旱基因的染色体定位

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中国农业科学 2007年第10期40卷 2136-2144页

作者：白志英李存东冯丽肖孙红春河北农业大学生命科学学院河北农业大学农学院

【目的】通过对不同水分处理条件下小麦代换系的穗花发育进程和产量性状研究,确定控制小麦穗花发育的主效应染色体,并对耐旱基因进行染色体定位。【方法】以小麦CS-Synthetic6x整套染色体代换系及其亲本为材料进行干旱胁迫处理,对穗花... 详细信息

【目的】通过对不同水分处理条件下小麦代换系的穗花发育进程和产量性状研究,确定控制小麦穗花发育的主效应染色体,并对耐旱基因进行染色体定位。【方法】以小麦CS-Synthetic6x整套染色体代换系及其亲本为材料进行干旱胁迫处理,对穗花分化过程进行观察,并对其产量性状分析研究。【结果】各代换系的穗花发育过程与亲本较为一致,都能正常通过穗原基和花原基分化两个阶段。在正常灌水条件下,2B代换系与父本Synthetic6x发育同步,分化最慢,7D次之,其它代换系发育较快,与母本中国春基本同步;在干旱胁迫条件下,2D代换系穗花分化较为缓慢,远远落后于中国春和其它代换系。且2D代换系每穗粒数、单穗粒重、千粒重等产量性状的抗旱系数均显著或极显著高于中国春。【结论】延缓穗花分化进程的主效基因可能位于2B和7D染色体上;耐旱相关基因可能位于2D染色体上。

关键词：小麦代换系穗花分化耐旱基因染色体定位

干旱胁迫对小麦叶片细胞膜透性效应的染色体定位研究

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华北农学报 2007年第1期22卷 1-4页

作者：白志英李存东冯丽肖孙红春河北农业大学河北保定071001

通过测定干旱胁迫下小麦中国春-Synthetic 6x染色体代换系及其亲本品种中国春(受体)和Synthetic 6x(供体)叶片的相对电导率和K+相对渗出率,对调控干旱胁迫下功能叶片细胞膜稳定性的染色体进行了定位研究。结果表明,1D,2D,2B,3A,3D,4A,4B... 详细信息

通过测定干旱胁迫下小麦中国春-Synthetic 6x染色体代换系及其亲本品种中国春(受体)和Synthetic 6x(供体)叶片的相对电导率和K+相对渗出率,对调控干旱胁迫下功能叶片细胞膜稳定性的染色体进行了定位研究。结果表明,1D,2D,2B,3A,3D,4A,4B,6A,6B,7D和7A等染色体代换系的相对电导率和K+相对渗出率均显著或极显著低于中国春,而其他代换系差异均不显著。表明Synthetic 6x的1D,2B,2D,3A,3D,4A,4B,6A,6B,7D和7A染色体上具有耐旱性基因,而其他染色体与Synthetic 6x的耐旱性无关。研究结果可为小麦抗旱遗传育种研究提供参考依据。

关键词：小麦染色体代换系细胞膜透性染色体调控

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应用模拟模型技术确定冬麦北移的北界

安徽农业科学 2012年第3期40卷 1291-1293,1312页

作者：邹立坤蓝岚冯丽肖河北农业大学河北保定071001 中央司法警官学院河北保定071000 保定学院河北保定071051

[目的]研究模拟模型技术在冬麦北移中的应用。[方法]在搜集河北省北部9个代表县多年气象资料和布置多点田间试验的基础上,结合小麦的抗寒生理特性,建立其抗寒性模型。[结果]运行模型预测小麦越冬状况,对其结果进行验证,决策出河北省冬... 详细信息

[目的]研究模拟模型技术在冬麦北移中的应用。[方法]在搜集河北省北部9个代表县多年气象资料和布置多点田间试验的基础上,结合小麦的抗寒生理特性,建立其抗寒性模型。[结果]运行模型预测小麦越冬状况,对其结果进行验证,决策出河北省冬麦北移安全北界为北纬41°以南的坝下地区。[结论]为研究小麦生长发育的动态变化规律以及环境、栽培技术对其发育的影响提供了有效工具。

关键词：冬小麦种植安全北界模拟模型