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苦荞来源类外泌体囊泡提取工艺优化及其生物活性分析

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苦荞来源类外泌体囊泡提取工艺优化及其生物活性分析

作者：张籍月成都大学

学位级别：硕士

苦荞(Fagopyrum tataricum)作为药食同源谷物,富含多种营养物质,具有调节肠道菌群、降血糖等多种生理功能。但以传统营养功能性成分为基础解析苦荞作用机制仍存争议,提示尚存“暗营养物质”。植物来源的外泌体样纳米囊泡(PELNs)是具有... 详细信息

苦荞(Fagopyrum tataricum)作为药食同源谷物,富含多种营养物质,具有调节肠道菌群、降血糖等多种生理功能。但以传统营养功能性成分为基础解析苦荞作用机制仍存争议,提示尚存“暗营养物质”。植物来源的外泌体样纳米囊泡(PELNs)是具有纳米样结构的囊泡,含脂类、蛋白、mi RNAs等。已有研究报道PELNs具有多种生理功能,如调节肠道菌群、维持胃肠道稳态、改善肠炎等。推测苦荞来源的外泌体样纳米囊泡(Tartary Buckwheat-Derived Nanoparticles,TBDNs)是其参与机体生理调节的重要因素。然而,目前关于TBDNs的提取工艺及生物活性分析鲜有报道。因此,本研究首次对TBDNs的PEG提取工艺进行优化,采用生物信息预测其生物活性,并利用动物实验进一步验证正常饮食添加TBNDs对小鼠生理生化指标的影响,从而为苦荞功能与安全性评价提供新的资料。主要研究成果如下:(1)TBDNs的PEG提取纯化工艺的优化及其表征。采用响应面试验,以TBDNs的产量、总酚与总黄酮含量、抗氧化活性为指标,优化其提取工艺。结果表明TBDNs在10%浓度PEG、p H-5,离心温度4℃条件下其产量与活性最佳。最佳工艺下所测得的TBDNs产量为1.7795 g/kg、总酚含量为178.648 mg/100g、总黄酮含量为145.421mg/100g、DPPH自由基清除率为86.37%。通过透射电子显微镜和纳米粒径跟踪分析仪对其表征,发现TBDNs呈茶托型囊泡结构,并显示了许多分散的囊泡群,提取的TBDNs经过粒径测试结果其平均粒径为182.8 nm,粒径主峰在162.8 nm。(2)miRNA介导TBDNs生物活性分析。通过生物信息学探索:(1)由苦荞中生物活性化合物调节的宿主表达的mi RNAs(内源性),(2)来自苦荞的mi RNAs(外源性)靶向基因的相关过程和途径,从而预测TBDNs的潜在生物活性。结果表明,外源性mi RNA和内源性mi RNA的靶向基因参与了许多生物过程,例如转录、细胞通讯、细胞代谢或凋亡过程的调控;同时具有许多分子功能,包括在蛋白质结合、DNA结合、转录因子和蛋白激酶结合等方面发挥作用。这表明苦荞麦的健康作用可能至少部分通过mi RNA相关机制介导。(3)TBDNs的安全性评估。考察正常饮食条件下添加TBDNs对小鼠生理生化及免疫的影响。结果表明,相对正常饮食组,TBDNs组小鼠体重、甘油三酯(TG)、尿酸(UA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)显著下降;天冬氨酸氨基转移酶(AST)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)以及肌酐(CREA)水平均未发生显著性变化;其它病理性指标以及免疫组化检测相关炎症因子(CD4、F480、MPO)未见显著改变。肠道菌群分析发现,TBDNs的摄入还能提高肠道中一些有益菌如乳杆菌属Lactobacillus、苏黎世杆菌属turicibacter和Lachnoclostridium的水平。综上所述,本研究首次优化了TBDNs的提取方法,初步预测了TBDNs潜在的生物活性,并通过动物实验探索正常饮食条件下食用TBNDs对小鼠生理生化指标及肠道菌群组成的影响,为苦荞营养与安全评价提供新的资料。

关键词：苦荞来源的外泌体样纳米囊泡 miRNA 生物信息学分析肠道菌群

气候变化背景下极端风暴洪水对道路的影响评估 ——以上海市为例

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气候变化背景下极端风暴洪水对道路的影响评估 ——以上海市为例

作者：郑凯月上海师范大学

学位级别：硕士

小学第三学段语文阅读教学中学生创新思维培养研究

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小学第三学段语文阅读教学中学生创新思维培养研究

作者：张朗月贵州师范大学

学位级别：硕士

小麦TILLING突变体库根系表型库的建立及PSK基因功能研究

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小麦TILLING突变体库根系表型库的建立及PSK基因功能研究

作者：唐凯月烟台大学

学位级别：硕士

小麦是我国主要作物之一,其根系生长状态会直接影响小麦产量。在植物生长发育过程中,根系除了能够起到固定植株和吸收养分的作用,还可以及时感知土壤环境变化,从而相应地调整自身结构来适应环境,所以根系是确保小麦良好生长与物质形成... 详细信息

小麦是我国主要作物之一,其根系生长状态会直接影响小麦产量。在植物生长发育过程中,根系除了能够起到固定植株和吸收养分的作用,还可以及时感知土壤环境变化,从而相应地调整自身结构来适应环境,所以根系是确保小麦良好生长与物质形成的关键。由于小麦根系结构复杂,研究难度较大,前人对小麦产量和品质的研究大多集中在小麦地上部分。本研究以实验室前期构建的济麦22 TILLING突变体库为基础,对1045份小麦TILLING突变体进行根系表型分析,建立根系表型库;其次基于小麦全基因组范围对TaPSK基因家族进行生物信息学及表达模式分析,筛选出了小麦根系表达量较高的TaPSK3、TaPSK9、TaPSK10、TaPSK11基因,在济麦22 TILLING突变群体全外显子捕获测序数据库查询以上4个基因的突变体进行突变位点鉴定,初步分析了成功鉴定的7个突变体在不同环境下的根系表型变化和基因表达情况。主要结果如下:1.济麦22 TILLING突变体库根系表型库的建立对1045份突变体进行表型分析发现,突变群体根系各表型性状间除根平均直径以外,其它表型性状间大多呈极显著正相关(P<0.01);根系变异指数分析发现,根尖数和根体积的变异程度较大,根平均直径最小;主成分分析结果表明,有两个重要的主成分呈现出75.634%的累计贡献率,突变群体根部表型性状综合分数排名结果显示:20J100-7、20J104-1、20J099-4、20J176-10、20J106-1等突变体根系表型性状评价综合得分高于济麦22。2.小麦PSK基因家族生物信息学及表达模式分析为探究TaPSK基因家族成员在根系发育中的作用,本研究利用生物信息学对其进行鉴定分析,通过转录组数据分析TaPSK基因在小麦不同组织的表达模式以及基因所在的染色体位置、基因结构、顺式作用元件等。RNA-seq数据分析表明,在12个TaPSK基因中有10个基因在小麦根系表达,本试验利用q RT-PCR筛选出了在小麦根中表达水平较高的4个基因(TaPSK3、TaPSK9、TaPSK10、TaPSK11);同时顺式作用元件分析表明,该基因家族具有多个促进根系生长发育、应对胁迫及激素调控方面的响应元件,以上结果可为后续深入研究TaPSK基因根系发育相关的生物学功能提供一定理论基础。***3、TaPSK9、TaPSK10、TaPSK11基因TILLING突变株系的查询与鉴定在本实验室构建的济麦22 TILLING突变群体全外显子捕获测序数据库中查询TaPSK3、TaPSK9、TaPSK10、TaPSK11基因的突变位点,共获得15个突变体。经测序验证后,成功鉴定出7个突变株系均存在单碱基突变,其突变结果与数据库一致。TaPSK10、TaPSK3、TaPSK9基因鉴定成功的突变体数量分别是4个、2个、1个。本试验为分析小麦TaPSK基因突变对小麦根系生长的影响奠定了基础。***3、TaPSK9、TaPSK10基因突变体根系表型与基因表达分析本研究以济麦22为材料确定了突变体的干旱和盐胁迫以及茉莉酸甲酯(Methy l jasmonate,MeJA)的处理浓度。试验结果表明:所有株系的总根长、根表面积、根生物量分布估算值、根尖数等根系表型性状数据受干旱和盐胁迫影响较明显。盐胁迫使部分突变体趋向萌发更多的根毛,低浓度的MeJA能够增加小麦侧根的长度。干旱和盐胁迫根系表型性状排名结果显示,JM027和济麦22相较于其它突变体有着较强的耐旱和耐盐性;q RT-PCR结果表明:干旱/盐胁迫/MeJA处理下对应突变株系的TaPSK3、TaPSK9、TaPSK10基因表达量均表现为不同程度的上调,在72 h后逐渐回归正常表达水平。以上研究结果可对后续深入研究TaPSK基因功能,培育耐逆性强的优质小麦提供数据和理论支持。本研究从表型和基因两个方面入手,研究突变体小麦根系生长发育特性,以期挖掘小麦根系重要根系表型性状和影响根系发育相关的相关基因,为遗传育种研究提供新的优良种质资源。

关键词：小麦突变体筛选植物磺肽激素α TILLING技术根系

论档案数智库的构建机理和实现路径——以纪检监察档案信息化提质赋能为例

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档案管理 2024年第1期 61-64页

作者：陈茜月王强郑州大学档案与校史馆郑州航空工业管理学院党委学工部

《数字中国建设整体布局规划》明确了我国经济活动、社会活动、公共事业向着数字化、智慧化的方向发展,也为档案事业数字化转型提出了新的要求。本文提出档案数智库理论概念、构建机理及在纪检监察档案信息化建设中的实践应用,旨在为数... 详细信息

《数字中国建设整体布局规划》明确了我国经济活动、社会活动、公共事业向着数字化、智慧化的方向发展,也为档案事业数字化转型提出了新的要求。本文提出档案数智库理论概念、构建机理及在纪检监察档案信息化建设中的实践应用,旨在为数字中国背景下档案事业数智化发展提供理论支持和实践参考。

关键词：档案数智库纪检监察档案管理数字化智囊信息平台

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竹木基生态铺面材料制备及其力学性能研究

竹木基生态铺面材料制备及其力学性能研究

作者：申超月重庆交通大学

学位级别：硕士

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预防性环境民事公益诉讼制度研究

预防性环境民事公益诉讼制度研究

作者：邓红月河北经贸大学

学位级别：硕士

随着经济社会的快速发展,生态系统面临着前所未有的威胁。传统的损害救济理念认为没有损害就没有救济,但在环境损害结果已经产生、生态环境已被侵害之后,才做出裁定要求被告承担恢复原状的赔偿费用,这样的事后弥补救济为时已晚。“图之... 详细信息

随着经济社会的快速发展,生态系统面临着前所未有的威胁。传统的损害救济理念认为没有损害就没有救济,但在环境损害结果已经产生、生态环境已被侵害之后,才做出裁定要求被告承担恢复原状的赔偿费用,这样的事后弥补救济为时已晚。“图之于未萌,虑之于未有。”习近平总书记强调指出,为了生态环境的安全,要构建全方位、多层级的生态环境风险防范体系。因此,救济措施开始被尝试提前到事中甚至事前,预防原则对于生态环境保护具有重要的前瞻性意义,环境保护应当遵循预防为先救济在后的逻辑顺位,预防性环境民事公益诉讼制度的相关规定由此开始在立法和司法层面显现。制度的建立并不是一蹴而就的,在实践层面,经过在多个数据库中查询相应司法案例后发现,在环境公益诉讼蓬勃发展的前景下,预防性环境民事公益诉讼发展却不尽如意,案件难以进入诉讼程序导致法院受理的案件数量寥寥无几,不仅立案难,审理过程更可谓困难重重,审理耗时长、作为重要内涵的“重大风险”认定标准模糊、原被告举证困难等困境的存在依然是掣肘其预防性功能有效发挥的主要阻碍。追本溯源,是我国的相关规定不明确,没有形成完整的体系甚至面临无法可依的局面,使得一些良好的法律规范无法运用于实践之中,我国现有的相关规定主要是“原则性”的条款,程序法的规定有限且大多零散分布在各种规范文件之中,亟待进一步的完善。因此本文从理论和司法实践出发,在研究我国预防性环境公益诉讼发展现状的基础上,梳理典型司法案例,寻找造成当前困境的原因,并结合国情学习域外国家的先进经验,尝试寻找完善的路径。研究预防性环境民事公益诉讼制度首先要打好理论基础,从概念、特征两方面出发对制度内涵进行界定,并从保障公民环境权和节约环境治理成本方面分析现阶段完善我国预防性环境民事公益诉讼制度的重要性和必要性。接着对“重大风险”这一关键因素进行深入剖析,明确内涵和判定标准,矫正法院这一唯一认证主体并完善行政机关和专家的辅助认证,重新分配举证责任以弥补原告诉讼能力不足的问题。为了落实预防功能,应采用多元化的责任承担方式,因此对域外国家体现预防性的主要环境诉讼制度进行梳理,借鉴美国的环保禁止令制度,同时为避免环境风险加剧可考虑先执行预备措施,最后加强环境司法和行政监管的衔接,做好监督保障,从而将预防性功能的实现落到实处。

关键词：预防性环境民事公益诉讼风险预防环境风险预防原则

伟大建党精神融入大学生思想政治教育路径研究

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伟大建党精神融入大学生思想政治教育路径研究

作者：张铭月重庆理工大学

学位级别：硕士

习近平总书记在庆祝中国共产党成立100周年大会的重要讲话中深刻阐述了伟大建党精神的丰富内涵,意义深远,价值巨大。伟大建党精神犹如一块基石,是中国共产党人精神谱系的源头,支撑起中国共产党百年奋斗的巍巍大厦,蕴含着丰富的思想政治... 详细信息

习近平总书记在庆祝中国共产党成立100周年大会的重要讲话中深刻阐述了伟大建党精神的丰富内涵,意义深远,价值巨大。伟大建党精神犹如一块基石,是中国共产党人精神谱系的源头,支撑起中国共产党百年奋斗的巍巍大厦,蕴含着丰富的思想政治教育资源。将伟大建党精神融入大学生思想政治教育,能够培育大学生的责任担当意识,提高大学生道德修养水平,为高校落实立德树人的根本任务做出贡献。本文在梳理和继承现有学术成果的基础上,对伟大建党精神融入大学生思想政治教育展开了较为系统的研究。先是解决了“是什么及何以重要”的问题,介绍了本文的研究背景、研究意义、研究思路、研究方法和研究重难点以及创新点,并梳理和评述了国内外的相关研究,在此基础上阐释了伟大建党精神的丰富内涵和鲜明特征,分析了伟大建党精神融入大学生思想政治教育的理论依据以及价值。随后解决了“为什么”的问题,对伟大建党精神融入大学生思想政治教育的现状进行了调研,总结了目前所取得的成效以及所存在的问题,并对问题产生的原因进行了分析。最后,在现状分析的基础上,概括了伟大建党精神融入大学生思想政治教育的内容、原则和方法,并结合实际提出了路径,解决了“怎么做”的问题。在内容方面,本文结合大学生思想政治教育需要,有针对性地将伟大建党精神内涵的四个组成部分分别作为理想信念教育、社会责任教育、艰苦奋斗教育和爱国主义教育的内容。同时,阐述了主导性与主体性相统一、统一性与多样性相统一、理论性与实践性相统一和层次性与渐进性相统一的原则,以及理论教育法、榜样示范法、自我教育法和实践锻炼法的方法。在以上研究的基础上,按照从思政小课堂,到校园宽课堂,到社会大课堂,再到网络广课堂的顺序,和线上线下路径相结合、理论实践相统一的整体逻辑,列举了一系列针对性强、覆盖广泛的路径,包括高校思想政治理论课的课堂教学方面、高校校园文化建设方面、社会实践方面以及网络育人方面,为伟大建党精神融入大学生思想政治教育提供了一定的参考。

关键词：伟大建党精神大学生思想政治教育路径

歌曲《故乡是北京》中京剧元素的运用与演唱探析

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歌曲《故乡是北京》中京剧元素的运用与演唱探析

作者：苏红月曲阜师范大学

学位级别：硕士