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原生质体激光诱变选育少根根霉脂肪酶高产菌株

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工业微生物 2011年第3期41卷 38-43页

作者：冀颐之李政谭天伟杜连祥林强天津科技大学生物工程学院天津市工业微生物重点实验室天津300222 北京联合大学生物化学工程学院北京100023 天津工业大学纺织学院天津300160 北京化工大学教育部生物炼制工程中心北京100029

对少根根霉BUCT-11原生质体制备、再生条件及激光诱变育种进行了研究。结果显示,少根根霉BUCT-11原生质体形成及再生最佳条件为:菌龄24 h,混合酶由27mg/mL的蜗牛酶和53 mg/mL的纤维素酶组成,酶解时间1.5 h,酶解温度30℃,渗透压稳定剂为0... 详细信息

对少根根霉BUCT-11原生质体制备、再生条件及激光诱变育种进行了研究。结果显示,少根根霉BUCT-11原生质体形成及再生最佳条件为:菌龄24 h,混合酶由27mg/mL的蜗牛酶和53 mg/mL的纤维素酶组成,酶解时间1.5 h,酶解温度30℃,渗透压稳定剂为0.6 mol/L NH_4 Cl、0.02 mol/L MgSO_4·7H_2O、0.4 mol/L CaCl_2的磷酸盐缓冲液。所得原生质体经激光诱变选育获得具有稳定遗传特性的高产突变菌株Y007,在摇瓶发酵条件下,测得脂肪酶水解酶活为151 U/mL,较出发菌株酶活提高了41%。

关键词：脂肪酶少根根霉激光原生质体诱变选育

强化底物利用酶系表达,提升地衣芽孢杆菌生产碱性蛋白酶性能

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中国生物工程杂志 2021年第2期41卷 53-62页

作者：周惠颖周翠霞张婷王雪雨张会图冀颐之路福平天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室天津300457 泰山学院生物与酿酒工程学院泰安271000 北京联合大学生物化学工程学院生物质废弃物资源化利用北京市重点实验室北京100023

地衣芽孢杆菌2709由于易于培养、GRAS状态和完善的蛋白质分泌能力,是已经投入工业生产碱性蛋白酶的菌株。为改善该菌株的发酵生产性能,提高菌体对培养基成分的利用和碱性蛋白酶产量,对菌株的胞外分泌酶系进行完善。利用同源重组机制,在... 详细信息

地衣芽孢杆菌2709由于易于培养、GRAS状态和完善的蛋白质分泌能力,是已经投入工业生产碱性蛋白酶的菌株。为改善该菌株的发酵生产性能,提高菌体对培养基成分的利用和碱性蛋白酶产量,对菌株的胞外分泌酶系进行完善。利用同源重组机制,在基因组复制起始位点附近引入了来源于短小芽孢杆菌的木聚糖酶基因xynA和在复制起始位点中心对称的位置引入耶氏解脂酵母来源的脂肪酶基因lipY2。整合菌株在摇瓶发酵44h时,木聚糖酶、脂肪酶酶活力分别达(58±2.07)U/mL和(207±10.62)U/mL,其分泌表达促进了地衣芽孢杆菌对发酵培养基的分解与利用,提高了培养基中还原糖、上清总氮的含量和沉淀中含氮化合物的分解;细菌生物量较地衣芽孢杆菌原始菌株提高了11.76%,同时碱性蛋白酶的发酵周期较原始菌提前了4h,碱性蛋白酶产量提高了14.41%。地衣芽孢杆菌2709分泌酶系的丰富和发酵性能的改善为在饲料行业中作为微生物制剂的地衣芽孢杆菌提供了改造的方法。

关键词：地衣芽孢杆菌木聚糖酶脂肪酶碱性蛋白酶

辅酶Q_(10)生产菌株粟酒裂殖酵母原生质体制备和再生研究

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北京联合大学学报 2008年第3期22卷 26-29页

作者：冀颐之李政林强北京联合大学生物化学工程学院北京化工大学北京100029

研究对辅酶Q10生产菌株粟酒裂殖酵母原生质体制备和再生条件进行了优化,确定了原生质体制备及再生的最佳条件为:菌龄20 h,蜗牛酶浓度2 g/L,酶溶液pH值6.5,酶解温度25℃,酶解时间2 h。通过对粟酒裂殖酵母原生质体制备及再生条件的研究,... 详细信息

研究对辅酶Q10生产菌株粟酒裂殖酵母原生质体制备和再生条件进行了优化,确定了原生质体制备及再生的最佳条件为:菌龄20 h,蜗牛酶浓度2 g/L,酶溶液pH值6.5,酶解温度25℃,酶解时间2 h。通过对粟酒裂殖酵母原生质体制备及再生条件的研究,建立了制备粟酒裂殖酵母原生质体的方法,以期进一步通过原生质体诱变获得辅酶Q10高产菌株。

关键词：粟酒裂殖酵母辅酶Q10 再生原生质体

微生物发酵床中黄腐酸生产菌株的筛选及其鉴定

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食品研究与开发 2018年第2期39卷 181-186页

作者：冀颐之赵有玺程艳玲刘涛杨昊龚平北京联合大学生物化学工程学院生物质废弃物资源化利用北京市重点实验室北京100023

筛选能够高效降解木质纤维素的黄腐酸生产菌株,以提升有机固体废弃物资源化利用水平。从北京京郊奶牛养殖场发酵床品样品中,分离筛选获得7株45℃条件下生长良好的耐高温菌株,检测其黄腐酸产量和木质纤维素降解率,得到能够较好降解纤维... 详细信息

筛选能够高效降解木质纤维素的黄腐酸生产菌株,以提升有机固体废弃物资源化利用水平。从北京京郊奶牛养殖场发酵床品样品中,分离筛选获得7株45℃条件下生长良好的耐高温菌株,检测其黄腐酸产量和木质纤维素降解率,得到能够较好降解纤维素和半纤维素降解的黄腐酸生产菌株DLS07和木质素降解性能良好的黄腐酸生产菌株DLS03。将两株菌1∶1复配,进行黄腐酸发酵试验,结果证明复合菌剂试验组其黄腐酸产量为76.73 g/kg,较DLS03、DLS07单菌发酵分别提高37%、9%,纤维素、半纤维素、木质素的降解率高于单菌发酵,分别为32.87%、45.46%、44.55%,说明采用复合发菌剂发酵较单菌发酵具有更高的转化效率。DLS03、DLS07菌株经16Sr DNA分类鉴定,初步确认DLS03为枯草芽孢杆菌,DLS07为地衣芽孢杆菌。芽孢杆菌复合菌剂能够高效降解木质纤维素,黄腐酸产量较高,在有机固体废弃物资源化利用领域有着极大的潜力。

关键词：黄腐酸木质纤维素发酵 16SrDNA 鉴定

根癌农杆菌介导载体pBI121转化少根根霉条件的研究

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食品科技 2014年第7期39卷 46-49页

作者：赵有玺冀颐之欧阳艳华龚平北京联合大学生物化学工程学院北京100023

考察了脂肪酶生产菌株少根根霉N1023 G418的敏感性,结果表明,G418对少根根霉最小抑制浓度为500μg/mL。研究了不同条件对载体pBI121转化少根根霉的影响,结果表明,以根癌农杆菌LBA4404为介导菌,少根根霉N1023为受体菌株,G418为筛选标记... 详细信息

考察了脂肪酶生产菌株少根根霉N1023 G418的敏感性,结果表明,G418对少根根霉最小抑制浓度为500μg/mL。研究了不同条件对载体pBI121转化少根根霉的影响,结果表明,以根癌农杆菌LBA4404为介导菌,少根根霉N1023为受体菌株,G418为筛选标记的最佳转化条件为:乙酰丁香酮(AS)300μmol/L、根癌农杆菌的初始浓度OD600为0.6、共培养时间2 d。在此条件下pBI121对少根根霉的转化率达到112 cfu/106 cfu孢子。转化菌株经过5次连续培养后仍然稳定。通过上述研究,建立了根癌农杆菌介导载体pBI121转化少根根霉的方法。这是首次成功建立少根根霉的转化方法,为进一步的研究奠定了基础。

关键词： pBI121 根癌农杆菌介导的转化少根根霉

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生物工艺学课程教学改革实践与探索

高校生物学教学研究（电子版） 2011年第2期1卷 27-30页

作者：冀颐之龚平赵伟北京联合大学生物化学工程学院北京100023

生物工艺学是生物工程专业的核心课程。结合我校生物工艺学课程的教学实践探讨了在教学内容、教学方法和实践教学等方面所进行的多层次的教学改革,以达到提高教学质量,提升学生的综合素质、创新能力和特色竞争力的目标。

关键词：生物工艺学课程建设教学改革

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产壳聚糖酶菌株选育及产酶条件研究

食品科技 2014年第5期39卷 2-5页

作者：赵有玺龚平王科力刘仕勋冀颐之北京联合大学生物化学工程学院北京100023

以淡紫拟青霉BJ2为出发菌株,分别通过亚硝基胍(NTG)和UV(紫外)诱变,采用透明圈法筛选,获得了产壳聚糖酶较高的突变菌株淡紫拟青霉BJ2-3,其所产酶活力达到7.48 U/mL,远高于BJ2的酶活力(1.58 U/mL)。摇瓶实验确定了该菌发酵生产壳聚糖酶... 详细信息

以淡紫拟青霉BJ2为出发菌株,分别通过亚硝基胍(NTG)和UV(紫外)诱变,采用透明圈法筛选,获得了产壳聚糖酶较高的突变菌株淡紫拟青霉BJ2-3,其所产酶活力达到7.48 U/mL,远高于BJ2的酶活力(1.58 U/mL)。摇瓶实验确定了该菌发酵生产壳聚糖酶的最佳发酵条件:碳源为8 g/L的壳聚糖,氮源为3 g/L的酵母粉,接种量为8%,发酵温度为28℃,500 mL三角瓶装液量125 mL,摇瓶转速180 r/min。在上述培养条件下,84 h时摇瓶中发酵液的最高酶活力达15.20U/mL。

关键词：淡紫拟青霉壳聚糖酶诱变

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解淀粉盐颗菌PHBV提取工艺的优化

食品科技 2014年第6期39卷 26-30页

作者：赵有玺龚平刘仕勋王科力冀颐之北京联合大学生物化学工程学院北京100023

极端嗜盐古菌利用廉价碳源生产PHBV,因具有良好的材料学性能和生产成本低廉成为目前PHA的研究热点。重点研究了解淀粉盐颗菌PHBV的提取工艺。主要研究内容:(1)优化菌体水裂解提取法的工艺。(2)优化菌体直接提取法的工艺。(3)通过对2种... 详细信息

极端嗜盐古菌利用廉价碳源生产PHBV,因具有良好的材料学性能和生产成本低廉成为目前PHA的研究热点。重点研究了解淀粉盐颗菌PHBV的提取工艺。主要研究内容:(1)优化菌体水裂解提取法的工艺。(2)优化菌体直接提取法的工艺。(3)通过对2种工艺提取的PHBV样品进行GPC、TGA、DSC分析,证明了2种工艺对PHBV样品的影响类似。菌体直接提取法提取率高于菌体水裂解提取法,但是菌体水裂解提取法得到样品的纯度较高。

关键词： PHBV 解淀粉盐颗菌提取工艺

卧式生物反应器固定化少根根霉发酵生产脂肪酶

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工业微生物 2012年第6期42卷 8-13页

作者：冀颐之龚平赵有玺王群群谭天伟北京联合大学生物化学工程学院北京100023 天津科技大学生物工程学院天津市工业微生物重点实验室天津300222 北京化工大学教育部生物炼制工程中心北京100029

以聚氨酯为固定化载体,采用6 L卧式生物反应器进行少根根霉脂肪酶的发酵研究。考察了固定化面积、通气量、转速、装液量等参数对脂肪酶生产的影响,确定了最佳的发酵条件为:聚氨酯固定床为载体,通气量5 L/min、转速40 r/min、装液量3.5 ... 详细信息

以聚氨酯为固定化载体,采用6 L卧式生物反应器进行少根根霉脂肪酶的发酵研究。考察了固定化面积、通气量、转速、装液量等参数对脂肪酶生产的影响,确定了最佳的发酵条件为:聚氨酯固定床为载体,通气量5 L/min、转速40 r/min、装液量3.5 L。在此条件下,研究了分批发酵代谢规律,获得了最高脂肪酶酶活95 U/mL,单位时间产率2021 U/(h·L)。重复批次发酵,重复3批次,获得平均酶活95 U/mL,最高酶活可达110 LU/mL,单位时间产率3476 U/(h·L),是批次反应的1.72倍。试验证明以聚氨酯固定床为载体的少根根霉菌体具有良好的重复使用率。

关键词：少根根霉脂肪酶固定化卧式生物反应器重复批次发酵