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青鳉nup 58的表达及其在性别分化中的潜在作用

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广西师范大学学报（自然科学版） 2024年第1期42卷 168-179页

作者：李雅园王光幸李新闻郭振华关桂君上海海洋大学水产与生命学院上海201306

核孔复合体是物质穿梭核膜的通道。核孔蛋白能影响核质和胞质间的物质交换,而核质运输具有调控生殖细胞进入雌性或雄性分化途径的能力。性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,gsdf)能调控青鳉Oryzias latipes雄性生殖细胞,... 详细信息

核孔复合体是物质穿梭核膜的通道。核孔蛋白能影响核质和胞质间的物质交换,而核质运输具有调控生殖细胞进入雌性或雄性分化途径的能力。性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,gsdf)能调控青鳉Oryzias latipes雄性生殖细胞,并在有丝分裂最后一轮之前开启或关闭配子发生中起关键作用。通过RT-qPCR实验发现nup 58(nucleoporin 58)在野生型青鳉精巢中的表达高于卵巢。对青鳉性腺转录组数据分析发现,nup 58在gsdf敲除后精巢中的表达会显著升高。免疫荧光实验结果显示,nup 58在配子发生不同阶段的所有生殖细胞中都有表达。我们的研究显示Nup58作为一种核孔蛋白,受gsdf信号的调控,并与雄性生殖细胞的增殖密切相关。由Nup58核孔蛋白协调的核质运输在生殖细胞性别分化中的作用和动态变化值得进一步探讨。

关键词：青鳉性腺性别分化转录组

青鳉gsdf调控Igf2bp2/Igf2bp3-m6A阅读器在雌雄生殖细胞的差异表达

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广西师范大学学报（自然科学版） 2024年第2期42卷 183-191页

作者：王光幸郭振华杨继辉李雅园李新闻关桂君上海海洋大学水产与生命学院上海201306

青鳉gsdf敲除导致生殖细胞异常增殖,产生XY巨大精巢或XY巨大卵巢。正常精巢、卵巢及gsdf缺失型XY巨大精巢或巨大卵巢的mRNA转录组比对分析和qPCR验证结果显示,igf2bp2表达可能受gsdf信号调控。脊椎动物igf2bp2的分子结构高度进化保守,ig... 详细信息

青鳉gsdf敲除导致生殖细胞异常增殖,产生XY巨大精巢或XY巨大卵巢。正常精巢、卵巢及gsdf缺失型XY巨大精巢或巨大卵巢的mRNA转录组比对分析和qPCR验证结果显示,igf2bp2表达可能受gsdf信号调控。脊椎动物igf2bp2的分子结构高度进化保守,igf2bp2 mRNA在胚胎发育各时期均有表达,在成体精巢表达量最高,提示igf2bp2可能在早期胚胎发育、性别分化及精子生成发育中起重要作用。免疫荧光检测显示XY精巢的抗Igf2bp2免疫反应信号强于XX卵巢、gsdf缺失型XY精巢和XY卵巢。不同于gsdf缺失激活igf2bp3的表达,gsdf缺失反而减弱igf2bp2表达。Gsdf对igf2bp2和igf2bp3的正负调控影响其介导的m6A甲基腺苷修饰,以及其靶向的mRNA转录后修饰和翻译,这一分子调控机制可能在脊椎动物性别分化和精子生成过程中普遍存在。

关键词：青鳉生殖细胞性别分化调控转录生长因子-β

青鳉gsdf下游因子zc4h2在脑-性腺中的表达分析

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基因组学与应用生物学 2022年第4期41卷 720-730页

作者：郭海燕李茜关桂君上海海洋大学水产与生命学院上海201306

硬骨鱼青鳉(Oryzias latipes)性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,Gsdf)是转化因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族成员之一,对启动生殖细胞进入雄性分化很重要,但其下游调控机制尚不明确。本研究利用转... 详细信息

硬骨鱼青鳉(Oryzias latipes)性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,Gsdf)是转化因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族成员之一,对启动生殖细胞进入雄性分化很重要,但其下游调控机制尚不明确。本研究利用转录组学方法对正常的和Gsdf信号缺失的青鳉性腺RNA转录组表达谱进行比较分析,发现zc4h2(zinc finger C4H2-type containing)在人工合成锌指核酸酶基因编辑法靶向敲除gsdf的纯合子XY型卵巢中的表达量明显高于正常野生型XX型卵巢中的(q2);RT-qPCR进一步验证了这一显著差异表达的结果。人ZC4H2是X染色体连锁的Wieacker-Wolff综合征致病因子之一。ZC4H2通过结合SMAD3蛋白,进而调控BMP/SMADS信号介导的神经干细胞发育。本研究发现青鳉zc4h2在多个组织中均有表达,且在脑和性腺中的表达呈现雄性高于雌性的性差特征。zc4h2 mRNA表达量在gsdf敲除XY型卵巢中显著高于正常XX型卵巢中的;zc4h2的3′端非翻译区域(3′untranslated region,3′UTR)产物在gsdf敲除型卵巢中高于正常XX型卵巢中的,提示zc4h2的转录表达可能参与性腺和脑的雄性分化和发育过程,而其转录产物的稳定性可能受Gsdf-Smad3信号通路影响。Gsdf-ZC4H2-Smad3因子的氨基酸序列和分子功能结构域在不同物种间高度保守,其介导的脑和性腺性分化的分子调控机制可能具有普遍性,为研究脊椎动物生殖干细胞及神经干细胞性分化和发育的分子机制提供了一个新线索。

关键词： zc4h2 性分化青鳉

青鳉gsdf调控ddx6介导的卵子发生的潜在机制

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基因组学与应用生物学 2022年第11期41卷 2099-2110页

作者：李茜王光幸李新闻关桂君上海海洋大学水产与生命学院上海201306

性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,gsdf)是青鳉(Oryzias latipes)雄性性别分化启动的开关因子之一,敲除gsdf将导致生殖细胞过度增殖以及XY雄鱼性逆转为雌鱼。本研究通过蛋白质组学对比分析青鳉野生型XX卵巢与gsdf缺失型X... 详细信息

性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,gsdf)是青鳉(Oryzias latipes)雄性性别分化启动的开关因子之一,敲除gsdf将导致生殖细胞过度增殖以及XY雄鱼性逆转为雌鱼。本研究通过蛋白质组学对比分析青鳉野生型XX卵巢与gsdf缺失型XY卵巢,发现有60个差异表达蛋白(differentially expressed proteins,DEPs)上调,158个DEPs下调。GO(Gene ontology)功能富集到细胞间桥、脂质转运等细胞连接结构和能量代谢通路,KEGG(Kyoto encyclopedia of genes and genomes)富集到RNA降解等关键信号通路,并发现DEAD-box解旋酶6(DEAD-box helicase 6,DDX6)蛋白表达量在gsdf敲除卵巢中显著升高,其mRNA的表达在转录组学分析中呈现相同增加趋势。各物种DDX6的分子结构具有高度同源性和进化保守性,RT-qPCR显示母源性ddx6 mRNA的表达随着青鳉胚胎的发育而减弱,在成体精巢与卵巢组织中均呈现高表达的特征,说明DDX6在配子发生和性腺分化发育过程中发挥重要作用。根据蛋白互作网络与组学分析结果,推测gsdf通过调控RNA降解(含有ddx6、lsm1等基因)途径抑制生殖细胞增殖,影响P-bodies(Cytoplasmic processing bodies)的组装,从而阻断了生殖细胞雌性分化。而卵黄原蛋白在gsdf缺失卵巢中的表达异常降低,这与敲除后卵母细胞大量停止在卵黄发生前的初级卵母细胞阶段的现象一致,说明gsdf可能通过DDX6介导参与初级卵泡发生和卵母细胞的发育过程。本实验研究结果为脊椎动物生殖细胞性别分化初期的分子机制研究提供了新的见解。

关键词：蛋白质组学 gsdf ddx6 性别分化青鳉

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青鳉tsn的克隆与表达分析

上海海洋大学学报 2022年第1期31卷 11-18页

作者：汪丝雨郭海燕李茜廖敏李雅园关桂君上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 上海海洋大学国家海洋生物科学国际联合研究中心上海201306 上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306

有性繁殖的性别决定机制虽具有多样性,但其生殖细胞都经过几轮有丝分裂和增殖后进入减数分裂,最终产生雌性或雄性配子。尽管有丝分裂过程中的生殖细胞在形态上没有雌雄差异,然而,未分化的生殖细胞在有丝分裂过程中如何获得雌雄性别特征... 详细信息

有性繁殖的性别决定机制虽具有多样性,但其生殖细胞都经过几轮有丝分裂和增殖后进入减数分裂,最终产生雌性或雄性配子。尽管有丝分裂过程中的生殖细胞在形态上没有雌雄差异,然而,未分化的生殖细胞在有丝分裂过程中如何获得雌雄性别特征尚不清楚。青鳉(Oryzias latipes)正常XX卵巢、正常XY精巢以及性腺体细胞衍生因子(gonadal soma-derived factor,gsdf)缺失型(gsdf^(-/-))卵巢的蛋白质组学质谱比对分析结果显示,gsdf^(-/-)XY卵巢中Tsn(Translin)蛋白产物显著高于gsdf^(-/-)XX卵巢,提示Tsn蛋白表达可能受dmy(DM-domain on Y chromosome,又名dmrt1bY)及下游Gsdf雄性信号调控。从青鳉性腺组织的cDNA中克隆了tsn基因的ORF(Open Reading Frame)片段。氨基酸序列的同源性比对分析及系统发育树评估显示,Tsn在脊椎动物物种间具有进化保守性,青鳉和斑马鱼(Danio rerio)的Tsn氨基酸序列高度同源。反转录PCR和实时荧光定量PCR检测结果显示,tsn的mRNA在野生型青鳉多个组织中广泛表达,其中在精巢中的表达量显著高于卵巢。免疫荧光检测发现,gsdf^(-/-)XY卵巢中抗青鳉Tsn抗体阳性反应的囊性生殖细胞异常增多,同蛋白组学分析得到的gsdf^(-/-)XY卵巢中Tsn蛋白表达量高于gsdf^(-/-)XX卵巢的结果相一致。在青鳉性腺分化发育过程中,Gsdf信号可能抑制Tsn阳性的雄性囊性生殖细胞增殖,当该信号被破坏后,这种抑制作用消失,导致Tsn阳性生殖细胞在gsdf^(-/-)XY卵巢中大量积累。青鳉Tsn阳性生殖细胞的囊性增殖,是青鳉有丝分裂期生殖细胞雄性分化的特征之一,为脊椎动物有丝分裂期生殖细胞的雌雄性别鉴定提供了线索。

关键词： gsdf tsn 生殖细胞性别分化卵巢青鳉

用模式生物青鳉概观硬骨鱼性别决定及性分化研究进展

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遗传 2017年第6期39卷 441-454页

作者：亢逸关桂君洪云汉上海海洋大学水产与生命学院鱼类性控及干细胞实验室上海201306 新加坡国立大学生物系遗传发育研究室新加坡119260

鱼类性别决定和性分化呈多元性,既有雌雄同体也有雌雄异体。性腺的雌雄性分化过程受遗传和环境因素(如温度、光照、激素和p H值等)影响,具有可逆可塑性。随着生物技术和基因组学的迅速发展,近年来脊椎动物性别决定和性分化的研究有了重... 详细信息

鱼类性别决定和性分化呈多元性,既有雌雄同体也有雌雄异体。性腺的雌雄性分化过程受遗传和环境因素(如温度、光照、激素和p H值等)影响,具有可逆可塑性。随着生物技术和基因组学的迅速发展,近年来脊椎动物性别决定和性分化的研究有了重大进展和显著突破。本文通过聚焦青鳉及其他硬骨鱼纲保守存在的dmrt1、gsdf、amh等雄性因子,探讨硬骨鱼普遍存在的雌雄性别可塑可逆信号通路,并介绍了新的基因组编辑和性控育种技术,为单性选育等水产养殖技术的研发提供参考。

关键词：青鳉性别决定性分化

基于双因素理论的L互联网公司员工激励机制优化策略研究

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基于双因素理论的L互联网公司员工激励机制优化策略研究

作者：刘桂君重庆理工大学

学位级别：硕士

青鳉(Oryzias latipes)smad3的克隆与表达分析

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基因组学与应用生物学 2021年第2期40卷 599-606页

作者：徐疏梅张颖庆关桂君上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室上海201306 上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室上海201306 上海海洋大学海洋生物科学国际联合研究中心科学技术部上海201306

鱼类性染色体的原始性导致性别决定基因的多样性。高等动物中的单个基因,在鱼类中因为基因组复制而产生多个同源基因,呈遗传多样性。TGF-β家族在硬骨鱼性别决定和性别分化的过程中发挥关键作用。smad3是性腺体细胞衍生因子(gsdf)的下... 详细信息

鱼类性染色体的原始性导致性别决定基因的多样性。高等动物中的单个基因,在鱼类中因为基因组复制而产生多个同源基因,呈遗传多样性。TGF-β家族在硬骨鱼性别决定和性别分化的过程中发挥关键作用。smad3是性腺体细胞衍生因子(gsdf)的下游基因,可将TGF-β信号从细胞表面传递至细胞核。本研究从青鳉精巢和卵巢组织cDNA中克隆了smad3a、smad3b基因的CDS全长序列。蛋白序列的同源性比对和系统发生分析显示,smad3在高等脊椎动物中只有一种,而在鱼类却有两种。RT和定量PCR分析结果显示,smad3在多组织中普遍表达,在精巢中表达高于卵巢。青鳉smad3a和smad3b的表达同性腺分化紧密关联,提示其在性腺雌雄性分化和发育中可能具有重要作用。

关键词：性别分化 smad3 青鳉

信息基础设施发展不平衡对城市群绩效差距的影响——基于国家级城市群的实证研究

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城市发展研究 2024年第4期31卷 99-107页

作者：李姗姗李佳楠宋砚秋李桂君中央财经大学财经研究院/北京财经研究基地中央财经大学管理科学与工程学院河北经贸大学商学院

信息基础设施是城市群发展的重要支撑，其发展水平对城市群绩效具有重要影响，对城市群信息基础设施发展水平的时空差异及其对经济绩效差距的影响进行了实证研究。研究发现：(1)城市群信息基础设施建设水平显著提升，但信息基础设施应... 详细信息

信息基础设施是城市群发展的重要支撑，其发展水平对城市群绩效具有重要影响，对城市群信息基础设施发展水平的时空差异及其对经济绩效差距的影响进行了实证研究。研究发现：(1)城市群信息基础设施建设水平显著提升，但信息基础设施应用水平趋向分化。(2)城市群间信息基础设施发展水平差距自2014年以后逐年缩小，建设水平差距显著缩小；但应用水平差距迅速扩大，且城市群内部差距扩大趋势更为明显。(3)信息基础设施建设水平差距通过积累效应和配置效应影响城市群绩效差距，缩小建设水平差距能够缓解城市群绩效差距。(4)信息基础设施应用水平差距对城市群绩效差距的影响具有异质性。从全国层面看，应用水平的不平衡会加剧城市群绩效差距。从区域层面看，在逃避竞争效应主导下，东部和中部的应用水平相对平衡能够缓解城市群绩效差距；在技术追赶效应下，东北和西部应用水平保持适当差距能够缩小城市群绩效差距。

关键词：信息基础设施建设与应用水平城市群绩效差距测度关系数据分析