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活性氧响应海藻酸钠/聚乙烯醇水凝胶敷料的制备及性能

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化学反应工程与工艺 2022年第5期38卷 438-445页

作者：芮金州彭虎红关怡新姚善泾浙江大学化学工程与生物工程学院浙江杭州310027

负载活性药物的水凝胶敷料能够通过药物的控制释放,防止细菌感染、消除炎症,从而有效促进伤口愈合,其性能与水凝胶的组成、制备方法以及药物负载过程有关。将3-氨基苯硼酸接枝的海藻酸钠(Alg-PBA)与聚乙烯醇(PVA)交联制备了水凝胶,研究... 详细信息

负载活性药物的水凝胶敷料能够通过药物的控制释放,防止细菌感染、消除炎症,从而有效促进伤口愈合,其性能与水凝胶的组成、制备方法以及药物负载过程有关。将3-氨基苯硼酸接枝的海藻酸钠(Alg-PBA)与聚乙烯醇(PVA)交联制备了水凝胶,研究了水凝胶的形成机理,考察了各组分质量比及PVA分子量对水凝胶形貌结构和流变行为的影响,并通过超临界溶液浸渍法将盐酸多西环素负载到水凝胶中。结果表明:Alg-PBA与PVA质量比为2:1、PVA分子量为77 kDa时,可制备机械性能良好的水凝胶,载药水凝胶在体外药物释放中表现出了明显的活性氧(ROS)响应性,为新型水凝胶伤口敷料的制备提供了参考。

关键词：水凝胶海藻酸钠聚乙烯醇伤口敷料活性氧响应

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一种新型生物微胶囊制备方法

化学工程 2004年第6期32卷 52-56页

作者：张立央姚善泾关怡新浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

对多组分新型生物微胶囊———SA/NaCS CaCl2/PMCG微胶囊的制备进行了研究,考察了SA质量分数、NaCS质量分数、PMCG质量分数及成膜时间等主要因素对微胶囊性能的影响。实验结果表明SA和NaCS存在最佳质量分数,分别为1.5%和2.5%;随着PMCG... 详细信息

对多组分新型生物微胶囊———SA/NaCS CaCl2/PMCG微胶囊的制备进行了研究,考察了SA质量分数、NaCS质量分数、PMCG质量分数及成膜时间等主要因素对微胶囊性能的影响。实验结果表明SA和NaCS存在最佳质量分数,分别为1.5%和2.5%;随着PMCG质量分数增加及在PMCG中反应时间的延长,微胶囊膜越厚,机械强度则先增加后降低。最终得到膜层较薄、机械强度高、物化性质稳定的中空微胶囊,为其应用奠定了基础。

关键词：生物微胶囊 SA/NaCS—CaCl2/PMCG微胶囊微胶囊性能

SA/CS-CaCl_2/PMCG新型生物微胶囊的扩散与截留性能

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化工学报 2004年第1期55卷 74-80页

作者：张立央姚善泾关怡新浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

通过测定不同相对分子质量的PEG传递透过SA/CS -CaCl2 /PMCG生物微胶囊的性能 ,确定了SA/CS -CaCl2 /PMCG膜的截留相对分子质量在 2 0 0 0左右。同时又测量了小分子物质葡萄糖、乳糖、乙醇和谷氨酸在 3种SA/CS -CaCl2 /PMCG微胶囊中的... 详细信息

通过测定不同相对分子质量的PEG传递透过SA/CS -CaCl2 /PMCG生物微胶囊的性能 ,确定了SA/CS -CaCl2 /PMCG膜的截留相对分子质量在 2 0 0 0左右。同时又测量了小分子物质葡萄糖、乳糖、乙醇和谷氨酸在 3种SA/CS -CaCl2 /PMCG微胶囊中的扩散性能 ,并用数学模型计算出了这些物质在不同微胶囊的混合扩散系数Dm 以及相应的微胶囊膜层中扩散系数D1。结果表明 :Dm 随PMCG浓度的增大先增大而后呈减小趋势 ,而D1则随PMCG浓度的增大而增大 ;并且D1 Dm,说明微胶囊中的传质阻力主要在微胶囊膜层中。

关键词：扩散性能截留性能 SA/CS—CaCl2/PMCG生物微胶囊

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重组人γ-干扰素包涵体稀释复性

化工学报 2004年第5期55卷 770-774页

作者：靳挺关怡新费峥峥姚善泾浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

采用稀释法研究了重组人γ 干扰素包涵体复性条件 ,如温度、pH值、蛋白浓度、复性液中脲浓度 ,同时对加样操作方式进行了考察 ,得到了较为适宜的复性条件 .结果表明 ,脲能有效地抑制复性过程中蛋白质的聚集 ,合适的脲浓度随复性蛋白浓... 详细信息

采用稀释法研究了重组人γ 干扰素包涵体复性条件 ,如温度、pH值、蛋白浓度、复性液中脲浓度 ,同时对加样操作方式进行了考察 ,得到了较为适宜的复性条件 .结果表明 ,脲能有效地抑制复性过程中蛋白质的聚集 ,合适的脲浓度随复性蛋白浓度的增加而有所增大 ,在 4℃、pH值 8 0、脲浓度 1 0mol·L-1、蛋白浓度0 1mg·ml-1及脉冲加样操作方式等条件下 ,复性后重组人γ 干扰素的活性为 2 39× 10 5IU·ml-1,比活达 2 2 1× 10 7IU·mg-1.

关键词：重组人γ-干扰素包涵体稀释复性

大肠杆菌二硫键形成蛋白A(DsbA)研究进展

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生物工程学报 2007年第1期23卷 7-15页

作者：罗曼关怡新姚善泾浙江大学化学工程与生物工程学系杭州310027

二硫键形成蛋白A(DisulfidebondformationproteinA,DsbA)是存在于大肠杆菌周质胞腔内的一种参与新生蛋白质折叠过程中催化二硫键形成的折叠酶。综述了DsbA三维结构、进化过程、协助蛋白质体内外复性方面的研究进展。DsbA比硫氧还原蛋白... 详细信息

二硫键形成蛋白A(DisulfidebondformationproteinA,DsbA)是存在于大肠杆菌周质胞腔内的一种参与新生蛋白质折叠过程中催化二硫键形成的折叠酶。综述了DsbA三维结构、进化过程、协助蛋白质体内外复性方面的研究进展。DsbA比硫氧还原蛋白具有更强的氧化性,其强氧化性来自于Cys30残基异常低的pKa值和不稳定的氧化型结构,通过定点突变的研究表明了Cys30残基是DsbA活性中心最关键的氨基酸残基之一。DsbA不论在体内与目标蛋白融合表达还是在体外以折叠酶形式添加,都能有效地催化蛋白质的折叠复性,同时DsbA还具有部分分子伴侣的活性。

关键词： DsbA Dsb家族折叠酶蛋白质折叠

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改进的锐孔法制备粒径均一的聚乳酸微球

高分子材料科学与工程 2011年第9期27卷 115-118页

作者：余金鹏关怡新姚善泾朱自强浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

锐孔法是制备微胶囊的常用方法之一。文中根据微通道法乳化技术原理,改进了锐孔法实验装置并用于聚乳酸微球的制备;应用简化的聚乳酸微球制备模型,研究了油相注入速率、搅拌器转速、聚乳酸浓度和锐孔内径大小等因素对聚乳酸微球平均粒径... 详细信息

锐孔法是制备微胶囊的常用方法之一。文中根据微通道法乳化技术原理,改进了锐孔法实验装置并用于聚乳酸微球的制备;应用简化的聚乳酸微球制备模型,研究了油相注入速率、搅拌器转速、聚乳酸浓度和锐孔内径大小等因素对聚乳酸微球平均粒径d和粒径分布系数(C V)的影响。结果表明,油相注入速率小于1.2 mL/min时,对d和C V影响较小;提高搅拌器转速能降低d;随着聚乳酸浓度的增大,d和C V均呈增大趋势;当锐孔内径处于200μm^550μm时,d和C V与锐孔内径无明显关系。用内径50μm玻璃毛细管针头代替金属针头,成功地制备出粒径均一的聚乳酸微球(d=77.93μm,C V=17.59%)。

关键词：锐孔法聚乳酸微球单分散

超临界辅助雾化制备适于气溶胶给药的药物微粒

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化工学报 2005年第2期56卷 187-196页

作者：朱自强关怡新姚善泾浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

超临界流体辅助雾化法 (SAA) 是一种新型的以超临界流体为基础的固体微粒制备工艺, 既能用于水溶性, 也可用于脂溶性的溶质. 该工艺能制备出适用于气溶胶给药要求的微粒, 预期可在药物行业内得到应用.综述了SAA过程的形成和特色、工艺... 详细信息

超临界流体辅助雾化法 (SAA) 是一种新型的以超临界流体为基础的固体微粒制备工艺, 既能用于水溶性, 也可用于脂溶性的溶质. 该工艺能制备出适用于气溶胶给药要求的微粒, 预期可在药物行业内得到应用.综述了SAA过程的形成和特色、工艺流程和操作条件以及相应的造粒结果. 评述了 6 种药物微粒的粒度、粒度分布及其形貌. 经SAA加工后的药物质量未见变化, 目前该工艺已进入中试阶段, 展示出较快的发展速度. 比较了SAA和现有的主要以超临界流体为基础的微粒制造工艺. 展望了加强应用基础研究的必要性, 进一步分析了SAA的机理和过程实质.

关键词：超临界流体辅助雾化气溶胶给药配方药物微粒制备

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重组瑞替普酶包涵体制备及其体外复性

化工学报 2015年第2期66卷 709-716页

作者：王俊雄关怡新姚善泾浙江大学化学工程与生物工程学院浙江杭州310027

将携带重组瑞替普酶(reteplase,rt-PA)的质粒成功转化到大肠杆菌BL21(DE3)后,诱导表达获得包涵体,考察了诱导剂浓度、培养温度和培养时间等条件对目标蛋白表达量的影响。在此基础上,对高效表达的rt-PA包涵体体外复性过程进行了详细研究... 详细信息

将携带重组瑞替普酶(reteplase,rt-PA)的质粒成功转化到大肠杆菌BL21(DE3)后,诱导表达获得包涵体,考察了诱导剂浓度、培养温度和培养时间等条件对目标蛋白表达量的影响。在此基础上,对高效表达的rt-PA包涵体体外复性过程进行了详细研究。首先利用单因素实验考察了复性液p H、GSH浓度、GSH/GSSG比例、蛋白浓度等各种复性条件对复性效果的影响;并结合正交实验设计,进一步研究了高蛋白浓度下复性后rt-PA酶活变化情况。以0.2 mmol·L-1 IPTG诱导,在33℃下培养6 h,每升发酵液约可获得1.7 g粗制包涵体。适宜的复性条件为蛋白浓度50μg·ml-1,p H 10.0,GSH浓度1 mmol·L-1,GSH/GSSG比例8,复性收率为87.2%。影响高蛋白浓度下rt-PA复性的关键因素为复性液初始p H及GSH浓度,在800μg·ml-1蛋白浓度下复性后rt-PA比活可达7.54×104 IU·mg-1,荧光光谱分析结果表明复性后rt-PA恢复了其天然态结构。

关键词：生物分离蛋白质复性二硫键正交实验设计瑞替普酶

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块状凝胶的制备及其协助溶菌酶复性的研究

浙江大学学报（工学版） 2004年第9期38卷 1212-1216页

作者：崔志芳关怡新姚善泾浙江大学化学工程与生物工程学系浙江杭州310027

利用水溶液聚合法合成温敏型聚N异丙基丙烯酰胺(PNIPA)块状凝胶,对其性能进行了表征并将其应用到溶菌酶的复性研究中.制得的PNIPA凝胶的低临界溶解温度为33℃,最大溶胀倍率为27,凝胶达到溶胀及缩水平衡需24h.加入270mg/mL凝胶时,溶菌酶... 详细信息

利用水溶液聚合法合成温敏型聚N异丙基丙烯酰胺(PNIPA)块状凝胶,对其性能进行了表征并将其应用到溶菌酶的复性研究中.制得的PNIPA凝胶的低临界溶解温度为33℃,最大溶胀倍率为27,凝胶达到溶胀及缩水平衡需24h.加入270mg/mL凝胶时,溶菌酶复性后的比活力达到5450.6U/mg,与稀释复性相比提高了61.5%.对复性机理的分析表明:聚合物长链上的疏水基团与折叠中间体间的疏水相互作用是PNIPA凝胶协助复性的关键.

关键词：块状凝胶制备溶菌酶复性聚N-异丙基丙烯酰胺温敏型凝胶蛋白质