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25%吡蚜酮WP防治白粉虱的药效试验

北方园艺 2010年第18期 186-187页

作者：刘海清庞占军关丽娥河北工程大学农学院河北邯郸056021 永年县农业局河北永年057150

以25%噻嗪酮WP和10%吡虫啉WP为对照药剂,进行了25%吡蚜酮WP不同剂量防治黄瓜上白粉虱的药效试验。结果表明:25%吡蚜酮WP是防治黄瓜白粉虱持效期长的理想药剂,中剂量(20g/667m2)药后14d防效达97.2%,明显高于对照药剂,且对黄瓜生长安全。... 详细信息

以25%噻嗪酮WP和10%吡虫啉WP为对照药剂,进行了25%吡蚜酮WP不同剂量防治黄瓜上白粉虱的药效试验。结果表明:25%吡蚜酮WP是防治黄瓜白粉虱持效期长的理想药剂,中剂量(20g/667m2)药后14d防效达97.2%,明显高于对照药剂,且对黄瓜生长安全。推荐使用剂量为20g/667m2。

关键词：吡蚜酮白粉虱防治效果

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永年县西部谷子高产栽培技术要点

现代农村科技 2010年第15期 8-8页

作者：关丽娥河北省永年县农业局永合会区域站

永年县西部发展谷子产业具有得天独厚的自然和区域优势，该区处于半丘陵地区，受水浇条件限制，往往是十年九旱，非常适合耐早植物谷子的生长。

关键词：西部发展栽培技术要点永年县谷子区域优势丘陵地区水浇条件

刚地弓形虫棒状体蛋白17(ROP17)真核表达载体的构建、表达及其激酶活性分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2014年第1期32卷 29-33页

作者：王海龙殷丽天张铁娥关丽孟晓丽刘红丽殷国荣山西医科大学医学寄生虫学研究所太原030001 山西医科大学生理学系太原030001 山西医科大学细胞生物学与遗传学教研室太原030001

目的构建刚地弓形虫RH株棒状体蛋白17(ROP17)真核表达载体,对表达产物进行激酶活性的检测和功能分析。方法根据刚地弓形虫ROP17蛋白编码基因(GenBank登录号为AM075203.1)设计引物,以弓形虫RH株速殖子总RNA为模板,RT-PCR扩增目的基因片段... 详细信息

目的构建刚地弓形虫RH株棒状体蛋白17(ROP17)真核表达载体,对表达产物进行激酶活性的检测和功能分析。方法根据刚地弓形虫ROP17蛋白编码基因(GenBank登录号为AM075203.1)设计引物,以弓形虫RH株速殖子总RNA为模板,RT-PCR扩增目的基因片段,克隆至真核表达载体p3×Flag-CMV-14,构建重组质粒p3×Flag-CMV-14/TgROP17。经菌液PCR、双酶切和测序鉴定正确后,用脂质体法转染至人胚肾细胞(HEK293T),RT-PCR和蛋白质印迹(Western blotting)分析表达产物;Western blotting检测其激酶活性;流式细胞术分析ROP17对转染宿主细胞凋亡的影响。结果 RT-PCR结果显示,从RH株弓形虫速殖子中扩增出约1 850 bp的基因片段。菌落PCR、双酶切和测序结果显示,重组质粒p3×Flag-CMV-14/TgROP17构建成功且序列正确。RT-PCR和Western blotting结果显示,在转染p3×Flag-CMV-14/TgROP17的细胞中有TgROP17的表达,基因片段大小为1 850bp,蛋白质相对分子质量(Mr)约为70 000,而转染空质粒组未见表达。Western blotting结果显示,ROP17可以磷酸化c-Jun蛋白;流式细胞术结果显示,ROP17抑制喜树碱(CPT)诱导的细胞凋亡,6 h和12 h的抑制率分别为20.6%和24.1%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了真核表达载体p3×Flag-CMV-14/TgROP17,其表达产物具有激酶活性且能够抑制细胞凋亡。

关键词：刚地弓形虫棒状体蛋白17 真核表达丝氨酸苏氨酸激酶细胞凋亡

重组弓形虫肌动蛋白解聚因子滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答及保护作用

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中国病原生物学杂志 2014年第2期9卷 158-162页

作者：关丽张铁娥王海龙孟晓丽杨建一殷国荣山西医科大学细胞生物学与遗传学教研室山西太原030001 山西医科大学医学寄生虫学研究所山西太原030001

目的观察重组弓形虫肌动蛋白解聚因子(Recombinant Toxoplasma gondii actin depolymerizing factor,rTgADF)滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答及抗弓形虫攻击的保护作用。方法 40只雌性BALB/c小鼠随机分为2组,分别用30μg rTgADF(溶于20μl P... 详细信息

目的观察重组弓形虫肌动蛋白解聚因子(Recombinant Toxoplasma gondii actin depolymerizing factor,rTgADF)滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答及抗弓形虫攻击的保护作用。方法 40只雌性BALB/c小鼠随机分为2组,分别用30μg rTgADF(溶于20μl PBS)和20μl PBS于第0、14和21d各滴鼻免疫1次。末次免疫后14d,每组处死小鼠5只,ELISA法测定血清IgA、IgG和IgG1/IgG2a及鼻咽、阴道和小肠冲洗液sIgA以及脾淋巴细胞培养上清中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平。每组另取5只小鼠,用4×104 RH株弓形虫速殖子/只灌胃攻击(致死性),观察小鼠健康状况并计算存活率。其余小鼠用1×104速殖子/只灌胃攻击(慢性),攻击后30d处死,计数肝、脑组织速殖子。结果 rTgADF诱发小鼠产生较强的系统免疫和黏膜免疫应答,免疫组小鼠血清IgG、IgA和IgG1/IgG2a水平与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。致死性攻击后30d,对照组小鼠全部死亡,免疫组小鼠存活率为20%,差异有统计学意义(P<0.01);慢性感染后30d,免疫组小鼠肝和脑虫荷分别比对照组减少63.87%(P<0.01)和50.14%(P<0.05)。结论 rTgADF滴鼻免疫小鼠诱导产生较强的黏膜及系统免疫应答,并可部分抵抗弓形虫致死性和慢性攻击,可作为弓形虫候选蛋白疫苗。

关键词：刚地弓形虫肌动蛋白解聚因子黏膜免疫鼻疫苗

1999-2010年产ESBLs大肠埃希菌的感染分布及耐药性分析

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中华医院感染学杂志 2012年第19期22卷 4340-4342页

作者：周秀珍刘建华张智杰刘岩董延娥关丽萍刘勇中国医科大学附属盛京医院检验科辽宁沈阳110004

目的了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)的临床分布特点及对抗菌药物的耐药性,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法对1999年1月-2010年12月临床分离的5106株ECO进行回顾性分析,菌株鉴定采用法国生物梅里埃公司的API和... 详细信息

目的了解医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)的临床分布特点及对抗菌药物的耐药性,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法对1999年1月-2010年12月临床分离的5106株ECO进行回顾性分析,菌株鉴定采用法国生物梅里埃公司的API和VITEK-2系统,药敏试验采用K-B纸片扩散法,耐药性分析采用WHONET5.4软件,双纸片协同试验及纸片扩散确证试验检测ELBLs。结果产ESBLs ECO检出率由1999年的16.27%上升至2010年的55.70%;ECO主要分离自尿液,占29.13%,其次是血液及痰,占20.06%及18.36%;主要来源于外科病区和内科病区;与非产ESBLs ECO比较,产ESBLs菌对阿米卡星、左氧氟沙星等非β-内酰胺酶类抗菌药物的耐药率均显著增高,差异有统计学意义(P<0.01),产与非产ESBLs ECO对亚胺培南和美罗培南均保持高度敏感,耐药率均<1.00%。结论产ESBLs ECO检出率呈逐年上升趋势;产ESBLsECO表达对包括非β-内酰胺类在内的抗菌药物多药耐药;产ESBLs ECO对抗菌药物的耐药性高于非产ESBLsECO,对碳青霉烯类抗菌药物仍保持高度敏感性。

关键词：超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性抗菌药物

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70例孕妇家庭自我监护结果分析

齐齐哈尔医学院学报 1996年第4期17卷 280-281页

作者：孟雅茹倪雪双关丽梁月娥宁安市妇幼院讷河市妇幼保健院齐齐哈尔市龙沙区中医院

我院在开展围产期保健系统管理时,选择部分妊娠后期孕妇进行家庭自我监护,效果非常显著,为今后进一步提高妇幼保健工作开创了新局面。1 资料与方法我们从1993年1月至1995年12月在三个街道和一个村,先后选泽70对夫妻参加家庭孕期自我监... 详细信息

我院在开展围产期保健系统管理时,选择部分妊娠后期孕妇进行家庭自我监护,效果非常显著,为今后进一步提高妇幼保健工作开创了新局面。1 资料与方法我们从1993年1月至1995年12月在三个街道和一个村,先后选泽70对夫妻参加家庭孕期自我监护培训。

关键词：孕妇家庭监护自我监护

米非司酮配伍米索前列醇用于终止8～16周妊娠

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齐齐哈尔医学院学报 1997年第1期18卷 23-25页

作者：郑玉艳梁月娥关丽芦英齐齐哈尔市昂昂溪区妇幼保健站齐齐哈尔市龙沙区中医院齐齐哈尔市妇幼保健院

近年来,米非司酮配伍前列激素抗早孕已在国内广泛开展,它终止孕7周内的成功率已达90％以上,并有安全、痛苦小等优点,深受广大妇女的欢迎。为了进一步探讨应用米非司酮配伍米索前列醇能否使用于终止大月份妊娠,我们自1994年6月至1996年11... 详细信息

近年来,米非司酮配伍前列激素抗早孕已在国内广泛开展,它终止孕7周内的成功率已达90％以上,并有安全、痛苦小等优点,深受广大妇女的欢迎。为了进一步探讨应用米非司酮配伍米索前列醇能否使用于终止大月份妊娠,我们自1994年6月至1996年11月,对300例妊娠在8～16周(2～4个月)孕妇施行了药物流产,其效果令人满意,现报告如下.

关键词：终止妊娠米非司酮米索前列醇

刚地弓形虫活化蛋白激酶C受体1基因的克隆和原核表达及纯化和抗原性分析

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环境与健康杂志 2013年第7期30卷 593-597页

作者：王海龙殷丽天孟晓丽张铁娥关丽刘红丽殷国荣山西医科大学寄生虫学教研室山西太原030001 山西医科大学生理学系

目的克隆刚地弓形虫活化蛋白激酶C受体1(TgRACK1)基因,原核表达、纯化TgRACK1,并分析其抗原性。方法制备弓形虫RH株速殖子总RNA,根据TgRACK1基因全长编码序列(GenBank登录号:AY547291)的开放阅读框设计引物并进行逆转录-聚合酶链式反应(... 详细信息

目的克隆刚地弓形虫活化蛋白激酶C受体1(TgRACK1)基因,原核表达、纯化TgRACK1,并分析其抗原性。方法制备弓形虫RH株速殖子总RNA,根据TgRACK1基因全长编码序列(GenBank登录号:AY547291)的开放阅读框设计引物并进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增,扩增产物经双酶切后连接入pGEX-6p-1载体,重组质粒转化大肠埃希菌DH5α,阳性菌落经菌液PCR、双酶切及DNA测序进行鉴定。将重组质粒pGEX-6p-1-TgRACK1转化至大肠埃希菌BL21(DE3)并加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)结合考马斯亮蓝染色检测表达产物;分别以抗GST标签抗体和兔抗弓形虫血清为一抗,免疫印迹(Western blotting)分析鉴定重组蛋白及其抗原性。重组融合蛋白经GST琼脂糖凝胶亲和纯化,纯化蛋白经SDS-PAGE分离,考马斯亮蓝染色结合凝胶成像系统分析其纯度。结果 RT-PCR扩增产物约为970 bp,重组质粒pGEX-6p-1-TgRACK1构建成功。经IPTG诱导获得相对分子质量约63 kDa的可溶性重组蛋白。诱导表达的蛋白质为带GST标签的重组融合蛋白,且能被兔抗弓形虫血清识别。亲和纯化后获得纯度大于95%的重组TgRACK1蛋白质。结论克隆得到弓形虫活化蛋白激酶C受体1基因,原核表达并纯化出该基因编码的蛋白质,且该重组蛋白具有抗原性。

关键词：刚地弓形虫活化蛋白激酶C受体1 原核表达亲和纯化抗原性

刚地弓形虫蛋白质二硫键异构酶基因的克隆及原核表达

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环境与健康杂志 2013年第10期30卷 875-878页

作者：王海龙李润花殷丽天孟晓丽刘红丽张铁娥关丽殷国荣山西医科大学寄生虫学教研室山西太原030001 太原师范学院生物系山西医科大学生理学系

目的克隆刚地弓形虫蛋白质二硫键异构酶(TgPDI)基因,原核表达、纯化重组TgPDI蛋白,并分析其免疫反应性。方法制备弓形虫RH株速殖子总RNA,根据TgPDI基因全长编码序列(登录号为AJ306291.2)的开放阅读框设计合成引物,并进行逆转录-聚合酶... 详细信息

目的克隆刚地弓形虫蛋白质二硫键异构酶(TgPDI)基因,原核表达、纯化重组TgPDI蛋白,并分析其免疫反应性。方法制备弓形虫RH株速殖子总RNA,根据TgPDI基因全长编码序列(登录号为AJ306291.2)的开放阅读框设计合成引物,并进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),扩增产物经双酶切后连接入pET-30a(+)载体,重组质粒pET-30a(+)-TgPDI转化大肠埃希菌(***)DH5α,阳性菌落经PCR、双酶切并测序鉴定。将重组质粒pET-30a(+)-TgPDI转化至大肠埃希菌Rosetta(DE3),并加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结合考马斯亮蓝染色检测表达产物;分别以抗His抗体和兔抗弓形虫血清为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)鉴定重组蛋白及其免疫反应性;重组蛋白His-TgPDI通过Ni2+琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化,纯化蛋白经SDSPAGE分离,考马斯亮蓝染色结合凝胶成像系统分析其纯度。结果 RT-PCR扩增产物约为1 427 bp。菌落PCR、双酶切及测序结果显示,重组质粒pET-30a(+)-TgPDI构建成功。SDS-PAGE结果显示,经IPTG诱导获得约57 kDa的可溶性重组蛋白。Western blotting结果表明,诱导表达的重组蛋白能被兔抗弓形虫血清识别。亲和纯化后获得纯度大于95%的重组TgPDI蛋白质。结论克隆得到弓形虫PDI基因,原核表达并纯化出该基因编码的蛋白,且该重组蛋白具有免疫反应性。

关键词：刚地弓形虫蛋白质二硫键异构酶克隆原核表达免疫反应性