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PYK-2在PGE2诱导结肠癌SW480细胞侵袭转移中的作用研究

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PYK-2在PGE2诱导结肠癌SW480细胞侵袭转移中的作用研究

作者：兰小琴山西医科大学

学位级别：硕士

目的 1.研究PGE及其受体对结肠癌SW480细胞黏附、迁移及侵袭能力的影响。 2.探讨PYK-2蛋白在PGE诱导结肠癌细胞侵袭转移信号通路中可能的作用机制。方法 1.采用常规细胞培养方法培养结肠癌细胞株SW480。 ***-PCR检测SW480中PGE四种EP(E... 详细信息

目的 1.研究PGE及其受体对结肠癌SW480细胞黏附、迁移及侵袭能力的影响。 2.探讨PYK-2蛋白在PGE诱导结肠癌细胞侵袭转移信号通路中可能的作用机制。方法 1.采用常规细胞培养方法培养结肠癌细胞株SW480。 ***-PCR检测SW480中PGE四种EP(EP1,EP2,EP3,EP4)受体的表达及PGE对各EP受体表达情况的影响。 ***法测定SW480细胞黏附能力。 ***迁移实验检测SW480细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测SW480细胞侵袭能力。 *** blotting检测PGE对SW480细胞中PYK-2蛋白磷酸化水平的影响。 *** blotting检测PGE+SC19220(EP1抑制剂)组,PGE+BAPTA-AM(胞内Ca螯合剂)组与PGE组相比,SW480细胞中PYK-2蛋白磷酸化水平的变化。结果 ***480细胞中,EP1,EP2,EP4都有表达,EP3无表达。加入PGE后,EP1表达增加(P＜0.05),其他受体的表达均无显著变化。 ***作用于细胞后,黏附细胞OD值由0.207±0.009增加至0.417±0.088,迁移细胞数由84.33±5.13增加至144.00±12.53,侵袭细胞数由42.67±3.05增加至86.00±7.00,差异均有统计学意义(P＜0.05)。提示外源性PGE可以显著增加SW480细胞黏附、迁移及侵袭细胞数量。 ***+SC19220组PGE组相比,黏附细胞OD值由0.417±0.088下降至0.140±0.011,迁移细胞数由144.00±12.53下降至110.67±10.06,侵袭细胞数由86.00±7.00下降至59.67±5.69,差异均有统计学意义(P＜0.05)。提示PGE的EP1受体拮抗剂SC19220可显著减少PGE所诱导的黏附、迁移及侵袭细胞数量。 4.结肠癌SW480细胞中,可检测到较弱的磷酸化PYK-2的表达,经PGE作用后,10min内PYK-2磷酸化水平随时间逐渐增加,30min检测基本降至基础水平。半定量分析各时间点磷酸化PYK-2相对水平,0min,5min,10min的PYK-2磷酸化水平之间差异有统计学意义(P＜0.05),30min与0min检测结果之间无统计学差异(P＞0.05)。 ***+SC19220组、PGE+BAPTA-AM组与PGE组相比,PYK-2蛋白磷酸化水平下降(P＜0.05)。结论 ***可能通过EP1促进SW480细胞黏附、迁移及侵袭。 ***可能通过Ca,EP1促进PYK-2的磷酸化,从而进一步激活依赖Src的EGFR信号通路,诱导结肠癌细胞的侵袭转移过程。

关键词： PGE2 SW480细胞侵袭转移 PYK-2

转录因子AP-2α对人结肠癌细胞增殖的抑制作用及其机制

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肿瘤 2008年第9期28卷 776-779,785页

作者：王莹兰小琴李美宁解军张悦红程牛亮山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原030001

目的:研究转录因子活化蛋白-2α(transcription factor activator protein-2α,AP-2α)对人结肠癌SW480细胞增殖的抑制作用及其相关机制。方法:构建pcDNA3.1(+)-AP-2α重组质粒,利用脂质体分别介导重组质粒pcDNA3.1(+)-AP-2α和空质粒pcDNA3.1(+)转染SW480细胞,以正常SW480细胞作为空白对照;采用RT-PCR和Western印迹法检测转染48h后各组细胞中AP-2α的表达水平;采用电泳迁移率分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测转染重组质粒后SW480细胞表达的AP-2α是否具有DNA结合活性;用MTT法研究AP-2α基因转染24、48、72h后SW480细胞的增殖情况;采用流式细胞术分析各组的细胞周期变化,Western印迹法检测细胞内p21/WAF1的表达水平。结果:转染pcDNA3.1(+)-AP-2α重组质粒48h后,SW480细胞内AP-2αmRNA含量以及蛋白水平均显著升高,并且具有较强的DNA结合活性;MTT结果提示,转染AP-2α基因后SW480细胞增殖趋缓;细胞周期分析结果提示,转染AP-2α基因48h后G0/G1期细胞比例较正常细胞增加(P<0.05);转染AP-2α基因48h后,SW480细胞内p21/WAF1表达增加。结论:AP-2α可抑制SW480细胞的增殖,其抑制作用很可能与激活p21/WAF1表达有关。

关键词：结肠肿瘤转录因子AP-2 细胞增殖基因表达

2015—2022年某三甲医院临床分离主要病原菌及耐药性监测

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疾病监测 2023年

作者：林楠杨大超高留英郭艳玲兰小琴北京市第一中西医结合医院

目的研究2015—2022年间某三甲医院临床分离的主要病原菌及其耐药趋势，为指导临床治疗提供有效依据。方法回顾分析医院近8年临床分离病原菌类别及耐药情况，采用VITEK-2Compact仪器对细菌进行鉴定及药敏试验。参照美国临床和实验室... 详细信息

目的研究2015—2022年间某三甲医院临床分离的主要病原菌及其耐药趋势，为指导临床治疗提供有效依据。方法回顾分析医院近8年临床分离病原菌类别及耐药情况，采用VITEK-2Compact仪器对细菌进行鉴定及药敏试验。参照美国临床和实验室标准化协会（ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute，CLSI）推荐的方法，采用WHONET5.6软件对细菌耐药结果进行统计。结果2015年1月—2022年12月临床分离菌株共15612株，其中革兰氏阳性菌占比20.50%，革兰氏阴性菌占比79.50%。排名前10位的病原菌分别为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、奇异变形杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、嗜麦芽寡养单胞菌和无乳链球菌。耐碳青霉烯类肠杆菌检出率由14.02%上升至33.56%，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率由40.68%下降至10.09%。常见病原菌整体耐药率较高，肺炎克雷伯菌及金黄色葡萄球菌耐药率上升明显。结论该医院近8年临床分离常见病原菌耐药形势严峻，需要进一步加强院内感染防控并持续进行耐药性监测，指导临床合理用药。

关键词：医院感染病原菌耐药监测

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北京市某区退休老干部体检生化结果分析

实验与检验医学 2016年第1期34卷 102-103,114页

作者：兰小琴北京市第一中西医结合医院检验科北京100026

目的了解北京市某区退休老干部体检ALT、BUN、CRE、UA、TC、TG、GLU、HDL-C、LDL-C 9项生化结果水平,为本地区老干部预防保健工作提供科学依据。方法采用Beckman全自动生化仪及其配套试剂进行检测。将1057名体检者按性别和年龄分组,对... 详细信息

目的了解北京市某区退休老干部体检ALT、BUN、CRE、UA、TC、TG、GLU、HDL-C、LDL-C 9项生化结果水平,为本地区老干部预防保健工作提供科学依据。方法采用Beckman全自动生化仪及其配套试剂进行检测。将1057名体检者按性别和年龄分组,对男女各项目阳性检出率及各年龄段阳性检出率进行统计学分析。结果男女总阳性检出率无统计学差异。其中GLU、BUN、CRE、UA男女比较有统计学差异,男性高于女性,TC、TG、HDL-C、LDL-C男女比较有统计学差异,女性高于男性。ALT男女比较无统计学差异。各项目阳性检出率前三位分别为：GLU、TC、TG,最高的年龄段集中在75~84岁。结论定期健康体检,及时发现异常指标,有针对性的治疗和复查,对提高老干部健康水平意义重大。

关键词：老干部健康体检生化指标

五倍子等8种中药对多重耐药鲍曼不动杆菌体外抑菌活性的研究

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中国卫生检验杂志 2017年第21期27卷 3086-3088页

作者：兰小琴北京市第一中西医结合医院北京100026

目的研究五倍子等8种中药对多重耐药鲍曼不动杆菌体外抑制作用。方法选用肉汤稀释法,分析检测8种中药的水煎液对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌活性。筛选抑菌效果最强的一种中药,比较其对鲍曼不动杆菌敏感菌株与多重耐药菌株抑菌活性... 详细信息

目的研究五倍子等8种中药对多重耐药鲍曼不动杆菌体外抑制作用。方法选用肉汤稀释法,分析检测8种中药的水煎液对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抑菌活性。筛选抑菌效果最强的一种中药,比较其对鲍曼不动杆菌敏感菌株与多重耐药菌株抑菌活性。结果五倍子对多重耐药鲍曼不动杆菌有较强的抑菌作用,其次乌梅和丁香也有一定的抑菌作用,穿心莲、连翘、枸杞、黄芩、黄连均未表现出抑菌作用;五倍子对鲍曼不动杆菌多重耐药菌株和敏感菌株抑菌效果无区别。结论五倍子对多重耐药鲍曼不动杆菌有显著抑菌效果,具有开发前景。

关键词：中药多重耐药鲍曼不动杆菌肉汤稀释法体外抑菌试验

北京市2009年主要恶性肿瘤区域分布特征的研究

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中国卫生检验杂志 2017年第17期27卷 2564-2565页

作者：兰小琴北京市第一中西医结合医院北京100026

目的探索北京市主要恶性肿瘤(包括肺癌、结直肠癌、肝癌、胃癌和乳腺癌)的地区分布特点,为恶性肿瘤的防控提供科学依据。方法收集北京市2009年主要恶性肿瘤的发病率监测资料,应用聚类分析和对应分析研究北京市主要恶性肿瘤的区域分布特... 详细信息

目的探索北京市主要恶性肿瘤(包括肺癌、结直肠癌、肝癌、胃癌和乳腺癌)的地区分布特点,为恶性肿瘤的防控提供科学依据。方法收集北京市2009年主要恶性肿瘤的发病率监测资料,应用聚类分析和对应分析研究北京市主要恶性肿瘤的区域分布特征,制作对应分析图研究主要恶性肿瘤发生的地区分布。结果北京市各区县恶性肿瘤发病率不同;聚类分析树状图显示北京市主要恶性肿瘤的发生可分为3个主要分布区域。结论北京市主要恶性肿瘤具有一定的地域分布特点,相关部门应根据其空间分布特点制定相应的防控措施。

关键词：恶性肿瘤地区分布聚类分析对应分析

2015-2022年北京市某三甲医院临床分离主要病原菌及耐药性监测

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疾病监测 2024年第8期39卷 1013-1019页

作者：林楠杨大超高留英郭艳玲兰小琴北京市第一中西医结合医院北京100026

目的研究2015-2022年北京市某三甲医院临床分离的主要病原菌及其耐药趋势,为临床治疗提供有效依据。方法回顾分析医院近8年临床分离病原菌类别及耐药情况,采用VITEK-2 Compact仪器对细菌进行鉴定及药敏试验。参照美国临床和实验室标... 详细信息

目的研究2015-2022年北京市某三甲医院临床分离的主要病原菌及其耐药趋势,为临床治疗提供有效依据。方法回顾分析医院近8年临床分离病原菌类别及耐药情况,采用VITEK-2 Compact仪器对细菌进行鉴定及药敏试验。参照美国临床和实验室标准化协会推荐的方法,采用WHONET 5.6软件对细菌耐药结果进行统计。结果 2015年1月至2022年12月临床分离菌株共15 612株,其中革兰阳性菌占20.50%,革兰阴性菌占79.50%。排名前10位的病原菌分别为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、奇异变形杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、嗜麦芽寡养单胞菌和无乳链球菌。耐碳青霉烯类肠杆菌检出率由14.02%上升至33.56%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检出率由40.68%下降至10.09%。常见病原菌整体耐药率较高,肺炎克雷伯菌及金黄色葡萄球菌耐药率上升明显。结论 2015-2022年该医院临床分离常见病原菌耐药形势严峻,应加强院内感染防控并持续进行耐药性监测,指导临床合理用药。

关键词：医院感染病原菌耐药监测

应用空间相关分析和圆分布研究中国肺结核时空分布特征

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传染病信息 2021年第2期34卷 156-159页

作者：兰小琴申林北京市第一中西医结合医院检验科 100026 北京市第一中西医结合医院口腔科 100026

目的研究中国肺结核发病的时空分布规律,为防控肺结核提供依据。方法收集2013—2017年全国各月肺结核报告发病数据进行圆分布分析,计算平均角,估计发病高峰日,并进行雷氏检验。收集2016年我国各省(自治区和直辖市)的肺结核报告发病率进... 详细信息

目的研究中国肺结核发病的时空分布规律,为防控肺结核提供依据。方法收集2013—2017年全国各月肺结核报告发病数据进行圆分布分析,计算平均角,估计发病高峰日,并进行雷氏检验。收集2016年我国各省(自治区和直辖市)的肺结核报告发病率进行全局空间相关性分析和局域空间相关性分析,研究肺结核发病的空间聚集性。结果中国肺结核报告发病数存在明显的时间集中趋势,发病高峰集中在3—5月。中国肺结核报告发病数圆分布分析存在平均角,经雷氏检验Z=13004.94,P<0.05。经全局空间相关性分析发现肺结核发病率在我国具有显著的空间聚集性,I=0.487,Z=4.278,P<0.05。经局域空间相关性分析发现我国肺结核发病率在新疆、青海、西藏及其周围存在空间上的聚集,其他区域未显示出明显的空间聚集性。结论我国肺结核发病存在时间集中趋势和空间聚集性,肺结核的时空分布特点对肺结核防控有重要意义。

关键词：肺结核圆分布空间聚集性空间自相关

PYK-2在PGE_2诱导大肠癌细胞侵袭转移中的作用

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肿瘤防治研究 2008年第10期35卷 697-700页

作者：兰小琴王莹李美宁张悦红解军程牛亮山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原030001

目的研究富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(proline-rich tyrosine kinase2,PYK-2)在前列腺素E2(PGE2)诱导大肠癌SW480细胞侵袭转移中的作用。方法实验分为A、B、C、D四组,分别为未处理组,PGE2组,PGE2+SC19220(EP1抑制剂)组,PGE2+BAPTA-AM(胞内Ca2+螯合剂)组。通过RT-PCR检测SW480中PGE2四种EP(EP1,EP2,EP3,EP4)受体的表达,应用Western blotting检测SW480细胞中PYK-2蛋白的表达,应用Transwell实验观察各组SW480细胞侵袭转移能力的改变。结果SW480表达PGE2的三种EP受体,EP1,EP2和EP4,PGE2可促进EP1的表达;经PGE2作用后,10分钟内PYK-2磷酸化水平逐渐增加,0分钟、5分钟、10分钟检测结果相比差异均有统计学意义(P0.05);C组、D组与B组相比PYK-2磷酸化水平明显下降(P<0.05),大肠癌细胞侵袭转移能力显著降低(P<0.05)。结论PGE2可能通过Ca2+,EP1促进PYK-2的磷酸化,从而进一步诱导大肠癌细胞的侵袭转移过程。

关键词：大肠癌 PGE2 PYK-2 EP1 侵袭转移