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作者：全紫瑶湖北中医药大学

学位级别：硕士

目的慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病机制中,患者机体累积有大量坏死细胞且常伴随着专职和兼职吞噬细胞吞噬功能受损而无法被及时清除,导致非可控性炎症。钙结合蛋白(S100A8/A9)、F-肌动蛋白(F-actin)是坏死细胞释放损伤相关分子模式(DAMPs)... 详细信息

目的慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病机制中,患者机体累积有大量坏死细胞且常伴随着专职和兼职吞噬细胞吞噬功能受损而无法被及时清除,导致非可控性炎症。钙结合蛋白(S100A8/A9)、F-肌动蛋白(F-actin)是坏死细胞释放损伤相关分子模式(DAMPs),与免疫细胞表面的模式识别受体(PRR)如可溶性糖基化终末产物受体(sRAGE)、C型凝集素9家族A成员(Clec9A)结合,激活相应的信号通路,增强固有和适应性免疫应答。同时,单核/巨噬细胞分泌的肺活化调控趋化因子(PARC/CCL18)可能通过调控巨噬细胞极化参与了COPD的病理过程。本研究旨在探讨S100A8/A9、sRAGE、Clec9A、CCL18等在慢性阻塞性肺疾病患者中的临床价值及其与其它临床指标的相关性。方法(1)选取2018年4月至2019年3月湖北中医药大学附属中西医结合医院呼吸科COPD患者203例,收集体检中心吸烟老年非COPD且相对健康体检者41例为吸烟对照组,不吸烟老年健康体检者167例为不吸烟对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测不同分期COPD患者和对照组血清中S100A8/A9和sRAGE、Clec9A、CCL18等的水平变化。将它们与COPD各期患者的临床指标:FEV占预计值%、FEV/FVC、中性粒细胞比率(NEU%)、吸烟量(pack-year)做相关性分析。利用受试者工作特征曲线(ROC)分析CCL18、Clec9A、S100A8/A9,sRAGE以及二者联合检测对于COPD的诊断价值。(2)收集2019年5月至2019年6月在该院呼吸科就诊的31例急性呼吸道感染患者、13例COPD患者和10例做纤支镜并无呼吸系统疾病患者的肺泡灌洗液为对照组,采用瑞氏染色分析肺泡灌洗液中各炎性细胞所占比例,采用免疫荧光的方法检测肺泡灌洗液中Clec9A表达。收集同期住院66例急性呼吸道感染患者血清标本,采用ELISA检测Clec9A水平。收集患者肺泡灌洗液临床呼吸道病原体13项和培养结果。(3)收集2019年6月至2019年8月在该院呼吸科就诊的3例COPD患者和3例体检中心性别年龄相匹配的对照者全血,提取单个核细胞,采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测COPD患者和对照组患者外周血单个细胞巨噬细胞分化指标。结果(1)COPD患者血清S100A8/A9水平与吸烟对照组和不吸烟对照组相比均明显上升,P<0.05;COPD患者GOLDⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期血清S100A8/A9水平与不吸烟对照组相比均明显上升,P<0.05。COPD患者血清sRAGE水平与吸烟对照组和不吸烟对照组相比均明显下降,P<0.05;COPD患者GOLDⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期血清sRAGE水平与不吸烟对照组相比明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清S100A8/A9水平与患者吸烟量、NEU%均呈正相关(P<0.05),与FEV/FVC、FEV占预计值百分比、sRAGE均呈负相关(P<0.05)。血清sRAGE水平与NEU%呈负相关(P<0.05)。ROC曲线中S100A8/A9,sRAGE以及二者联合检测的曲线下面积分别为0.922[95%CI(0.897.947)],0.926[95%CI(0.899.952)],0.966[95%CI(0.950.983)]。COPD患者GOLD I、II、III、IV期血清Clec9A水平与对照组相比明显上升,埃兹蛋白(Ezrin)水平与对照组相比明显上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。COPD患者血清Clec9A和Ezrin水平呈显著性正相关(P<0.05)。ROC曲线Clec9A和Ezrin单独检测的曲线下面积分别是0.823[95%CI(0.781-0.864)]、0.693[95%CI(0.641-0.745)],二者联合检测的曲线下面积是0.847[95%CI(0.808-0.885)]。COPD患者血清CCL18水平随着疾病严重程度呈上升趋势,与吸烟对照组和不吸烟对照组相比明显下降,P<0.05。为了进一步研究吸烟对慢性阻塞性肺病患者血清CCL18的影响,对COPD患者中不吸烟者、正在吸烟者和戒烟者的血清CCL18水平进行了检测,发现正在吸烟者和戒烟者的血清CCL18浓度明显高于从不吸烟者。与此同时,吸烟患者的血清CCL18水平明显高于戒烟者,P<0.05。CCL18血清水平与吸烟量呈正相关,与FEV/FVC、FEV占预计值百分比呈负相关,P<0.05。作为临床诊断指标,ROC曲线中CCL18的曲线下面积为0.722(95%CI:0.669-0.775)。(2)肺泡灌洗液沉渣涂片瑞氏染色结果:COPD患者和部分急性呼吸道感染患者肺泡灌洗液涂片瑞氏染色镜下可见大量中性粒细胞聚集,部分急性呼吸道感染患者以

关键词：慢性阻塞性肺疾病钙结合蛋白S100A8/A9 可溶性糖基化终末产物受体sRAGE C型凝集素9家族A成员Clec9A 趋化因子CCL18 坏死清除

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警报素既是免疫警报又是疾病警报

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中国免疫学杂志 2018年第6期34卷 935-938,943页

作者：全紫瑶谢圣高崔天盆武汉市第一医院检验科武汉430022 湖北中医药大学检验学院武汉430065

警报素(Alarmins)是机体处于组织损伤和炎症反应状态或生理应激时,由白细胞和上皮细胞等释放到胞外的内源性生物介质,也称为危险相关分子模式(Danger-associated molecular patterns,DAMPs)。通过趋化和激活抗原递呈细胞(Antigen presen... 详细信息

警报素(Alarmins)是机体处于组织损伤和炎症反应状态或生理应激时,由白细胞和上皮细胞等释放到胞外的内源性生物介质,也称为危险相关分子模式(Danger-associated molecular patterns,DAMPs)。通过趋化和激活抗原递呈细胞(Antigen presenting cells,APC)等免疫细胞从而增强固有免疫和适应性免疫应答。它与疾病的产生发展及转归密切相关,对于临床诊疗具有重要的指导意义。

关键词：警报素危险相关分子模式压力素

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Clec9A介导的体内坏死细胞清除机制研究进展

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中国免疫学杂志 2021年第12期37卷 1517-1520页

作者：晏黎黄伟全紫瑶崔天盆湖北中医药大学附属武汉市中西医结合医院检验科武汉430022 湖北中医药大学检验学院武汉430065

机体在病毒感染、肿瘤等病理因素下产生的大量坏死细胞需要细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的靶向杀伤作用来清除。人外周血BDCA3+树突状细胞上的Clec9A能特异性识别与结合坏死细胞暴露的纤维状肌动蛋白(F-actin),激活胞内脾酪氨酸激酶Syk。Cle... 详细信息

机体在病毒感染、肿瘤等病理因素下产生的大量坏死细胞需要细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的靶向杀伤作用来清除。人外周血BDCA3+树突状细胞上的Clec9A能特异性识别与结合坏死细胞暴露的纤维状肌动蛋白(F-actin),激活胞内脾酪氨酸激酶Syk。Clec9A作为F-actin的受体,不仅内吞坏死细胞,同时将坏死细胞相关抗原交叉提呈至CD8^(+)T细胞,活化CTL,启动机体获得性免疫应答。CTL释放的穿孔素及颗粒酶特异性杀伤靶细胞,导致体内感染细胞或肿瘤细胞进一步被清除。因此,Clec9A在机体抗病毒感染、肿瘤治疗中具有潜在的应用前景。

关键词： C型凝集素9家族A成员纤维状肌动蛋白坏死细胞交叉提呈

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胞外肌动蛋白检测的临床应用

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中国免疫学杂志 2019年第3期35卷 368-371页

作者：全紫瑶吴兆立谢圣高崔天盆武汉市第一医院检验科武汉430022 湖北中医药大学检验学院武汉430065

肌动蛋白是细胞骨架微丝系统的主要组成成分,在细胞膜完整性受损的情况下,肌动蛋白被释放到细胞外成为危险相关分子模式的一员。目前已发现的胞外肌动蛋白有三种存在形式:与细胞膜外表面连接、存在于细胞外基质或是游离于循环体液中。... 详细信息

肌动蛋白是细胞骨架微丝系统的主要组成成分,在细胞膜完整性受损的情况下,肌动蛋白被释放到细胞外成为危险相关分子模式的一员。目前已发现的胞外肌动蛋白有三种存在形式:与细胞膜外表面连接、存在于细胞外基质或是游离于循环体液中。胞外肌动蛋白参与多种疾病病理生理过程,作为一种自身抗原也参与许多自身免疫性疾病的发生发展。循环游离肌动蛋白、抗肌动蛋白免疫球蛋白以及肌动蛋白清除系统相关组分均可以作为生物标志物,用于多种疾病的预后判断。

关键词：肌动蛋白危险相关分子模式凝溶胶蛋白抗肌动蛋白抗体生物标志物

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死亡细胞清除的阴与阳

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国际检验医学杂志 2018年第24期39卷 3075-3081页

作者：陈超全紫瑶崔天盆武汉市第一医院检验科/武汉市中西医结合医院检验科湖北武汉430022

机体每时每刻都有大量细胞凋亡,及时清除凋亡细胞对维持机体的免疫平衡至关重要,凋亡细胞被吞噬细胞清除过程分为:招募、识别和吞噬消化3个阶段。凋亡细胞清除表现为没有炎性反应或者一个已经存在的促炎反应在吞噬发生后被下调。当机体... 详细信息

机体每时每刻都有大量细胞凋亡,及时清除凋亡细胞对维持机体的免疫平衡至关重要,凋亡细胞被吞噬细胞清除过程分为:招募、识别和吞噬消化3个阶段。凋亡细胞清除表现为没有炎性反应或者一个已经存在的促炎反应在吞噬发生后被下调。当机体处于组织损伤和炎性反应状态或生理应激时,细胞发生凋亡或坏死,若凋亡细胞不能及时清除也会继发性坏死,细胞坏死释放内源性危险信号分子,也称为危险相关分子模式(DAMPs)。DAMPs在结构和功能上与侵入机体的外源性的保守的微生物即病原体相关分子模式的表面结构具有相似性,可被病原体识别受体(PRRs)识别,激活相关信号通路,产生自身抗体或活化其他免疫细胞,导致自身免疫性疾病或炎性反应。

关键词：细胞凋亡细胞坏死死亡细胞清除胞葬

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Hippo-YAP通路与肿瘤相关性研究进展

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医学研究杂志 2019年第7期48卷 12-15,27页

作者：刘思伽全紫瑶胡必成谢圣高湖北中医药大学检验学院武汉430065 武汉市第一医院 430022

Hippo-YAP通路是由一种癌基因和多种抑癌基因所组成的高度保守的信号转导通路,能抑制细胞增殖、促进细胞凋亡、控制器官生长发育和调节细胞接触性抑制。YAP是Hippo-YAP通路的主要效应因子,YAP过表达或Hippo-YAP通路异常会引发多种疾病,... 详细信息

Hippo-YAP通路是由一种癌基因和多种抑癌基因所组成的高度保守的信号转导通路,能抑制细胞增殖、促进细胞凋亡、控制器官生长发育和调节细胞接触性抑制。YAP是Hippo-YAP通路的主要效应因子,YAP过表达或Hippo-YAP通路异常会引发多种疾病,进而导致肿瘤的产生。YAP可作为肿瘤治疗的有效靶点,目前虽没有YAP的直接抑制剂,但可通过抑制YAP活性来进行药物治疗。本文综述了Hippo-YAP通路的组成、调控机制、与肿瘤的关系及针对Hippo-YAP通路的靶向治疗。

关键词： Hippo-YAP通路 YAP 肿瘤

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微柱凝胶卡检测梯度稀释IgG型抗-D的试验表现

微柱凝胶卡检测梯度稀释IgG型抗-D的试验表现

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中国输血协会第十届输血大会

作者：仇丰武全紫瑶阳娅玲武汉血液中心

目的探讨不同厂家生产的微柱凝胶卡检测IgG型抗-D的试验表现。方法选取Baso、博讯、Bio-Rad、DG GRIFOLS公司生产的微柱凝胶卡,分别与不同滴度的IgG型抗-D进行Coombs试验,综合评价其表现,分析各自的检出限。结果 Baso卡的检出限为64,博...

目的探讨不同厂家生产的微柱凝胶卡检测IgG型抗-D的试验表现。方法选取Baso、博讯、Bio-Rad、DG GRIFOLS公司生产的微柱凝胶卡,分别与不同滴度的IgG型抗-D进行Coombs试验,综合评价其表现,分析各自的检出限。结果 Baso卡的检出限为64,博讯、DG GRIFOLS卡的检出限为1 024,Bio-Rad的检出限为2 048。

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血清淀粉样蛋白A和C反应蛋白在相关炎性疾病监测中的应用

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湖北中医药大学学报 2017年第5期19卷 102-105页

作者：杨斌全紫瑶程小欢湖北省谷城县人民医院湖北谷城441700 湖北中医药大学检验学院湖北武汉430065 武汉大学中南医院检验科湖北武汉430071

目的探讨急性时相反应蛋白血清淀粉样蛋白A(SAA)和C反应蛋白(CRP)在相关炎性疾病监测中的应用价值。方法选择2016年1月1日~10月31日于湖北省谷城县人民医院临床疑似有感染的住院患者1020例以及111例健康体检患者(正常对照组),对其进行CR... 详细信息

目的探讨急性时相反应蛋白血清淀粉样蛋白A(SAA)和C反应蛋白(CRP)在相关炎性疾病监测中的应用价值。方法选择2016年1月1日~10月31日于湖北省谷城县人民医院临床疑似有感染的住院患者1020例以及111例健康体检患者(正常对照组),对其进行CRP和SAA检测。将住院患者按照疾病类型分为6组:糖尿病伴并发症、心血管疾病、多发性骨髓瘤、创伤骨折、其他肿瘤和皮肤疾病。分别对每组疾病的SAA、CRP实验数据做ROC曲线面积分析,判断二者单独检测和平行试验联合检测对各种疾病的诊断价值。结果通过对实验数据进行分析,SAA与CRP变化趋势不一致的患者占44.6%,所占比例较大,尤以SAA增高而CRP正常患者居多。再比较这两种指标在同一种疾病中的升高幅度,前者高于后者。通过对各种疾病的ROC曲线下面积计算,可得联合检测一般具有更多的曲线下面积。结论 SAA相比于CRP,在相关炎性疾病监测中可能更有临床价值。临床上在进行炎症监测时,应重视SAA异常升高而CRP正常患者。在有条件的情况下选择两种指标做联合检测,更具有临床诊断价值。

关键词：血清淀粉样蛋白A C反应蛋白炎性疾病

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慢性阻塞性肺疾病患者血清S100A8/A9和sRAGE水平变化及临床意义

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中华检验医学杂志 2020年第2期43卷 165-170页

作者：全紫瑶陈菁武小杰刘旭王爱利谢圣高王月芹姜锐章爽谢俊刚崔天盆湖北中医药大学附属中西医结合医院检验科武汉430022 湖北中医药大学附属中西医结合医院呼吸科武汉430022 湖北中医药大学检验学院武汉430065 华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸与危重医学科武汉430030

目的分析慢性阻塞性肺疾病患者血清钙结合蛋白S100A8/A9和可溶性糖基化终末产物受体(sRAGE)水平的变化及临床意义。方法病例对照研究。选取2018年4月至2019年1月湖北中医药大学附属中西医结合医院呼吸科慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者203例... 详细信息

目的分析慢性阻塞性肺疾病患者血清钙结合蛋白S100A8/A9和可溶性糖基化终末产物受体(sRAGE)水平的变化及临床意义。方法病例对照研究。选取2018年4月至2019年1月湖北中医药大学附属中西医结合医院呼吸科慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者203例,其中男166例,女37例,年龄52~92岁,平均(69.72±9.08)岁。收集体检中心吸烟老年非COPD且相对健康体检者41例为吸烟对照组,其中男35例,女6例,年龄55~89岁,平均(68.66±8.74)岁。收集不吸烟老年健康体检者167名为不吸烟对照组,其中男132名,女35名,年龄57~92岁,平均(69.13±7.21)岁。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测不同分期COPD患者和两组对照组血清中S100A8/A9和sRAGE的水平,将其与COPD患者的各临床指标:第一秒用力呼气容积FEVl占预计值%、FEV1/FVC(用力肺活量)、中性粒细胞比率(NEU%)、吸烟量:每日吸烟包数乘吸烟年数(pack-year)做相关性分析。利用受试者工作特征(ROC)曲线分析S100A8/A9,sRAGE以及二者联合检测对于COPD的诊断价值。结果COPD患者血清S100A8/A9水平[(2.70±1.11)μg/ml]与吸烟对照组[(1.65±0.63)μg/ml]和不吸烟对照组[(0.99±0.48)μg/ml]相比均明显上升(t=5.807,P<0.0001;t=18.45,P<0.0001);COPD患者GOLDⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期血清S100A8/A9水平[(2.08±1.08)μg/ml,(2.58±1.06)μg/ml,(2.69±1.12)μg/ml,(2.95±1.10)μg/ml]与不吸烟对照组[(0.99±0.48)μg/ml]相比明显上升,差异均有统计学意义(t=6.616,P<0.0001;t=14.56,P<0.0001;t=17.10,P<0.0001;t=18.09,P<0.0001)。COPD患者血清sRAGE水平[(0.29±0.25)ng/ml]与吸烟对照组[(0.60±0.24)ng/ml]和不吸烟对照组[(0.85±0.35)ng/ml]相比均明显下降(t=7.367,P<0.0001;t=18.14,P<0.0001);COPD患者GOLDⅠ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期血清sRAGE水平[(0.46±0.40)、(0.28±0.25)、(0.29±0.25)和(0.25±0.19)ng/ml]与不吸烟对照组[(0.85±0.35)ng/ml]相比明显下降,差异均有统计学意义(t=3.459,P=0.0005;t=10.23,P<0.0001;t=13.95,P<0.0001;t=11.70,P<0.0001)。血清S100A8/A9水平与患者吸烟量、NEU%均呈正相关(r=0.4585,P<0.0001;r=0.2283,P=0.0011),与FEV1/FVC、FEV1占预计值百分比、sRAGE均呈负相关(r=-0.1906,P=0.0064;r=-0.1863,P=0.0078;r=-0.2017,P=0.0039)。sRAGE与NEU%呈负相关(r=-0.1559,P=0.0264)。ROC曲线中S100A8/A9,sRAGE以及二者联合检测的曲线下面积分别为0.922[95%CI(0.897~0.947)],0.926[95%CI(0.899~0.952)],0.966[95%CI(0.950~0.983)]。结论S100A8/A9和sRAGE水平与气流受限严重程度和血清炎症介质水平相关,有望作为COPD的潜在的生物标志物。

关键词：肺疾病,慢性阻塞性钙粒蛋白A 钙粒蛋白B 高级糖化终产物受体

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系统性红斑狼疮患者血清中F-肌动蛋白抗体检测的临床应用

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中华风湿病学杂志 2018年第8期22卷 543-547页

作者：吴兆立刘湘杨惠琴宁勇赵岚黄伟程贵莲熊银李妹全紫瑶崔天盆武汉市第一医院检验科 430022 武汉市第一医院风湿免疫科 430022 湖北中医药大学检验学院

目的探讨SLE患者血清中F-肌动蛋白抗体检测的临床价值及其与其他临床指标的相关性。方法ELISA法检测2017年3月至2018年1月武汉市第一医院收治的93例SLE患者（病例组），72例RA患者（疾病对照组）和同期83名体检健康者（健康对照组）血清... 详细信息

目的探讨SLE患者血清中F-肌动蛋白抗体检测的临床价值及其与其他临床指标的相关性。方法ELISA法检测2017年3月至2018年1月武汉市第一医院收治的93例SLE患者（病例组），72例RA患者（疾病对照组）和同期83名体检健康者（健康对照组）血清中F-肌动蛋白抗体水平，并分析3组结果的阳性率；回顾性分析病例组93例患者的SLEDAI、血清免疫球蛋白G（IgG）、ESR、抗dsDNA抗体及ANA临床指标数据，将F-肌动蛋白抗体单位数值与上述各指标逐一进行相关性分析；利用受试者工作特征曲线（ROC）分析F-肌动蛋白抗体单位数值对SLE的诊断价值。采用t检验，χ2检验和Spearman／Pearson相关分析进行统计分析。结果SLE病例组、疾病对照组和健康对照组血清中F-肌动蛋白抗体平均水平分别为（18±13）U、（12±6）U和（11±5）U，SLE病例组与疾病对照组、健康对照组差异均有统计学意义（t=3．163，P=0．0019;t=4．436，P〈0．01）；SLE病例组血清中F-肌动蛋白抗体阳性率为33％（31／93），与疾病对照组（10％，7／72）和健康对照组（4％，3／83）相比，差异均有统计学意义坼=12．76，P〈0．01；2z=24．84，P〈0．01）；SIN病例组F．肌动蛋白抗体单位数值与患者SLEDAI、IgG、ESR、抗dsDNA抗体及ANA均呈正相关（r=0．2737，P=0．0083；r=0．5587，P〈0．01；r=0．4199，P=0．0001；r=0．3514，P=0．0011；r=0．4609，P〈0．01），其中，F-肌动蛋白抗体单位数值与IgG及ANA相关性最明显；ROC曲线中，曲线下面积（AUC）为0．62[95％CI（0．54，0．70）]，差异有统计学意义（P=0．0013）。F-肌动蛋白抗体单位数值的临界值（cut-off值）为14．04U时，约登指数最大（YI=0．30），对SLE的诊断敏感度为0．77，特异度为0．53。结论F-肌动蛋白抗体在SLE患者血清中的平均水平和阳性率较RA患者和健康人群高，对SLE有一定的诊断价值；F-肌动蛋白抗体单位数值与SLEDAI、ESR及抗dsDNA抗体均相关，说明其可以作为一种新型生物标志物反映SLE患者的疾病活动情况。

关键词：肌动蛋白类红斑狼疮系统性生物学标记

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