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模拟微重力对大鼠嗜铬细胞瘤细胞形态及其生长的影响

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航天医学与医学工程 2006年第2期19卷 79-84页

作者：杨唐斌曲丽娜钟萍元艳宏肇海中国航天员科研训练中心北京100094

目的研究回转是否影响PC12细胞内蛋白质的羰基化和硝基化水平,进而影响细胞骨架和形态;细胞内活性氮水平升高是否会影响PC12细胞的增殖分化。方法观察并测定了静置对照组和回转组细胞的细胞形态和细胞密度的变化,采用免疫荧光标记和RT-... 详细信息

目的研究回转是否影响PC12细胞内蛋白质的羰基化和硝基化水平,进而影响细胞骨架和形态;细胞内活性氮水平升高是否会影响PC12细胞的增殖分化。方法观察并测定了静置对照组和回转组细胞的细胞形态和细胞密度的变化,采用免疫荧光标记和RT-PCR技术研究了回转对细胞骨架蛋白Ac-tin羰基化和Tubulin硝基化以及nNOS和iNOS的mRNA和蛋白表达的影响;并利用流式细胞术检测了细胞周期的改变,初步探讨了这些改变和一氧化氮合酶之间的关系。结果细胞骨架蛋白发生硝基化和羰基化的改变,但回转组细胞骨架形态变化不明显,PC12细胞的微丝回转后明显伸长;回转后,细胞密度显著增加,细胞周期中DNA合成的S期明显缩短。结论结果表明水平回转模拟微重力并不改变PC12细胞形态,相反还有利于细胞的生长,其机制可能与一氧化氮合酶的表达上调有关。

关键词：失重模拟水平式回转器硝基酪氨酸蛋白羰基细胞骨架荧光标记

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微重力条件下细胞电融合研究进展

生物医学工程学杂志 2008年第3期25卷 720-723页

作者：孙艳元艳宏易宗春庄逢源樊瑜波北京航空航天大学生物工程系北京100083

生物分离、细胞培养和细胞电融合是目前在空间条件下研究的主要生物过程。空间微重力环境是细胞电融合技术的理想场所,由于不存在重力和对流的影响,使电融合技术得到了改善。在提高杂交瘤得率、培植新品种和研究微重力细胞生物学效应方... 详细信息

生物分离、细胞培养和细胞电融合是目前在空间条件下研究的主要生物过程。空间微重力环境是细胞电融合技术的理想场所,由于不存在重力和对流的影响,使电融合技术得到了改善。在提高杂交瘤得率、培植新品种和研究微重力细胞生物学效应方面具有广阔的应用前景。本文综述了微重力条件下细胞电融合的研究进展,细胞电融合过程中细胞骨架发生的变化,以及微重力条件下提高融合效率潜在的原因。

关键词：微重力细胞电融合细胞骨架融合效率

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抗硝基酪氨酸单克隆抗体的制备与鉴定

细胞与分子免疫学杂志 2004年第5期20卷 638-639页

作者：曲丽娜杨唐斌元艳宏钟萍杨彬阚广捍航天医学工程研究所十三室北京100094 北京怡成生物电子技术有限公司北京100020

硝基酪氨酸(nitrotyrosine,NT)为活性氮(reactive nitrogen species,RNS)对蛋白酪氨酸残基氧化修饰的产物,是体内RNS形成的重要生物标记物[1.2].目前,NT的检测主要采用HPLC、HPLC-EC及GC-MS等方法,需要大型仪器和专业人员操作,并需进行... 详细信息

硝基酪氨酸(nitrotyrosine,NT)为活性氮(reactive nitrogen species,RNS)对蛋白酪氨酸残基氧化修饰的产物,是体内RNS形成的重要生物标记物[1.2].目前,NT的检测主要采用HPLC、HPLC-EC及GC-MS等方法,需要大型仪器和专业人员操作,并需进行样品的预处理,费时费力;而且样品的处理过程还会人为地产生NT,影响检测结果的准确性[3,4].免疫学技术为检测NT开辟了一条新的途径,将NT与载体蛋白的连接物作为免疫原,制备针对NT的mAb,然后用于ELISA、Western blot、免疫组化染色和免疫电镜研究.用ELISA法定量测定NT时,样品不需要前处理,可同时测定大量的实验与对照组样品.本实验旨在利用一种新的NT与载体蛋白交联的方法,制备针对NT的特异性mAb,从而完善现有的NT检测方法,以更好地阐明NT的生理病理作用.

关键词：硝基酪氨酸 RNS HPLC 单克隆抗体体内氧化修饰载体蛋白残基鉴定样品

兔抗人血小板GPIb α C端多肽多克隆抗体的制备与初步应用

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兔抗人血小板GPIb α C端多肽多克隆抗体的制备与初步应用

第十一届全国血栓与止血学术会议暨血栓栓塞性疾病（血栓与止血）基础与临床研究进展学习班

作者：元艳宏戴克胜北京航空航天大学生物工程系

目的:血小板表面膜糖蛋白(GP)Ib-IX-V 与 VWF 的结合是血小板血栓形成的起始、关键步骤。研究发现,14-3-3蛋白在调控血小板 GPIb 与 VWF 结合过程中起着重要作用。现有研究证实,在 GPIb α中,存在有 2个14-3-3蛋白的结合位点,GPIb β中...

目的:血小板表面膜糖蛋白(GP)Ib-IX-V 与 VWF 的结合是血小板血栓形成的起始、关键步骤。研究发现,14-3-3蛋白在调控血小板 GPIb 与 VWF 结合过程中起着重要作用。现有研究证实,在 GPIb α中,存在有 2个14-3-3蛋白的结合位点,GPIb β中166位磷酸化的丝氨酸位点也是14-3-3蛋白的结合位点。另有研究显示 GPIb α中550-570位置可能还存在一个14-3-3蛋白的

关键词：

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模拟失重及力负荷对大鼠胫骨骨液流的影响

航天医学与医学工程 2003年第4期16卷 257-259页

作者：马永洁元艳宏谢力勤李莹辉万玉民史之祯航天医学工程研究所北京100094

目的采用体内分子示踪方法观察尾吊大鼠胫骨骨陷窝小管液流改变及施加力负荷后的变化。方法 36只SD雄性大鼠分 3组 :自由活动组 ,悬吊组 ,悬吊 +力负荷组。实验第 2 1天 ,每组选 4只大鼠尾静脉注射辣根过氧化物酶 (HRP)溶液 ,3h后断头... 详细信息

目的采用体内分子示踪方法观察尾吊大鼠胫骨骨陷窝小管液流改变及施加力负荷后的变化。方法 36只SD雄性大鼠分 3组 :自由活动组 ,悬吊组 ,悬吊 +力负荷组。实验第 2 1天 ,每组选 4只大鼠尾静脉注射辣根过氧化物酶 (HRP)溶液 ,3h后断头处死大鼠 ,取胫骨冰冻切片 ,染色后观察HRP反应产物在骨组织的分布情况。结果悬吊组大鼠骨陷窝染色反应物沉积量明显少于自由对照组 ;力负荷组大鼠骨陷窝反应物沉积量明显多于悬吊组。结论模拟失重条件下 ,大鼠骨陷窝小管液体流动受到了一定程度的抑制 ,短时间一定强度的力负荷刺激 ,可促进其液体流动。

关键词：失重模拟力负荷骨组织胫骨液流示踪剂

血小板膜糖蛋白（GP）Ibα胞内区551到565氨基酸序列对GPIbα结合VWF功能的调控作用

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中华血液学杂志 2011年第9期32卷 618-621页

作者：张卫林廖翊元艳宏闫荣阮长耿戴克胜北京航空航天大学生物与医学工程学院血液与细胞生物学实验室 100191 苏州大学第一附属医院、江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室

目的探讨血小板膜糖蛋白（GP）Ibα胞内区551到565氨基酸序列对GPIbα结合血管性血友病因子（VwF）功能的调控作用。方法以同时表达野生型GPIbα、GPIbβ和GPIX三种蛋白的中国仓鼠卵巢细胞株（1b9）、同时表达野生型GPIbβ、GPⅨ和在565... 详细信息

目的探讨血小板膜糖蛋白（GP）Ibα胞内区551到565氨基酸序列对GPIbα结合血管性血友病因子（VwF）功能的调控作用。方法以同时表达野生型GPIbα、GPIbβ和GPIX三种蛋白的中国仓鼠卵巢细胞株（1b9）、同时表达野生型GPIbβ、GPⅨ和在565或551以后氨基酸序列缺失的GPIbd的中国仓鼠卵巢细胞株（A565或A551）为模型，采用流式细胞术检测细胞株的GPIbα在瑞斯托霉素诱导下结合VwF的能力，流动腔技术检测细胞株在流体剪切力条件下（200s-1）在VWF表面的黏附状况，激光共聚焦技术检测细胞株在botrocetin诱导下在VwF表面的铺展状况。结果与对照lb9和A551相比，A565细胞株在ristocetin诱导下其GPIbα结合VwF的能力最强（P〈0．01），在VwF表面黏附的A565细胞数量最多（P〈0．05），在botrocetin诱导下A565细胞株在VwF表面的铺展面积最大（P〈0．05）。结论GPIbα胞内区551到565氨基酸序列对GPIbα结合vwF的功能具有重要调控作用。

关键词：糖蛋白I bα 血管性血友病因子

GPIbα膜内段14-3-3新结合点的发现及其对血小板功能的调控作用

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GPIbα膜内段14-3-3新结合点的发现及其对血小板功能的调控作用

模拟微重力对大鼠嗜铬细胞瘤细胞蛋白酪氨酸硝基化的影响

中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议

作者：张卫林元艳宏赵丽丽阮长耿戴克胜北京航空航天大学生物与医学工程学院血液与细胞生物学实验室

＜正＞目的:探讨血小板膜糖蛋白（GP）Ibα膜内段新的14-3-3蛋白结合位点的存在,探讨该位点对血小板生理功能的调控作用。方法:合成氨基酸寡肽,免疫大白兔,得到多克隆抗体。构建GPIbα突变体表达质粒,建立突变型细胞株（1b9、S609A、S5...

＜正＞目的:探讨血小板膜糖蛋白（GP）Ibα膜内段新的14-3-3蛋白结合位点的存在,探讨该位点对血小板生理功能的调控作用。方法:合成氨基酸寡肽,免疫大白兔,得到多克隆抗体。构建GPIbα突变体表达质粒,建立突变型细胞株（1b9、S609A、S559A、S166A、Δ565和Δ552）;免疫共沉淀检测GPIbα与14-3-3蛋白的结合情况。流式细胞术检测细胞株在瑞斯托霉素

关键词：

来源： cnki会议评论

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中华航空航天医学杂志 2006年第2期17卷 120-123,163页

作者：曲丽娜杨唐斌元艳宏钟萍李莹辉中国航天员科研训练中心航天细胞分子生物学实验室北京100094

目的研究微重力状态下活性氮自由基(RNS)对神经细胞蛋白质氧化修饰的影响。方法以大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞作为神经细胞模型,利用水平轴回转器模拟微重力效应。回转72 h后,对回转和对照组细胞进行一氧化氮合酶和硝基酪氨酸的免疫细胞... 详细信息

目的研究微重力状态下活性氮自由基(RNS)对神经细胞蛋白质氧化修饰的影响。方法以大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞作为神经细胞模型,利用水平轴回转器模拟微重力效应。回转72 h后,对回转和对照组细胞进行一氧化氮合酶和硝基酪氨酸的免疫细胞化学染色分析,同时采用硝酸盐还原酶偶联法测定回转PC12细胞的一氧化氮(NO)水平,竞争性ELISA方法定量检测细胞硝基酪氨酸的水平。结果回转后PC12细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和硝基酪氨酸免疫细胞化学染色均增强。回转后PC12细胞NO水平升高(P<0.01),蛋白质酪氨酸硝基化程度显著增加(P<0.01)。结论模拟失重可诱导PC12细胞NO的合成,增加蛋白质氧化损伤程度。

关键词：失重模拟氧化性应激活性氮蛋白质氧化损伤硝基酪氨酸

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氧化损伤评估体系的建立及其在航天中的应用

氧化损伤评估体系的建立及其在航天中的应用