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胡桃楸成花相关基因JmLFY启动子克隆及活性分析

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胡桃楸成花相关基因JmLFY启动子克隆及活性分析

作者：傅靖棋沈阳农业大学

学位级别：硕士

胡桃楸(Juglans mandshurica Maxim)是我国东北地区珍贵的用材树种,兼具经济价值和生态价值,该物种具有雌雄花同株异型异熟的生殖特性,严重影响胡桃楸成花坐果。为解决胡桃楸果实产量低这一瓶颈问题,阐明JmLFY基因在胡桃楸诱导成花过程... 详细信息

胡桃楸(Juglans mandshurica Maxim)是我国东北地区珍贵的用材树种,兼具经济价值和生态价值,该物种具有雌雄花同株异型异熟的生殖特性,严重影响胡桃楸成花坐果。为解决胡桃楸果实产量低这一瓶颈问题,阐明JmLFY基因在胡桃楸诱导成花过程中调控的分子机制,本研究在课题组前期对JmLFY基因功能验证的基础上,通过PCR技术克隆获得了胡桃楸JmLFY基因启动子序列。构建了胡桃楸JmLFY基因启动子不同长度5’端缺失片段的植物表达载体,利用农杆菌介导进行本式烟草遗传转化和瞬时转化分析启动子的活性。利用酵母单杂交技术对胡桃楸JmSOC1蛋白与JmLFY基因启动子进行点对点验证。上述研究成果为进一步构建胡桃楸成花调控网络提供理论依据,同时为胡桃楸缩短童期、提前开花、提高果实产量奠定基础,在生产上具有重要的理论和指导意义。主要研究成果如下:1.成功克隆出胡桃楸成花相关JmLFY基因启动子,序列长度为2115bp,与核桃Jr LFY基因同源性可以达到90%以上。利用启动子在线分析软件对JmLFY启动子上的顺式作用元件分析发现,胡桃楸JmLFY基因启动子上存在多种不同功能的顺式作用元件,包括真核生物启动子必备的核心顺式作用元件、光响应元件、开花相关元件、激素响应元件、抗逆响应元件、厌氧诱导调控元件、参与玉米醇溶蛋白代谢调节的顺式调控元件、损伤响应元件,以及一些未知功能的元件。2.通过双酶切方法构建了胡桃楸JmLFY启动子与GUS基因融合的植物表达载体p CAMBIA1301-p LFY1,利用农杆菌介导叶盘法对本式烟草进行遗传转化,共获得6株转基因烟草。对转基因烟草的不同组织部位进行GUS组织化学染色和q RT-PCR分析发现,GUS基因在烟草根、茎、叶、花中均有表达,并且在叶中的表达量最高,在根中的表达量最低,表达量从高到低分别为:叶>茎>花>根。3.构建了5个不同长度的植物表达载体p CAMBIA1301-p LFY2,p CAMBIA1301-p LFY3,p CAMBIA1301-p LFY4,p CAMBIA1301-p LFY5,p CAMBIA1301-p LFY6来确定胡桃楸JmLFY基因启动子的启动活性、核心调控区域及顺式作用元件的功能。利用农杆菌介导对烟草叶片进行瞬时转化,并进行各种非生物胁迫处理,GUS染色和酶活性检测发现,不同长度启动子片段均具有启动活性,并且能够响应长光周期、低温、SA、I AA、GA3和Me JA的诱导,胡桃楸JmLFY基因启动子的核心调控区域位于-234bp～-1904bp之间。4.构建了pGADT7-Rec2-JmSOC1猎物载体和p HIS2-p LFY诱饵载体,将p GADT7-rec2-p53/p HIS2-p53(阳性对照)、p GADT7-Rec2/p HIS2-p53(阴性对照)、p GADT7-Rec2/p HIS2-p LFY(自激活组)和p GADT7-Rec2-JmSOC1/p HIS2-p LFY(试验组)分别共转化Y187酵母感受态细胞,将酵母菌液分别涂布DDO、TDO、TDO/3-AT筛选培养基平板。结果表明,自激活组p GADT7-Rec2/p HIS2-p LFY在TDO/90m M 3-AT培养基上生长被抑制而试验组p GADT7-Rec2-JmSOC1/p HIS2-p LFY能在TDO/90m M 3-AT培养基上正常生长,说明JmSOC1蛋白与JmLFY基因启动子之间具有相互作用。

关键词：胡桃楸成花基因 JmLFY 启动子活性分析

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植物性别分化研究进展

分子植物育种 2022年第14期20卷 4833-4839页

作者：傅靖棋秦柏婷蔡佳友张丽杰沈阳农业大学林学院辽宁省林木遗传育种与培育重点实验室沈阳110866

在自然界中广泛存在着单性植物,不同植物在性别分化过程中形成单性花、两性花,植物的这种性别分化机制在实际生产中具有重要的理论意义和应用价值。有关植物性别分化的研究已成为学者们关注的热点。目前,关于植物性别分化的研究主要集... 详细信息

在自然界中广泛存在着单性植物,不同植物在性别分化过程中形成单性花、两性花,植物的这种性别分化机制在实际生产中具有重要的理论意义和应用价值。有关植物性别分化的研究已成为学者们关注的热点。目前,关于植物性别分化的研究主要集中在形态学、生理生化、细胞学以及分子生物学等方面。在查阅近年来国内外关于植物性别分化相关文献基础上,本研究从植物性别分化的研究目的及意义、形态学、细胞学、生理生化、分子标记、分子生物学以及性别分化的影响因素等方面进行了综述,以期通过对植物性别分化相关研究进行总结,为后期对植物性别分化的研究提供参考。

关键词：性别分化性别鉴定性别决定基因

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胡桃楸不同发育器官内源激素的动态变化

分子植物育种 2022年第15期20卷 5130-5137页

作者：秦柏婷蔡佳友傅靖棋刘春苹张丽杰沈阳农业大学林学院辽宁省林木遗传育种与培育重点实验室沈阳110866

为探讨胡桃楸花芽、叶片及果实中内源激素含量的变化特点,提高胡桃楸坐果率,本试验选取生理分化期的花芽以及形态分化期的叶片和果实,采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定生长素(IAA)、赤霉素(GA)、脱落酸(ABA)、细胞分裂素(CTK)、乙烯(E... 详细信息

为探讨胡桃楸花芽、叶片及果实中内源激素含量的变化特点,提高胡桃楸坐果率,本试验选取生理分化期的花芽以及形态分化期的叶片和果实,采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定生长素(IAA)、赤霉素(GA)、脱落酸(ABA)、细胞分裂素(CTK)、乙烯(ETH)、油菜素内酯(BR)、水杨酸(SA)、茉莉酸(JA)的含量,探讨胡桃楸性别分化过程中内源激素的调控作用。结果表明,两种类型胡桃楸的雌雄花芽中内源激素在生理分化初期各激素含量高低相反,叶片中各内源激素含量在7月初达到峰值,当胡桃楸开始结实,叶片中各激素含量下降;GA和ETH在胡桃楸结实之前含量较低,但在结实之后含量大幅上升。胡桃楸花芽分化过程中高浓度IAA促进开花,但浓度过高则会抑制开花,GA起到抑制成花的作用,SA和JA可能存在协同作用,为结实做准备,调节成花叶片中各激素含量在胡桃楸结实之前不断累积,GA和ETH在果实发育过程中起到关键作用。胡桃楸性别分化过程中主要内源激素的变化特点,可以揭示其调控生理分化期的花芽和叶片及果实的作用,为人工调控花期和坐果率提供理论依据。

关键词：胡桃楸(Juglans mandshurica) 雌雄异型异熟内源激素性别分化

胡桃楸激素调控相关JmDELLA基因克隆与表达分析

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分子植物育种 2021年

作者：范新蕊秦柏婷蔡佳友傅靖棋董天一张丽杰沈阳农业大学林学院辽宁省林木遗传育种与培育重点实验室

为探讨胡桃楸激素调控相关JmDELLA基因在花芽性别分化过程中的调控机理，本研究从胡桃楸转录组测序数据库中筛选出与激素调控相关DELLA基因的差异片段，通过PCR扩增技术获得DELLA基因CDS全长序列，命名为JmDELLA (GneBank登录号: 400411...

为探讨胡桃楸激素调控相关JmDELLA基因在花芽性别分化过程中的调控机理，本研究从胡桃楸转录组测序数据库中筛选出与激素调控相关DELLA基因的差异片段，通过PCR扩增技术获得DELLA基因CDS全长序列，命名为JmDELLA (GneBank登录号: 400411)。并利用生物信息学软件对JmDELLA基因进行生物信息学分析，利用RT-PCR对胡桃楸不同器官组织进行表达分析。克隆获得JmDELLA基因的CDS序列全长为1 842 bp，编码613个氨基酸，将该基因编码的氨基酸序列序列比对和聚类分析，结果表明该基因与核桃(Juglans regia)、薄皮山核桃(Carya illinoinensis)、杨梅(Morella rubra)亲缘关系同源性可以达到80%以上。RT-PCR表达分析表明胡桃楸激素调控相关JmDELLA基因在雌、雄花芽中表达量最高，因此推测该基因参与了胡桃楸花芽性别分化的整个过程。该结果为深入解析胡桃楸雌雄异型异熟性别分化的分子调控机理提供理论依据。

关键词：

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鉴定最重QED原子的新方法

Science Bulletin 2024年第10期69卷 1386-1391页

作者：傅靖航贾森周兴玉张玉洁沈成平苑长征 School of Physics Beihang UniversityBeijing 100083China School of Physics Southeast UniversityNanjing 211189China School of Physics and Electronic Technology Liaoning Normal UniversityDalian 116029China Peng Huanwu Collaborative Center for Research and Education Beihang UniversityBeijing 100191China Key Laboratory of Nuclear Physics and Ion-beam Application(MOE)and Institute of Modern Physics Fudan UniversityShanghai 200443China School of Physics Henan Normal UniversityXinxiang 453007China Institute of High Energy Physics Chinese Academy of SciencesBeijing 100049China University of Chinese Academy of Sciences Beijing 100049China

QED atoms are composed of unstructured and point-like lepton pairs bound together by the electromag-netic *** smallest and heaviest QED atom is formed by a τ^(+)τ^(-)***,the only known atoms of this type are the e^(+)e^(-)and μ^(+)e^(-)atoms,which were discovered 64 years ago and remain the sole examples found thus *** demonstrate that the J_(τ)(τ^(+)τ^(-) atom with J^(PC)=1^(--))atom signal can be observed with a significance larger than 5o including both statistical and systematic uncertainties,*** process e^(+)e^(-)→X^(+)Y^(-)E(X,Y=e,μ,π,K,or ρ,and E is the missing energy due to unobserved neutri-nos)with 1.5 ab^(-1)data taken around the τ pair production *** τ lepton mass can be measured with a precision of 1 keV with the same data *** is within one year's running time of the pro-posed super tau-charm facility in China or super charm-tau factory in Russia.

关键词： QED atom Tau lepton e^(+)e^(-)annihilation STCF SCTF

魔鬼·立人·决断:《摩罗诗力说》与作为留日鲁迅思想方法的复仇话语

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安徽大学学报（哲学社会科学版） 2024年第2期48卷 67-74页

作者：周楷棋中山大学中文系(珠海) 广东珠海519082

“复仇”是《摩罗诗力说》建构“摩罗诗群”的话语线索之一。在阐释《该隐》的部分,鲁迅以一段不属于既有材源的原创言说,塑造了一个不同于拜伦笔下的魔鬼形象,其同时复仇上帝并抵抗民众的背驰行为彰显出留日鲁迅思想探索的深度与矛盾... 详细信息

“复仇”是《摩罗诗力说》建构“摩罗诗群”的话语线索之一。在阐释《该隐》的部分,鲁迅以一段不属于既有材源的原创言说,塑造了一个不同于拜伦笔下的魔鬼形象,其同时复仇上帝并抵抗民众的背驰行为彰显出留日鲁迅思想探索的深度与矛盾。“鲁迅魔鬼”的矛盾背后,蕴含着鲁迅借由“复仇-立人”的思想路径,探索现代主体生成时遭遇的自反性张力。该主体从诞生之始就展现为以现代价值批判自我传统和所在语境的断裂式生成,以及在价值决断的两难中产生的罪感意识。经由《摩罗诗力说》,复仇话语从形象、方法到心理贯穿着彼时的摩罗谱系和“五四”新文化运动以来的启蒙者群像,成为鲁迅主体思想建构的独特方法。

关键词：鲁迅摩罗诗力说复仇魔鬼

晚清跨省实官捐纳运作中的省际利益调适——以光绪庚辛年间“秦晋实官捐输”为中心

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学术研究 2024年第7期 161-170页

作者：黎俊棋暨南大学历史学系广东广州510632

光绪庚辛年间(1900—1901),陕西、山西遭遇了严重的灾荒,两省巡抚为了筹款助赈,会衔奏准跨省举办“秦晋实官捐输”。由于当时户部统筹全国实官捐纳事务的“能力”与“动力”不足,故陕西、山西以及跨省举办“顺直善后振捐”的直隶,一开... 详细信息

光绪庚辛年间(1900—1901),陕西、山西遭遇了严重的灾荒,两省巡抚为了筹款助赈,会衔奏准跨省举办“秦晋实官捐输”。由于当时户部统筹全国实官捐纳事务的“能力”与“动力”不足,故陕西、山西以及跨省举办“顺直善后振捐”的直隶,一开始主要通过督抚内部协商的方式在制度层面调适彼此间的利益分配。但在“本省利益优先”思维的影响下,三省督抚在制度层面达成的利益分配共识屡生变化,陕西与山西之间更是在巡抚人事发生变动后,迟迟不能达成新的共识,最后只能频繁寻求清廷中央介入“秦晋实官捐输”的相关事务。在双方各执一词的情况下,清廷最终决定将两省捐款分配格局维持现状,彰显出部省在特殊历史时期管控利益纠纷,尤其是治国理政方面的严重局限。

关键词：晚清陕西山西跨省实官捐纳

硅烷偶联剂改性聚丙烯纤维水泥基复合材料的性能研究

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硅酸盐通报 2024年第7期43卷 2355-2362,2371页

作者：孙嘉琦刘曦王传林苏芝棋鲁鑫麦靖敏汕头大学土木与智慧建设工程系汕头515063 广东省结构安全与监测工程技术研究中心汕头515063

本文使用不同类型(KH550和KH560)和不同浓度(0.5%、1.0%、1.5%和2.0%,质量分数)的SCA对聚丙烯纤维(PPF)进行表面改性,通过无侧限抗压强度试验和抗折试验,研究了SCA改性聚丙烯纤维水泥基复合材料的承压能力,并使用扫描电子显微镜对改性... 详细信息

本文使用不同类型(KH550和KH560)和不同浓度(0.5%、1.0%、1.5%和2.0%,质量分数)的SCA对聚丙烯纤维(PPF)进行表面改性,通过无侧限抗压强度试验和抗折试验,研究了SCA改性聚丙烯纤维水泥基复合材料的承压能力,并使用扫描电子显微镜对改性后的聚丙烯纤维水泥基复合材料进行了微观表征。结果表明:KH560改性聚丙烯纤维对水泥基复合材料的流动度影响较大,KH550次之;整体上,SCA浓度越接近1.5%,对聚丙烯纤维水泥基复合材料流动度的影响越大;随着KH550浓度增大,水泥基复合材料孔隙率总体呈降低趋势,随着KH560浓度增大,水泥基复合材料孔隙率呈先下降后上升的趋势,并且浓度为1.5%时孔隙率最小;两种SCA均提高了PPF表面的粗糙度,并能在PPF-SCA-基体界面实现化学键连接;两种SCA对聚丙烯纤维水泥基复合材料抗折强度的影响较小,但能有效提高抗压强度。总体而言,KH550改性效果优于KH560。

关键词：硅烷偶联剂聚丙烯纤维水泥基复合材料表面改性力学性能微观结构

柴胡桂枝干姜汤加减治疗肝郁脾虚型功能性消化不良的疗效分析

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世界复合医学 2024年第2期10卷 5-8页

作者：肖东靖傅南琳罗定市中医院内三科广东罗定527200 云浮市中医院广东云浮527300

目的对柴胡桂枝干姜汤加减治疗肝郁脾虚型功能性消化不良的实际效果进行研究。方法方便选取2022年1—12月罗定市中医院收治的64例肝郁脾虚型功能性消化不良患者为研究对象,以随机数表法分为两组,每组32例。对照组接受多潘立酮片等常规... 详细信息

目的对柴胡桂枝干姜汤加减治疗肝郁脾虚型功能性消化不良的实际效果进行研究。方法方便选取2022年1—12月罗定市中医院收治的64例肝郁脾虚型功能性消化不良患者为研究对象,以随机数表法分为两组,每组32例。对照组接受多潘立酮片等常规治疗方法,治疗组在对照组的基础上进行柴胡桂枝干姜汤加减治疗,疗程为4周。比较两组临床疗效、症状积分、功能性消化不良生存质量量表(Functional Digestive Dysfunction Quality of Life Scale,FDDQL)总积分和安全性。结果治疗后,治疗组治疗总有效率为96.88%,高于对照组的75.00%,差异有统计学意义(χ^(2)=6.335,P<0.05)。治疗后,治疗组症状积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组FDDQL积分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组安全性较好,均无不良反应。结论柴胡桂枝干姜汤加减治疗肝郁脾虚型功能性消化不良效果显著。

关键词：柴胡桂枝干姜汤肝郁脾虚证功能性消化不良