检索结果-南通市图书馆

阴道毛滴虫Rac1蛋白的cDNA克隆和序列分析(英文)

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004年第5期22卷 290-293页

作者：傅玉才章家新郑晓虹刘红汕头大学医学院寄生虫学教研室汕头515031

目的　获得阴道毛滴虫Rac1蛋白的cDNA克隆 ,研究其在细胞周期中的调解作用。　方法　提取阴道毛滴虫总RNA ,构建cDNA表达文库 ,随机分离cDNA克隆并测序。用在线生物分析软件NCBIBLAST、ClustalW以及Treeview等程序进行序列分析。　结果... 详细信息

目的　获得阴道毛滴虫Rac1蛋白的cDNA克隆 ,研究其在细胞周期中的调解作用。　方法　提取阴道毛滴虫总RNA ,构建cDNA表达文库 ,随机分离cDNA克隆并测序。用在线生物分析软件NCBIBLAST、ClustalW以及Treeview等程序进行序列分析。　结果　获得一株有 714bp的cDNA克隆。序列分析表明 ,该克隆开放阅读框具 60 0bp ,推测肽链具 2 0 0个氨基酸。该肽链与Rho家族中Rac1鸟苷三磷酸 (GTP)酶同源性最高 (>60 % ) ,并具多种RhoGTP酶的保守基序 ,如GTP结合部位、GTP酶激活蛋白作用基序、GTP分离抑制因子作用基序、鸟嘌呤核苷酸交换因子作用基序等。进化树分析显示该克隆属于Rac亚家族GTP酶 ,与原虫Rac1蛋白最接近。　结论　该克隆属RhoGTP酶的Rac亚家族 ,很可能是阴道毛滴虫的Rac1蛋白。

关键词：阴道毛滴虫 l蛋白 cDNA克隆序列分析 GTP酶作用酶激活肽链 NCBI 生物分析

内分泌因子、生长因子、细胞因子与卵巢卵泡的发育

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第19期11卷 3821-3828页

作者：罗丽莉黄菊傅玉才汕头大学医学院第一附属医院妇产科广东省汕头市515041 汕头大学医学院细胞衰老实验室广东省汕头市515041

目的:探讨内分泌因子、生长因子、细胞因子等因素对卵巢卵泡发育以及凋亡调控机制的研究进展。资料来源:应用计算机检索PubMed数据库1995-01/2006-09关于卵巢卵泡发育和卵泡凋亡研究的文章,检索词“follicular development,follicular a... 详细信息

目的:探讨内分泌因子、生长因子、细胞因子等因素对卵巢卵泡发育以及凋亡调控机制的研究进展。资料来源:应用计算机检索PubMed数据库1995-01/2006-09关于卵巢卵泡发育和卵泡凋亡研究的文章,检索词“follicular development,follicular atresia,oocyte,apoptosis”,限定文章的语言种类为English。资料选择:对资料进行初筛,选取近年发表的关于卵巢卵泡发育和卵泡凋亡的文献,纳入标准:①具有原创性,论点论据可靠的试验文章。②观点明确,分析全面的文章。③文献主体内容与此课题联系紧密的文章。排除标准:实验设计不合理的文章及观点模糊的综述。资料提炼:共检索到225篇关于卵巢卵泡发育和卵泡凋亡研究的文献,最终纳入56篇符合标准的文献。资料综合:哺乳动物卵巢卵泡发育和凋亡过程包括卵母细胞凋亡、原始卵泡形成、原始卵泡发育启动、卵泡发育成熟和卵泡闭锁等阶段。在卵泡腔形成前,卵泡的存亡不依赖于促性腺激素,主要是受各种生长因子和细胞因子的调节;卵泡腔形成后,促性腺激素是卵泡的主要存活因子,它主导卵泡的命运。本文拟对内分泌因子、生长因子、细胞因子等因素对卵巢内生殖细胞和卵泡的存活以及凋亡调控的机制进行综述。结论:在哺乳动物卵巢中,雌性生殖细胞的发育和凋亡是一个复杂的多因素调控过程,除遗传因素外,内分泌因子、生长因子、细胞因子等也起关键性作用。

关键词：卵母细胞,卵泡,凋亡,闭锁综述文献

阴道毛滴虫沉默信息调节因子2同源基因的原核表达载体构建及表达

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2006年第3期24卷 244-246页

作者：张可浩黄丽霞傅玉才章家新温州医学院附属台州医院台州317000 汕头大学医学院汕头515041 厦门市仙岳医院厦门361012

提取阴道毛滴虫(T.vaginalis)LX006细胞株传代培养细胞总RNA,RT-PCR扩增Tv-Sir2-like全长cDNA链,扩增产物连接到T-A克隆载体并转化大肠埃希菌(E.coli)JM109。提取重组克隆质粒,并用限制性内切酶EcoRⅠ和PstⅠ进行双酶切,将目的基因定向... 详细信息

提取阴道毛滴虫(T.vaginalis)LX006细胞株传代培养细胞总RNA,RT-PCR扩增Tv-Sir2-like全长cDNA链,扩增产物连接到T-A克隆载体并转化大肠埃希菌(E.coli)JM109。提取重组克隆质粒,并用限制性内切酶EcoRⅠ和PstⅠ进行双酶切,将目的基因定向克隆到原核表达载体pET-41b,并在E.coliBL21中经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果显示目的基因定向克隆于原核表达质粒pET-41b获得了表达重组子,IPTG诱导该原核表达载体在E.coliBL21中表达相对分子质量(Mr)约为59000的重组融合蛋白,表达量占菌体总蛋白量的30%。

关键词：阴道毛滴虫沉默信息调控因子2 同源基因基因克隆原核表达

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单纯性肥胖的基因调控机制

生命的化学 2008年第3期28卷 248-251页

作者：冯雅卿傅玉才汕头大学医学院细胞衰老实验室汕头515041

单纯性肥胖的产生主要是由于能量摄入超过能量消耗,引起脂肪在细胞内的积累,导致脂肪细胞数目增多、体积增大。能量的摄取与消耗涉及到体内多个代谢调控环节,其中胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)信号通路、哺... 详细信息

单纯性肥胖的产生主要是由于能量摄入超过能量消耗,引起脂肪在细胞内的积累,导致脂肪细胞数目增多、体积增大。能量的摄取与消耗涉及到体内多个代谢调控环节,其中胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)信号通路、哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR信)号通路以及Sirt1信号通路起着关键性作用,它们又可通过影响γ过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)来调控脂肪细胞的分化与形成。

关键词：脂肪细胞分化 γ过氧化物酶体增殖物激活受体哺乳动物雷帕霉素靶蛋白胰岛素样生长因子-1 单纯性肥胖

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Sir2p的酶活性与生物寿命的关系

生命的化学 2004年第3期24卷 208-210页

作者：张可浩傅玉才汕头大学医学院病原微生物学教研室广东515041

Sir2p是近年来新发现的一种依赖NAD+ 的组蛋白脱乙酰基酶 ,它在转录沉默、染色质稳定、双链DNA断裂损伤后的生理修复。

关键词： sir2p 组蛋白脱乙酰基酶转录沉默长寿

阴道毛滴虫RRas同源基因的克隆和序列分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2006年第3期24卷 215-218页

作者：许铭炎傅玉才刘居理张仁利汕头大学医学院寄生虫学教研室汕头515041 深圳市疾病预防控制中心深圳518020

目的克隆和分析阴道毛滴虫RRas同源基因,以探讨其在细胞内信号传导通路中的功能。方法从已构建的阴道毛滴虫cDNA表达文库中分离得到一个与人类RRas同源的cDNA克隆,用PCR扩增该cDNA克隆TvRRas相对应的基因组DNA,并对cDNA克隆及其对应的... 详细信息

目的克隆和分析阴道毛滴虫RRas同源基因,以探讨其在细胞内信号传导通路中的功能。方法从已构建的阴道毛滴虫cDNA表达文库中分离得到一个与人类RRas同源的cDNA克隆,用PCR扩增该cDNA克隆TvRRas相对应的基因组DNA,并对cDNA克隆及其对应的基因组DNA进行测序。利用BLASTP,RPS-BLAST和ClustalW等工具进行序列分析。结果TvRRascDNA序列全长705对碱基,读码框含615对碱基,推测蛋白质序列具205个氨基酸。序列分析显示该基因的基因组DNA序列含有5′端ATG起始密码子和3′端的终止密码子,与cDNA序列完全一致,提示该基因无内含子;进一步分析表明该基因系RRas亚家族的同源基因,其氨基酸序列与人类和小鼠的RRas同源性最高(两者的一致性均为51%,相似性均为70%),同时拥有人类RRas基因高度保守的结合GTP的结构域和完全一致的效应结构域。进化树分析表明该基因与人类的RAS原癌蛋白基因分支及RRas分支聚类。结论获得了阴道毛滴虫RRas同源基因。

关键词：阴道毛滴虫 RRas同源基因基因克隆

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SIRT1与糖尿病

广东医学 2010年第20期31卷 2717-2719页

作者：宋荣华许文灿傅玉才汕头大学医学院第一附属医院内分泌科广东汕头515041 汕头大学医学院病原学教研室广东汕头515041

SIRT2（silent information regulator2）在芽殖酵母（S.cere-vasiae）的基因转录研究中首次被发现,是一种广泛存在于各物种的基因,在转录沉默、染色质稳态、DNA损伤后修复、

关键词： SIRT1 糖尿病基因转录损伤后修复芽殖酵母染色质 DNA

PC12细胞应激损伤中能量限制的效应及SIRT3的表达

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中华医学杂志 2011年第5期91卷 350-354页

作者：李天题李朝晖庄绪莹傅玉才中山大学中山医学院法医系广州510080 汕头大学医学院第一附属医院病理科

目的研究H2O2诱导的PC12细胞氧化应激损伤中,能量限制（CR）及SIRT3参与的调控效应.方法实验分4组：H2O2组,H2O2＋CR组,CR组和正常对照组 MTT法检测不同浓度H2O2作用下CR对细胞生存率的影响 TUNEL染色法检测过氧化氢作用后CR对细胞的... 详细信息

目的研究H2O2诱导的PC12细胞氧化应激损伤中,能量限制（CR）及SIRT3参与的调控效应.方法实验分4组：H2O2组,H2O2＋CR组,CR组和正常对照组 MTT法检测不同浓度H2O2作用下CR对细胞生存率的影响 TUNEL染色法检测过氧化氢作用后CR对细胞的凋亡的影响免疫荧光检测PC12细胞中SIRT3的表达定位 RT-PCR及Western印迹检测SIRT3、Caspase-3的表达变化.结果 60μmol/L H2O2作用6 h后,H2O2组细胞生存率（74.01±2.21）%可维持在70%以上,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05） 120μmol/L H2O2作用下,H2O2组的细胞活力显著下降（38.22±3.34）%,后续研究选取60μmol/L H2O2浓度作为应激源 60μmol/L H2O2作用6 h后H2O2组细胞生存率（74.01±2.21）%与CR＋H2O2组（97.26±1.92）%间比较差异有统计学意义（P＜0.05）.TUNEL凋亡检测H2O2＋CR组凋亡率较H2O2组显著降低.免疫荧光双染色证实PC12细胞中SIRT3为一种线粒体蛋白.Western印迹显示与正常对照组（5256±144）比较,CR组中SIRT3表达升高（6857±157）,差异有统计学意义（P＜0.05）、H2O2组中表达降低（3786±160）,差异有统计学意义（P＜0.05）.与H2O2组（3786±160）比较,CR＋H2O2组中SIRT3表达上升（5056±121）,差异有统计学意义（P＜0.05）.与正常对照组比较（5342±420）,H2O2组中Caspase-3表达升高（8499±426）,差异有统计学意义（P＜0.001）.CR＋H2O2组（5750±438）中Caspase-3表达较H2O2组表达下降（8499±426）,差异有统计学意义（P＜0.001）.RT-PCR显示与正常对照组（6204±134）比较,CR组（7214±148）中SIRT3表达升高,差异有统计学意义（P＜0.05）、H2O2组中表达降低（4807±143）,差异有统计学意义（P＜0.05）.与H2O2组（4807±143）比较,CR＋H2O2组中SIRT3表达上升（6195±166）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 PC12细胞中,CR具有抗氧化应激损伤及凋亡的效应 CR可上调PC12细胞中SIRT3的表达,在H2O2诱导的PC12应激损伤中CR-SIRT3的调控具有保护效应,SIRT3是否具有延缓神经元衰老作用值得进一步研究.

关键词：氧化性应激 PC12细胞过氧化氢热量限制

PKC介导凝血酶诱导人肺成纤维细胞单核细胞趋化蛋白-1的表达

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南方医科大学学报 2012年第9期32卷 1250-1254页

作者：袁超许铭炎陈耿臻傅玉才邓小玲汕头大学医学院细胞生物与遗传学教研室广东汕头515041 汕头大学医学院细胞衰老实验室广东汕头515041 汕头大学医学院第二附属医院口腔科广东汕头515041 汕头大学医学院第二附属医院普外科广东汕头515041

目的研究蛋白激酶C(PKC)在凝血酶诱导人肺成纤维细胞(HLF-1)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达信号通路中的作用。方法分别用几种不同类型的PKC抑制剂预处理HLF-1,再用凝血酶(10 nmol/L)刺激HLF-1,利用ELISA法检测上清液中MCP-1的蛋白表达... 详细信息

目的研究蛋白激酶C(PKC)在凝血酶诱导人肺成纤维细胞(HLF-1)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达信号通路中的作用。方法分别用几种不同类型的PKC抑制剂预处理HLF-1,再用凝血酶(10 nmol/L)刺激HLF-1,利用ELISA法检测上清液中MCP-1的蛋白表达;提取细胞裂解液中总RNA并逆转录合成cDNA,利用实时荧光定量PCR检测MCP-1 mRNA表达水平。结果广谱型PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I和RO-31-8220可抑制凝血酶诱导的HLF-1 MCP-1蛋白释放及mRNA表达,而Ca2+依赖性PKC抑制剂G 6976则没有抑制效果。结论非Ca2+依赖性PKC介导凝血酶诱导HLF-1释放MCP-1。

关键词：凝血酶蛋白激酶C抑制剂单核细胞趋化蛋白-1 人肺成纤维细胞