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白藜芦醇抑制小鼠脊髓损伤铁死亡的实验研究

白藜芦醇抑制小鼠脊髓损伤铁死亡的实验研究

作者：倪成涛蚌埠医学院

学位级别：硕士

目的(1)建立小鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型,探究小鼠SCI后病灶区脊髓铁死亡的表现以及时间点。(2)探究白藜芦醇(resveratrol,Res)对SCI小鼠神经元铁死亡及运动功能恢复的影响。(3)探究白藜芦醇抑制SCI后铁死亡的机制。方法... 详细信息

目的(1)建立小鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型,探究小鼠SCI后病灶区脊髓铁死亡的表现以及时间点。(2)探究白藜芦醇(resveratrol,Res)对SCI小鼠神经元铁死亡及运动功能恢复的影响。(3)探究白藜芦醇抑制SCI后铁死亡的机制。方法(1)通过脊髓精密打击器(RWD68099II)建立c57小鼠T10段SCI模型,并随机分为6组,包括sham组,SCI-1d组,SCI-3d组,SCI-5d组,SCI-7d组,SCI-14d组。利用蛋白印迹分析(Westernbloting,WB)技术检测各组病灶区脊髓中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4),溶质载体家族7成员11(xCT),铁转运蛋白(FPN),铁蛋白重链1(FTH1)以及酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)等铁死亡相关蛋白的表达水平;通过普鲁士蓝DAB(diaminobenzidine)加强染色检测各组病灶区脊髓铁离子的表达水平。(2)将小鼠随机分为4组,分别是假手术组(sham组),SCI组,SCI+溶剂组(SCI+V 组),SCI+Res(200mg/kg)组。利用 Basso Mouse Scale score(BMS评分)和足迹分析评定各组小鼠后肢运动功能的恢复情况;通过苏木精伊红(hematoxylin eosin,HE)染色观察损伤段脊髓形态的变化;通过尼式(Nissl)染色及免疫荧光(Immunofluorescence,IF)染色观察损伤段脊髓正常和变性神经元的表达情况。利用WB检测各组脊髓铁死亡相关蛋白的表达情况。通过试剂盒检测各组病灶区脊髓中谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量、GPX4活性的水平和二价铁离子(Fe2+)的浓度。通过透射电镜观察病灶区脊髓神经元细胞及其线粒体形态。通过普鲁士蓝DAB加强染色检测各组脊髓病灶区神经元铁离子的沉积情况。(3)将小鼠随机分为2组,分别是SCI+Res组和SCI+Res+ML385组(核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂)(30mg/kg)。利用WB检测Nrf2/GPX4通路相关蛋白的表达情况。结果(1)WB结果显示,和sham组相比,xCT和GPX4的表达在损伤后呈下降趋势,于第3天显著降低(p<0.01),随后有不同程度的升高。ACSL4在损伤后表达降低,随后于第3天显著增加(p<0.01),达到高峰。FTHI的表达在损伤后呈上升趋势,并在第5天显著增加(p<0.01)。损伤后各时间点FPN的表达都显著降低(p<0.01)。普鲁士蓝染色结果显示,与sham组相比,损伤后各时间点脊髓病灶区神经元铁离子的沉积情况都有不同程度的升高,于第3天达到高峰(p<0.01),随后呈下降趋势。(2)BMS评分结果显示,SCI后14,21,28,35天,SCI+Res治疗组评分明显高于SCI+V组(p<0.05)。损伤后第35天进行足迹测试。结果显示,与SCI和SCI+溶剂组小鼠相比,Res治疗小鼠的步态恢复和运动协调能力得到显著改善(p<0.01)。(3)HE染色结果显示,Res减轻损伤后病灶区的病理性形态改变。Nissl染色显示,与SCI组相比,Res可以保留更多存活的神经元(p<0.01)。FJC染色结果显示,SCI3d后病灶区变性的神经元表达最多(p<0.05),与SCI+V组相比,Res可以抑制神经元变性(p<0.05)。正结果显示,Res抑制了神经元的死亡(p<0.05)。(4)透射电镜观察显示,SCI后线粒体皱缩,线粒体嵴减少,而Res明显改善线粒体的形态。(5)普鲁士蓝DAB加强染色显示,SCI后病灶区出现病理性的褐色铁离子,用Res干预后,明显降低了铁离子的沉积情况(p<0.05)。铁离子试剂盒检测损伤段脊髓铁离子表达情况,结果显示,与SCI+V组相比,Res降低铁离子的表达(p<0.05)。同时,Res还可以降低MDA的表达,促进GPX4的活性和GSH的表达。(6)WB结果显示,与SCI+V组相比,Res干预后上调了 GPX4,xCT,FPN,FTH1等铁死亡相关蛋白的表达,并在使用Nrf2特异性抑制剂ML385后抑制了 Res的上调效应(p<0,05)。结论(1)小鼠SCI早期即出现神经元细胞铁死亡现象,并在第三天达到高峰。(2)Res可以改善小鼠SCI后病灶区脊髓神经元铁的沉积,并且促进SCI后神经及运动功能的恢复。(3)Res可能通过Nrf2/GPX4通路抑制神经元铁死亡,减轻SCI继发性损伤,促进功能恢复。

关键词：脊髓损伤白藜芦醇铁死亡 Nrf2/GPX4通路

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涂料防活性印花助剂及工艺探讨

涂料防活性印花助剂及工艺探讨

2004’国际涂料应用和特种印花学术交流会

作者：倪成涛丹东恒星精细化工有限公司

介绍涂料防活性染料印花的耐酸糊料和粘合剂的选择及其应用

关键词：涂料防印耐酸糊料耐酸粘合剂

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水性PU/PA复合核/壳乳液合成与应用

印染 2007年第8期33卷 27-28页

作者：仇凯杨青倪成涛李刚丹东恒星精细化工有限公司辽宁丹东118003 辽东学院实验中心辽宁丹东118003

介绍了水性聚氨酯(PU)/聚丙烯酸酯(PA)复合核/壳乳液的合成方法和制备工艺,阐述了PUA在纺织品涂层中的应用性能。将合成的水性聚氨酯/聚丙烯酸酯复合核/壳乳液应用于纺织品涂层,其性能优于单一的聚氨酯乳液和聚丙烯酸乳液,且性价比高于... 详细信息

介绍了水性聚氨酯(PU)/聚丙烯酸酯(PA)复合核/壳乳液的合成方法和制备工艺,阐述了PUA在纺织品涂层中的应用性能。将合成的水性聚氨酯/聚丙烯酸酯复合核/壳乳液应用于纺织品涂层,其性能优于单一的聚氨酯乳液和聚丙烯酸乳液,且性价比高于普通乳液20%。

关键词：涂层整理整理剂乳化液聚氨酯聚丙烯酸酯

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防泳移剂FS-603的合成与应用

印染 2006年第10期32卷 37-38页

作者：倪成涛周明孙继昌丹东恒星精细化工有限公司辽宁丹东118003

采用马来酸酐、丙烯酰胺等合成的用于涂料轧染的防泳移剂FS-603,具有乳化、分散、匀染和增染作用。由于其能在织物上形成厚度均匀的不连续薄膜,从而减少了高温烘干时涂料的泳移,染色织物具有较好的耐洗和耐摩擦牢度,以及匀染遮盖作用。

关键词：轧染涂料防泳移剂

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特种印花及整理在灯芯绒产品上的应用

染整科技 2003年第6期 27-32页

作者：倪成涛刘凤兰丹东恒星精细化工有限公司118003

介绍了我公司十六种特种印花及整理剂在灯芯绒产品上的应用，为印染行业提高产品附加值提供了可操作的条件。

关键词：特种印花整理剂灯芯绒整理加工应用烂花印花霜花印花

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涂料防活性印花助剂及工艺探讨

染整科技 2005年第3期 38-39页

作者：樊丽辉倪成涛沈阳化工学院，110142 丹东恒星精细化工有限公司，118003

对涂料防活性印花的酸性防印工艺，重点介绍了耐酸糊料和耐酸粘合剂选择的技术要求．并还介绍了应用工艺。

关键词：工艺探讨印花助剂涂料活性印花应用工艺技术要求耐酸糊料粘合剂防印

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特种印花及整理在灯芯绒产品上的应用

特种印花及整理在灯芯绒产品上的应用

2003年全国灯芯绒、卡其染整技术和发展交流会

作者：倪成涛刘凤兰丹东恒星精细化工有限公司

介绍了十六种特种印花及整理在灯芯绒产品上的应用,为提高附加值提供了条件。

关键词：灯芯绒织物整理剂增稠剂涂料印花特种印花活性染料印花

来源： cnki会议评论

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高牢度皮革涂饰剂FS-001的研制

皮革与化工 2011年第5期28卷 12-14页

作者：倪成涛杨文堂辽宁恒星精细化工有限公司辽宁丹东118003

介绍了一种乳液聚合方法。通过种子乳液聚合,调整单体比例,引发剂和乳化剂的品种及数量,确定当丙烯酸丁酯和苯乙烯占单体总量的90%～94%,功能单体N-羟甲基丙烯酰胺和丙烯酸羟乙酯占单体总量的2.5%～4.5%,引发剂用量占单体重量的0.9%,阴... 详细信息

介绍了一种乳液聚合方法。通过种子乳液聚合,调整单体比例,引发剂和乳化剂的品种及数量,确定当丙烯酸丁酯和苯乙烯占单体总量的90%～94%,功能单体N-羟甲基丙烯酰胺和丙烯酸羟乙酯占单体总量的2.5%～4.5%,引发剂用量占单体重量的0.9%,阴、非离子乳化剂比例为1∶3,乳化剂总量为单体总量2%,丙烯酸用量为单体总量的3%～4%时,合成的皮革涂饰剂FS-001牢度高,手感好,柔软丰满,具有良好的市场应用前景。

关键词：皮革涂饰剂乳液聚合种子乳液

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环保柔软型印花增稠剂的合成与应用

染整技术 2005年第10期27卷 35-37页

作者：周明倪成涛姜武丹东恒星精细化工有限公司辽宁丹东118002 辽东学院辽宁丹东118000

介绍合成柔软型增稠剂方法、反应单体、乳化剂、有机溶剂、交联单体的选择以及合成工艺。利用涂料印花助剂及工艺,可达到染料印花的手感和得色效果,以适应纺织品印花市场的高效、环保要求。

关键词：印花环保手感得色