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小鼠脐血联合骨髓c-kit(+)细胞移植加快造血重建的研究

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中国实验血液学杂志 2011年第2期19卷 416-421页

作者：袁颖华李静俞夜花石军上海交通大学附属第六人民医院血液科上海200233

本研究探讨小鼠脐血与骨髓造血祖细胞联合移植以加快移植后早期造血重建作用,并达到脐血来源细胞长期嵌合的程度。采用MACS间接免疫分选法纯化BDF1小鼠骨髓中lin-sca-1-c-kit+(c-kit+)及lin-sca-1+(sca-1+)细胞群,用半固体集落培养结合... 详细信息

本研究探讨小鼠脐血与骨髓造血祖细胞联合移植以加快移植后早期造血重建作用,并达到脐血来源细胞长期嵌合的程度。采用MACS间接免疫分选法纯化BDF1小鼠骨髓中lin-sca-1-c-kit+(c-kit+)及lin-sca-1+(sca-1+)细胞群,用半固体集落培养结合细胞形态学方法比较二者的体外生物学特性。将60Coγ射线照射的BDF1小鼠(CD45.2)作为受体鼠;接受来自同基因小鼠(CD45.1)骨髓c-kit+细胞群与DBA/2新生小鼠外周血(NPB)的联合移植作为实验组,以NPB干细胞单独移植以及其与sca-1+细胞的联合移植作为对照组,比较移植后22天内的白细胞及血小板变化。用流式细胞术检测移植60周内受鼠外周血粒细胞、T细胞、B细胞中供、受鼠来源细胞比例的动态变化。结果显示:①与sca-1+细胞比较,c-kit+细胞胞体大,胞浆多,核仁明显,其体外集落体积明显小于sca-1+组,未见高增殖潜能集落(HPP)形成;②与NPB干细胞单独移植比较,当NPB干细胞与1×104、2.5×104或5×104细胞量的c-kit+或sca-1+细胞联合移植时,可使白细胞>1×109/L及血小板>100×109/L所需恢复时间从17天提前至12天;③联合c-kit+细胞的移植实验组至移植后60周时脐血来源粒细胞、B细胞和T细胞分别为(96.68±2.68)%、(92.55±3.04)%和(67.96±7.91)%,比第2周时有明显增加(p<0.01),与此相反,联合sca-1+细胞的移植对照组来自同基因供髓和残髓的细胞逐渐增多,而脐血来源细胞逐渐减少,至移植后60周时,脐血来源的粒细胞,B细胞和T细胞仅占(28.46±18.98)%、(17.75±13.17)%、(6.19±7.62)%,比第2周时明显减少(p<0.01)。结论:脐血与受鼠同基因骨髓c-kit+细胞联合移植可加快移植后早期造血恢复,并达到粒细胞、B细胞、T细胞中脐血来源细胞的长期完全或主要嵌合。

关键词：脐血移植骨髓造血祖细胞混合移植造血重建

急性髓系白血病缓解期骨髓中“ALIP”样结构与纤维增生的相关性分析

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中国实验血液学杂志 2014年第1期22卷 40-43页

作者：章菁俞夜花吴振添翟元梅王慧刘四红陶英石军苏州大学医学部江苏苏州215123 上海交通大学附属第六人民医院血液科上海200233

本研究探讨急性髓系白血病(AML)化疗后缓解期骨髓中幼稚前体细胞异常定位(abnormal location of immature precursor,ALIP)样结构及纤维增生在预后评估中的作用及二者的相关性。观察47例AML患者从初发到复发前或随访终止前不同时间点采... 详细信息

本研究探讨急性髓系白血病(AML)化疗后缓解期骨髓中幼稚前体细胞异常定位(abnormal location of immature precursor,ALIP)样结构及纤维增生在预后评估中的作用及二者的相关性。观察47例AML患者从初发到复发前或随访终止前不同时间点采集的骨髓切片132张,以终末是否复发分为复发前组及未复发组,比较单位面积内"ALIP"样结构数量和网硬蛋白纤维化强度(reticalin fiber density,RFD)在两组间的差异;用统计学方法分析二者对AML预后评估作用及二者间的相关性。结果表明:复发前组患者缓解期间"ALIP"样结构数量为3.46±2.71簇/mm2,初发时RFD为2.76%±1.50%,均明显高于未复发组(P4簇/mm2或RFD>1.68%者复发率分别高达89.5%及95.2%;"ALIP"样结构>4簇/mm2者初发时骨髓RFD为2.47%±2.48%,与"ALIP"样结构≤4簇/mm2者相比无统计学意义(P>0.05);同时"ALIP"样结构数量和对应时间点的骨髓RFD间相关系数r=0.057,亦无统计学差异(P>0.05)。结论:AML患者骨髓"ALIP"样结构及RFD同为AML早期复发的不良预后因素,但二者间并无相关性,表明"ALIP"样结构的形成不依赖于骨髓纤维增生。

关键词：急性髓系白血病 “ALIP”样结构纤维增生

硼替佐米联合毛喉素诱导硼替佐米耐药骨髓瘤细胞凋亡的实验研究

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中国癌症杂志 2016年第9期26卷 784-789页

作者：王莹莹钟瑶俞夜花唐勇杭海芳朱琦上海交通大学医学院附属第九人民医院血液内科上海200011

背景与目的:硼替佐米作为蛋白酶体抑制剂已成为新诊断和复发多发性骨髓瘤患者临床治疗的主要药物,但仍有部分患者对硼替佐米产生耐药而影响其长期生存。近年来研究发现,提高细胞内环腺苷酸浓度可以诱导骨髓瘤细胞凋亡并延缓其生长,成为... 详细信息

背景与目的:硼替佐米作为蛋白酶体抑制剂已成为新诊断和复发多发性骨髓瘤患者临床治疗的主要药物,但仍有部分患者对硼替佐米产生耐药而影响其长期生存。近年来研究发现,提高细胞内环腺苷酸浓度可以诱导骨髓瘤细胞凋亡并延缓其生长,成为骨髓瘤治疗新途径。该研究通过观察硼替佐米联合腺苷酸环化酶激动剂毛喉素(forskolin)对硼替佐米耐药骨髓瘤细胞的作用,探究克服骨髓瘤耐药的可能途径及其机制。方法:以硼替佐米耐药骨髓瘤细胞株H929-R和原代细胞为模型,通过观察细胞生长、形态、凋亡相关基因的改变来研究硼替佐米、毛喉素单独或联合处理对硼替佐米耐药细胞增殖及凋亡的影响;并应用Rh123/PI双染法检测药物处理前后细胞内线粒体跨膜电位的变化;同时采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测线粒体凋亡相关基因转录水平及抗凋亡基因Bcl-2和Mcl-1的蛋白水平的改变。结果:硼替佐米(20 nmol/L)与毛喉素(50 nmol/L)能够协同诱导硼替佐米耐药细胞凋亡。进一步研究发现,毛喉素可协同硼替佐米促使耐药细胞内线粒体跨膜电位下降并下调其Bcl-2和Mcl-1蛋白的表达。结论:毛喉素联合硼替佐米能够诱导硼替佐米耐药骨髓瘤细胞凋亡。

关键词：毛喉素硼替佐米骨髓瘤细胞凋亡

口腔颌面部弥漫大B细胞淋巴瘤的临床特征及预后分析

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临床血液学杂志 2023年第3期36卷 188-193页

作者：俞夜花杭海芳庞淯阳路伟刘佳佳石军上海交通大学医学院附属第九人民医院血液内科上海200023

目的:分析口腔颌面部弥漫大B细胞淋巴瘤(OC-MR DLBCL)患者临床特征,探讨其预后及可能影响因素。方法:回顾性收集2015年1月—2022年3月收治的60例OC-MR DLBCL患者临床资料,并与67例非OC-MR DLBCL患者进行比较。Kaplan-Meier法计算生存率,... 详细信息

目的:分析口腔颌面部弥漫大B细胞淋巴瘤(OC-MR DLBCL)患者临床特征,探讨其预后及可能影响因素。方法:回顾性收集2015年1月—2022年3月收治的60例OC-MR DLBCL患者临床资料,并与67例非OC-MR DLBCL患者进行比较。Kaplan-Meier法计算生存率,log-rank检验和Cox回归模型进行单因素及多因素生存预后分析。结果:60例OC-MR DLBCL患者中,男41例,女19例,中位年龄64岁;non-GCB型占71.4%,Ann ArborⅠ/Ⅱ期占58.3%,60.0%患者属于IPI评分(0~2分)低危组。OC-MR DLBCL与非OC-MR DLBCL患者比较,性别、年龄及Hans分类分布差异无统计学意义,但Ⅲ/Ⅳ期及IPI高危患者占比均较低(P0.05)。生存分析显示IPI评分高危及起病于非韦氏环的OC-MR DLBCL患者预后不良,IPI是影响OS及PFS的独立预后因素(P0.05)。结论:OC-MR DLBCL患者有特异性临床特征,多数处于早期及低危状态,整体预后不优于非OC-MR DLBCL。IPI及不同起病部位是影响OC-MR DLBCL预后的重要因素。

关键词：口腔颌面部弥漫大B细胞淋巴瘤韦氏环预后

长、短疗程口服抗病毒药预防急性髓系白血病患者乙型肝炎病毒再激活的观察研究

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中国癌症杂志 2017年第12期27卷 964-969页

作者：庄衍唐勇俞夜花杭海芳叶为德刘隽上海交通大学医学院附属第九人民医院血液内科上海200011

背景与目的:乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)再激活是急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)合并HBV感染的患者接受诱导和巩固化疗期间严重并发症之一,核苷类抗HBV药物(包括拉米夫定和恩替卡韦等)已成为预防和抢先治疗HBV再... 详细信息

背景与目的:乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)再激活是急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)合并HBV感染的患者接受诱导和巩固化疗期间严重并发症之一,核苷类抗HBV药物(包括拉米夫定和恩替卡韦等)已成为预防和抢先治疗HBV再激活主要抗病毒药物。该研究观察并探究AML合并HBV感染患者化疗前后长疗程和短疗程口服核苷类抗HBV药物预防病毒再激活的临床疗效和安全性。方法:回顾性分析29例AML合并HBV感染并接受至少4个疗程化疗患者的临床资料。根据患者口服核苷类抗HBV药物预防治疗前HBV表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBs Ag)含量以及抗HBV药物持续服用时间分为4个亚组,系统分析和比较不同亚组患者HBV再激活情况和药物不良反应。结果:长疗程预防(long course prophylaxis group,LCP)组,即口服抗HBV药物持续至化疗结束后6个月以上,该组患者的HBV再激活率和HBV相关性肝炎发生率分别为5.56%(1/18)和0%(0/18),明显低于短疗程预防(short course prophylaxis group,SCP)组患者(即口服抗HBV药物持续至化疗结束后1个月以内)的45.45%(5/11)和36.36%(4/11),差异有统计学意义(P=0.018和P=0.014),而LCP和SCP组患者的HBV原发耐药率分别为11.11%(2/18)和9.09%(1/11),差异无统计学意义(P>0.05)。进一步亚组分析显示,预防治疗前HBs Ag阳性患者(HBs Ag大于等于0.05 IU/m L)经长疗程预防,其HBV再激活率和HBV相关性肝炎发生率分别为8.33%(1/12)和0%(0/12),明显低于SCP组,66.67%(4/6)和66.67%(4/6),差异有统计学意义(P=0.022和P=0.005);同时,LCP和SCP组中HBs Ag(+)患者的HBV原发耐药率分别为8.33%(1/12)和16.67%(1/6),差异无统计学意义(P>0.05)。此外,LCP组中HBs Ag阴性患者(HBs Ag小于0.05 IU/m L)的HBV再激活率、肝炎发生率和原发耐药率与SCP组中HBs Ag(-)患者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。LCP和SCP组患者均未发生3级以上药物毒性反应。结论:长疗程口服核苷类抗HBV药物是降低AML合并HBs Ag(+)感染患者化疗后病毒再激活以及病毒相关事件发生率有效而且安全性良好的预防治疗方案。

关键词：急性髓系白血病乙型肝炎病毒再激活预防性抗病毒治疗

AML骨髓“前ALIP”样结构数量及其与骨小梁距离对白血病复发的影响

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中国实验血液学杂志 2012年第2期20卷 242-245页

作者：俞夜花章菁吴振添袁颖华翟元梅陶英侯健石军上海交通大学附属第六人民医院血液科上海200233 第二军医大学附属长征医院血液科上海200003

本研究通过急性髓系白血病(AML)患者完全缓解(CR)期骨髓"前ALIP"样结构定位、定量异常的检测,探讨其与AML复发的相关性。对62例骨髓涂片示CR的患者骨髓活检塑料切片进行回顾性分析及预后随访,依据预后将其分为复发前组及未复发组。计算... 详细信息

本研究通过急性髓系白血病(AML)患者完全缓解(CR)期骨髓"前ALIP"样结构定位、定量异常的检测,探讨其与AML复发的相关性。对62例骨髓涂片示CR的患者骨髓活检塑料切片进行回顾性分析及预后随访,依据预后将其分为复发前组及未复发组。计算骨髓塑料切片每平方毫米内单个、两个聚集前体细胞数量及二者的总和,结合计算机图像分割法测量其与骨小梁间的精确距离,明确"前ALIP"样结构定位、定量异常与复发的相关性。结果表明:复发前组及未复发组骨髓"前ALIP"样结构数量分别为11±11.71和8.33±9.17个/mm2,均明显高于正常对照组(5.29±4.00)(P<0.01)。在"前ALIP"数量≥11个/mm2的17例患者中,复发前组12例,占70.6%,明显高于未复发组(29.4%,P<0.05);而复发前组"前ALIP"与骨小梁的相对距离为(341.31±266.16)μm,明显远于未复发组(242.41±174.65)μm(P<0.01),有向骨小梁间区迁移的趋势。在前"ALIP"与骨小梁之间平均距离≥341μm的18名患者中,复发前组14例,占77.8%,明显高于未复发组(P<0.01)。结论:AML患者CR期骨髓切片中"前ALIP"样结构平均数量超过11个/mm2或其与骨小梁间的平均距离超过341μm,预示AML可能早期复发,应及时进行再诱导缓解治疗。

关键词：急性髓系白血病前ALIP样结构骨小梁白血病复发

急性髓系白血病骨髓“前ALIP”样结构的特征研究

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中国实验血液学杂志 2011年第5期19卷 1166-1170页

作者：俞夜花袁颖华李玲曹桂涛李静陶英姜华侯健石军上海交通大学附属第六人民医院血液科上海200233 华东师范大学软件学院上海200062 第二军医大学附属长征医院血液科上海200003

本研究提出骨髓组织"前ALIP"样结构的概念,采用计算机图像处理技术研究其特征,并探讨其与急性髓系白血病(AML)的相关性。以抽吸-活检一步取材法采集化疗后完全缓解(CR)的AML患者骨髓,常规方法制作骨髓病理切片、光学显微镜成像系统摄片... 详细信息

本研究提出骨髓组织"前ALIP"样结构的概念,采用计算机图像处理技术研究其特征,并探讨其与急性髓系白血病(AML)的相关性。以抽吸-活检一步取材法采集化疗后完全缓解(CR)的AML患者骨髓,常规方法制作骨髓病理切片、光学显微镜成像系统摄片;比较4种计算机图像分割技术,筛选最佳方法对前体细胞进行识别、定位;结合形态学及面积法分割骨小梁;计算AML患者骨髓图像中单个及2个聚集前体细胞数量并以欧式距离变换法检测其与骨小梁的相对距离,与正常骨髓比较;分析在ALIP出现之前前体细胞定位、定量异常与AML的关系,探讨"前ALIP"的结构特征。结果表明,与8-sobel算子、canny算子、分水岭法相比,本研究创建的基于形态学的计算机图像分割方法能准确识别骨髓切片中前体细胞,同时结合面积法实现了骨小梁的分割。检测CR组骨髓切片中单个前体细胞为(19.27±11.60)个/mm2,2个聚集前体细胞为(1.77±1.76)簇/mm2,均明显高于正常对照组(p0.05),但与CR组单个前体细胞相比明显向骨小梁间区迁移(p<0.05)。结论:前体细胞从正常定位、定量到ALIP1结构出现之前存在更早期的骨髓异常状态,即"前ALIP"状态,其结构特征为定位或定量异常的单个及2个聚集前体细胞。

关键词：急性髓系白血病 “前ALIP”样结构计算机图像识别

上海多家三甲医院中性粒细胞缺乏伴发热淋巴瘤患者病原菌分布及耐药性分析

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复旦学报（医学版） 2019年第2期46卷 199-204,216页

作者：励菁菁朱琦王椿胡炯陈芳源施菊妹郝思国刘澎俞夜花上海交通大学医学院附属第九人民医院血液科上海200011 上海交通大学附属第一人民医院血液科上海200080 上海交通大学医学院附属瑞金医院血液科上海200025 上海交通大学医学院附属仁济医院血液科上海200127 同济大学附属第十人民医院血液科上海200072 上海交通大学医学院附属新华医院血液科上海200092 复旦大学附属中山医院血液科上海200032

目的探讨中性粒细胞缺乏(粒缺)伴发热淋巴瘤患者致病菌的分布及其耐药现状,为临床有效控制感染和合理选用抗生素提供依据。方法回顾性分析2012年1月至2014年12月上海12家三甲医院血液科收治的粒缺伴发热淋巴瘤患者的病原菌分布及药敏特... 详细信息

目的探讨中性粒细胞缺乏(粒缺)伴发热淋巴瘤患者致病菌的分布及其耐药现状,为临床有效控制感染和合理选用抗生素提供依据。方法回顾性分析2012年1月至2014年12月上海12家三甲医院血液科收治的粒缺伴发热淋巴瘤患者的病原菌分布及药敏特点。结果 108株临床分离菌中革兰阴性(G^-)菌67株,占62.04%;革兰阳性(G^+)菌41株,占37.96%。G^-菌中肠杆菌科细菌最多,占全部致病菌的34.26%(37株);G^+菌中葡萄球菌属最多,占全部致病菌的24.07%(26株)。所有致病菌感染部位以呼吸道分布最多,共60株,占所有标本的55.56%,其次为伤口分泌物19株(17.59%)、导管12株(11.11%)、血液10株(9.26%)、其他标本7株(6.48%)。呼吸道分泌物培养出的菌株以肺炎克雷伯杆菌居多,伤口标本则为产酸克雷伯杆菌,导管以大肠埃希菌多见,而血液标本则以葡萄球菌感染为主。G^+菌对青霉素、红霉素、左氧氟沙星、头孢菌素及庆大霉素类抗生素均不同程度耐药,但对磷霉素、万古霉素、替考拉宁及利奈唑胺敏感度可达92.9%～100%。G^-菌对部分青霉素及头孢菌素类抗生素耐药率较高之外,对阿米卡星、美罗培南、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦等抗生素均较敏感。结论粒缺伴发热淋巴瘤患者致病菌仍以G^-菌为主,分布较为广泛,多药耐药情况严重。利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁等仍可作为G^+菌感染的经验性用药;亚胺培南、美罗培南、阿米卡星等可作为G^-菌感染的用药选择。

关键词：淋巴瘤中性粒细胞减少发热细菌耐药性

Recognition of Red Cell and Megakaryocyte Based L-Shaped Envelope Function

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Journal of Shanghai Jiaotong university(Science) 2012年第6期17卷 755-760页

作者：俞夜花郑西涛张永伟杨堃章菁石军 Department of Hematology Shanghai Sixth People's Hospital Affiliated to Shanghai Jiaotong University College of Information Technology Shanghai Ocean University

In order to explore the cell composition and its metabolism,it is important to let computer recognize the cells and get the counts of different cells for a sample.This paper proposes an L-shaped envelop function and the related fuzzy clustering method as a way to identify the megakaryocyte and the red cell from the sliced marrow image.This method is useful when the staining is insufficient and the color cannot be used as the identifying factor.This method uses the experimental histogram data to fit the L-shaped function and then use it as the envelop for the match test.The fuzzy c-means(FCM) performance index is used to test the adjacent area and get the minimum and finally secure the identification.The new method is not limited to megakaryocyte or red cell and can be used for general purposes of cell recognition.Tests show that this envelop function can ensure the recognition rate with different staining batches and can reach satisfied counting under similar illumination condition.

关键词：模式识别计算机图像识别理论