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辛伐他汀纳米粒对脂多糖刺激的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

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辛伐他汀纳米粒对脂多糖刺激的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

作者：俞国峰浙江大学

学位级别：硕士

目的：初步尝试辛伐他汀纳米粒的制备,研究其理化性质,并探讨其对脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)刺激的体外培养的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响。方法：(1)采用溶剂扩散法方法制备辛伐他汀纳米粒,粒度与Zeta电位分析仪测定纳米粒粒径... 详细信息

目的：初步尝试辛伐他汀纳米粒的制备,研究其理化性质,并探讨其对脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)刺激的体外培养的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响。方法：(1)采用溶剂扩散法方法制备辛伐他汀纳米粒,粒度与Zeta电位分析仪测定纳米粒粒径,以高效液相色谱法测定药物包封率和载药量。(2)采用胰酶消化法进行人脐静脉内皮细胞的培养,以免疫组化法对内皮细胞进行鉴定。(3)通过LPS刺激脐静脉内皮细胞制造脓毒症细胞模型,分为空白对照组,LPS组,辛伐他汀静脉制剂组(LPS+辛伐他汀静脉制剂)及辛伐他汀纳米粒组(LPS+辛伐他汀纳米粒),培养6h,12h,24h,予MTT法检测细胞活性。共培养12h后流式细胞仪检测细胞调亡率,并用蛋白印迹法(western blot)检测四组Bcl-2及Bax蛋白的表达。结果：(1)采用溶剂扩散法成功制备辛伐他汀纳米粒,测其直径在350.3±156.9nm,包封率65.71%,载药量3.29%。(2)原代脐静脉内皮细胞梭形,连接呈片后显现内皮细胞形状,呈铺路石样。人脐静脉内皮细胞Ⅷ因子相关抗原抗体鉴定为内皮细胞。(3)细胞活性比较：共培养6h后LPS组的细胞活性明显低于空白对照组(P0.05)。共培养12h及24h细胞活性比较：LPS组的细胞活性明显低于空白对照组(P<0.05),辛伐他汀静脉制剂组及辛伐他汀纳米粒组细胞活性均高于LPS组(P<0.05),辛伐他汀纳米粒组细胞活性高于辛伐他汀静脉制剂组(P<0.05)。12h和24h组间活性无明显差异。共培养12h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率结果：LPS组的凋亡率明显高于空白对照组(P<0.05),辛伐他汀静脉制剂组凋亡率及辛伐他汀纳米粒组均低于LPS组(P<0.05),辛伐他汀纳米粒组凋亡率低于辛伐他汀静脉制剂组(P<0.05). Western Blot检测各组Bc1-2, Bax蛋白结果：LPS组Bcl-2蛋白的表达低于空白对照组(P<0.05),Bax蛋白的表达明显高于空白对照组(P<0.05)。辛伐他汀静脉制剂组及辛伐他汀纳米粒组Bcl-2蛋白的表达均高于LPS组(P<0.05),低于空白对照组((P<0.05), Bax蛋白的表达明显低于LPS组(P<0.05),高于空白对照组(P<0.05)。辛伐他汀纳米粒组Bcl-2蛋白的表达高于辛伐他汀静脉制剂组(P<0.05), Bax蛋白的表达低于辛伐他汀静脉制剂组(P<0.05)。结论：(1)采用溶剂扩散法方法制备的辛伐他汀纳米粒粒径小,包封率及载药量较好;(2)LPS可能通过降低Bcl-2蛋白表达,提高Bax蛋白表达而明显增加人脐静脉内皮细胞凋亡率;(3)辛伐他汀静脉制剂及辛伐他汀纳米粒能提高LPS刺激人脐静脉内皮细胞的活性,降低其细胞凋亡率,其可能机制为提高LPS刺激人脐静脉内皮细胞Bcl-2蛋白的表达,而降低Bax蛋白的表达,起到保护内皮细胞的作用;(4)辛伐他汀纳米粒组较辛伐他汀静脉制剂细胞活性更强,凋亡率更低,可能与辛伐他汀纳米粒组Bcl-2蛋白表达高于辛伐他汀组,而Bax蛋白表达低于辛伐他汀组有关。

关键词：辛伐他汀纳米粒脂多糖内皮细胞脓毒症 bcl-2 bax 凋亡

干旱半干旱区不同林型人工林水源涵养能力比较研究

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生态学报 2021年第5期41卷 1979-1990页

作者：程唱贺康宁俞国峰柴世秀北京林业大学水土保持学院水土保持国家林业局重点实验室北京100083 北京市水土保持工程技术研究中心北京100083 林业生态工程教育部工程研究中心北京100083 青海省西宁市大通土族回族自治区气象局西宁810100

通过引入模糊物元模型优化水源涵养能力估算方法,从而为研究区林分结构调整、水源涵养能力提升提供科学依据。运用欧式贴近度,以青海省大通县塔尔沟小流域6种不同林型人工林云杉×白桦混交林(YB)、云杉×青杨混交林(YQ)、云杉×落叶松... 详细信息

通过引入模糊物元模型优化水源涵养能力估算方法,从而为研究区林分结构调整、水源涵养能力提升提供科学依据。运用欧式贴近度,以青海省大通县塔尔沟小流域6种不同林型人工林云杉×白桦混交林(YB)、云杉×青杨混交林(YQ)、云杉×落叶松混交林(YL)、云杉纯林(Y)、落叶松纯林(L)、青杨纯林(Q)作为研究对象,定量评价其水源涵养能力。结果表明:欧式贴近度大小排序为YB(0.794)>YQ(0.723)>YL(0.655)>Y(0.494)>L(0.416)>Q(0.270),欧式贴近度越大,该林分类型水源涵养能力更强。6种林型中,白桦×青杨混交林水源涵养能力最强,青杨林水源涵养能力最差。

关键词：干旱半干旱区水源涵养能力模糊物元模型欧式贴近度

连续性血液净化治疗对创伤脓毒症患者外周血单核细胞膜型CD14表达及炎症反应的影响

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中华创伤杂志 2018年第6期34卷 540-545页

作者：李智鑫应利君金烈洲吕铁俞国峰绍兴市人民医院重症医学科浙江省绍兴市312000

目的探讨连续性血液净化（CBP）治疗对脓毒症患者外周血单核细胞膜型CD14（mCD14）及炎症反应的影响。方法采用回顾性病例对照研究分析2015年1月-2016年12月收治的50例创伤后并发严重脓毒症患者临床资料，其中男34例，女16例；年龄16～7... 详细信息

目的探讨连续性血液净化（CBP）治疗对脓毒症患者外周血单核细胞膜型CD14（mCD14）及炎症反应的影响。方法采用回顾性病例对照研究分析2015年1月-2016年12月收治的50例创伤后并发严重脓毒症患者临床资料，其中男34例，女16例；年龄16～73岁，平均45．37岁。根据是否同意接受CBP治疗，将患者分为CBP组（25例）和非CBP组（25例）。在两组治疗后0，12，24，48，72h留取外周血标本，采用流式细胞术检测mCD14水平变化，ELISA法检测白细胞弹性蛋白酶（HLE）表达变化。将治疗24h后的两组分离出外周血单核细胞并于体外培养，脂多糖（LPS）刺激后4，8，12，24，48，72h检测单核细胞中mCD14表达变化；采用ELISA法检测单核细胞培养液中肿瘤坏死因子-α（TNF-01）、白细胞介素（IL）-6及IL-10的水平。结果治疗后12，24，48，72h，两组HLE水平均较治疗前下调（P〈0．01），CBP组下调幅度明显大于非CBP组（P〈0．01）。治疗后12，24，48，72h，两组mCD14水平均较治疗前上调（P〈0．01），CBP组上调幅度明显大于非CBP组（P〈0．01）。CBP组在培养前及培养后4，8hmCD14水平明显高于相同时相点的非CBP组（P〈0．01）。两组单核细胞接受LPS再刺激后4，8，12，24，48h，CBP组TNF-α、IL-6的分泌水平均明显高于非CBP组（P〈0．01），而IL—10水平两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CBP治疗可以通过清除创伤脓毒症患者外周血炎症因子、促炎介质及直接或间接降低HLE水平，使其单核细胞mCD14水平上升，当机体再次受到外界刺激时，其抗炎反应能力明显强于未接受CBP治疗患者。

关键词：脓毒症创伤和损伤血液滤过膜型CD14

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明火炉铅淬火连续热处理工艺性能探讨

金属制品 2002年第6期28卷 12-14页

作者：俞国峰上海二钢有限公司 200090

根据奥氏体化组织转变原理 ,比较明火炉和马弗炉及不锈钢管式半明火炉的工艺特点 ,分析和探讨明火炉的优势和工艺特性。不同的炉子应采用不同的热处理工艺 ,明火炉DV值较高 ,温度高、车速快 ,可以提高热效率。明火炉加热技术是今后的发... 详细信息

根据奥氏体化组织转变原理 ,比较明火炉和马弗炉及不锈钢管式半明火炉的工艺特点 ,分析和探讨明火炉的优势和工艺特性。不同的炉子应采用不同的热处理工艺 ,明火炉DV值较高 ,温度高、车速快 ,可以提高热效率。明火炉加热技术是今后的发展方向。

关键词：工艺性能明火炉高温快速加热 DV值铅淬火过冷度钢丝

血液灌流对脓毒性休克高迁移率族蛋白B-1清除效果的研究

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中华医院感染学杂志 2019年第1期29卷 23-26,35页

作者：俞国峰吕铁陆地应利君绍兴市人民医院重症医学科

目的分析HA330血液灌流对脓毒性休克患者高迁移率族蛋白B-1清除效果及对患者组织灌注的影响。方法采用前瞻性单中心研究方法,选取2015年1月-2016年12月重症医学科脓毒症休克患者共60例,采用数字随机法分成两组,常规组30例和灌流组30例... 详细信息

目的分析HA330血液灌流对脓毒性休克患者高迁移率族蛋白B-1清除效果及对患者组织灌注的影响。方法采用前瞻性单中心研究方法,选取2015年1月-2016年12月重症医学科脓毒症休克患者共60例,采用数字随机法分成两组,常规组30例和灌流组30例。常规组按常规治疗,灌流组在常规治疗基础上采用HA330血液灌流,每次灌流时间持续2h,连续3d。记录患者治疗前及治疗第4天的血流动力学指标:包括平均动脉压(MAP)、心率(HR)、心脏指数(CI)、左心室收缩力指数(dpmax)和外周血管指数(SVRI),血管活性药物的使用率。同时检测高迁移率族蛋白B-1(HMGB-1)、乳酸(Lac),前降钙素(PCT)、C-反应蛋白(CRP)水平,记录患者ICU住院时间及机械通气时间。结果两组患者治疗后血流动力学指标均好转,MAP、CI、dpmax升高,HR、SVRI、乳酸下降,且灌流组指标变化幅度优于常规治疗组(P<0.05);两组患者治疗后炎症指标CRP,PCT及HMGB-1水平均下降,且灌流组指标变化幅度优于常规治疗组(P<0.05),血管活性药物使用率灌流组由93.3%下降至23.3%,常规组由96.7%下降至33.3%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗后APAHCEⅡ评分均下降,灌流组治疗后APAHCEⅡ评分下降值(6.60±2.27)高于对照组(4.85±1.80),差异有统计学意义(P<0.05);两组机械通气时间和ICU住院时间比较差异无统计学意义。结论血液灌流能更好地减少脓毒性休克患者的HMGB-1水平,降低炎症反应,稳定血流动力学,改善组织灌注。

关键词：血液灌流脓毒性休克高迁移率族蛋白B-1 血流动力学

重症监护病房患者静脉导管相关感染病原菌及耐药性研究

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中国消毒学杂志 2016年第8期33卷 774-776页

作者：俞国峰宋志方周雷应利君绍兴市人民医院浙江绍兴312000

目的研究重症监护病房(ICU)患者深静脉导管相关感染的病原菌分布及耐药性,为临床科学选用抗菌药物提供依据。方法采用回顾性调查方法,对某医院ICU住院患者中疑似静脉导管相关感染(CRBSI)者送检标本病原菌检验结果进行了统计分析。结果 ... 详细信息

目的研究重症监护病房(ICU)患者深静脉导管相关感染的病原菌分布及耐药性,为临床科学选用抗菌药物提供依据。方法采用回顾性调查方法,对某医院ICU住院患者中疑似静脉导管相关感染(CRBSI)者送检标本病原菌检验结果进行了统计分析。结果 102例疑似静脉导管相关感染患者中确诊CRBSI 44例,感染率为43.1%;股静脉置管患者感染率最高,占52.3%。44例CRBSI患者送检标本中共检出病原菌48株(含混合感染4例),革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌和真菌构成比依次为54.17%、29.17%和16.67%。26株革兰阳性球菌对万古霉素、替考拉宁、利奈唑烷均敏感;革兰阴性菌仅对丁胺卡那和替加环素全部敏感。结论 CRBSI病原体以革兰阳性菌为主,且革兰阳性菌和革兰阴性菌耐药性较普遍,仅对少部分抗菌药物敏感。

关键词：重症监护室静脉导管相关感染病原菌耐药性

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血压的性别差异与小鼠肾脏钠离子通道的关系

中国比较医学杂志 2016年第9期26卷 13-18页

作者：王伟俞国峰程梦婷赵蓉刘珍温州医科大学检验医学院生命科学学院浙江省遗传学重点实验室浙江温州325035

目的研究雌雄小鼠的血压、肾脏尿钠排泄以及相关的肾脏钠离子通道和信号通路,初步探讨血压的性别差异与肾脏钠离子通道的关系。方法选取成年雌雄小鼠,用无创血压仪检测小鼠血压,火焰分光光度计测量小鼠血、尿钠离子浓度,Real-time PCR和... 详细信息

目的研究雌雄小鼠的血压、肾脏尿钠排泄以及相关的肾脏钠离子通道和信号通路,初步探讨血压的性别差异与肾脏钠离子通道的关系。方法选取成年雌雄小鼠,用无创血压仪检测小鼠血压,火焰分光光度计测量小鼠血、尿钠离子浓度,Real-time PCR和Western-Blot检测小鼠肾脏钠氯同向转运体(NCC)、钠钾氯同向转运体(NKCC2)、上皮钠离子通道(ENa C)的表达水平,以及上游的缺乏赖氨酸的丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(WNK激酶)的mRNA水平。结果雌鼠血压低于雄鼠,尿钠排泄高于雄鼠,NCC、NKCC2的mRNA和蛋白水平均明显增加,ENa C无明显差异,WNK4显著升高,WNK1无差异。结论雌鼠血压低于雄鼠可能是由雌鼠尿钠排泄增加导致,WNK4-NCC/NKCC2信号通路参与其调控。

关键词：性别血压钠离子通道 WNK 小鼠

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影响钢丝热处理组织性能的常见因素分析

金属制品 2003年第4期29卷 7-9页

作者：俞国峰沈美芳上海二钢有限公司 200090

阐述盘条和钢丝内部及表面缺陷对钢丝性能和热处理组织的影响 ,比较“高线温、高铅温、快车速”和“低线温、低铅温、慢车速”两种热处理工艺方式特点 ,实验研究了拉拔压缩率对钢丝热处理后抗拉强度的影响 ,结果表明在相同的热处理条件... 详细信息

阐述盘条和钢丝内部及表面缺陷对钢丝性能和热处理组织的影响 ,比较“高线温、高铅温、快车速”和“低线温、低铅温、慢车速”两种热处理工艺方式特点 ,实验研究了拉拔压缩率对钢丝热处理后抗拉强度的影响 ,结果表明在相同的热处理条件下 ,提高热处理前变形量可提高热处理后钢丝的组织性能。

关键词：钢丝热处理组织力学性能压缩率

右美托咪定对无创通气AECOPD患者镇静的安全性及有效性研究

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中国现代医生 2017年第35期55卷 86-89页

作者：俞国峰应利君绍兴市人民医院(浙江大学绍兴医院)重症医学科浙江绍兴312000

目的评估右美托咪定对慢性阻塞性肺部疾病急性发作期患者需要使用无创通气支持下镇静的安全性及有效性。方法选取2015年3月~2017年2月我院入住重症医学科的AECOPD并需要无创通气支持的患者64例,随机分为右美托咪定组和对照组,每组32例,... 详细信息

目的评估右美托咪定对慢性阻塞性肺部疾病急性发作期患者需要使用无创通气支持下镇静的安全性及有效性。方法选取2015年3月~2017年2月我院入住重症医学科的AECOPD并需要无创通气支持的患者64例,随机分为右美托咪定组和对照组,每组32例,两组均给予无创通气和常规治疗,右美托咪定组予右美托咪定维持量(0.2~0.7)μg/(kg·h),维持RASS评分-1^+1分,比较两组患者0h、6h、12h、24h、48h的氧合指数、二氧化碳分压、平均动脉压、心率。并比较两组患者的无创机械通气时间、有创通气率、ICU住院时间及谵妄的发生率及患者28 d生存率,观察右美托咪定组有无戒断症状。结果右美托咪定组6h后二氧化碳明显较对照组下降(P<0.05),24h后氧合明显较对照组改善(P<0.05),6h、12h平均动脉压较对照组下降(P<0.05),心率6h后均较对照组明显下降(P<0.05),但无明显心动过缓。右美托咪定组无创通气时间、留住ICU时间较对照组明显缩短(P<0.05),有创通气率及谵妄发生率降低,有显著差异(P<0.05)。右美托咪定组无明显戒断症状发生,两组患者的28d生存率无明显差异。结论右美托咪定联合无创机械通气支持显著改善AECOPD患者氧合,减少机械通气时间及住ICU时间,减少插管率及谵妄发生率,且安全性较高。

关键词：右美托咪定慢性阻塞性肺病急性发作无创通气镇静