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ASF1B通过PI3K/Akt通路调节人胶质瘤细胞的增殖和侵袭

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神经解剖学杂志 2022年第3期38卷 314-320页

作者：程创陈元武熊伟侯良绢夏菁邓雪松重庆三峡医药高等专科学校人体解剖学教研室重庆404120 三峡库区道地药材开发利用重庆市重点实验室重庆404120

目的:探讨抗沉默功能1B组蛋白伴侣(ASF1B)对人胶质瘤细胞的增殖与侵袭的影响及机制。方法:首先比较GENT2数据库中正常人脑组织与人脑肿瘤组织中ASF1B的表达,分析ASF1B表达与预后的关系;WesternBlot法检测A172、U87、U251和HS683细胞系中... 详细信息

目的:探讨抗沉默功能1B组蛋白伴侣(ASF1B)对人胶质瘤细胞的增殖与侵袭的影响及机制。方法:首先比较GENT2数据库中正常人脑组织与人脑肿瘤组织中ASF1B的表达,分析ASF1B表达与预后的关系;WesternBlot法检测A172、U87、U251和HS683细胞系中ASF1B的表达;采用siRNA技术抑制人脑胶质瘤细胞系U251和U87细胞ASF1B基因表达;分别通过CCK-8法和Transwell小室法检测U251和U87细胞增殖和侵袭情况,Western Blot法检测PI3K/Akt通路中p-Akt和p-mTOR蛋白的表达水平。结果:与正常脑组织相比,ASF1B在人脑肿瘤组织中的表达明显增加,ASF1B高表达的人脑肿瘤患者总生存期更短(P=0.036);ASF1B下调不仅明显抑制U251和U87细胞的增殖和侵袭;也明显抑制p-Akt和p-mTOR蛋白表达。结论:ASF1B通过PI3K/Akt通路促进U251和U87细胞增殖和侵袭。

关键词：抗沉默功能1B组蛋白伴侣 PI3K Akt 增殖侵袭人脑胶质瘤细胞

“人体表面解剖学”在高职针灸推拿专业教学探索实践

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科技风 2022年第13期 26-28页

作者：侯良绢刘滢漆伟谭辉陈春梅重庆三峡医药高等专科学校解剖学教研室重庆404120 重庆大学附属三峡医院康复科重庆404000 重庆三峡医药高等专科学校中医学院重庆404120

目的:评价“人体表面解剖学”在针推专业的应用效果。方法:将2018级针推专业5个班和2019级针推专业5个班分为对照组和实验组,通过对“人体表面解剖学”内容的整合、课堂教学和实验教学方法的改进,增加阶段测试等。最后通过标本考试、阶... 详细信息

目的:评价“人体表面解剖学”在针推专业的应用效果。方法:将2018级针推专业5个班和2019级针推专业5个班分为对照组和实验组,通过对“人体表面解剖学”内容的整合、课堂教学和实验教学方法的改进,增加阶段测试等。最后通过标本考试、阶段测试、期末测试以及调查问卷等方式了解学生对“人体表面解剖学”内容的掌握情况。结果:实验组在标本测试、阶段测试、期末测试中成绩明显高于对照组(p<0.05),学生对“人体表面解剖学”对腧穴定位、提高实践动手能力、提高学习效率和参与度等满意程度均较高。结论:“人体表面解剖学”在针推专业开展是非常有必要的。

关键词：人体表面解剖学针推专业骨性标志

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MKP-1表达与UT-B基因敲除小鼠抑郁样行为的关系

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MKP-1表达与UT-B基因敲除小鼠抑郁样行为的关系

作者：侯良绢重庆医科大学

学位级别：硕士

目的：研究尿素通道蛋白B（Urea transporter B UT-B）基因敲除对小鼠自主行为的影响;以及小鼠海马形态结构的改变，海马组织内尿素和NO含量、MKP-1表达部位及水平的改变，以及MAPK信号分子的表达水平变化，探讨UT-B基因敲除小鼠出现抑... 详细信息

目的：研究尿素通道蛋白B（Urea transporter B UT-B）基因敲除对小鼠自主行为的影响;以及小鼠海马形态结构的改变，海马组织内尿素和NO含量、MKP-1表达部位及水平的改变，以及MAPK信号分子的表达水平变化，探讨UT-B基因敲除小鼠出现抑郁样行为的分子机制。方法：1.8-12周龄体重匹配，雌性野生型和UT-B基因敲除小鼠各20只，分别进行强迫游泳实验，高架十字迷宫实验和旷场实验，检测野生型小鼠和UT-B基因敲除小鼠的自主行为。2.采用HE染色和免疫组织化学技术，观察两型小鼠海马形态结构以及MKP-1的表达。3.采用尿素和NO检测试剂盒测定两型小鼠海马尿素和NO水平。4.采用Western Blot技术检测两型海马MKP-1、MAPKs相关信号分子的表达水平。结果：1．强迫游泳实验结果显示：野生型小鼠和UT-B基因敲除小鼠的游泳不动时间分别为（86±13s）和（123±19s），UT-B基因敲除小鼠的游泳不动时间明显延长（P=0.00120.05）;总路程分别为（10110±756.3）mm和（13770±844.7）mm（P=0.025<0.05），UT-B基因敲除小鼠在中央区域活动时间明显减少，运动频率高。提示其具有抑郁样行为。***-B基因敲除小鼠海马各亚区神经元密度减小，神经元MKP-1的表达水平上调。***-B基因敲除和野生型小鼠海马尿素水平为（16.7±2.0mM vs11.6±1.4mM，p=0.004<0.001），NO含量为（1.05±0.07μmol/gprot vs1.29±0.06μmol/gprot，p=0.04<0.05），表明UT-B基因敲除小鼠海马尿素水平显著升高而NO含量明显降低。***-B基因敲除小鼠海马MKP-1表达水平上调531.9%，pERK和pJNK表达水平明显降低39.1%和21.3%，磷酸化p38MAPK水平无明显改变。结论：1．强迫游泳实验、高架十字迷宫实验和旷场实验结果提示UT-B基因敲除小鼠具有抑郁样行为。***-B基因敲除引起小鼠海马神经元减少，尿素堆积，NO含量减少。***-B基因敲除引起小鼠海马缺氧，诱导神经元MKP-1表达水平上调，MKP-1通过特异性下调pERK和pJNK水平引发小鼠的抑郁样行为。

关键词：尿素通道蛋白B 抑郁样行为小鼠 MKP-1

数字化评价模式在人体解剖学实验教学评价中的应用

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科教导刊 2023年第29期 45-47页

作者：程创黄海兵侯良绢重庆三峡医药高等专科学校人体解剖学教研室重庆404120

实验教学是人体解剖学的重要组成部分,正确评价实验教学效果具有必要性和关键性.传统的实验教学评价模式在人力、物力和时间成本方面消耗较高,效率低下.文章拟将数字化评价模式引入人体解剖学实验评价中,比较数字化评价模式与传统评价... 详细信息

实验教学是人体解剖学的重要组成部分,正确评价实验教学效果具有必要性和关键性.传统的实验教学评价模式在人力、物力和时间成本方面消耗较高,效率低下.文章拟将数字化评价模式引入人体解剖学实验评价中,比较数字化评价模式与传统评价模式的优劣性,为人体解剖学的实验教学评价探索新的评价途径,并为数字化评价模式的推广提供一定的理论基础.

关键词：人体解剖学实验教学评价数字化评价模式

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睡眠剥夺对小鼠肾组织中IL-6、TNF-α表达水平的影响

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中国生物制品学杂志 2019年第1期32卷 36-39,45页

作者：刘刚侯良绢重庆三峡中心医院感染科重庆404000 重庆三峡医药高等专科学校解剖教研室重庆404120

目的探讨睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对小鼠肾组织中炎症因子IL-6和TNF-α表达的影响。方法将C57雄性小鼠随机分为空白对照组及SD 24、48和72 h组,利用COBAS INTEGRA 800全自动生化分析仪检测小鼠血清中尿素氮(urea nitrogen,BUN),... 详细信息

目的探讨睡眠剥夺(sleep deprivation,SD)对小鼠肾组织中炎症因子IL-6和TNF-α表达的影响。方法将C57雄性小鼠随机分为空白对照组及SD 24、48和72 h组,利用COBAS INTEGRA 800全自动生化分析仪检测小鼠血清中尿素氮(urea nitrogen,BUN),肌酐(creatinine,CREA)和尿酸(uric acid,URCA)的含量;黄嘌呤氧化酶法检测肾脏组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量;对动物进行组织学检查,ELISA法检测肾脏组织中IL-6和TNF-α含量。结果与空白对照组比较,随SD时间延长,小鼠血清中BUN、CREA和URCA含量在SD 24 h后显著增高(P <0. 01),48和72 h持续增高(P <0. 01);小鼠肾脏组织中SOD活性随SD时间延长持续下降(P <0. 01),MDA含量持续增加(P <0. 01);HE染色可见肾小管上皮细胞空泡样变性、轻度水肿,肾小球和间质内可见炎症细胞浸润和红细胞,肾小囊腔闭塞;IL-6、TNF-α含量随SD时间延长持续增加(P <0. 01)。结论 SD诱发肾组织氧化损伤,引起脂质过氧化,使得肾脏结构和功能受损,促进炎症因子IL-6和TNF-α的大量释放,激活炎症反应,加重对肾脏的损伤。

关键词：睡眠剥夺炎症因子氧化应激肾脏小鼠 IL-6 TNF-α

姜黄素对睡眠剥夺小鼠血清心肌酶、氧化应激酶和炎症因子表达的影响

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中国生物制品学杂志 2018年第9期31卷 969-973页

作者：刘刚侯良绢重庆三峡中心医院感染科重庆404000 重庆三峡医药高等专科学校重庆404120

目的探讨姜黄素(curcumin)对睡眠剥夺小鼠血清心肌酶、氧化应激酶和炎症因子表达的影响。方法将50只C57雄性小鼠随机分为正常对照组、睡眠剥夺模型组和姜黄素低、中、高剂量组。采用改良多平台水环境法(modifid multiple platrorm water... 详细信息

目的探讨姜黄素(curcumin)对睡眠剥夺小鼠血清心肌酶、氧化应激酶和炎症因子表达的影响。方法将50只C57雄性小鼠随机分为正常对照组、睡眠剥夺模型组和姜黄素低、中、高剂量组。采用改良多平台水环境法(modifid multiple platrorm water environmental method,MMPWM)进行睡眠剥夺连续72 h,姜黄素低、中、高剂量组按50、100、150 mg/kg进行灌胃,正常对照组和睡眠剥夺模型组小鼠在相同时间点给予等体积生理盐水灌胃,连续8周,每天1次。采用BS-220全自动生化分析仪检测血清心肌酶中心肌酶乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、α-羟丁酸脱氢酶(alpha-hydroxybutyrate dehydrogenase,α-HBDH)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)含量;黄嘌呤氧化酶法检测心肌组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性,硫代巴比妥酸(thiosulfuric acid barbitone,TBA)法检丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量;ELISA法检测心肌组织中白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)含量。结果与睡眠剥夺模型组比较,姜黄素各剂量组小鼠血清心肌酶LDH、CK、α-HBDH、AST含量均下降(P<0.000 1);小鼠心肌组织中SOD、GSH-Px活性逐渐增强(P<0.05),MDA含量逐渐下降(P<0.05),IL-1β、IL-6、TNF-α含量均逐渐下降(P<0.05)。结论姜黄素可保护心肌组织,其机制可能是通过提高心肌组织的抗氧化能力,减轻氧化应激损伤,抑制或降低炎症因子的释放。

关键词：姜黄素睡眠剥夺氧化应激酶心肌酶炎症因子

川芎嗪对慢性脑缺血小鼠认知功能障碍及海马星形胶质细胞胶质原纤维蛋白表达的影响

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中国生物制品学杂志 2018年第2期31卷 150-154,159页

作者：侯良绢黄小环重庆三峡医药高等专科学校重庆404120 重庆市抗肿瘤天然药物工程技术研究中心重庆404120

目的探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对慢性脑缺血小鼠认知功能障碍及海马星形胶质细胞胶质原纤维蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响。方法采用改良双侧颈总动脉结扎术建立小鼠慢性脑缺血模型,经腹腔分别注射3... 详细信息

目的探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对慢性脑缺血小鼠认知功能障碍及海马星形胶质细胞胶质原纤维蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响。方法采用改良双侧颈总动脉结扎术建立小鼠慢性脑缺血模型,经腹腔分别注射30和80 mg/kg的TMP注射液(即TMP低、高剂量组),每组10只,另设假手术组(不结扎),模型组和假手术组腹腔注射等量生理盐水。各组均在术后24 h开始给药,每日1次,连续8周。Morris水迷宫试验检测小鼠空间学习和记忆能力;黄嘌呤氧化酶法检测小鼠海马组织中的超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)含量,硫代巴比妥酸(TBA)法检测丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,双抗体两步ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)及白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量;免疫组织化学染色法及Western blot法检测小鼠海马CA1区GFAP的表达水平。结果与模型组比较,TMP低、高剂量组小鼠在Morris水迷宫定位航行试验中的逃避潜伏期和游泳路程均明显缩短(P<0.05),空间探索试验中穿越原平台的次数增多(P<0.05);小鼠海马组织中SOD含量明显增加(P<0.05),MDA、TNF-α及IL-1β含量明显降低(P<0.05);IOD值明显下降(P<0.05),GFAP表达水平明显下降(P<0.05)。结论 TMP可改善慢性脑缺血小鼠认知功能障碍,其机制可能是增强抗脂质氧化能力,抑制星形胶质细胞增生活化,减少GFAP的表达,减轻炎症反应,从而降低对海马组织的损害。

关键词：慢性脑缺血脂质氧化星型胶质细胞川芎嗪海马

尿素通道蛋白B敲除小鼠海马毛细血管的体视学

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解剖学杂志 2015年第4期38卷 442-445页

作者：侯良绢冉建华重庆三峡医药高等专科学校基础医学部解剖学教研室万州404120 重庆医科大学基础医学院解剖学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院神经科学研究中心重庆400016

目的:研究尿素通道蛋白B(UT-B)敲除小鼠海马组织中尿素对海马毛细血管形态结构的影响,探讨UT-B基因敲除小鼠出现抑郁样行为的病理机制.方法:采用糖水偏好实验观察野生型和UT-B基因敲除小鼠的抑郁样行为,尿素检测试剂盒测定2型小鼠海马... 详细信息

目的:研究尿素通道蛋白B(UT-B)敲除小鼠海马组织中尿素对海马毛细血管形态结构的影响,探讨UT-B基因敲除小鼠出现抑郁样行为的病理机制.方法:采用糖水偏好实验观察野生型和UT-B基因敲除小鼠的抑郁样行为,尿素检测试剂盒测定2型小鼠海马尿素水平,免疫组织化学和体视学定量检测2型小鼠海马毛细血管总长度、总体积、总表面积、平均直径等形态学指标.结果:糖水偏好实验中,野生型和UT-B基因敲除小鼠的糖水偏爱指数分别为77.22％±3.93％vs6L 20％±4.42％,差异具有统计学意义.野生型和UT-B基因敲除小鼠海马尿素水平,海马毛细血管的总长度、总体积、总表面积、平均直径差异均有统计学意义.结论:UT-B敲除导致小鼠海马尿素堆积,引发小鼠海马毛细血管的形态改变,毛细血管总体积下降造成海马血灌注量不足而引发小鼠的抑郁样行为.

关键词：海马毛细血管尿素通道蛋白B 体视学小鼠

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姜黄素对睡眠剥夺小鼠学习记忆力的影响

中国生物制品学杂志 2017年第6期30卷 618-622页

作者：侯良绢夏菁黄小环重庆三峡医药高等专科学校重庆404120 重庆市抗肿瘤天然药物工程技术研究中心重庆404120

目的探讨姜黄素(Curcumin)对睡眠剥夺(sleep deprived,SD)小鼠学习记忆力的影响。方法将50只C57雄性小鼠随机分为正常睡眠组、睡眠剥夺模型组和姜黄素低、中、高剂量组。采用改良多平台水环境法进行睡眠剥夺,姜黄素低、中、高剂量组分别... 详细信息

目的探讨姜黄素(Curcumin)对睡眠剥夺(sleep deprived,SD)小鼠学习记忆力的影响。方法将50只C57雄性小鼠随机分为正常睡眠组、睡眠剥夺模型组和姜黄素低、中、高剂量组。采用改良多平台水环境法进行睡眠剥夺,姜黄素低、中、高剂量组分别于24、48及72 h经小鼠腹腔注射给药,剂量分别为5、10、20 mg/kg,正常睡眠组及睡眠剥夺模型组小鼠在相同时间给予腹腔注射等体积的生理盐水。每天给药1 h后经Morris水迷宫试验测试各组小鼠的学习记忆力;睡眠剥夺72 h后,检测小鼠海马组织中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、丙二醛(malonaldehyde,MDA)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量,Western blot法检测TNF-α的表达水平。结果与睡眠剥夺模型组比较,姜黄素各剂量组小鼠在Morris水迷宫定位航行试验中逃避潜伏期和游泳路程均明显缩短(P<0.05),空间探索试验中穿越平台次数明显增多(P<0.05);小鼠海马组织中SOD、GSH-Px含量明显增加(P<0.05),MDA、TNF-α含量明显降低(P<0.05);Western blot法结果表明,TNF-α的表达量明显下降(P<0.05)。结论姜黄素可改善睡眠剥夺小鼠学习记忆力,其机制可能是减少自由基堆积,增强抗氧化能力,减少炎症因子TNF-α的产生。

关键词：姜黄素睡眠剥夺海马肿瘤坏死因子-α