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血必净注射液通过FKN/NF-κB信号通路减轻脓毒症炎症反应的机制研究

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血必净注射液通过FKN/NF-κB信号通路减轻脓毒症炎症反应的机制研...

作者：侯常苗湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的:脓毒症是临床上具有极高死亡率的感染重症,机体过度的免疫反应是其重要的致病环节。血必净注射液(Xuebijing injection,XBJ)在临床上治疗脓毒症具有良好的疗效,但其抗炎的机制尚不明确。本研究旨在从动物和细胞实验层面探讨血必净... 详细信息

目的:脓毒症是临床上具有极高死亡率的感染重症,机体过度的免疫反应是其重要的致病环节。血必净注射液(Xuebijing injection,XBJ)在临床上治疗脓毒症具有良好的疗效,但其抗炎的机制尚不明确。本研究旨在从动物和细胞实验层面探讨血必净注射液与趋化因子Fractalkine(FKN)的关系,以及二者与NF-κB信号通路的关系和作用,为临床脓毒症的治疗和血必净注射液的应用,提供新的依据与思路。方法:C57BL/6小鼠腹腔预注射XBJ后,通过盲肠穿刺结扎术(Cecal Ligation Puncture,CLP)制备脓毒症小鼠模型,将实验小鼠随机分为假手术组(Sham)、血必净对照组(Sham+XBJ)、模型组(CLP)和血必净治疗组(CLP+XBJ)。(1)观察XBJ对小鼠生存率的影响;(2)苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)检测小鼠肺、肝和肾的损伤情况;(3)酶联免疫吸附实验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠血清FKN、TNF-α和IL-6的表达情况;(4)Western Blot检测小鼠肺、肝和肾组织中FKN表达水平及p65的核移位情况。XBJ预处理人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)后,采用脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导细胞损伤,(5)分别收集细胞的培养上清液、提取膜蛋白和浆蛋白,Western Blot检测FKN表达水平;转染p CMV-FKN质粒,将细胞分为CON组、LPS组、LPS+XBJ组、p CMV-FKN组、p CMVFKN+LPS组和p CMV-FKN+LPS+XBJ组。(6)Western Blot检测p65的表达及核移位的情况;(7)ELISA检测上清液中TNF-α和IL-6水平;(8)采用免疫共沉淀实验进一步分析FKN对NF-κB信号通路的影响。结果:(1)Sham+XBJ组小鼠存活率与Sham组的相比无差异(P>0.05),而CLP+XBJ组小鼠存活率(60%)显著高于CLP组(40%)(P<0.01);(2)HE染色发现CLP组小鼠肺、肝和肾的损伤均比Sham组严重(P<0.05),而CLP+XBJ组的损伤较CLP组显著减轻(P<0.05);(3)ELISA检测发现与CLP组相比,Sham组和CLP+XBJ组小鼠血清中的TNF-α、IL-6和FKN表达含量均显著降低(P<0.05);(4)Western Blot实验发现在CLP组小鼠的肺、肝和肾组织中,CLP组的FKN蛋白表达较Sham组和CLP+XBJ组均显著增加(P<0.05);同时发现,核p65蛋白的表达也显著增加(P<0.05)。(5)Western Blot实验发现,LPS组细胞上清液、膜蛋白和浆蛋白中的FKN表达均显著高于CON组和LPS+XBJ组(P<0.05);(6)转染过表达FKN质粒后发现,p CMV-FKN+LPS组中核p65蛋白的表达均显著高于CON组、LPS组和p CMV-FKN组(P<0.05),而LPS+XBJ组降低了LPS组的核p65蛋白表达(P<0.05),同时p CMV-FKN+LPS+XBJ组也减少了p CMV-FKN+LPS组的核p65蛋白水平(P<0.05);(7)ELISA检测发现过表达FKN后,TNF-α和IL-6表达显著上升(P<0.05),LPS刺激后,TNF-α和IL-6表达进一步增加(P<0.05),而p CMV-FKN+LPS+XBJ组的TNF-α和IL-6含量显著低于p CMV-FKN+LPS组(P<0.05);(8)免疫共沉淀实验发现FKN与p65存在共作用,血必净注射液可以显著降低它们的共作用(P<0.05)。结论:血必净注射液可以有效改善脓毒症小鼠的一般状态和生存率,减少炎症因子(TNF-α、IL-6)的表达水平以及减少肺、肝和肾组织损伤。血必净注射液减少脓毒症小鼠中FKN的表达水平和p65的核移位。LPS可以诱导HUVEC细胞FKN表达上升,血必净注射液通过抑制FKN和p65的共作用来减轻LPS诱导的HUVEC细胞炎症水平。

关键词：脓毒症血必净注射液 FKN NF-κB通路 p65核移位

《欧洲创伤后大出血和凝血障碍管理指南:第六版》解读

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实用休克杂志（中英文） 2023年第3期7卷 170-172页

作者：侯常苗程婷陈芳湖南中医药大学临床医学院(湖南省脑科医院) 湖南省急救医学研究所急危重症代谢组学湖南省重点实验室湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院)急诊医学科

2023年3月发布的《欧洲创伤后大出血和凝血障碍管理指南:第六版》是截至目前根据欧洲及其他地区现有相关证据整理总结的最新指南,旨在进一步优化和标准化创伤管理。全篇基于循证医学证据共总结了39项临床实践建议,建议遵循创伤出血患者... 详细信息

2023年3月发布的《欧洲创伤后大出血和凝血障碍管理指南:第六版》是截至目前根据欧洲及其他地区现有相关证据整理总结的最新指南,旨在进一步优化和标准化创伤管理。全篇基于循证医学证据共总结了39项临床实践建议,建议遵循创伤出血患者管理的大致时间路径,并在关键决策点后面进行分组。研究显示,大约三分之一的严重创伤的患者在到达医院时已处于凝血功能障碍状态,系统的诊断和治疗方法已被证明可以减少可预防的创伤患者死亡人数.

关键词：凝血障碍创伤出血凝血功能障碍循证医学证据整理总结管理指南创伤患者大出血

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破格救心汤在心血管疾病中的应用与研究进展

中医药导报 2023年第5期29卷 217-220页

作者：侯常苗祝益民湖南中医药大学临床医学院湖南长沙410000 湖南省人民医院/湖南师范大学附属第一医院湖南长沙410000

通过文献阅读与整理,对破格救心汤在心血管疾病中的应用与研究进行了总结。破格救心汤具有扶正固脱、回阳救逆之效,在正确的煎煮和合理的配伍下是安全的。破格救心汤能通过改善心功能、心肌代谢和微循环障碍来减缓急慢性心脏衰竭、肺源... 详细信息

通过文献阅读与整理,对破格救心汤在心血管疾病中的应用与研究进行了总结。破格救心汤具有扶正固脱、回阳救逆之效,在正确的煎煮和合理的配伍下是安全的。破格救心汤能通过改善心功能、心肌代谢和微循环障碍来减缓急慢性心脏衰竭、肺源性心脏病、心源性休克、心脏骤停和脓毒症心肌病等急危重症的病情,提高临床疗效和治愈率,也为心血管急危重症疾病的救治提供新的思路与依据。

关键词：破格救心汤附子心血管疾病危重症安全性综述

灯盏细辛通过VDAC1/ROS/NLRP3通路减轻H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞损伤

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中国临床药理学杂志 2023年第20期39卷 2927-2931页

作者：田源肖雯侯常苗温慧莉游三丽袁李礼湖南中医药大学临床医学院湖南长沙410007 湖南省脑科医院心血管内科湖南长沙410007 湖南师范大学生命科学学院湖南长沙410081

目的探讨灯盏细辛(EB)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法建立体外H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化应激损伤模型。将体外培养的HL-1小鼠心肌细胞分为空白组(常规培养)、对照组(4 mg·L^(-1) EB 1 h)、... 详细信息

目的探讨灯盏细辛(EB)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法建立体外H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化应激损伤模型。将体外培养的HL-1小鼠心肌细胞分为空白组(常规培养)、对照组(4 mg·L^(-1) EB 1 h)、模型组(800μmol·L^(-1) H_(2)O_(2) 1 h)、实验组(4 mg·L^(-1) EB+800μmol·L^(-1) H_(2)O_(2) 1 h)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力;用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测细胞损伤情况;用流式细胞术检测活性氧(ROS)含量;用蛋白质印迹法检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)和电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)蛋白表达水平;用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)含量;用钙黄绿素乙酰甲酯(Calcein AM)检测线粒体通透性转换孔(mPTP)的开放程度。结果空白组、对照组、模型组和实验组的细胞活力分别为(93.58±7.33)%、(95.18±4.24)%、(52.20±6.98)%和(74.80±5.33)%;LDH释放量分别为(44.18±6.36)、(46.16±5.01)、(689.60±124.00)和(365.60±87.79)U·L^(-1);ROS释放量分别为0.97±0.10、0.97±0.05、5.18±0.21和3.08±0.41;NLRP3蛋白表达水平分别为0.98±0.06、0.99±0.01、1.98±0.19和1.60±0.17;GSDMD蛋白表达水平分别为1.00±0.07、1.00±0.05、1.97±0.09和1.46±0.10;IL-1β释放量分别为(25.39±5.35)、(25.02±2.37)、(214.8±35.90)和(117.50±23.66)pg·mL^(-1);VDAC1蛋白表达水平分别为1.00±0.04、1.01±0.05、3.18±0.15和1.80±0.18;30 min的mPTP孔开放水平分别为1.22±0.02、1.22±0.01、1.14±0.02、1.17±0.01。模型组上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);实验组上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论灯盏细辛减轻H_(2)O_(2)诱导的HL-1心肌细胞损伤,其机制可能与通过VDAC1调节ROS/NLRP3通路有关。

关键词：灯盏细辛电压依赖性阴离子通道1 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 活性氧焦亡

基于内生“五邪”理论探讨溃疡性结肠炎中医辨治思路

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辽宁中医杂志 2024年第8期51卷 55-58页

作者：常苗韩捷河南中医药大学河南郑州450003 河南中医药大学第一附属医院河南郑州450003

内生“五邪”是脏腑经络和气血津液生理功能异常所致的综合性病机变化,与溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)发病及病理改变关系密切,从内湿、内火、内风、内寒、内燥的角度阐述UC的中医病机及治法对于临床理论研究具有重要意义。内... 详细信息

内生“五邪”是脏腑经络和气血津液生理功能异常所致的综合性病机变化,与溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)发病及病理改变关系密切,从内湿、内火、内风、内寒、内燥的角度阐述UC的中医病机及治法对于临床理论研究具有重要意义。内生“五邪”所致UC的病机及相应治法主要有:内湿:脾虚阳微,痰湿内停;治宜健脾益阳,运化痰湿;内火(内热):火热内生,血溢瘀阻,治宜清(虚)热泻火(热),兼清湿热化瘀;内风:肝风内结,风伤肠络,络损血溢,治宜疏肝理气,清肠疏风,凉血止血;内寒:脾肾阳虚,寒凝血瘀,治宜温肾暖脾,活血止痛;内燥:燥伤津血,肠络失养,治宜生津润燥,滋养肠道。在临床实际中,UC并非单一病机致病,可为“五邪”兼夹为病,并易变生痰浊瘀血,临证应随证治之。

关键词：内生五邪溃疡性结肠炎辨治思路

农地流转对种植业低碳化发展水平的影响机制研究

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四川农业大学学报 2024年

作者：安勇侯苗邹玉友东北林业大学本科生院东北林业大学经济管理学院

【目的】研究农地流转对种植业低碳化发展水平的影响机制及效应，为尽早实现农业“双碳”目标以及推进农业全面绿色转型提供经验借鉴。【方法】基于2005—2020年30个省级面板数据，从碳源减控和产业发展二元视角构建种植业低碳发展水平... 详细信息

【目的】研究农地流转对种植业低碳化发展水平的影响机制及效应，为尽早实现农业“双碳”目标以及推进农业全面绿色转型提供经验借鉴。【方法】基于2005—2020年30个省级面板数据，从碳源减控和产业发展二元视角构建种植业低碳发展水平评价指标体系，运用熵权—TOPSIS模型测度种植业低碳化发展水平，并采用双固定效应、中介效应及工具变量模型探究农地流转对种植业低碳化发展水平的影响机制。【结果】国内种植业低碳化发展水平不高，种植业低碳化发展水平排名前5位的省份为山东、河南、广东、江苏和福建，排名后5位省份为安徽、青海、吉林、江西和内蒙古；农地流转正向驱动种植业低碳化发展水平提升；种植业化学化水平与机械化水平在农地流转影响种植业低碳化发展过程中有中介效应。【结论】通过持续推进农地制度改革、提升种植业化学物资利用效率和机械化水平、实施差异化配套政策以提升种植业低碳化发展潜力，推进中国式农业现代化绿色高效发展。

关键词：农地流转低碳化发展水平中介效应双固定效应工具变量

大中型灌区农业水价测算与用水户承载力研究——以江苏省为例

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价格理论与实践 2024年

作者：侯苗董阿忠杨星江苏省水利科学研究院

测算大中型灌区农业水价和农业用水户水价承载力及其影响因素，对完善我国农业用水价格形成机制、推进我国农业水价综合改革具有重要意义。本文采用现场调研、查阅文献、统计分析、对比分析等方法，对江苏省大中型灌区农业水价和农业用... 详细信息

测算大中型灌区农业水价和农业用水户水价承载力及其影响因素，对完善我国农业用水价格形成机制、推进我国农业水价综合改革具有重要意义。本文采用现场调研、查阅文献、统计分析、对比分析等方法，对江苏省大中型灌区农业水价和农业用水户水价承载力进行较为系统的研究，结果显示：仅考虑工程运行维护成本时，江苏农业水价一般介于0.08-0.17元/立方米（43.2-92.67元/亩）之间，灌区规模、水源类型、灌溉方式等是其主要影响因素；地方财政精准补贴降低了农户的用水成本，也解决了部分灌区成本水价超过用水户承载力的问题。要持续推进农业水价综合改革政策，通过加大财政投入、提高灌区管理水平、改善灌溉条件等方式，降低农业水价、促进农业节水、提高用水户收入，从而进一步增强其水价承载力、减轻用水负担。

关键词：农业灌区农业水价运行维护成本承载力

血必净对阿霉素急性心肌损伤时氧化应激和炎症因子的影响

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实用休克杂志（中英文） 2022年第5期6卷 281-284页

作者：方萌肖薇薇顾潇宵颜诗帆侯常苗湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院)乳甲二病区湖南省人民医院(湖南师范大学附属第一医院)急诊科/国际医学部湖南省急救医学研究所急危重症代谢组学湖南省重点实验室湖南中医药大学

目的探讨血必净对阿霉素所致小鼠急性心肌损伤时氧化应激水平和炎症因子表达的影响。方法将50只昆明小鼠随机分为正常对照组(10只)、阿霉素组(20只)和血必净治疗组(20只)。正常对照组不做任何处理;阿霉素组单次腹腔注射阿霉素15mg/kg;... 详细信息

目的探讨血必净对阿霉素所致小鼠急性心肌损伤时氧化应激水平和炎症因子表达的影响。方法将50只昆明小鼠随机分为正常对照组(10只)、阿霉素组(20只)和血必净治疗组(20只)。正常对照组不做任何处理;阿霉素组单次腹腔注射阿霉素15mg/kg;血必净治疗组单次腹腔注射阿霉素15mg/kg,间隔0.5h给予血必净15mL/kg,0.5h后再重复注射血必净1次。观察48h后心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素6(IL-6)mRNA表达,以及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清SOD、丙二醛(MDA)和IL-6水平变化。结果阿霉素处理后小鼠产生急性心肌损伤表现,心肌酶学指标(CK-MB、LDH)升高(P<0.05)。与阿霉素组相比,血必净治疗组的心肌酶学指标降低,心肌组织中的SOD mRNA表达升高,IL-6 mRNA表达降低,血清SOD活性升高,MDA含量降低,IL-6水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血必净能够通过提高抗氧化酶活性,降低脂质过氧化水平,减轻炎症因子释放,从而减轻阿霉素所致的小鼠急性心肌损伤。

关键词：血必净阿霉素心肌损伤氧化应激炎症

农业全成本水价模型及两部制水价形成机制研究

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节水灌溉 2024年

作者：张雯叶杨星侯苗鞠艳刘园园齐斐江苏省水利科学研究院南京市高淳区水务局

为优化现行农业水价形成机制，推动水资源配置和生态可持续发展，基于两部制水价理论，构建以资源水价、工程水价、环境水价相结合的农业全成本水价模型。研究选取江苏地区4个典型灌区为对象，调研农业水价形成要素，计算农业用水全成... 详细信息

为优化现行农业水价形成机制，推动水资源配置和生态可持续发展，基于两部制水价理论，构建以资源水价、工程水价、环境水价相结合的农业全成本水价模型。研究选取江苏地区4个典型灌区为对象，调研农业水价形成要素，计算农业用水全成本和基于两部制的全成本水价，分析农业水价影响因素。结果显示，在仅考虑环境补偿的前提下，环境水价仍略高于工程水价；生产费用、管理费用等部分工程水价构成要素也与农业用水全成本呈强相关，相关系数达到0.88以上；两部制水价较单一制水价更能发挥水价在促进节水、控污方面的调节作用。通过实例验证，模型具有实用性，可为当地农业水价成本测算工作提供借鉴。

关键词：农业水价全成本水价模型基本水价计量水价实例验证