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人脐带间充质干细胞源小细胞外囊泡对皮肤光老化的防御作用及机制研究

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人脐带间充质干细胞源小细胞外囊泡对皮肤光老化的防御作用及机制...

作者：侯小美江苏大学

学位级别：硕士

目的:间充质干细胞来源的小细胞外囊泡(mesenchymal stem cell-derived small extracellular vesicle,MSC-sEV)在组织再生修复中的作用是当今生命科学中的研究热点,而在皮肤抗衰领域,MSC-sEV的作用仍有待探究。皮肤光老化(skin photoagi... 详细信息

目的:间充质干细胞来源的小细胞外囊泡(mesenchymal stem cell-derived small extracellular vesicle,MSC-sEV)在组织再生修复中的作用是当今生命科学中的研究热点,而在皮肤抗衰领域,MSC-sEV的作用仍有待探究。皮肤光老化(skin photoaging)是长期日光照射诱发的一种外源性皮肤衰老。本研究旨在探讨人脐带组织来源的MSC-sEV(human umbilical cord MSC-sEV,hucMSC-sEV)在皮肤光老化模型中的作用及机制,为推动MSC-sEV在皮肤疾病防治和医学美容领域中的转化应用提供理论依据。方法:应用长波紫外线UVA联合中波紫外线UVB构建裸鼠皮肤光老化模型,依据课题组前期建立的差速-超速离心法提取hucMSC-sEV,于每轮UV照射前对裸鼠的背部皮肤行hucMSC-sEV联合微针滚轮处理,以PBS处理组、0.05%维A酸处理组、UV损伤组及未处理Ctrl组为对照组。分别于造模第35天和第50天观察皮肤大体观,收集皮肤组织进行伊红-苏木精(Hematoxylin-Eosin,HE)染色和Masson染色,观察真皮与表皮厚度、胶原纤维结构,综合评估hucMSC-sEV对皮肤光老化的防御效果。体外应用UVA低剂量多频次照射处理真皮成纤维细胞(dermal fibroblast,DF)构建细胞光老化模型,于UV照射前加入hucMSC-sEV干预,设置β-烟酰胺单核苷酸干预组作为阳性对照组。应用SAβ-gal染色、免疫荧光、流式细胞术、Western blot检测细胞衰老状态、氧化应激水平、DNA损伤以及胶原蛋白的合成,评估hucMSC-sEV的干预效果。对Ctrl组、UV损伤组、UV+sEV处理组的DF细胞进行转录组测序(RNA sequencing,RNAseq),结合生物信息学分析,在动物及细胞模型中筛选验证3组中差异表达的基因,揭示hucMSC-sEV调控的关键靶点,并通过基因转染过表达DF细胞中的靶基因明确hucMSC-sEV防御皮肤光老化的具体作用机制。结果:在裸鼠皮肤光老化模型中,肉眼可见脱屑和皱纹的增加,HE及Masson染色结果显示受损的皮肤角质层增厚,而表皮与真皮厚度下降,胶原纤维发生断裂伴细胞外基质成分变性沉积。相较其他干预组,hucMSC-sEV干预能够有效改善皮肤衰老表型,维持皮肤厚度并恢复胶原纤维结构。在体外细胞模型中,UVA成功诱导了衰老DF细胞的增加,而hucMSC-sEV预处理能减少衰老细胞数量,抑制UVA引起的氧化应激、DNA损伤以及基质金属蛋白酶-1的表达,减少胶原蛋白流失,揭示hucMSC-sEV能够有效防御皮肤光老化。基于Ctrl组、UV损伤组和UV+sEV处理组3组DF细胞的RNA-seq和体内外验证结果,筛选出hucMSC-sEV处理后表达水平显著上调的妊娠区带蛋白(pregnancy zone protein,PZP)。过表达实验结果显示,伴随DF细胞中PZP水平的升高,可以减轻UVA导致的氧化应激损伤,显著抑制胶原蛋白的降解以及DNA损伤反应的激活,提示PZP在hucMSC-sEV防御DF细胞光老化中发挥关键作用。结论:HucMSC-sEV能够有效防御皮肤光老化,并通过上调PZP表达水平,显著抑制细胞衰老与DNA损伤,有望为预防皮肤衰老提供新策略。

关键词：小细胞外囊泡皮肤光老化真皮成纤维细胞妊娠区带蛋白细胞衰老

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高层建筑基础浅埋的整体性分析

建筑结构学报 2010年第S2期31卷 304-308页

作者：侯小美宋宝东中建国际(深圳)设计顾问有限公司广东深圳518048

结合深圳前海地铁上盖物业高层建筑因地下地铁轨道线的原因而不能设置地下室,只能采用基础浅埋的工程实例,提出了在不满足《建筑地基基础设计规范》5.1.3条和《高层建筑混凝土结构技术规程》12.1.7条:桩箱和桩筏基础的埋置深度不宜小于... 详细信息

结合深圳前海地铁上盖物业高层建筑因地下地铁轨道线的原因而不能设置地下室,只能采用基础浅埋的工程实例,提出了在不满足《建筑地基基础设计规范》5.1.3条和《高层建筑混凝土结构技术规程》12.1.7条:桩箱和桩筏基础的埋置深度不宜小于建筑物高度的1/18～1/20规定的情况下,对高层建筑在地震作用和水平风荷载作用下的整体倾覆分析、基础底面的零应力区分析、桩的竖向和水平承载力分析、大震弹性反应谱作用下桩的抗拔分析分别进行验算和采取有效的构造措施,来加强基础的刚度,保证建筑基础满足地基承载力、稳定性、基础底面的零应力区控制和大震作用下桩抗拔的要求,就可对规范的限制放松,在场地受限的情况下,也可采用浅埋基础的设计方案。其设计可供同类工程参考。

关键词：高层建筑浅埋基础整体倾覆零应力区分析大震弹反应谱

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灰色关联在叠合结构内力转移性能上的应用

中南工业大学学报 2002年第1期33卷 18-20页

作者：侯小美黄赛超中南大学资源环境与建筑工程学院湖南长沙410083

应用灰色关联分析法的原理 ,对叠合结构截面内力转移性能的 4个主要影响因素——— 2个阶段的截面有效高度比h0 1/h0 ,第 1阶段弯矩相对值M1/M1u,第 2阶段弯矩相对值M2 /M2u,截面配筋率 ρ/ ρmax进行关联优劣排序 .研究结果表明 ,影响... 详细信息

应用灰色关联分析法的原理 ,对叠合结构截面内力转移性能的 4个主要影响因素——— 2个阶段的截面有效高度比h0 1/h0 ,第 1阶段弯矩相对值M1/M1u,第 2阶段弯矩相对值M2 /M2u,截面配筋率 ρ/ ρmax进行关联优劣排序 .研究结果表明 ,影响叠合结构截面内力转移性能最大的关联因子是 2个阶段的截面有效高度比h0 1/h0 ,其次是第 1阶段弯矩相对值M1/M1u,第 2阶段弯矩相对值M2 /M2u,影响最小的关联因子是截面配筋率 ρ/ ρmax.

关键词：灰色关联分析截面内力转移叠结合关联因子

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应用神经网络评估叠合结构的耐久性

中南工业大学学报 2002年第2期33卷 125-128页

作者：侯小美黄赛超中南大学资源环境与建筑工程学院湖南长沙410083

由于叠合结构在预制和现浇两阶段受力截面高度不同 ,在荷载的作用下叠合结构产生的裂缝宽度、挠度、曲率总是大于钢筋混凝土和预应力混凝土在相同条件下产生的相应数值 .而且在实际操作中 ,只是按照结构规范简单地将荷载作用下的两阶段... 详细信息

由于叠合结构在预制和现浇两阶段受力截面高度不同 ,在荷载的作用下叠合结构产生的裂缝宽度、挠度、曲率总是大于钢筋混凝土和预应力混凝土在相同条件下产生的相应数值 .而且在实际操作中 ,只是按照结构规范简单地将荷载作用下的两阶段结果叠加 ,导致误差很大 ,很难准确地进行叠合结构的耐久性评估 .为此 ,作者提出了应用神经网络技术对叠合结构进行耐久性评估新方法 .该方法以叠合结构的裂缝宽度、挠度作为结构耐久性评估的网络输入 ,对网络采用动量法和自适应学习率调整的方法 ,从而较好地解决了数据空间分布不均对网络收敛速度及精度的影响问题 .计算结果与试验结果较好吻合 ,真实地反映了叠合结构二次受力的实际情况 ,能准确地预测出叠合结构的裂缝宽度、挠度 ,且避免了实际操作中人为因素、环境因素的影响。

关键词：神经网络叠合结构耐久性二次受力评估

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华润大厦超限高层的抗震性能化设计

结构工程师 2012年第3期28卷 60-66页

作者：侯小美宋宝东中建国际(深圳)设计顾问有限公司深圳518033

《高层建筑混凝土结构技术规程》(JGJ 3—2010)新增加了第3.11节:结构抗震性能设计,使高层的抗震设防目标有了更进一步的深化和发展。以南宁华润大厦超限高层为工程实例,采用基于性能设计的抗震分析方法,细化了各构件在各阶段的抗震性... 详细信息

《高层建筑混凝土结构技术规程》(JGJ 3—2010)新增加了第3.11节:结构抗震性能设计,使高层的抗震设防目标有了更进一步的深化和发展。以南宁华润大厦超限高层为工程实例,采用基于性能设计的抗震分析方法,细化了各构件在各阶段的抗震性能目标。采用多种有限元分析软件,针对超限高层详细进行了小震振型反应谱分析、中震作用下的屈服判别法分析、大震作用下的弹塑性静力推覆分析、跨多层通高柱的屈曲分析,并基于分析结果提出了该工程结构的超限抗震加强措施,保证了超限结构的安全可靠,为同类工程设计提供借鉴。

关键词：结构抗震性能设计屈服判别法静力推覆分析屈曲分析

小细胞外囊泡在皮肤光老化等皮肤疾病中的作用及机制研究进展

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中国细胞生物学学报 2023年第2期45卷 334-344页

作者：孔翔徐开颜吴芷菁吴佩佩侯小美张佳昕李钰李加利孙梓暄江苏大学医学院镇江212013 镇江市外泌体基础与转化应用高技术研究重点实验室镇江212013

小细胞外囊泡(small extracellular vesicles,sEVs)是近几年纳米医学界的新星,它有着独特的形态结构和理化性质,可以充当细胞间信息传递的介质,并作为疾病发生发展过程中的生物学标志物。现今人们越来越关注皮肤光老化问题,有关sEVs延... 详细信息

小细胞外囊泡(small extracellular vesicles,sEVs)是近几年纳米医学界的新星,它有着独特的形态结构和理化性质,可以充当细胞间信息传递的介质,并作为疾病发生发展过程中的生物学标志物。现今人们越来越关注皮肤光老化问题,有关sEVs延缓和改善皮肤光老化的研究也逐渐成为热点。来源于间充质干细胞的sEVs不仅在皮肤光老化中有减轻炎症反应和减弱氧化损伤等的作用,而且对于其他皮肤疾病(例如皮肤创伤、斑块状银屑病、系统性红斑狼疮以及皮肤肿瘤等)也有着显著的作用。此外,由于sEVs的囊泡性质,sEVs正在成为一种新的药物递送系统。然而在将干细胞源性sEVs作为一种新的治疗方法时,仍需重视其安全性和毒性问题。

关键词：间充质干细胞小细胞外囊泡皮肤光老化皮肤创伤皮肤肿瘤

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扭矩扳子检定装置测量不确定度的评定

技术与市场 2020年第7期27卷 65-66页

作者：侯小美陕西航空电气有限责任公司陕西兴平713107

结合扭矩扳子检定装置的建标工作,依据JJG707-2014《扭矩扳子检定规程》、JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》,对扭矩扳子检定装置的测量标准不确定度进行了评定。

关键词：扭矩扳子检定装置扭矩扳子测量不确定度

细胞自噬对HTLV-1在HeLa细胞中复制动力学的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2017年第3期37卷 208-212页

作者：黄青松丁自强牛志国王婷婷侯小美毛璐爽吕若涵李泽黄新祥王辉江苏大学医学院镇江212013 新乡医学院医学检验学院免疫学研究中心 453003 新乡医学院医学检验学院科研创新班 453003 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心新乡453003

目的探讨成人T淋巴细胞白血病病毒1型（HTLV-1）感染后的复制动力学及其对宿主细胞状态的影响。方法将HTLV-1病毒阳性细胞系MT2与HeLa细胞进行共培养，获得病毒早期感染模型，免疫印迹检测病毒核心蛋白p19、凋亡相关蛋白caspase-3/9、... 详细信息

目的探讨成人T淋巴细胞白血病病毒1型（HTLV-1）感染后的复制动力学及其对宿主细胞状态的影响。方法将HTLV-1病毒阳性细胞系MT2与HeLa细胞进行共培养，获得病毒早期感染模型，免疫印迹检测病毒核心蛋白p19、凋亡相关蛋白caspase-3/9、自噬相关蛋白LC3；real-time PCR检测病毒载量；荧光素酶活性检测3′长末端重复序列（3′-LTR）转录活性；免疫荧光检测自噬体数目。结果通过细胞共培养成功模拟了早期病毒感染；共培养后4 h、8 h、16 h、24 h、36 h，病毒核酸载量及长末端重复序列3′-LTR转录活性逐渐增加（P〈0.01），24-36 h达到平台期；而核心蛋白p19的表达4 h可以检测到，但8 h后降低，16 h后又升高，24 h和36 h差异无统计学意义；病毒感染后宿主细胞中caspase-3/7/9的活性及蛋白没有明显变化（P〉0.05），但是自噬相关蛋白LC3B/LC3A比例逐渐上升，伴有胞内自噬体数目的增加（P〈0.01）。结论HTLV-1病毒复制动力学与宿主细胞的自噬密切相关。

关键词：成人T淋巴细胞白血病病毒1型复制动力学细胞凋亡细胞自噬

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大底盘地下室结构优化设计的经济性探讨

广东土木与建筑 2008年第4期15卷 15-17页

作者：侯小美宋宝东黄用军中建国际(深圳)设计顾问有限公司深圳518033

以卓越皇岗世纪中心近10万m2大底盘地下室为分析对象,针对地下室基础、外墙、梁板水平构件布置、楼板钢筋选用等方面,采用新型底板体系和专门的技术措施,从多角度、多方面地去优化各构件的配筋量,从而使整个地下室获得了良好的经济指标... 详细信息

以卓越皇岗世纪中心近10万m2大底盘地下室为分析对象,针对地下室基础、外墙、梁板水平构件布置、楼板钢筋选用等方面,采用新型底板体系和专门的技术措施,从多角度、多方面地去优化各构件的配筋量,从而使整个地下室获得了良好的经济指标,既满足了结构受力要求,又为建设方节省了大量资金,取得了可观的经济效益。

关键词：大底盘地下室承台柱帽式无梁筏板地下室外墙梁板楼盖体系