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茶皂素提取纯化及其抗菌活性研究

茶皂素提取纯化及其抗菌活性研究

作者：侯如燕安徽农业大学

学位级别：硕士

茶皂素是从山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia)植物中提取出来的一类齐墩果烷型三萜类皂甙的混合物。近三十年的研究表明，它具有良好的表面活性的同时，又具有多种生物学活性。特别是近年来的药理活性研究发现，茶皂素具有抗菌消炎、杀... 详细信息

茶皂素是从山茶科(Theaceae)山茶属(Camellia)植物中提取出来的一类齐墩果烷型三萜类皂甙的混合物。近三十年的研究表明，它具有良好的表面活性的同时，又具有多种生物学活性。特别是近年来的药理活性研究发现，茶皂素具有抗菌消炎、杀灭病毒、抗氧化、抗高血压、抑制酒精吸收保护肠胃、以及杀虫驱虫等药理学功能。茶皂素具有广阔的应用前景。本文对两种常用的茶皂素定量分析方法：香草醛-浓硫酸显色法和测定糖体定量法进行了比较分析，并用自制的标准品绘制了茶皂素定量测定的工作曲线，为提取和纯化工艺中的定量分析奠定了基础;本文重点研究了从油茶饼粕中分离提纯茶皂素的工艺，在提高茶皂素的得率的基础上得到了高纯度的茶皂素产品;为了扩大茶皂素的应用范围，对茶皂素的抗菌活性进行了初步探索。定量分析方法的研究结果表明，两种定量方法都适合于茶皂素的定量分析，但各有优缺。香草醛-浓硫酸显色法是最常用的皂甙定量方法，它具有反应灵敏，操作相对简单，操作流程短等优点，但是，反应条件要求控制严格，否则易造成实验误差。测定糖体定量法具有显色相对稳定，反应条件容易控制，但试剂消耗量大，操作流程长，被测样品需经过初步纯化等缺点。两种检测方法在严格控制反应条件的情况下，都能准确的定量茶皂素产品。本文侧重对茶皂素的分离纯化方法的研究，得出了树脂吸附法和溶剂萃取法两种适合茶皂素分离纯化的工艺流程。筛选出一种适合茶皂素生产的国产苯乙烯共聚树脂，并对树脂的吸附及解吸性能进行了优化选择;对溶剂萃取法的各个工艺过程进行了详细的实验探索，得出了较佳的溶剂法生产茶皂素的工艺流程，使得产品得率和纯度进一步提高;首次使用了一种安全、无毒的溶剂实现茶皂素的初步结晶，避免了有毒有机溶剂对环境的污染，且得到了高纯度茶皂素产品。茶皂素粗提物对食品腐败细菌、真菌以及植物病原真菌的抗菌实验结果表明，茶皂素对各种细菌和真菌均有不同程度的抑制作用，且抑菌效果与茶皂素浓度呈正相关。茶皂素粗提物对食品腐败菌中细菌和曲霉属(Aspergillus)真菌抑制能力较弱，而对青霉菌(Penicillium glaueus)和单细胞真菌啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiate)的抑菌能力较强，尤其对啤酒酵母pocharo叫es cerevisiQte）的抑菌效果最好，其最低杀菌浓度 MIC值为***／ttil;茶皂素粗提物对植物病原真菌小麦纹枯病菌吠hizoctonia cerealisvander HOven）和棉花黄萎病菌（Verticillium dahliae）有较强的抑菌作用，其EC。。分别为：80刀9和 169．24mg／thl。研究结果还表明，茶皂素作为抑菌活性物质对不同的菌种有一定的选择性，并且有着潜在的应用价值和广泛的应用前景。

关键词：茶皂素提取纯化定量方法抗菌活性

安徽茶园茶叶中四种大量元素和七种微量元素的含量分析及生物富集研究（英文）

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光谱学与光谱分析 2017年第6期37卷 1980-1986页

作者：彭传燚朱晓慧奚军军侯如燕蔡荟梅安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室安徽合肥230036

主要采用电感耦合等离子体质谱技术(inductively coupled plasma mass spectrometry,ICP-MS)测定了安徽茶园茶叶中四种大量元素(Ca,K,Mg,P)和七种微量元素(Al,Mn,Fe,Cu,Zn,Cd和Pb)含量,并进行了生物富集分析。结果表明,嫩叶中Ca,K,Mg和P的含量最高(Ⅰ,>3.0mg·g^(-1)),Al,Mn,Zn和Fe的含量次之(Ⅱ,0.2~3.0mg·g^(-1)),Cu,Pb和Cd的含量最低(Ⅲ,3.0mg·g^(-1)),P,Mn,Zn和Fe的含量次之(Ⅱ,0.2~3.0mg·g^(-1)),Cu,Pb和Cd的含量最低(Ⅲ,<0.05mg·g^(-1))。其中,P和Mn是茶叶中富集能力最强的;此外,Cu,Pb和Cd的含量低于相关的限量标准。聚类分析结果表明舒茶早和龙井43两个品种之间矿质元素的组成没有显著性的差异。

关键词：茶叶大量元微量元素生物富集 ICP-MS

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果胶酶澄清西洋参果酒的影响因素与效果评价

食品与发酵工业 2008年第11期34卷 86-90页

作者：蔡荟梅侯如燕宛志沪安徽农业大学茶与食品科技学院

通过四因素二次旋转正交试验设计,考察了果胶酶的水解温度、时间、酶的用量和pH值对西洋参果酒澄清度的影响,得出西洋参果酒澄清度的回归模型。结果表明,水解温度对果酒澄清度的影响显著(P酶解温度>酶的用量>酶解时间;西洋参果酒澄清的... 详细信息

通过四因素二次旋转正交试验设计,考察了果胶酶的水解温度、时间、酶的用量和pH值对西洋参果酒澄清度的影响,得出西洋参果酒澄清度的回归模型。结果表明,水解温度对果酒澄清度的影响显著(P酶解温度>酶的用量>酶解时间;西洋参果酒澄清的优化工艺参数为:酶解温度为60℃,酶的用量1 mL,酶解时间180 min和pH值为3.5;果胶酶对果酒的感官、色泽和稳定性有改善作用。

关键词：西洋参果酒果胶酶澄清数学模型

水果蔬菜中吡虫啉农药残留的液相色谱检测方法

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食品与发酵工业 2009年第10期35卷 128-131页

作者：侯如燕蔡荟梅张正竹宛晓春安徽农业大学茶与食品科技学院教育部农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室安徽合肥230036

果蔬样品经乙腈提取,ENVI-18小柱净化,采用液相色谱,二极管阵列检测器检测,测定了几种水果蔬菜中吡虫啉农药的残留量。对苹果、梨、香蕉、黄瓜、西红柿、圆白菜进行了添加回收试验,吡虫啉的添加浓度为0.05-3.0mg/kg,其回收率范围84.4%-1... 详细信息

果蔬样品经乙腈提取,ENVI-18小柱净化,采用液相色谱,二极管阵列检测器检测,测定了几种水果蔬菜中吡虫啉农药的残留量。对苹果、梨、香蕉、黄瓜、西红柿、圆白菜进行了添加回收试验,吡虫啉的添加浓度为0.05-3.0mg/kg,其回收率范围84.4%-108.6%,相对标准偏差(RSD)≤7.6%,方法最低检出浓度为0.02-0.05mg/kg,符合农药残留分析要求。方法前处理手段简单快捷,有机溶剂用量少。

关键词：水果蔬菜吡虫啉农药残留液相色谱

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西洋参果酒酿造工艺的研究

食品工业科技 2012年第1期33卷 241-244,249页

作者：蔡荟梅高柱蒋跃林侯如燕宛志沪安徽农业大学安徽食品安全与检测省级实验室安徽合肥230036 国家农副加工食品质量监督检验中心安徽合肥230001

对西洋参果酒的酿造条件进行了初步的探讨,通过单因素实验、正交实验,确定出该产品的最佳生产工艺。结果表明:采用带果皮60℃热浸提20min,去皮渣发酵,并采用发酵温度为26℃,接种量为7%,SO2添加量为80mg/L,起始糖度为18.7%。在该工艺条... 详细信息

对西洋参果酒的酿造条件进行了初步的探讨,通过单因素实验、正交实验,确定出该产品的最佳生产工艺。结果表明:采用带果皮60℃热浸提20min,去皮渣发酵,并采用发酵温度为26℃,接种量为7%,SO2添加量为80mg/L,起始糖度为18.7%。在该工艺条件下发酵,酿造出来的西洋参果酒,颜色鲜红,澄清透亮,酒味浓郁,酒体丰满,同时具有丰富的营养成分。

关键词：西洋参果酒发酵条件果胶酶

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采用大孔树脂法纯化油茶皂苷的工艺条件

食品与发酵工业 2005年第2期31卷 130-132页

作者：侯如燕宛晓春黄继轸安徽农业大学茶与食品科技学院教育部农业部茶叶生物化学与生物技术重点开放实验室

比较了 10种国产大孔树脂纯化油茶皂苷的吸附和解吸性能 ,筛选出一种适合茶皂苷生产的国产苯乙烯共聚树脂 ,并对树脂的吸附及解吸性能进行了优化选择 ,所得产品纯度超过 80 % ,产品的得率 >8% ,是一种较好的生产精制油茶皂苷的方法。

关键词：皂苷大孔树脂纯化国产解吸性能筛选优化选择共聚树脂产品纯度工艺条件

三个品种茶树氟富集特性及其在亚细胞中的分布

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中国农业科学 2013年第8期46卷 1668-1675页

作者：蔡荟梅彭传燚李成林高柱侯如燕宛晓春安徽农业大学茶与食品科技学院/教育部农业部茶叶生物化学与生物技术重点实验室安徽绿魁茶业有限公司 3. 国家农副加工食品质量监督检验中心

【目的】研究茶树对氟吸收、富集规律及其解毒机理。【方法】通过水培试验,结合差速离心方法研究平阳特早、乌牛早和凫早2号氟富集的特性及根和叶片中氟的亚细胞分布,比较不同品种之间的差异。【结果】3个品种茶树根、茎和叶氟含量均随... 详细信息

【目的】研究茶树对氟吸收、富集规律及其解毒机理。【方法】通过水培试验,结合差速离心方法研究平阳特早、乌牛早和凫早2号氟富集的特性及根和叶片中氟的亚细胞分布,比较不同品种之间的差异。【结果】3个品种茶树根、茎和叶氟含量均随着培养介质氟浓度的增加而升高,0—10 mg.L-1氟处理下,地上部分氟含量大于根部氟含量(转运系数>1),且茶树吸收的氟中56%贮存在地上部分。除对照组外,大部分氟积累在叶片和根系的细胞壁(76.84%—91.58%)和可溶性部分(53.24%—80.35%),氟的添加均增加了氟在3个品种茶树细胞壁和可溶性部分中的分配比例,减少了其在细胞器中的富集。加氟处理下,平阳特早和乌牛早叶片亚细胞组分氟含量的变化趋势为:细胞壁>可溶性部分>细胞器;凫早2号为可溶性部分>细胞壁>细胞器。低氟(0—5 mg.L-1)氟处理下,茶树根系亚细胞氟含量变化趋势为:细胞器≥细胞壁>可溶性部分;高氟(10—50 mg.L-1)氟处理下,则为细胞壁>可溶性部分≥细胞器。【结论】转运系数、地上部分氟的贮存率和氟在亚细胞组分的分布表明,茶树具有较强的向上运输氟的能力;氟在茶树根和叶中的亚细胞分布与茶树的品种和溶液氟处理的浓度有关,叶片中总氟含量与各亚细胞组分氟含量之间及其各亚细胞组分氟含量之间的关系与品种有关,根系表现与品种无关;细胞壁和可溶性部分是茶树高氟处理下氟主要的存储部位,说明细胞壁沉淀和细胞内的区隔化作用可能是茶树能够解除氟毒的重要原因。

关键词：茶树品种氟富集亚细胞分布

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基于主成分聚类分析的咸味香精鉴别方法

食品与发酵工业 2013年第6期39卷 180-185页

作者：侯如燕杨婷婷朱萌萌张蕾安徽农业大学茶与食品科技学院安徽食品质量安全与检测省有实验室安徽合肥230036 安徽出入境检验检疫局安徽合肥230022

采用静态顶空与GC-MS联用对4种品牌"一滴香"、2种品牌牛肉味、1种品牌鸡肉味和1种品牌猪肉味咸味香精的挥发性成分进行了分析,共鉴定出105种挥发性成分,主要由醛类、酮类、酯类及含氮、含硫类化合物组成。利用SPSS 19.0分析软件对所得10... 详细信息

采用静态顶空与GC-MS联用对4种品牌"一滴香"、2种品牌牛肉味、1种品牌鸡肉味和1种品牌猪肉味咸味香精的挥发性成分进行了分析,共鉴定出105种挥发性成分,主要由醛类、酮类、酯类及含氮、含硫类化合物组成。利用SPSS 19.0分析软件对所得105种挥发性成分进行主成分聚类分析,结果表明:"一滴香"产品与常用牛肉味、鸡肉味、猪肉味香精有差异,且常用香精的生产工艺及配方是影响聚类分析的主要因素。

关键词： '一滴香' 咸味香精 HS-GC/MS 聚类分析

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主成分及聚类分析用于洽洽香瓜子的快速鉴别

食品与发酵工业 2013年第10期39卷 227-234页

作者：朱萌萌沈旭陈江琳杨婷婷侯如燕安徽农业大学茶与食品科技学院硕士研究生安徽合肥230036 合肥洽洽食品有限责任公司安徽合肥230036

采用同时蒸馏萃取(SDE)与GC-MS联用对洽洽香瓜子和6种不同品牌香瓜的挥发性成分进行了分析,共分离鉴定出129种挥发性成分,主要由醛类、酮类、酯类、烯烃类、醚类、含硫含氮类、酚类、醇类和酸类化合物组成,不同品牌的香瓜子含有其特有... 详细信息

采用同时蒸馏萃取(SDE)与GC-MS联用对洽洽香瓜子和6种不同品牌香瓜的挥发性成分进行了分析,共分离鉴定出129种挥发性成分,主要由醛类、酮类、酯类、烯烃类、醚类、含硫含氮类、酚类、醇类和酸类化合物组成,不同品牌的香瓜子含有其特有的挥发性风味物质。利用SPSS 19.0分析软件对所得的129种挥发性成分进行主成分分析,取累积贡献率为92.44%的前8个主成分进行聚类分析。结果表明,通过主成分聚类分析能很好的将洽洽香瓜子与其他品牌的香瓜子鉴别区分开。

关键词：香瓜子 SDE—GC—MS 主成分分析聚类分析