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地涌金莲组织培养中的褐化抑制研究

地涌金莲组织培养中的褐化抑制研究

作者：侯健华中国林业科学研究院

学位级别：硕士

地涌金莲为我国西南地区特有的单种属植物,其株形端庄、花序硕美,是具有广阔前景的珍贵野生花卉种质资源。地涌金莲组织培养中的褐化问题一直是其优良品种选育及规模化生产的技术瓶颈。为解决这一问题,本文以原变种地涌金莲和变种红苞... 详细信息

地涌金莲为我国西南地区特有的单种属植物,其株形端庄、花序硕美,是具有广阔前景的珍贵野生花卉种质资源。地涌金莲组织培养中的褐化问题一直是其优良品种选育及规模化生产的技术瓶颈。为解决这一问题,本文以原变种地涌金莲和变种红苞地涌金莲为供试材料,对地涌金莲组织培养的外植体消毒方式、植物生长调节剂种类及配比和不同抗褐化剂对愈伤组织褐化的影响进行了研究,对比了原变种和红苞变种组织培养中的差异,分析了地涌金莲组织培养过程中总酚含量和PPO活性的动态变化,对地涌金莲不同变种、不同部位的总酚含量和PPO活性进行了定量分析。主要研究结论如下:(1)地涌金莲组织培养中未经消毒的外植体其污染率为0,且褐化率和褐化指数均显著低于消毒后的外植体;6-BA在地涌金莲愈伤组织诱导中起主要作用,浓度为2 mg·L-1、3mg·L-1时有利于愈伤组织的诱导,能显著降低褐化指数;添加柠檬酸+抗坏血酸(VC)混合液、表面添加VC均对红苞变种褐化未起到明显抑制作用,姜汁和阿魏酸对抑制愈伤组织褐化有较好的效果,48.5 mg·L-1的阿魏酸能显著降低愈伤组织的褐化,使愈伤组织分化率达17.9%,较对照的2.9%提高了15%。(2)地涌金莲愈伤组织在培养过程中其褐化指数呈上升趋势,培养30 d时原变种和红苞变种愈伤组织褐化指数分别为3.1%和8.3%,培养180 d后褐化指数分别升至71.7%和89.3%,在相同的时期,红苞变种愈伤组织的褐化指数均显著高于原变种。培养30 d时原变种愈伤组织生长量为487.3%,红苞变种愈伤组织生长量为244.0%,随着继代次数的增加,愈伤组织相对生长量逐渐降低,到180 d时分别降至33.3%和10.7%,红苞变种愈伤组织的相对生长量显著低于原变种。红苞变种愈伤组织比原变种愈伤组织褐化更为严重,更难成功获得组培苗。(3)在地涌金莲愈伤组织诱导时期,PPO活性急剧升高,原变种PPO活性高于红苞变种,培养14 d时二者PPO酶的比活力分别为3948.1、2037.2(0.01 A·g-1·min-1)。在愈伤组织培养60 d后,原变种愈伤组织PPO活性开始降低,至培养120 d后PPO活性保持在1700900(0.01 A·g-1·min-1)左右,红苞变种愈伤组织PPO活性并不降低,一直保持在2200550(0.01 A·g-1·min-1)左右。在愈伤组织诱导和分化阶段,红苞变种愈伤组织总酚含量均显著高于原变种,且红苞变种愈伤组织在培养30 d后总酚含量不断增加,由3.05 mg·g-1增至5.20 mg·g-1;原变种愈伤组织总酚含量保持在2.3 mg·g-1左右,相对稳定。在愈伤组织分化阶段,红苞变种PPO活性和总酚含量均高于原变种,这一过程伴随着红苞变种的褐变加重,这说明红苞变种褐化严重可能与其高的PPO活性和总酚含量有关。(4)检测的地涌金莲不同外植体部位中雄蕊总酚含量最高,为21 mg·g-1,红苞变种的叶片和叶脉中总酚含量均高于原变种,分别是原变种的2.0倍和3.2倍。地涌金莲叶片、叶脉、和雌花胚珠等3个部位PPO活性较高,苞片、雄花子房等8个部位PPO活性很低或PPO没有活性。地涌金莲愈伤组织分化成芽后其总酚含量和PPO活性均会降低,红苞变种芽的总酚含量高于原变种,原变种芽的PPO活性高于红苞变种。地涌金莲芽在发育成叶这一过程中,其总酚含量有所增加,原变种由0.56 mg·g-1增加为4.67 mg·g-1,红苞变种由2.34 mg·g-1增加至9.43 mg·g-1;但其芽的PPO活性和母株叶片的PPO活性差异不显著。(5)通过本研究可得出,以地涌金莲未成熟雄花为外植体,在无菌条件下不经过消毒直接进行接种,采用2 mg·L-1、3 mg·L-1的6-BA和3 mg·L-1的2,4-D对外植体进行愈伤组织的诱导,在愈伤组织诱导和分化培养基中添加48.5 mg·L-1阿魏酸作抗褐化剂,可以有效的抑制地涌金莲愈伤组织的褐化问题,优化了地涌金莲组织培养体系。

关键词：地涌金莲愈伤组织褐化总酚含量 PPO活性

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仁和水库大坝现状及抗洪能力复核计算分析

现代农业科技 2013年第3期 221-222页

作者：侯健华黑龙江省依安县水利勘测设计队黑龙江依安161500

阐述了仁和水库大坝工程概况,对水库大坝现状抗洪能力复核的计算方法进行了分析,以期保证水库大坝的安全运行。

关键词：仁和水库土坝工程概况抗洪能力计算分析

地涌金莲不同部位外植体多酚氧化酶活性及总酚含量分析

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安徽农业大学学报 2017年第3期44卷 487-491页

作者：杨凯博舒清态侯健华朱丹青西南林业大学林学院昆明650224 中国林业科学研究院资源昆虫研究所昆明650233 昆明市呈贡区农林局昆明650500

通过对比分析地涌金莲原变种与红苞变种外植体PPO活性及总酚含量的差异,为组织培养适宜外植体的选择提供理论依据。结果表明,地涌金莲原种与红苞变种不同部位总酚含量存在显著差异,均表现为雄蕊最高,其中原变种为21.42 mg·g^(-1),红苞... 详细信息

通过对比分析地涌金莲原变种与红苞变种外植体PPO活性及总酚含量的差异,为组织培养适宜外植体的选择提供理论依据。结果表明,地涌金莲原种与红苞变种不同部位总酚含量存在显著差异,均表现为雄蕊最高,其中原变种为21.42 mg·g^(-1),红苞变种为20.64 mg·g^(-1),且均显著高于其他部位;红苞变种叶片及叶脉总酚含量分别为9.43mg·g^(-1)和2.32 mg·g^(-1),显著高于原变种的4.67 mg·g^(-1)和0.72 mg·g^(-1),而红苞变种雌花子房壁总酚含量为4.96 mg·g^(-1),显著低于原变种的9.44 mg·g^(-1),其余8个部位的总酚含量在2变种间无显著差异;原变种叶片及叶脉的PPO活性分别为971.5和542.8(0.01△A·g^(-1)·min(-1)),显著高于红苞变种的277.2和428.5(0.01△A·g^(-1)·min(-1)),其他部位的PPO活性两者无显著差异。表明总酚含量及PPO活性均较低的花苞片、雄花子房是地涌金莲组织培养较理想外植体材料。

关键词：地涌金莲组织培养褐化总酚多酚氧化酶

全国绿化委员会印发《全民义务植树尽责形式管理办法(试行)》

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国土绿化 2017年第6期 9-10页

作者：许云飞侯健华

1981年12月13日,五届全国人大四次会议通过了《关于开展全民义务植树运动的决议》。次年,国务院颁布了《关于开展全民义务植树运动的实施办法》。从此,一场世界上参加人数最多、持续时间最长、声势最浩大、影响最深远的群众性植树活动,... 详细信息

1981年12月13日,五届全国人大四次会议通过了《关于开展全民义务植树运动的决议》。次年,国务院颁布了《关于开展全民义务植树运动的实施办法》。从此,一场世界上参加人数最多、持续时间最长、声势最浩大、影响最深远的群众性植树活动,以其特有的法定性、全民性、公益性、义务性,在中华大地上蓬勃开展起来。

关键词：全民义务植树运动委员会管理绿化持续时间国务院群众性公益性

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地涌金莲组织培养中的褐化抑制

林业科学研究 2015年第2期28卷 217-221页

作者：侯健华李正红马宏刘秀贤万友名中国林业科学研究院资源昆虫研究所云南昆明650224

地涌金莲组织培养中的褐化问题一直是其优良品种选育及规模化生产的技术瓶颈。为解决这一问题,以地涌金莲未成熟雄花为试材,研究了外植体消毒方式、植物生长调节剂种类及配比和不同抗褐化剂对愈伤组织褐化的影响。结果表明,未经消毒的... 详细信息

地涌金莲组织培养中的褐化问题一直是其优良品种选育及规模化生产的技术瓶颈。为解决这一问题,以地涌金莲未成熟雄花为试材,研究了外植体消毒方式、植物生长调节剂种类及配比和不同抗褐化剂对愈伤组织褐化的影响。结果表明,未经消毒的外植体其污染率为0%,且褐化率和褐化指数均显著低于消毒后的外植体;6-BA在地涌金莲愈伤组织诱导中起主要作用,浓度为2 mg·L-1、3 mg·L-1时有利于愈伤组织的诱导,能显著降低褐化指数;添加柠檬酸+抗坏血酸(VC)混合液、表面添加VC均对地涌金莲褐化未起到明显抑制作用,姜汁和阿魏酸对抑制愈伤组织褐化有较好的效果,48.5 mg·L-1的阿魏酸能显著降低愈伤组织的褐化,使愈伤组织分化率达17.9%,较对照的2.9%提高了15%。

关键词：地涌金莲组织培养愈伤组织褐化抗褐化剂

地涌金莲及红苞地涌金莲对光和CO_2的响应

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林业科学研究 2013年第2期26卷 234-239页

作者：周翠丽李正红马宏万友名刘秀贤侯健华中国林业科学研究院资源昆虫研究所云南昆明650224

比较分析了地涌金莲原种及红苞地涌金莲变种的光响应和CO2响应特征以及叶绿素含量等指标。结果表明:(1)在Pn—PAR中,地涌金莲原种的最大光饱和净光合速率、光补偿点和暗呼吸速率分别较红苞变种高20.42%、34.88%、31.95%,而光饱和点却较... 详细信息

比较分析了地涌金莲原种及红苞地涌金莲变种的光响应和CO2响应特征以及叶绿素含量等指标。结果表明:(1)在Pn—PAR中,地涌金莲原种的最大光饱和净光合速率、光补偿点和暗呼吸速率分别较红苞变种高20.42%、34.88%、31.95%,而光饱和点却较红苞变种低4.95%;Pn—Ci响应的各参数中,原种的光呼吸速率、CO2饱和最大净光合速率以及羧化效率分别高于红苞变种2.73%、14.79%、21.35%,说明地涌金莲的光合能力要强于红苞地涌金莲;(2)地涌金莲具有典型的C3植物特征;(3)地涌金莲为阳性耐荫植物;(4)地涌金莲的叶绿素a、b以及a/b的含量分别高于红苞地涌金莲22.60%、32.46%、25.06%。

关键词：地涌金莲红苞地涌金莲光响应 CO2响应叶绿素

用不同的手术方法对高龄股骨颈骨折患者进行治疗的效果对比

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当代医药论丛 2020年第11期18卷 32-34页

作者：黄吉辉张黎杨学义陈嘉侯健华柳州市中医医院综合骨科广西柳州545001

目的:对比用不同的手术方法对高龄股骨颈骨折患者进行治疗的临床效果.方法:将2018年3月至2019年3月期间柳州市中医医院收治的76例高龄股骨颈骨折患者作为研究对象.按照随机数表法将这76例患者分为甲组(n=38)和乙组(n=38).对甲组患者进... 详细信息

目的:对比用不同的手术方法对高龄股骨颈骨折患者进行治疗的临床效果.方法:将2018年3月至2019年3月期间柳州市中医医院收治的76例高龄股骨颈骨折患者作为研究对象.按照随机数表法将这76例患者分为甲组(n=38)和乙组(n=38).对甲组患者进行空心钉内固定术,对乙组患者进行人工髋关节置换术.然后,比较两组患者进行手术的用时、术中的出血量、住院的时间、Harris髋关节功能的评分、术后并发症的发生率及其股静脉的平均血流速度.结果:治疗后,与甲组患者相比,乙组患者进行手术的用时和住院的时间均更长,其术中的出血量更多,P0.05.在术后的1个月时,与甲组患者相比,乙组患者Harris髋关节功能的评分更高,其股静脉的平均血流速度更快,P<0.05.结论:与进行空心钉内固定术相比,对高龄股骨颈骨折患者进行人工髋关节置换术的效果更好,可显著促进其髋关节功能的恢复,促进其髋关节血管的重建.但是,该术式可延长治疗的时间,增加患者的术中出血量.

关键词：高龄股骨颈骨折空心钉内固定术人工髋关节置换术髋关节功能

腰椎间盘突出症患者使用银质针深刺治疗对疼痛感的缓解效果

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2020年第10期 59-60页

作者：黄吉辉张黎杨学义侯健华陈嘉柳州市中医医院广西柳州545000

分析腰椎间盘突出症患者使用银质针深刺治疗对疼痛感的缓解效果。方法:本文采用的96例研究对象为20018年5月至2020年5月到我院开展治疗的腰椎间盘突出症患者。根据治疗方法分为银质针治疗组(n=32)、单纯佩戴支具组(n=32)与常规封闭治疗... 详细信息

分析腰椎间盘突出症患者使用银质针深刺治疗对疼痛感的缓解效果。方法:本文采用的96例研究对象为20018年5月至2020年5月到我院开展治疗的腰椎间盘突出症患者。根据治疗方法分为银质针治疗组(n=32)、单纯佩戴支具组(n=32)与常规封闭治疗组(利多卡因+曲安奈德,n=32),随访3个月,比较疼痛程度改善情况。结果:在VAS评分上,银质针治疗组明显优于单纯佩戴支具组、常规封闭治疗组(P<0.05)。结论:在腰椎间盘突出症治疗过程中,采用银质针深刺的优势显著,在减轻疼痛程度方面发挥着重要的作用,临床可进一步推广运用。

关键词：腰椎间盘突出症银质针深刺封闭治疗疼痛程度

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内镜与腹腔镜联合治疗重症急性胰腺炎

内蒙古医学杂志 2004年第12期36卷 1035-1036页

作者：苑海明侯健华王永新蔚向军乌海市人民医院外二科内蒙古乌海016000

目的 :探讨内镜及腹腔镜治疗重症急性胰腺炎效果。方法 :回顾性分析 1995年 1月～ 2 0 0 1年 11月采用传统内科及外科方法治疗重症急性胰腺炎 (SAP) 38例 ,2 0 0 1年 11月～ 2 0 0 3年 11月采用内镜及腹腔镜联合治疗SAP 17例进行对比研... 详细信息

目的 :探讨内镜及腹腔镜治疗重症急性胰腺炎效果。方法 :回顾性分析 1995年 1月～ 2 0 0 1年 11月采用传统内科及外科方法治疗重症急性胰腺炎 (SAP) 38例 ,2 0 0 1年 11月～ 2 0 0 3年 11月采用内镜及腹腔镜联合治疗SAP 17例进行对比研究 ,分析哪一种方法更有效。结果 :传统内科及外科方法治疗组病死率5 2 6 % ,内镜及腹腔镜治疗组病死率 17.6 %。结论 :内镜及腹腔镜联合治疗SAP效果好。

关键词：重症急性胰腺炎内镜腹腔镜