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牛促卵泡激素α亚基cDNA的克隆与序列分析

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生物化学与生物物理进展 1998年第2期25卷 159-162页

作者：昔奋攻余荭陈新国石玉瑚陈清轩张志红新疆农业科学院微生物研究所中国科学院发育生物研究所

从牛脑垂体中提取总ＲＮＡ，分离ｍＲＮＡ，反转录获得ｃＤＮＡ，ＰＣＲ扩增获得长为３８０ｂｐ的牛促卵泡激素α亚基ｃＤＮＡ片段，将它克隆于ｐＵＣ１９中，进行序列分析，结果表明：所克隆的α亚基基因编码区序列与Ｅｒｗｉｎ所发表... 详细信息

从牛脑垂体中提取总ＲＮＡ，分离ｍＲＮＡ，反转录获得ｃＤＮＡ，ＰＣＲ扩增获得长为３８０ｂｐ的牛促卵泡激素α亚基ｃＤＮＡ片段，将它克隆于ｐＵＣ１９中，进行序列分析，结果表明：所克隆的α亚基基因编码区序列与Ｅｒｗｉｎ所发表的序列基本相同，仅编码第２４位赖氨酸的密码有差异，同时将所获基因的核苷酸序列及相应氨基酸序列与人、啮齿类的同类基因相比较，具有很高的同源性．

关键词：牛促卵泡激素促卵泡激素 α亚基 cDNA 序列分析

牛泡沫病毒BFV3026细胞感染性的确立及包装细胞系的建立

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病毒学报 2003年第4期19卷 330-335页

作者：余荭孔晓红李汀马永钢陈启民耿运琪南开大学生命科学院天津300071

分别将牛泡沫病毒BFV3026接种于胎牛肺细胞(FBL)、牛肺细胞系(BL12)、新生牛肾细胞(NBK)、兔肺细胞(RL)、人乳腺癌上皮细胞(MCF)、293T、HeLa、CV-1、CHO等9种细胞,通过对它们及其传代细胞的病变观察与RT-PCR检测,确立BFV3026对这9种细... 详细信息

分别将牛泡沫病毒BFV3026接种于胎牛肺细胞(FBL)、牛肺细胞系(BL12)、新生牛肾细胞(NBK)、兔肺细胞(RL)、人乳腺癌上皮细胞(MCF)、293T、HeLa、CV-1、CHO等9种细胞,通过对它们及其传代细胞的病变观察与RT-PCR检测,确立BFV3026对这9种细胞的感染。并以BFV3026原病毒DNA为模板,通过PCR构建以pcD NA3 1(-)为载体的gag-pol、env真核表达质粒共转染BL12细胞,经G418持续筛选,获得8个NeoR细胞克隆。RT-PCR及包装实验证实:其中7个细胞克隆能有效行使包装辅助功能。

关键词：牛泡沫病毒 BFV3026细胞感染性包装细胞系

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砂石生产废水处理工艺研究

现代工程科技 2023年第10期2卷 37-40页

作者：余桂荭中国葛洲坝集团路桥工程有限公司湖北宜昌443002

针对现有水电站砂石加工系统产生的高悬浮物废水处理工艺存在排泥系统易堵、沉渣脱水困难的问题,通过对砂石加工废水中悬浮物的沉降性能、粒径分布和沉渣的脱水性能进行相关分析,提出了组合式沉淀工艺及处理砂石废水创新工艺。经此工艺... 详细信息

针对现有水电站砂石加工系统产生的高悬浮物废水处理工艺存在排泥系统易堵、沉渣脱水困难的问题,通过对砂石加工废水中悬浮物的沉降性能、粒径分布和沉渣的脱水性能进行相关分析,提出了组合式沉淀工艺及处理砂石废水创新工艺。经此工艺处理后,采用活性炭吸附床进行二级深度处理,以进一步去除砂石生产废水中的有机物、微量元素(如重金属等)和臭味。实践证明,该工艺具有良好的处理效果和经济性,可以有效解决悬浮物沉降和泥渣脱水问题。

关键词：砂石系统生产废水处理工艺设计

牛泡沫病毒BFV3026 gag基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达(英文)

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南开大学学报（自然科学版） 2003年第1期36卷 84-90页

作者：余荭孔晓红马永刚李汀王金忠陈启民耿运琪南开大学生命科学学院天津300071

从牛泡沫病毒 BFV3 0 2 6感染的胎牛肺细胞中提取 Hirt DNA,PCR扩增 BFV3 0 2 6gag基因 .序列分析确证后 ,将其克隆于原核表达载体 p ET3 2 A,重组质粒转化大肠杆菌 BL2 1 (DE3 ) ,经 IPTG诱导 ,使 Gag蛋白得以高效表达 .SDS-PAGE及 Wes... 详细信息

从牛泡沫病毒 BFV3 0 2 6感染的胎牛肺细胞中提取 Hirt DNA,PCR扩增 BFV3 0 2 6gag基因 .序列分析确证后 ,将其克隆于原核表达载体 p ET3 2 A,重组质粒转化大肠杆菌 BL2 1 (DE3 ) ,经 IPTG诱导 ,使 Gag蛋白得以高效表达 .SDS-PAGE及 Western blot证实 :表达蛋白占菌体总蛋白的 40 % .本工作的完成为 Gag蛋白功能的研究奠定基础 .

关键词：牛泡沫病毒 BFV3026 gag基因基因克隆基因表达序列分析大肠杆菌

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BICP0激活三种复杂牛反转录病毒LTR

南开大学学报（自然科学版） 2004年第3期37卷 93-97页

作者：宣成昊刁丽榕朱义鑫乔文涛余荭陈启民耿运琪南开大学生命科学院天津300071

BICP0在病毒生活周期中具有重要功能,参与对病毒以及宿主的许多启动子的激活.BHV-1超感染所引发的BIV基因表达水平的提高即与该蛋白有关.为探究其激活特性,选取三种典型牛反转录病毒BIV、BLV和BFV,对其LTR上NF-κB及AP-1位点进行单独或... 详细信息

BICP0在病毒生活周期中具有重要功能,参与对病毒以及宿主的许多启动子的激活.BHV-1超感染所引发的BIV基因表达水平的提高即与该蛋白有关.为探究其激活特性,选取三种典型牛反转录病毒BIV、BLV和BFV,对其LTR上NF-κB及AP-1位点进行单独或共缺失,通过Luc瞬时表达分析发现:BICP0可激活所选三种牛反转录病毒的启动子,且激活功能与其NF-κB和AP-1位点有关.同时发现:在BIV中BICP0介导的两转录因子间具有相互协同作用,而在BFV中却表现相互抑制.

关键词： BICPO 牛反转录病毒反式激活 NF—κB AP—1

牛泡沫病毒跨膜蛋白的穿膜区具有细胞毒性作用

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南开大学学报（自然科学版） 2005年第2期38卷 49-53页

作者：马永刚余荭王金忠陈启民耿运琪南开大学生命科学学院天津300071

泡沫病毒(FV)具有广泛的宿主范围,可以感染从人到鱼几乎所有脊椎动物细胞,可见其包膜蛋白具有极强的膜融合能力.分析牛泡沫病毒(BFV)的跨膜蛋白(TM),在其C端存在一个穿膜螺旋区,其中含有连续的疏水氨基酸.本文以BFV3026原病毒DNA为模板... 详细信息

泡沫病毒(FV)具有广泛的宿主范围,可以感染从人到鱼几乎所有脊椎动物细胞,可见其包膜蛋白具有极强的膜融合能力.分析牛泡沫病毒(BFV)的跨膜蛋白(TM),在其C端存在一个穿膜螺旋区,其中含有连续的疏水氨基酸.本文以BFV3026原病毒DNA为模板,利用PCR分段扩增TM编码区,克隆原核表达载体pET32a(+),序列分析证实后,转化***21(DE3),经IPTG诱导,仅有穿膜区完全缺失的TM3获得表达,其余含有完整或部分穿膜区的TM1及TM2均未表达.表达菌生长状态测定显示:TM穿膜区C端疏水氨基酸串联区对细胞具有强烈致死效应.同时利用金属螯合层析对所表达TM3蛋白进行初步纯化,Westernblot证实其有良好的抗原性.

关键词：牛泡沫病毒(BFV) 穿膜区细胞毒性

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牛泡沫病毒中国株感染兔的研究

中国病毒学 2003年第6期18卷 566-570页

作者：余荭孔晓红宣成昊王金忠陈启民耿运琪南开大学生命科学学院天津300071

将牛泡沫病毒(BFV3026)感染的细胞经耳缘静脉注射兔子,并以正常细胞注射的兔为对照。1年后处死,病毒挽救实验及PCR检测显示:兔经一次注射即可被BFV3026感染,病毒广泛分布于感染兔的多种脏器中,通过共培养可从感染兔血、肝、脾、肺、肾... 详细信息

将牛泡沫病毒(BFV3026)感染的细胞经耳缘静脉注射兔子,并以正常细胞注射的兔为对照。1年后处死,病毒挽救实验及PCR检测显示:兔经一次注射即可被BFV3026感染,病毒广泛分布于感染兔的多种脏器中,通过共培养可从感染兔血、肝、脾、肺、肾中拯救出相应感染性病毒颗粒,并在脑、骨髓、心、胰、肠系膜中检到高拷贝BFV原病毒DNA存在。同时,血清学检测表明:感染兔在接受注射一个月后即产生高滴度抗病毒蛋白抗体,并维持该滴度水平直至实验终止,兔未表现任何可观病变。

关键词：牛泡沫病毒3026 兔感染中国株

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RU5区对BFV3026基因表达的调控

中国病毒学 2004年第2期19卷 129-132页

作者：孔晓红余荭宣成昊辛丹王金忠陈启民耿运琪南开大学生命科学学院天津300071

以牛泡沫病毒(Bovine foamy virus, BFV)中国株BFV3026原病毒DNA为材料,构建R区系列缺失质粒, 通过对其转染细胞中RT水平及对缺失质粒与luc报告质粒共转染细胞中萤火虫荧光素酶活性的测定,确立U5区对于BFV3026两类启动子LTR和IP均具有... 详细信息

以牛泡沫病毒(Bovine foamy virus, BFV)中国株BFV3026原病毒DNA为材料,构建R区系列缺失质粒, 通过对其转染细胞中RT水平及对缺失质粒与luc报告质粒共转染细胞中萤火虫荧光素酶活性的测定,确立U5区对于BFV3026两类启动子LTR和IP均具有负调控作用;同时将带有不同R区的BFV3026结构基因片段克隆于异源启动子CMV之下,通过对其转染细胞293T中RT酶活性的测定,确立R区对于病毒结构基因pol的表达具有一定的调节作用,并将其功能区域初步界定在R区5′端100bp内。

关键词：牛泡沫病毒 RU5区 BFV3026 基因表达调控转染细胞萤火虫荧光素酶基因治疗

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Ri质粒研究进展

Ri质粒研究进展