检索结果-南通市图书馆

分离和鉴定油菜D型MAP激酶基因BnMPK9

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作物学报 2013年第3期39卷 440-448页

作者：余舜武张利达刘国兰罗利军上海市农业科学院上海市农业生物基因中心上海201106 上海交通大学农业与生物学院植物生物技术研究中心上海200240

为了应对不良的外界环境,植物形成了一整套复杂的信号网络体系以适应变化的外界环境。其中MAPK级联是其中一个重要而保守的信号传导系统。采用RT-PCR策略,从干旱处理的油菜cDNA中克隆出全长的细胞分裂原激活的蛋白激酶基因。该基因被命... 详细信息

为了应对不良的外界环境,植物形成了一整套复杂的信号网络体系以适应变化的外界环境。其中MAPK级联是其中一个重要而保守的信号传导系统。采用RT-PCR策略,从干旱处理的油菜cDNA中克隆出全长的细胞分裂原激活的蛋白激酶基因。该基因被命名为BnMPK9(Gen Bank登录号为AY737714),包含一个蛋白激酶区和一个保守的CD区。该基因与拟南芥AtMPK9高度同源,其激酶的磷酸化位点为TDY,同为D型MAPK亚家族基因。Southern blot结果表明该基因在油菜基因组中拷贝数不少于2个。Northern blot结果显示该基因能在不同的植物组织中表达。其表达受到甘露醇、紫外线和双氧水诱导上调表达,但低温和水杨酸处理后下调表达。实时RT-PCR分析表明,甘露醇和双氧水能长时间诱导该基因高表达。在油菜根中,甘露醇也能促进其上调表达。BnMPK9连接到pYES2.1酵母表达载体中转化酵母,发现增强了酵母对600mmolL–1甘露醇和0.2mmolL–1 tBuOOH的抗性。以上结果说明BnMPK9是MAPK基因家族中的一员,涉及真核生物细胞渗透和活性氧胁迫,并增强其抗性。

关键词： BnMPK9 油菜非生物胁迫酵母表达

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基因组原位杂交的新进展及其在植物中的应用

武汉植物学研究 2001年第3期19卷 248-254页

作者：余舜武张端品宋运淳华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室武汉430070 武汉大学植物发育生物学教育部重点实验室武汉430072

The uptodate advances of genomic in situ hybridization (GISH) for last ten years are reviewed in the article. These methods initially deriving from animal research have been developed in plant study, such as Multicolor Fluorescence in situ Hybridization (McFISH), Third strand in situ Hybridization (TISH), Comparative Genomic Hybridization (CGH) and Simultaneous in situ Hybridization. GISH applied widely in plant can reveal the species origin and evolution and determine the truth of distant hybrid containing foreign chromatin. Also it can research the chromosome behaviour including B chromosome and explore the genomic mapping and genic function. Finally the applicability and resolving power of GISH about taxonomic distance, genomic size and the length of chromosome fragment are discussed, as well as the future and the status of GISH in plant.

关键词：基因组原位杂交染色体物种植物应用

一种提高水稻FISH检出率的新方法—RFLP混合标记

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遗传 2001年第3期23卷 263-266页

作者：金危危覃瑞余舜武宋运淳武汉大学植物发育生物学教育部重点实验室 430072 华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室 430070

分别以水稻 1号染色体上混合标记的 8个紧密连锁的RFLP(平均约 1.7kb)和 5号染色体的BAC克隆44B4(137kb) ,以及 12号染色体单个RFLPRG397(约 1.5kb)为探针 ,在水稻染色体上进行了荧光原位杂交(FISH)。结果表明 ,RFLP混合标记杂交的检出... 详细信息

分别以水稻 1号染色体上混合标记的 8个紧密连锁的RFLP(平均约 1.7kb)和 5号染色体的BAC克隆44B4(137kb) ,以及 12号染色体单个RFLPRG397(约 1.5kb)为探针 ,在水稻染色体上进行了荧光原位杂交(FISH)。结果表明 ,RFLP混合标记杂交的检出率为 2 7% ,大大高于单个RFLP的检出率 (7% )。其检出率虽然低于BAC克隆 44B4(6 0 % ) ,但它具有程序简单易行的特点 ,使基因原位定位更加高效。由于水稻中与已知功能基因紧密连锁的RFLP标记具有数量丰富、分布密集等优势 ,揭示了混合标记的RFLP在禾本科植物同线性和共线性分析中的广阔应用前景。此外 ,混合标记的RFLP还可以用于染色体的准确识别和核型分析。

关键词：荧光原位杂交 FISH 检出率 RFLP BAC 混合标记水稻

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油菜春季田间管理

农村实用技术与信息 1998年第2期 17-18页

作者：余舜武武汉华中农业大学农学系 430070

二.重施蕾苔肥,巧施花肥蕾苔肥在立春前后、苔高6.7～10厘米时施用,苔肥数量根据油菜长势长相、土壤肥力高低、底肥和苗肥的多少来确定,以早发稳长,不早衰,不贪青疯长迟熟为原则.对菜苗长势强旺、叶片肥大、叶色浓绿、土壤肥沃、底肥... 详细信息

二.重施蕾苔肥,巧施花肥蕾苔肥在立春前后、苔高6.7～10厘米时施用,苔肥数量根据油菜长势长相、土壤肥力高低、底肥和苗肥的多少来确定,以早发稳长,不早衰,不贪青疯长迟熟为原则.对菜苗长势强旺、叶片肥大、叶色浓绿、土壤肥沃、底肥和苗肥充足的田块,蕾苔肥要稳施少施.对叶片向上伸展。

关键词：油菜田间管理春季

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疣粒野生稻原生质体再生小植株

中国农业科学 2002年第12期35卷 1556-1559+1587页

作者：朱永生陈葆棠秦发兰余舜武张端品华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室武汉430070

以我国特有的疣粒野生稻成熟胚和幼穗作外植体诱导愈伤组织 ,挑选致密颗粒状愈伤组织建立胚性细胞悬浮系并分离原生质体 ,将原生质体固体包埋后添加液体培养基进行培养。在培养过程中调节培养体系渗透压诱导产生胚状体 ,成功得到疣粒野... 详细信息

以我国特有的疣粒野生稻成熟胚和幼穗作外植体诱导愈伤组织 ,挑选致密颗粒状愈伤组织建立胚性细胞悬浮系并分离原生质体 ,将原生质体固体包埋后添加液体培养基进行培养。在培养过程中调节培养体系渗透压诱导产生胚状体 ,成功得到疣粒野生稻的原生质体再生植株 ,对提高原生质体再生频率的途径进行了探讨。

关键词：疣粒野生稻原生质体再生

与Gm-6和Pi-5(t)连锁的栽培稻BAC克隆在药用野生稻中的FISH定位

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科学通报 2000年第22期45卷 2427-2430页

作者：覃瑞魏文辉金危危何光存宁顺斌余舜武宋运淳武汉大学发育生物学研究中心武汉430072 华中农业大学作物改良国家重点实验室武汉430070

用栽培稻遗传图第4连锁群中与抗稻瘿蚊和抗稻瘟病基因, Gm-6和Pi-5(t)连锁的RFLP标记RG214和RZ565及其筛选出来的2个BAC克隆作探针, 对药用野生稻荧光原位杂交. 供试探针均被定位于第4染色体长臂, 百分距分别为74.18±2.62, 52.33±3.78... 详细信息

用栽培稻遗传图第4连锁群中与抗稻瘿蚊和抗稻瘟病基因, Gm-6和Pi-5(t)连锁的RFLP标记RG214和RZ565及其筛选出来的2个BAC克隆作探针, 对药用野生稻荧光原位杂交. 供试探针均被定位于第4染色体长臂, 百分距分别为74.18±2.62, 52.33±3.78, 72.33±2.62和54.50± 5.43, 信号检出率为8.3%, 9.8%, 52.70%和61.2%. BAC克隆和RFLP标记探针杂交位置几乎一致, 说明在栽培稻和野生稻中RFLP标记RG214和RZ565都在同一BAC克隆的大插入片段中, 药用野生稻与抗性基因Gm-6和Pi-5(t)的同源顺序就在第4染色体信号出现的相应位置. 在未封阻的情况下, 药用野生稻多个染色体上具有信号, 这表明药用野生稻和栽培稻的Cot1DNA重复顺序也在一定的程度上具有同源性. 药用野生稻第4染色体是根据Jena等(1994)和RFLP杂交的结果确定的, 并讨论了栽培稻BAC克隆对药用野生稻原位杂交物理作图的可行性等问题.

关键词：药用野生稻物理定位 BAC克隆栽培稻抗病基因

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高效海藻DNA提取方法研究

上海水产大学学报 2008年第5期17卷 530-534页

作者：韩静余舜武罗利军上海海洋大学水产与生命学院上海200090 上海市农业生物基因中心作物遗传改良国家重点实验室种质资源分室上海201106

简单、高效的抽提DNA是进行分子生物学研究的基础。选取三种不同海藻纲中的条斑紫菜、条浒苔、钝顶螺旋藻为材料,通过采用改良的CTAB法、LiCl法及试剂盒法抽提基因组DNA并进行比较,以找出适用于各种藻类DNA提取的快速有效方法。结果表... 详细信息

简单、高效的抽提DNA是进行分子生物学研究的基础。选取三种不同海藻纲中的条斑紫菜、条浒苔、钝顶螺旋藻为材料,通过采用改良的CTAB法、LiCl法及试剂盒法抽提基因组DNA并进行比较,以找出适用于各种藻类DNA提取的快速有效方法。结果表明适当提高裂解液与样品比能有效降低材料中多糖与蛋白质、酚类等杂质,提高DNA纯度和得率。经过修改后,三种方法都能有效抽提DNA,其中试剂盒法省时,所得到的DNA纯度最高,但得率较低且成本高。CTAB法与LiCl法也均能得到高质量的DNA,但LiCl法相对而言更简捷有效。此外,抽提前的材料预处理对DNA质量有明显影响。

关键词：海藻 DNA提取 LiCl法

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甜菜碱对ECO-TILLING分析的影响

上海农业学报 2011年第1期27卷 37-40页

作者：吴迪余舜武罗利军上海海洋大学上海200433 上海市农业生物基因中心上海201106

为了解决高GC含量基因分析中无法应用ECO-TILLING的问题,以高GC含量的基因组物种水稻为材料,在PCR反应体系中添加0.1 mmol/L的甜菜碱,随后直接利用CEL-I酶酶切。结果表明,添加甜菜碱能够明显提高PCR反应效率,而且不影响CEL-I的酶切活性。

关键词： ECO-TILLING 甜菜碱 CEL-I酶

利用不同实时定量PCR方法分析相对基因表达差异

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作物学报 2007年第7期33卷 1214-1218页

作者：余舜武刘鸿艳罗利军上海市农业生物基因中心作物遗传改良国家重点实验室种质资源分室(上海) 上海201106

利用实时荧光定量PCR方法分析目标基因转录本之间的表达差异,目前常用的分析实验数据的有绝对定量和相对定量方法。为了克服绝对定量方法的繁琐和简化相对定量的分析方法,分别利用2-ΔΔCt、2-ΔCt和标准曲线法对水稻OsRDB1基因在不同... 详细信息

利用实时荧光定量PCR方法分析目标基因转录本之间的表达差异,目前常用的分析实验数据的有绝对定量和相对定量方法。为了克服绝对定量方法的繁琐和简化相对定量的分析方法,分别利用2-ΔΔCt、2-ΔCt和标准曲线法对水稻OsRDB1基因在不同化学试剂和激素处理下的表达差异进行了分析,发现2-ΔΔCt必须引入标准的看家基因作为参考,计算方法繁琐,计算结果受扩增效率影响;而利用2-ΔCt和标准曲线法计算方便,节省定量PCR试剂,但其结果易受到RNA浓度测量准确率的影响,其中标准曲线法引入斜率消除扩增效率的影响,最能测得实际的原始拷贝数差异。

关键词：相对定量标准曲线实时荧光定量PCR OsRDB1