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番茄环斑病毒RT-LAMP检测方法的建立

植物检疫 2013年第4期27卷 44-47页

作者：余澍琼张吉红张慧丽宁波出入境检验检疫局浙江宁波315012

本研究采用逆转录环介导等温扩增技术(Reverse transcription-loop-mediated isothermalamplification,RT-LAMP),建立了番茄环斑病毒(Tomato ringspot virus,ToRSV)检测方法。研究得到LAMP反应最佳条件,孵育温度和反应时间分别为65℃,30... 详细信息

关键词：番茄环斑病毒逆转录环介导等温扩增检测

茶叶中掺杂小麦DNA的提取及检测方法的比较

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贵州农业科学 2013年第6期41卷 148-150,154页

作者：张吉红潘登余澍琼陈建国宁波出入境检验检疫局浙江宁波315012 浙江万里学院生物环境学院浙江宁波315100

为探索茶叶中掺杂小麦的快速检测方法,对3种不同的核酸提取方法(标准CTAB提取法、改良CTAB提取法和试剂盒提取法)进行分析比较,根据小麦内源GAG56D基因比较了茶叶中掺杂小麦成分的普通PCR和实时荧光PCR检测方法。结果表明:最适合掺杂小... 详细信息

为探索茶叶中掺杂小麦的快速检测方法,对3种不同的核酸提取方法(标准CTAB提取法、改良CTAB提取法和试剂盒提取法)进行分析比较,根据小麦内源GAG56D基因比较了茶叶中掺杂小麦成分的普通PCR和实时荧光PCR检测方法。结果表明:最适合掺杂小麦DNA的方法为标准的CTAB提取法。扩增结果显示,针对理论DNA浓度的检测灵敏度,实时荧光PCR的灵敏度能达到0.1%,普通PCR能达到1%,实时荧光PCR是普通PCR的10倍。

关键词：茶叶小麦 DNA提取普通PCR 实时荧光PCR 检测方法

南芥菜花叶病毒的RT-LAMP检测试剂盒的研制

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植物保护学报 2013年第2期40卷 189-190页

作者：陈先锋张吉红崔俊霞张慧丽郭立新余澍琼宁波出入境检验检疫局宁波315012

南芥菜花叶病毒（Arabis mosaic virus,ArMV）是我国对外公布的检疫性有害生物,其寄主广泛,极易传播、蔓延[1],因此,加强对该病毒的检测具有重要的意义。目前,针对ArMV的检测方法主要有DAS-ELISA和RT-PCR技术[2]。这两种方法在检测周期... 详细信息

南芥菜花叶病毒（Arabis mosaic virus,ArMV）是我国对外公布的检疫性有害生物,其寄主广泛,极易传播、蔓延[1],因此,加强对该病毒的检测具有重要的意义。目前,针对ArMV的检测方法主要有DAS-ELISA和RT-PCR技术[2]。这两种方法在检测周期方面具有明显的优势,且操作简单,但对仪器的依赖性较强。

关键词：南芥菜花叶病毒检测试剂盒 DAS-ELISA RT-PCR技术检疫性有害生物 mosaic virus ArMV

掺杂玉米茶叶的基因组DNA提取与PCR检测方法建立

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湖北农业科学 2013年第22期52卷 5615-5617页

作者：余澍琼张吉红赵旭东陈建国宁波出入境检验检疫局浙江宁波315012 临沂市产品质量监督检验所山东临沂276004

根据玉米内源ZEIN基因建立了茶叶中掺杂玉米的普通PCR和实时荧光PCR检测方法。结果表明,标准CTAB法适合提取茶叶样品基因组DNA,实时荧光PCR的灵敏度能达到0.1%,普通PCR能达到1%,实时荧光PCR是普通PCR的10倍。两种方法都能达到检测要求。

关键词：茶叶(Camellia sinensis) 玉米(Zea mays) 普通PCR 实时荧光PCR 检测方法

利用环介导等温扩增技术检测茶叶中掺杂的大豆成分

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浙江农业学报 2015年第8期27卷 1479-1483页

作者：余澍琼张吉红崔俊霞张慧丽倪健波宁波出入境检验检疫局浙江宁波315012

采用环介导等温扩增技术,建立了一种快速简便的检测茶叶中掺杂的大豆成分的方法。根据大豆内源基因序列,共设计了6条引物,通过环介导等温扩增技术(LAMP)扩增得到特征性的瀑布状条带。特异性检测表明,所设计的引物对大豆成分的检测具有... 详细信息

采用环介导等温扩增技术,建立了一种快速简便的检测茶叶中掺杂的大豆成分的方法。根据大豆内源基因序列,共设计了6条引物,通过环介导等温扩增技术(LAMP)扩增得到特征性的瀑布状条带。特异性检测表明,所设计的引物对大豆成分的检测具有良好的特异性;灵敏度试验显示,LAMP方法比荧光PCR方法灵敏度高10倍。通过对反应温度、甜菜碱浓度、Mg2+浓度和d NTP浓度的优化,本研究建立起优化的反应条件,整个检测周期约1 h,检测结果采用SYBR green I染色显示,易于观察和判定,可应用于大批量茶叶样本中掺杂大豆成分的检测。

关键词：茶叶大豆环介导等温扩增检测

逆转录环介导等温扩增技术检测草莓潜隐环斑病毒的研究

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植物保护 2013年第6期39卷 74-77页

作者：张吉红余澍琼徐瑛张慧丽陈先锋陈剑平陈炯宁波出入境检验检疫局宁波315012 浙江省农业科学院杭州310021 宁波大学宁波315211

采用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),建立了草莓潜隐环斑病毒(Strawberry latent ringspot virus,SLRSV)检测方法。根据SLRSV外壳蛋白编码基因上的8个位点,共设计了6条引物,通过逆转录环介导等温扩增得到特征性的瀑布状条带。特异性试验表明,引物对SLRSV的检测具有良好的特异性;灵敏度试验显示RT-LAMP的灵敏度比普通RT-PCR高出100倍。该方法无需特殊的试剂和设备,只需在水浴锅中65℃等温扩增,整个检测周期约1.5h,结果采用SYBR green I染色显示,易于观察和判定。

关键词：草莓潜隐环斑病毒环介导等温扩增检测

百合无症病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立

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浙江农业学报 2014年第1期26卷 127-130页

作者：余澍琼陈先锋张吉红于翠张慧丽闻伟刚宁波出入境检验检疫局浙江宁波315012 上海出入境检验检疫局上海200331

百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)是侵染百合科植物的主要病毒之一。根据该病毒不同分离株外壳蛋白基因(coat protein,CP)的保守序列,设计特异性引物与荧光探针,建立了LSV的实时荧光RTPCR检测方法。利用该方法检测LSV的2个阳... 详细信息

百合无症病毒(Lily symptomless virus,LSV)是侵染百合科植物的主要病毒之一。根据该病毒不同分离株外壳蛋白基因(coat protein,CP)的保守序列,设计特异性引物与荧光探针,建立了LSV的实时荧光RTPCR检测方法。利用该方法检测LSV的2个阳性样品,均能够得到典型扩增曲线,而在百合斑驳病毒、烟草环斑病毒、番茄环斑病毒等其他病毒阳性样品中没有典型的扩增曲线,表明了该方法的特异性。与普通RTPCR法相比,此方法灵敏度提高10倍。应用该方法,2012年6月至今,宁波出入境检验检疫局从荷兰进境的67批百合种球样品中检出53批百合无症病毒阳性,检出率为93%。

关键词：百合无症病毒实时荧光RT—PCR 百合科

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导水屏障调谐减震渡槽振动台试验

清华大学学报（自然科学版） 2024年第7期64卷 1147-1156页

作者：黄邦辉李志荣左澍琼邓开来辜文兰洪彧西南交通大学土木工程学院成都610031 云南省滇中引水工程有限公司昆明650000

横向地震动激励下,渡槽中水体发生晃动,有可能放大渡槽的地震响应。为抑制渡槽中的水体振动,该文提出了适用于大型渡槽的导水屏障。该导水屏障沿顺槽向安装于渡槽中,将水体横向分隔,同时设置了部分通孔,便于水体通过,由此改变水体在渡... 详细信息

横向地震动激励下,渡槽中水体发生晃动,有可能放大渡槽的地震响应。为抑制渡槽中的水体振动,该文提出了适用于大型渡槽的导水屏障。该导水屏障沿顺槽向安装于渡槽中,将水体横向分隔,同时设置了部分通孔,便于水体通过,由此改变水体在渡槽中的横向振动特征,进而减小渡槽地震响应。为探究导水屏障对渡槽的减震效果,依托典型的大型渡槽实际工程,该文设计了矩形渡槽和U形渡槽的振动台试验,考虑了槽内水位高度、屏障透水率等参数对渡槽减震效果的影响。通过振动台试验,获得了渡槽在白噪声、简谐荷载和地震动激励下的动力响应,同时得到了渡槽的自振频率和盖梁峰值加速度等结构响应。试验结果表明:导水屏障可以提升渡槽溢水的台面加速度阈值,实际减小了渡槽中水体振动。定义渡槽盖梁峰值加速度之比为减震系数,减震系数与渡槽断面类型、槽内水位、激振频率和导水屏障透水率等均相关。当激振频率接近渡槽基频时,导水屏障呈现良好的减震效果;当激振频率远离渡槽基频时,导水屏障反而可能导致渡槽地震响应放大。在El centro地震动激励下,大部分工况中导水屏障呈现良好的减震效果,减震系数的均值和标准差受槽内水位、导水屏障透水率等因素影响较大,导水屏障的定量减震机理还有待进一步研究。

关键词：渡槽导水屏障振动台试验加速度响应减震系数

预测干部容错:效率考量、合法性压力与领导特征——基于机器学习方法的预测建模

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公共管理与政策评论 2024年第3期13卷 152-168页

作者：刘展余余洋雷玉琼复旦大学国际关系与公共事务学院湖南大学公共管理学院

国家对于干部容错机制的诉求愈发强烈,但是近年来该政策在国内的扩散速度逐步放缓。要解决上述问题,关键在于研究干部容错机制的扩散逻辑。在政策创新扩散逻辑相关研究中,既有研究方法大多遵循“样本内解释”的思路。这使得相关研究结... 详细信息

国家对于干部容错机制的诉求愈发强烈,但是近年来该政策在国内的扩散速度逐步放缓。要解决上述问题,关键在于研究干部容错机制的扩散逻辑。在政策创新扩散逻辑相关研究中,既有研究方法大多遵循“样本内解释”的思路。这使得相关研究结论的科学性,尤其是泛化能力,难以得到保证。为突破这一局限,本文采用“样本外预测”的思路来探索干部容错机制的扩散逻辑。具体来看,本文基于政策创新扩散理论构建了分析框架,使用机器学习方法训练了地方政府采纳干部容错机制的预测模型,并在确保模型预测性能的前提下呈现干部容错机制的扩散逻辑。模型解读结果表明,干部容错机制的扩散主要由行动者逻辑主导,其次是效率逻辑,最后是合法性逻辑;效率逻辑、合法性逻辑及行动者逻辑三个维度中,最具影响力的特征分别为治理规模、同级采纳和主官任期。地方政府采纳干部容错机制的概率与治理规模具有负向关系,与同级采纳具有正向关系,与主官任期具有倒U形关系。为推进干部容错机制有序发展,本文建议地方政府强化机制扩散中的领导驱动效应、科学规划干部容错机制扩散路径。

关键词：干部容错机制政策创新扩散机器学习预测建模