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癌基因C-jun及其缺失突变体过表达细胞株的构建与鉴定

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天津师范大学学报（自然科学版） 2020年第2期40卷 39-43页

作者：余斯琦朱长军天津师范大学生命科学学院天津300387 天津师范大学天津市动植物抗性重点实验室天津300387 天津师范大学分子细胞系统生物学重点实验室天津300387

为了探究转录因子C-jun在细胞中的生理功能,以真核细胞表达质粒pFlag-c-jun为模板,首先设计了C-jun DNA结合功能域缺失突变体的点突变引物序列,构建Flag-C-jun DNA结合功能域缺失突变体质粒pFlag-c-junmut.通过细胞转染、药物筛选等方法... 详细信息

为了探究转录因子C-jun在细胞中的生理功能,以真核细胞表达质粒pFlag-c-jun为模板,首先设计了C-jun DNA结合功能域缺失突变体的点突变引物序列,构建Flag-C-jun DNA结合功能域缺失突变体质粒pFlag-c-junmut.通过细胞转染、药物筛选等方法,获得Flag-C-jun和Flag-C-junmut稳定表达的HelaS细胞株,用蛋白印记迹交和细胞免疫荧光染色方法对细胞株进行验证.鉴定结果表明,本研究成功构建了Flag-C-jun和Flag-C-junmut稳定表达的细胞株,且表达均在细胞核内.

关键词：转录因子 C-jun 缺失突变体细胞株稳定表达

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组织蛋白表达水平检测方法的比较分析

天津师范大学学报（自然科学版） 2019年第1期39卷 46-50页

作者：鲍鹏余斯琦苏春玉于东渤朱长军董智雄天津师范大学生命科学学院天津300387 天津师范大学天津市动植物抗性重点实验室天津300387 天津师范大学分子细胞系统生物学重点实验室天津300387

为了得到一种能够准确、快速检测组织蛋白表达水平的方法,收集了12例结肠癌病人的癌组织及癌旁组织,以RRP15 mRNA的表达水平作为参照,比较免疫组织化学染色法和免疫荧光染色法在检测组织蛋白表达水平方面的优劣.免疫组织荧光染色结果显... 详细信息

为了得到一种能够准确、快速检测组织蛋白表达水平的方法,收集了12例结肠癌病人的癌组织及癌旁组织,以RRP15 mRNA的表达水平作为参照,比较免疫组织化学染色法和免疫荧光染色法在检测组织蛋白表达水平方面的优劣.免疫组织荧光染色结果显示,12例患者中有8例患者肿瘤组织的RRP15表达为阳性,4例为阴性,其结果与Real-time PCR定量结果高度一致.免疫组织化学染色结果显示,12例患者中有9例患者肿瘤组织的RRP15表达为阳性,其余3例为阴性,其中6号和11号免疫组织化学检测为阴性,而Real-time PCR定量和免疫组织荧光染色结果均为阳性,即免疫组化检测结果与Real-time PCR定量结果的一致性较差.因此认为,免疫荧光染色法是检测组织中蛋白表达水平的首选方法,免疫组织化学染色法可作为一种辅助方法.

关键词：蛋白表达水平检测石蜡切片免疫荧光染色免疫组织化学染色

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汪立三《窗花集》的民族特征及演奏分析

汪立三《窗花集》的民族特征及演奏分析

作者：余子琦江西师范大学

学位级别：硕士

驱动蛋白Kif4A杆状病毒表达系统的构建与优化

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科技资讯 2018年第27期16卷 235-238,240页

作者：于东渤张红娇苏春玉余斯琦朱长军董智雄天津师范大学生命科学学院分子细胞系统生物学重点实验室天津300378 天津迈拓思生物科技有限公司天津300378

目的为了探究人驱动蛋白分子Kif4A在有丝分裂过程中的作用及其调节机制,需要在体外表达并纯化有活性的Kif4A蛋白。方法构建了驱动蛋白Kif4A的体外真核表达载体pFastBac-Kif4A,将其转化到DH10Bac感受态细胞中,通过蓝白斑筛选得到阳性克隆... 详细信息

目的为了探究人驱动蛋白分子Kif4A在有丝分裂过程中的作用及其调节机制,需要在体外表达并纯化有活性的Kif4A蛋白。方法构建了驱动蛋白Kif4A的体外真核表达载体pFastBac-Kif4A,将其转化到DH10Bac感受态细胞中,通过蓝白斑筛选得到阳性克隆,抽提得到杆状病毒基因组。由于杆状病毒基因组较大,标准的转染方法转染效率较低,对该方法进行了优化。将杆状病毒基因组通过标准的和优化的转染方法转染到草地夜蛾卵巢细胞SF9中,经培养得到表达驱动蛋白Kif4A的初代杆状病毒。结果通过检测初代杆状病毒的滴度,我们发现,与标准的转染方法相比,优化的转染方法所得到的初代杆状病毒的滴度更高,相同稀释度感染条件下表达的Kif4A蛋白水平更高。结论本研究成功构建了Kif4A杆状病毒表达系统,并优化了SF9细胞转染的方法,为后续大量表达和纯化Kif4A蛋白奠定了基础。

关键词：驱动蛋白 Kif4A 杆状病毒脂质体转染

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贮箱内浆态低温推进剂沉降特性数值研究

西安交通大学学报 2024年第1期58卷 146-156页

作者：夏斯琦谢福寿厉彦忠郭琬西安交通大学制冷与低温工程研究所西安710049

为了揭示浆态低温推进剂在贮存时的颗粒沉积行为规律,解决沉积带来的浆态低温推进剂向火箭发动机输送时的供给问题,研究了贮箱内浆态低温推进剂的沉降特性。基于欧拉-欧拉数值模拟方法,考虑固体颗粒动力学理论建立了低温固液两相流动与... 详细信息

为了揭示浆态低温推进剂在贮存时的颗粒沉积行为规律,解决沉积带来的浆态低温推进剂向火箭发动机输送时的供给问题,研究了贮箱内浆态低温推进剂的沉降特性。基于欧拉-欧拉数值模拟方法,考虑固体颗粒动力学理论建立了低温固液两相流动与相变传热数值模型,研究了浆态低温推进剂(浆氮、浆氧、浆氢)在贮箱内两相流场动力学信息与沉降特性,并讨论了不同低温工质、不同粒径(0.02~0.5 mm)、不同固相体积分数(10%~50%)以及不同漏热率(50~200 W/m^(2))工况对浆体低温推进剂沉积和流场特性的影响。结果表明:固氧颗粒在液氧内沉降较为微弱,但固氮和固氢颗粒明显沉降,实际应用时需考虑防沉降措施;在固相粒径较小、固相初始含量较少、壁面漏热更少的情况下,浆态低温推进剂的沉积量更少;固液密度比较大的浆状流体沉降速率更快,以0.5 mm的粒径为例,浆氮、浆氢相界面的下移速率分别为15.62及12.58 mm/s,而浆氧的相界面下移速率仅为0.12 mm/s;此外,在特定条件下贮箱中存在方向相反的双涡旋。研究结果揭示了浆态低温推进剂在存储过程中的物理规律,可为浆态流体的高效储存和应用提供参考。

关键词：浆氮浆氧浆氢低温推进剂数值模拟

松原市中心城区应急避难场所服务功能评价及布局优化

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作者：汤斯琦吉林大学

学位级别：硕士

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基于知识图谱嵌入的古都旅游景点推荐

基于知识图谱嵌入的古都旅游景点推荐

作者：滕斯琦南京信息工程大学

学位级别：硕士

RPS14在结直肠癌中的表达及生物学作用的研究

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RPS14在结直肠癌中的表达及生物学作用的研究

作者：岳斯琦吉林大学

学位级别：硕士

目的:本研究选择生信数据库、二维液相色谱-质谱联用技术、免疫印迹技术、免疫组织化学技术作为探索结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)组织和配对的癌旁组织中核糖体蛋白小亚基14(Ribosomal Protein S14,RPS14)蛋白表达量的差异的方法,... 详细信息

目的:本研究选择生信数据库、二维液相色谱-质谱联用技术、免疫印迹技术、免疫组织化学技术作为探索结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)组织和配对的癌旁组织中核糖体蛋白小亚基14(Ribosomal Protein S14,RPS14)蛋白表达量的差异的方法,以细胞功能实验的方式验证了RPS14表达量对结直肠癌细胞的影响,为临床上结直肠癌患者的治疗和早期诊断提供了新的方向,也为探索结直肠癌的发生发展机制奠定了基础。方法:1.在生信分析方面,通过结合TIMER数据库、STRING数据库、GEPIA2数据库、TCGA数据库、Cbioportal数据库明确RPS14在结直肠癌中的表达、诊断效果、预后、肿瘤免疫环境相关性及RPS14的共表达基因分布情况。2.利用2D-LC-MS来研究两类结直肠癌组织(癌组织和癌旁组织)并选择Western Blot实验验证。按照免疫组织化学技术的结果分析40对结直肠癌组织及其癌旁组织蜡块中RPS14的蛋白表达量的差异。3.选择SW620结直肠癌细胞系为基础确立RPS14过表达和敲低表达的细胞株,对细胞株开展细胞增殖实验、细胞迁移和侵袭实验。得到RPS14的蛋白表达量对SW620结直肠癌细胞系细胞功能产生的影响。结果:***14在结直肠癌组织中上调表达。2.2D-LC-MS发现了RPS14在结直肠癌组织中上调表达,本研究用WB及免疫组织化学技术验证了这一实验结果。3.成功确立了瞬时转染的结直肠癌过表达及敲低表达细胞系,凭借使用荧光显微镜、RT-q PCR技术及Western Blot实验对细胞进行了验证。细胞增殖实验及细胞迁移和侵袭实验体现过表达RPS14可促进细胞的增殖、迁移及侵袭,敲低表达RPS14可抑制细胞的增殖、迁移及侵袭。结论:***14在结直肠癌组织中是上调表达的。***14上调表达可促进结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭功能,RPS14有潜力作为结直肠癌筛查及诊断的生物标志物。

关键词：二维液相色谱-质谱联用技术生物信息学 RPS14 免疫组化技术结直肠癌

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论数据持有公证

南昌大学学报（人文社会科学版） 2024年第1期55卷 97-106页

作者：饶传平陶斯琦江西财经大学法学院江西南昌330031

数据要素市场蓬勃发展,但国家数据产权体系尚未形成,数据确权法律依据缺乏,数据交易亟须建立数据归属的信任机制,以推动数据可信流通体系建设。在实践中,江西省南昌市赣江公证处在全国完成了首例数据资源公证。在理论上,数据持有公证可... 详细信息

数据要素市场蓬勃发展,但国家数据产权体系尚未形成,数据确权法律依据缺乏,数据交易亟须建立数据归属的信任机制,以推动数据可信流通体系建设。在实践中,江西省南昌市赣江公证处在全国完成了首例数据资源公证。在理论上,数据持有公证可以建构可靠的市场信任机制,促进数据要素价值释放,推进数据确权过程。公证是法定证明活动,可以满足数据交易过程中的增信需求,降低交易成本和交易风险;还可以为数据价值评估与资产入表提供基础,助力数据要素治理。数据持有公证应当采取形式和实质相结合的审查模式。数据持有公证制度和数据产权登记制度可以共存,为市场提供多元选择。

关键词：数据持有公证效力公证审查模式数据产权登记

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