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中药四性的研究（Ⅰ）——人参类中药的生物热动力学和分子生物学研究

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中药四性的研究（Ⅰ）——人参类中药的生物热动力学和分子生物学...

作者：余惠旻湖南中医学院

学位级别：硕士

中药四性是中医药最基本的理论之一，长期以来一直是中医药基础研究的难点和热点。本专题从生物物理化学和分子生物学的角度，考察了中药四性的客观真实性及其在中医药学中的意义，旨在为中医药现代化特别是中医药理论现代化提供新的思... 详细信息

中药四性是中医药最基本的理论之一，长期以来一直是中医药基础研究的难点和热点。本专题从生物物理化学和分子生物学的角度，考察了中药四性的客观真实性及其在中医药学中的意义，旨在为中医药现代化特别是中医药理论现代化提供新的思路、方法和依据。利用微量量热法，测定了大肠杆菌在不同条件下的生长热谱曲线，得到了相应的热动力学参数如生长速率常数(K)、抑制率(I)、半抑制率(IC)、热焓(ΔH)，根据生物热动力学参数值，结合本草文献报道，综合分析了人参(Radix ginseng)、西洋参(Radix quinquefoliae)、红参(RadixGinseng Rubra)药性的差异。结果表明：K、ΔH可作为中药四性研究的物理量指标。微量量热法快捷、灵敏、科学、可行，可作为中药四性理论研究的一种十分有用的手段。采用逆转录PCR(RT-PCR)技术和斑点杂交技术分别测定了正常大鼠脑组织的腺苷酸环化酶AC(Adenylate Cyclase)的mRNA表达及红参、人参、西洋参对其的影响，从分子水平揭示了不同药性的药物所显示的AC表达的差异性。提示：对AC活性产生兴奋和抑制，从而引起环磷酸腺苷(cAMP)含量发生相应的变化，可能是药物显示寒、热药性的药理机制之一。本专题采用微量量热法和分子生物学技术研究中药四性理论，在国内尚属首次，对开拓中医药理论研究的思路、寻求中医药理论研究的突破，是一个新的有益的尝试。

关键词：中药四性微量量热法人参西洋参红参分子生物学逆转录PCR 斑点杂交腺苷酸环化酶

基于细胞凋亡表达的中药四性模式识别系统研究——西洋参和红参抗MPP^+诱导SH-SY5Y细胞凋亡的药性学对比研究

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中国药房 2009年第18期20卷 1367-1369页

作者：余惠旻周红祖深圳大学医学院深圳市518060 深圳市中医院深圳市518020

目的:研究不同药性的中药,属凉性的西洋参水提物(WEAG)和属温性的红参水提物(WERG)对四氢吡啶离子(MPP+)诱导神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的影响。方法:将细胞分4组,对照组为常规加入完全培养基,模型组为加入0.5mmolMPP+,西洋参组和... 详细信息

目的:研究不同药性的中药,属凉性的西洋参水提物(WEAG)和属温性的红参水提物(WERG)对四氢吡啶离子(MPP+)诱导神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的影响。方法:将细胞分4组,对照组为常规加入完全培养基,模型组为加入0.5mmolMPP+,西洋参组和红参组同时加入0.5mmolMPP+和不同浓度的WEAG及WERG。给予WEAG和WERG进行干预。应用Hoechst33258染色观察细胞形态变化,MTT比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:与模型组比较,WEAG和WERG能显著改善模型组SH-SY5Y细胞的凋亡特性,显著升高其吸光度值,降低凋亡率,且WERG保护作用强于WEAG。结论:WEAG和WERG均对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有不同程度的保护作用,而温性中药抗凋亡作用更强,药性不同,其抗凋亡作用亦不同。

关键词： SH-SY5Y细胞四氢吡啶离子药性红参西洋参细胞凋亡

基于细胞凋亡表达的中药四性模式识别系统研究——红参、生晒参和西洋参抗Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的药性学比较

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中国药房 2009年第24期20卷 1843-1845页

作者：余惠旻周红祖深圳大学医学院深圳市518060 深圳市中医院深圳市518020

目的:研究不同药性中药——红参(温性)、生晒参(平性)和西洋参(凉性)对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法:用Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞,复制阿尔茨海默病(AD)患者脑内神经元的病理损伤模型,以不同浓度的红参水提物... 详细信息

目的:研究不同药性中药——红参(温性)、生晒参(平性)和西洋参(凉性)对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法:用Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞,复制阿尔茨海默病(AD)患者脑内神经元的病理损伤模型,以不同浓度的红参水提物(WERG)、生晒参水提物(WEG)和西洋参水提物(WEAG)进行干预,以倒置显微镜观察其形态学变化;MTT法测定细胞存活率;流式细胞技术检测细胞凋亡率;蛋白印迹法测定兔抗人B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2连接X蛋白(Bcl-2)的表达。结果:50μmol.L-1Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞72h后,细胞变圆、聚集,细胞存活率显著降低(P<0.01)、凋亡率显著升高(P<0.01)。Aβ25-35与不同浓度的WERG、WEG和WEAG同时孵育后,可显著减少细胞损伤,使细胞存活率升高、凋亡率降低,同时Bax与Bcl-2比值显著降低。结论:不同药性的红参、生晒参和西洋参对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有不同程度的保护作用,其中红参作用较强。

关键词： SH—SY5Y细胞 β-淀粉样蛋白药性红参生晒参西洋参水提物细胞凋亡

西洋参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

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中药材 2008年第9期31卷 1373-1377页

作者：胡胜全余惠旻刘塔斯杨大坚陈新滋何翠君深圳市中药药学及分子药理学研究重点实验室广东深圳518057 湖南中医药大学药学院湖南长沙410007

目的:探究在以SH-SY5Y细胞作为神经元代表,β淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导凋亡的阿尔茨海默症(Alzheimer′s Disease,AD)体外细胞模型中,西洋参水提物(water extracts of American Ginseng,WEAG)对神经元的保护作用。方法:流式细胞仪(FCM)... 详细信息

目的:探究在以SH-SY5Y细胞作为神经元代表,β淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导凋亡的阿尔茨海默症(Alzheimer′s Disease,AD)体外细胞模型中,西洋参水提物(water extracts of American Ginseng,WEAG)对神经元的保护作用。方法:流式细胞仪(FCM)检测确定Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡的最佳浓度和时间,以及WEAG抗凋亡的浓度,MTT法检测细胞存活率,Hoechst33258染色观察细胞形态的变化。结果:50μmol/L Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞72 h后,细胞变圆,聚集,Hoechst33258染色可见明显的颗粒状和固缩状荧光,FCM检测凋亡率达(37.30±0.69)%,与对照组(1.56±0.80)%比较,差异具有显著性意义(P<0.05)。而Aβ25-35和不同浓度的WEAG(0.5、1、5 mg/ml)同时孵育后,细胞形态明显改善,MTT值显著高于Aβ25-35处理组(P<0.01),凋亡率分别降低到(16.71±1.08)%、(10.52±2.11)%和(3.39±1.65)%,与Aβ25-35损伤组(37.30±0.69)%相比,差异具有统计学意义(p<0.05),并呈现出剂量依赖关系。结论:西洋参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有显著的保护作用。

关键词： SH-SY5Y细胞 Aβ25-35 西洋参水提物细胞凋亡

干姜、大黄、丹参水提物对Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的药性学比较研究

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中国中医基础医学杂志 2012年第11期18卷 1262-1264,1267页

作者：方玲子周红祖余惠旻深圳市第二人民医院广东深圳518035 深圳市中医院广东深圳518020 深圳大学医学院广东深圳518060

目的:研究干姜、大黄、丹参水提物对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,建立Aβ25-35致SH-SY5Y细胞凋亡的模型,同时给予干姜、大黄、丹参水提物进行干预。应用MTT比色法检测细胞活力、流式... 详细信息

目的:研究干姜、大黄、丹参水提物对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,建立Aβ25-35致SH-SY5Y细胞凋亡的模型,同时给予干姜、大黄、丹参水提物进行干预。应用MTT比色法检测细胞活力、流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:50μmol.L-1Aβ25-35作用于SH-SY5Y细胞72 h,MTT值降低到(65.69±3.26)%,凋亡率增加到(45.17±3.84)%(P<0.01 ***)。干姜水提物能明显改善以上凋亡特性,显著升高MTT值,降低凋亡率;大黄和丹参水提物则对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡无保护作用。结论:干姜对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有显著的保护作用,而大黄和丹参却无此保护作用,中药药性不同,其抗凋亡作用亦不同。

关键词： SH-SY5Y细胞 β-淀粉样蛋白干姜大黄丹参热性寒性细胞凋亡

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石杉碱甲双层缓释片的研制及体外释药研究

中国药房 2009年第21期20卷 1628-1630页

作者：周红祖刘湘丹余惠旻深圳市中医院深圳市518020 湖南中医药大学药学院长沙市410208 深圳大学医学院深圳市518060

目的：研制石杉碱甲双层缓释片并考察其体外释药特征。方法：缓释层以HPMCK4M为缓释骨架材料，乳糖为稀释剂；速释层以淀粉-碳酸钙为稀释剂，羧甲基淀粉钠为崩解剂，压制双层片，高效液相色谱法检测释放度。结果：制备的石杉碱甲双层片... 详细信息

目的：研制石杉碱甲双层缓释片并考察其体外释药特征。方法：缓释层以HPMCK4M为缓释骨架材料，乳糖为稀释剂；速释层以淀粉-碳酸钙为稀释剂，羧甲基淀粉钠为崩解剂，压制双层片，高效液相色谱法检测释放度。结果：制备的石杉碱甲双层片速释层在1--2min崩解，呈粉末状，符合要求；缓释层的释药曲线用Higuchi方程拟合，可维持12h释药。结论：该处方下研制的石杉碱甲双层缓释片可达到既速效又长效的目的。

关键词：石杉碱甲双层片均匀设计体外释药

左金方配方颗粒剂与传统汤剂诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的作用比较

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中国中医基础医学杂志 2015年第7期21卷 833-836页

作者：周红祖余惠旻深圳市中医院广东深圳518020 深圳大学医学院广东深圳518060

目的:比较左金方配方颗粒剂与传统汤剂对人胃癌细胞SGC-7901生长的活性抑制和凋亡诱导作用。方法:采用MTT比色法观察SGC-7901生长受抑制情况,流式细胞仪分析细胞凋亡率,Hoechst 33258染色观察细胞形态学变化。结果:左金方配方颗粒剂与... 详细信息

目的:比较左金方配方颗粒剂与传统汤剂对人胃癌细胞SGC-7901生长的活性抑制和凋亡诱导作用。方法:采用MTT比色法观察SGC-7901生长受抑制情况,流式细胞仪分析细胞凋亡率,Hoechst 33258染色观察细胞形态学变化。结果:左金方配方颗粒剂与传统汤剂分别作用SGC-7901细胞后均能抑制细胞活性,且与剂量、时间呈依赖关系,并可诱导SGC-7901的凋亡。结论:同一浓度的左金方配方颗粒剂与传统汤剂作用SGC-7901相同时间,左金方配方颗粒剂比传统汤剂的作用效果更为明显。

关键词：左金方颗粒剂左金方传统汤剂 SGC-7901 凋亡

Telocytes作为抗胃癌中药潜在作用靶点的探究

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中国中医基础医学杂志 2022年第12期28卷 2011-2014,2042页

作者：黄庆宝刘霞周红祖王雯杨卓凡郑智彬宣攒威罗浩鑫余惠旻广州中医药大学第四临床医学院深圳市中医院深圳518033 深圳大学医学部深圳518060 深圳市第二人民医院深圳518025

目的探究telocytes (TCs)作为中药抗胃癌作用的潜在靶点。方法应用透射电子显微镜、苏木精-伊红染色、免疫组化、多重荧光免疫组化技术,对25例人胃部组织中TCs的形态、分布、免疫表型进行分析,对癌组织中TCs的细胞数量进行半定量分析... 详细信息

目的探究telocytes (TCs)作为中药抗胃癌作用的潜在靶点。方法应用透射电子显微镜、苏木精-伊红染色、免疫组化、多重荧光免疫组化技术,对25例人胃部组织中TCs的形态、分布、免疫表型进行分析,对癌组织中TCs的细胞数量进行半定量分析。结果 TCs多分布于胃腺体之间的间质、血管周围、伴行于肌束周边及肌层间质中,胞体多为梭形、扁平状或椭圆形,突起(telopodes, Tps)数目不等,形状略有差异。TCs表达CD34、血小板源性生长因子受体α多肽(platelet-derived growth factor receptor alpha, PDGFR-α)。胃癌组织中TCs的形态及其网状结构发生改变,胃癌组织黏膜下层和肌层中TCs的细胞数量明显低于正常胃组织,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 TCs在人胃组织各层均有分布,其免疫表型为CD34^(+)/PDGFR-α^(+)/c-kit-/CD31-,TCs的缺失可能是胃癌发生发展的重要机制,本研究结果为胃癌临床治疗及中药开发潜在靶点的研究提供了实验依据。

关键词： Telocytes 胃癌中药靶点

基于细胞凋亡表达的生晒参、红参和西洋参四性研究展望

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中草药 2008年第6期39卷 801-804页

作者：胡胜全周红祖余惠旻刘塔斯深圳市中药药学与分子药理学国家重点实验室广东深圳518057 深圳市二医院广东深圳518035 湖南中医药大学药学院湖南长沙410007

中药四性的研究一直是困扰中医药界的热点和难点问题,迄今未取得实质性的进展,严重影响了中医药现代化的进程。把细胞凋亡学应用于中药四性的研究,定性定量刻画中药四性的生物学效应与细胞凋亡的关系。从细胞分子水平建立一个中药四性... 详细信息

中药四性的研究一直是困扰中医药界的热点和难点问题,迄今未取得实质性的进展,严重影响了中医药现代化的进程。把细胞凋亡学应用于中药四性的研究,定性定量刻画中药四性的生物学效应与细胞凋亡的关系。从细胞分子水平建立一个中药四性的模式识别系统,将成为衡量中药四性的一个新突破。结合国内外大量文献研究和本课题组的研究基础,对中药四性的发展和定位提出新的观点和思路,对中药四性的研究进行评述和前瞻性分析。

关键词：中药四性细胞凋亡生晒参红参西洋参