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双向启动子探针载体的构建及其在谷氨酸棒杆菌中的应用

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农业生物技术学报 2023年第2期30卷 425-435页

作者：曹煜余心宇刘秀霞白仲虎江南大学生物工程学院/工业生物技术教育部重点实验室/粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心

双向启动子(bidirectional promoters,BDPs)为自然界常见表达元件之一，能够为遗传电路设计、代谢途径组装和优化提供新工具，但目前缺乏针对BDPs的高通量筛选手段。为了高通量筛选性能优越的BDPs，用于代谢工程中的多基因调控，本研究... 详细信息

双向启动子(bidirectional promoters,BDPs)为自然界常见表达元件之一，能够为遗传电路设计、代谢途径组装和优化提供新工具，但目前缺乏针对BDPs的高通量筛选手段。为了高通量筛选性能优越的BDPs，用于代谢工程中的多基因调控，本研究构建了一种BDPs活性探针载体p19BDP。该探针基于绿色荧光瞬时表征蛋白传感器蛋白1(green fluorescent sensor for transiently expressed proteins 1,gSTEP1)和瞬时表征蛋白传感器蛋白质标签(sensor for transiently expressed proteins tag,STEPtag)相互作用后会产生荧光的原理，以“头对头”的方式将gSTEP1基因与STEPtag基因连入p19-0质粒(删除tac启动子的pXMJ19质粒改造获得)获得探针载体，在两个基因中间插入BDPs序列后，通过检测荧光信号初步表征BDPs活性。通过转录组数据分析筛选出了8个谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)中的BDPs，利用探针载体p19BDP对其活性进行表征，其中两个诱导型启动子BDPcat和BDPicl的荧光值较诱导前分别提高了15.9倍和6.2倍，且在一定范围内荧光强度与诱导剂浓度呈正相关；其他6个内源BDPs(BDP1～BDP6)中，BDP6的荧光强度是对照启动子BDPcat(未诱导)的6.8倍。该探针载体不影响菌体生长，且gSTEP1/STEPtag复合物形成后其荧光值保持稳定。以上结果表明，探针载体p19BDP能够灵敏、有效地表征谷氨酸棒杆菌中BDPs强度。本研究为谷氨酸棒杆菌高通量挖掘天然BDPs提供了有效工具，同时为原核生物中BDPs筛选提供了新的思路。

关键词：谷氨酸棒杆菌探针载体双向启动子诱导型启动子

免疫球蛋白IgM和IgA的分子机制研究进展

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中国科学:生命科学 2025年

作者：王禹心李雅鑫肖俊宇北京大学生命科学学院蛋白质与植物基因研究国家重点实验室广州医科大学广州医科大学附属第一医院广州呼吸健康研究院呼吸疾病全国重点实验室/国家呼吸系统疾病临床医学研究中心/国家呼吸医学中心北大-清华生命科学联合中心

免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig)是机体防御机制的关键组成部分,包括5种主要类别:IgM、IgD、IgG、IgE和IgA. IgM是感染初期产生的首类抗体,同时具有强效的补体激活能力;而IgA则是黏膜免疫的主要抗体. IgM和IgA均以多聚体的形式在免疫防... 详细信息

免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig)是机体防御机制的关键组成部分,包括5种主要类别:IgM、IgD、IgG、IgE和IgA. IgM是感染初期产生的首类抗体,同时具有强效的补体激活能力;而IgA则是黏膜免疫的主要抗体. IgM和IgA均以多聚体的形式在免疫防御中发挥功能.得益于冷冻电子显微镜技术的进步,近期研究揭示了IgM和IgA核心区的高分辨率结构,为理解其分子组装机制、受体结合模式以及与病原体蛋白的相互作用提供了新的视角.本综述旨在总结这些最新研究进展,以期加深对IgM和IgA分子机制的理解.

关键词： IgM IgA 黏膜免疫结构生物学受体识别病原体效应分子

一种适用于混合三端直流输电线路的故障定位方法

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西安交通大学学报 2025年第1期59卷 37-46页

作者：高淑萍杨莉莉武心宇周晋宇宋国兵西安科技大学电气与控制工程学院西安710054 西安市电气设备状态监测与供电安全重点实验室西安710054 西安交通大学电气工程学院西安710049

针对因结构复杂导致的混合三端直流输电线路故障定位困难的问题,提出了一种结合变分模态分解算法与改进卷积神经网络(CNN)的故障定位方法(VMD-CNN)。首先,利用PSCAD/EMTDC软件构建混合三端直流输电系统模型,获得故障电流数据,应用克拉... 详细信息

针对因结构复杂导致的混合三端直流输电线路故障定位困难的问题,提出了一种结合变分模态分解算法与改进卷积神经网络(CNN)的故障定位方法(VMD-CNN)。首先,利用PSCAD/EMTDC软件构建混合三端直流输电系统模型,获得故障电流数据,应用克拉克变换对其解耦,获取故障电流的线模分量;其次,对得到的线模分量进行变分模态分解(VMD),得到多个本征模态函数(IMF)分量,选取特征信息最丰富的IMF分量作为VMD-CNN模型的输入;然后,利用高效的分类模型支持向量机(SVM)判别故障发生的区域,将提取到的IMF分量作为SVM输入进行训练学习,可以准确判断出故障发生区域;最后,搭建VMD-CNN模型进行故障定位,挖掘出行波信号中蕴藏的故障信息,同时通过麻雀搜索算法优化CNN中的超参数,实现混合三端直流输电线路的精确定位。仿真结果表明:过渡电阻为100Ω,不同故障位置情况下的定位相对误差均在0.17%以内;故障位置为460 km,不同过渡电阻情况下的定位相对误差均在0.25%以内;过渡电阻为50Ω,不同故障类型情况下的相对误差均在0.3%以内。所提方法能够提升不同故障位置、过渡电阻和故障类型下的定位准确性。

关键词：混合三端直流输电故障定位变分模态分解卷积神经网络麻雀搜索算法

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停滞棒杆菌遗传改造工具和启动子文库构建

生物加工过程 2024年第2期22卷 147-155页

作者：叶光正余心宇林钰宽蔡友华邢新会陈武薛正莲张翀安徽工程大学生物与食品工程学院安徽芜湖241000 清华大学化工系生物化工研究所清华大学合成与系统生物学研究中心工业生物催化教育部重点实验室北京100084 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司广东肇庆526060 清华大学深圳国际研究生院生物医药与健康工程研究院广东深圳518055 安徽省工业微生物分子育种工程实验室安徽芜湖241000

停滞棒杆菌是用于5′-肌苷酸生产的重要微生物底盘。为利用代谢工程技术来创建和优化高效细胞工厂,在停滞棒杆菌中构建遗传改造工具和启动子文库十分必要。本研究使用pCG1复制子构建了大肠杆菌-停滞棒杆菌穿梭载体,建立停滞棒杆菌外源DN... 详细信息

停滞棒杆菌是用于5′-肌苷酸生产的重要微生物底盘。为利用代谢工程技术来创建和优化高效细胞工厂,在停滞棒杆菌中构建遗传改造工具和启动子文库十分必要。本研究使用pCG1复制子构建了大肠杆菌-停滞棒杆菌穿梭载体,建立停滞棒杆菌外源DNA转化方法、基于自杀质粒同源重组的基因敲除方法,最终形成了停滞棒杆菌异源基因稳定表达系统;停滞棒杆菌游离质粒的电转化效率达到(2.3±0.3)×10^(3)cfu/μg;构建停滞棒杆菌的合成启动子文库,筛选得到24个强度差异达30倍的启动子元件,用于停滞棒杆菌中的基因精细表达调控。

关键词：停滞棒杆菌转化效率穿梭质粒启动子基因敲除

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项目式教学在高中化学教学中的有效应用

学周刊 2025年第1期1卷 107-110页

作者：孙心茹崔克宇吉林师范大学化学学院吉林四平136000

项目式教学是一种动态的教学方法,指的是教师根据教材内容、学生学情和课程目标,融入生活化、趣味化、创新性等元素,创设科学情境,指引学生在小组合作学习中完成高效探究,从中汲取知识以及他人的学习优势,实现取长补短。新时代下,随着... 详细信息

项目式教学是一种动态的教学方法,指的是教师根据教材内容、学生学情和课程目标,融入生活化、趣味化、创新性等元素,创设科学情境,指引学生在小组合作学习中完成高效探究,从中汲取知识以及他人的学习优势,实现取长补短。新时代下,随着社会对人才培育的要求越来越高,项目式教学在教育工作中的应用也逐渐广泛,在无形中推动了我国教育工作的整体发展。基于此,文章以高中化学为例,分析了项目式教学在高中化学教学中的应用价值和应用策略,希望可以转化教师的教学思路,使教师意识到传统教学模式的弊端,为一线教师的实际教学工作起到一定的借鉴作用,推动我国高中化学教学的进一步改革和发展。

关键词：项目式教学高中化学有效应用

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青年失业者的生命体验与生活选择——一个社会时间的视角

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中国青年研究 2025年

作者：余澍西北农林科技大学人文社会发展学院

作为生命历程中非意图的损害性事件，失业的发生打破了青年人遵照社会时间运行的行为模式与行动节奏，在干扰个体日常生活的同时亦使其生命历程陷入了停滞与中断。对于青年而言，这种停滞表现为生命历程规划的失序、生命历程运行的去同... 详细信息

作为生命历程中非意图的损害性事件，失业的发生打破了青年人遵照社会时间运行的行为模式与行动节奏，在干扰个体日常生活的同时亦使其生命历程陷入了停滞与中断。对于青年而言，这种停滞表现为生命历程规划的失序、生命历程运行的去同步化与生命历程时序性的断裂。在面对危机时，青年失业者通过适应、调整、复归与转向等策略试图恢复自身生命历程与社会时间的秩序性。当下，有必要重新审视我国的失业保障制度，以更加完善的失业保障制度嵌入于青年失业者重建生命历程与时间秩序的实践中，增强国家与社会对青年失业者的支持。

关键词：青年问题青年失业社会时间生命历程

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基于经验知识的建筑节能方案智能决策模型

清华大学学报(自然科学版) 2025年第1期 53-61页

作者：马丁媛李怡心李小冬北京建筑大学城市经济与管理学院工程管理系清华大学建设管理系

在绿色建筑设计中，传统节能方案的选择依赖设计师经验，难以考量技术、成本等多维因素，决策效率受限。该文提出基于经验知识的建筑节能方案智能决策模型。通过构建含有147个绿色星级认证建筑的案例库，利用案例推理方法，根据初步设... 详细信息

在绿色建筑设计中，传统节能方案的选择依赖设计师经验，难以考量技术、成本等多维因素，决策效率受限。该文提出基于经验知识的建筑节能方案智能决策模型。通过构建含有147个绿色星级认证建筑的案例库，利用案例推理方法，根据初步设计已知属性计算余弦相似度进行相似案例检索，为目标案例提供技术方案参考；通过比较分析4种机器学习算法，以确定的技术方案为输入参数，建立基于机器学习算法的增量成本预测模型；以夏热冬冷地区建筑为例对所构建的模型进行有效性验证。结果表明：基于案例推理的建筑节能方案智能决策模型可找到最相似案例并重用其技术方案，提高了决策效率；基于极端梯度提升算法的增量成本预测模型的预测准确率最高，为72.41%。该研究所构建的智能决策模型可提高建筑节能方案的科学性与决策效率，为绿色建筑设计提供重要支持。

关键词：智能决策经验知识案例推理机器学习

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无心之失抑或有的放矢：上市公司存贷双高异象与审计质量

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管理评论 2025年

作者：窦超原亚男杨雪罗棪心中央财经大学商学院北京交通大学经济管理学院

我国上市公司的审计质量一直饱受争议，而近些年一再爆雷的“存贷双高”型企业进一步凸显了这一问题的严重性，上市公司造假案件不仅对资本市场造成极大冲击，也集中暴露了会计师事务所在审计工作中的职责缺位与利益勾结问题，引发了市... 详细信息

我国上市公司的审计质量一直饱受争议，而近些年一再爆雷的“存贷双高”型企业进一步凸显了这一问题的严重性，上市公司造假案件不仅对资本市场造成极大冲击，也集中暴露了会计师事务所在审计工作中的职责缺位与利益勾结问题，引发了市场对企业“存贷双高”异象与审计质量问题的关注及担忧。立足于当前证监会坚持“一案双查”的现状，究竟上市公司的“存贷双高”异象与审计质量间存在何种关系？如何来改善“存贷双高”型企业的审计质量以防范风险？本文在理论分析的基础上，以2007—2018年沪深A股上市公司为研究样本进行了实证分析，系统验证了“存贷双高”型企业存在的低水平审计质量问题，凸显了这一财务异象潜在的隐患特征。进一步，从公司内部治理机制与外部治理渠道展开了缓解机制的探究，并探究了“存贷双高”影响审计质量的路径。研究结果表明，提升审计委员会的人员规模与独立性可以有效改善“存贷双高”型企业的审计质量，而公司面临的卖空压力越大、媒体关注度越高亦能显著提高“存贷双高”型企业的审计质量。同时，“存贷双高”通过审计合谋影响审计质量。上述结果不仅揭示了现阶段审计工作在防范“存贷双高”型企业爆雷中的职责缺位，也给相关市场主体预防风险和监管部门加强监督提供了借鉴参考，有助于资本市场更好地认清“存贷双高”这一财务异象与审计质量之间的关系。

关键词：存贷双高审计质量缓解机制

面向多网联无人机的MADRL协同路径规划算法

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西安电子科技大学学报 2025年

作者：李安余传鑫陈成南昌大学信息工程学院先进信号处理与智能通信江西省重点实验室

针对多架网联无人机（Cellular-connected Unmanned Aerial Vehicle， CUAV）执行多个动态目标点巡航监测任务的协同路径规划问题，本文提出了一种基于多智能体深度强化学习(Multi-Agent Deep Reinforcement Learning， MADRL)的协同动... 详细信息

针对多架网联无人机（Cellular-connected Unmanned Aerial Vehicle， CUAV）执行多个动态目标点巡航监测任务的协同路径规划问题，本文提出了一种基于多智能体深度强化学习(Multi-Agent Deep Reinforcement Learning， MADRL)的协同动态目标分配与路径规划算法。具体而言，首先对多架CUAV对地通信系统环境建模，在CUAV与蜂窝网络通信连接约束、防碰撞等移动性约束下，构建多架CUAV任务完成总时间和总中断时间加权和最小化优化问题。然后把优化问题离散化并转为马尔可夫博弈。为解决所构建的组合优化问题，提出了基于深度确定性策略梯度(Deep Deterministic Policy Gradient， DDPG)的系列算法有效地处理CUAV之间的合作与竞争关系，且引入一个共享经验池，以提高算法的稳定性和学习效率；最后通过仿真实验验证了所提出的MADRL框架在多架CUAV协同路径规划的可行性、有效性和鲁棒性。研究表明：多智能体双延迟-确定策略梯度算法（multi-agent twin delayed deep deterministic policy gradient algorithm，MATD3）算法在动态目标位置的协同目标分配与路径规划中具有更好的效果。

关键词：无人机强化学习网联无人机多智能体深度强化学习路径规划动态目标分配