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检测华支睾吸虫特异性IgG4生物素-亲和素复合酶联免疫吸附法的建立及检测效能分析

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中国血吸虫病防治杂志 2015年第2期27卷 156-161页

作者：王玠宋丽君余传信沈双许永良殷旭仁柯雪丹高玒刘茜江苏省寄生虫病分子生物学重点实验室、卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室、江苏省血吸虫病防治研究所无锡214064

目的探讨亲和素-生物素复合酶联免疫吸附法(ABC-ELISA)检测特异性Ig G4抗体用于诊断华支睾吸虫病的效果。方法建立检测华支睾吸虫特异性抗体Ig G4的ABC-ELISA法(Ig G4-ABC-ELISA),以此方法检测华支睾吸虫病、日本血吸虫病、卫氏并殖吸... 详细信息

目的探讨亲和素-生物素复合酶联免疫吸附法(ABC-ELISA)检测特异性Ig G4抗体用于诊断华支睾吸虫病的效果。方法建立检测华支睾吸虫特异性抗体Ig G4的ABC-ELISA法(Ig G4-ABC-ELISA),以此方法检测华支睾吸虫病、日本血吸虫病、卫氏并殖吸虫病、弓形虫病、棘球蚴病、囊尾蚴病和曼氏裂头蚴病患者血清样本。以Ig G4-ELISA和Ig GELISA法为对照,比较3种方法用于诊断华支睾吸虫病的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及诊断效率。结果成功建立了用于检测华支睾吸虫特异性抗体的Ig G4-ABC-ELISA法,用此方法检测华支睾吸虫病患者血清特异性抗体Ig G4的敏感性为90.0%,特异性为98.2%,阳性预测值为93.8%,阴性预测值为97.0%,诊断效率为96.3%;Ig G4-ELISA法检测华支睾吸虫病患者血清特异性抗体敏感性为86.0%,特异性为98.2%,阳性预测值为93.5%,阴性预测值为95.9%,诊断效率为95.4%;Ig G-ELISA法检测华支睾吸虫病患者血清特异性抗体Ig G的敏感性为94.0%,特异性为88.1%,阳性预测值为70.1%,阴性预测值为98.0%,诊断效率为89.4%。Ig G4-ABC-ELISA法检测华支睾吸虫病患者血清特异性抗体的敏感性高于Ig G4-ELISA法(P<0.05),特异性高于Ig G-ELISA法(P<0.05)。结论 Ig G4-ABC-ELISA法检测华支睾吸虫特异性抗体IgG4具有高度敏感性与特异性,在华支睾吸虫病诊断中具有较好应用价值。

关键词：华支睾吸虫亲和素-生物素酶联免疫吸附法 IgG4 IgG 诊断

曼氏血吸虫虫卵蛋白IPSE基因合成、表达及特性分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第2期28卷 89-93页

作者：谢曙英陈红根余传信殷旭仁华万全曾小军梁幼生高琪江西省寄生虫病防治研究所南昌330046 江苏省寄生虫病防治研究所卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室无锡214064

目的合成并表达曼氏血吸虫虫卵白介素4诱导物(IPSE)基因,并对其免疫特性进行分析。方法应用重叠PCR方法合成曼氏血吸虫IPSE基因,将其定向克隆至表达载体pET32a(+)的硫氧还蛋白(Trx)序列下游,构建重组表达质粒IPSE/pET32a(+)。将重组质... 详细信息

目的合成并表达曼氏血吸虫虫卵白介素4诱导物(IPSE)基因,并对其免疫特性进行分析。方法应用重叠PCR方法合成曼氏血吸虫IPSE基因,将其定向克隆至表达载体pET32a(+)的硫氧还蛋白(Trx)序列下游,构建重组表达质粒IPSE/pET32a(+)。将重组质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,表达Trx-IPSE融合蛋白。大量制备表达产物,用镍螯合亲和层析胶在变性条件下纯化重组Trx-IPSE融合蛋白。用大量PBS对变性融合蛋白进行透析,获得部分复性的可溶性Trx-IPSE融合蛋白。应用蛋白质印迹(Westernblotting)分析其是否能被慢性日本血吸虫病患者血清中IgG抗体所识别,及其与健康人血清中IgE抗体的结合能力。结果人工合成的IPSE基因序列与天然基因序列完全一致。经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,含重组质粒的转化子细菌能表达相对分子质量(Mr)约35700的蛋白分子,与预计Trx-IPSE融合蛋白的相对分子质量大小相符。Westernblotting分析结果显示,变性的和复性的Trx-IPSE融合蛋白均能被慢性日本血吸虫病患者血清中IgG抗体识别,融合蛋白Trx-IPSE能与健康人血清中IgE抗体非特异性结合。结论曼氏血吸虫IPSE基因合成获得成功,重组表达的IPSE具有与天然抗日本血吸虫抗体反应和与IgE非特异性结合的能力。

关键词：曼氏血吸虫虫卵蛋白血吸虫虫卵白介素4诱导物基因合成功能分析

多聚酶链反应技术及其在细菌性疾病诊断中的应用

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中国人兽共患病杂志 1992年第5期8卷 47-50页

作者：余传信万超群中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所

多聚酶链反应技术是一种在体外能使DNA分子短时间内扩增至数百万倍的新技术,具有操作简便,快速、灵敏、特异、高效等优点。自1985年问世以来,已经在传染病诊断、法医学、肿瘤学研究、遗传学、遗传工程及考古学等领域获得广泛应用。本文... 详细信息

多聚酶链反应技术是一种在体外能使DNA分子短时间内扩增至数百万倍的新技术,具有操作简便,快速、灵敏、特异、高效等优点。自1985年问世以来,已经在传染病诊断、法医学、肿瘤学研究、遗传学、遗传工程及考古学等领域获得广泛应用。本文仅就多聚酶链反应技术的基本原理及其在细菌源性疾病的诊断和研究中的应用做一概述。一、原理多聚酶链反应的全过程基本上由三个步骤组成:即DNA变性;结合;延伸。首先在高温下使双链DNA分子变性解链为单链。

关键词：聚合酶链反应细菌性疾病诊断

1-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉衍生物的合成及抗日本血吸虫活性评价

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有机化学 2013年第12期33卷 2588-2595页

作者：王文龙宋丽君王古平范文华殷旭仁余传信冯柏年江南大学药学院无锡214122 江苏艾凡生物医药有限公司无锡214122 江苏省寄生虫病防治研究所无锡214064

大规模使用抗血吸虫病药物吡喹酮产生的耐药性问题备受关注．为了寻找新型的抗血吸虫病药物，设计、合成了一类1-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉衍生物2～10，并对化合物进行了体外抗日本血吸虫活性评价．结果显示，含有氯乙酰基取代的衍生... 详细信息

大规模使用抗血吸虫病药物吡喹酮产生的耐药性问题备受关注．为了寻找新型的抗血吸虫病药物，设计、合成了一类1-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉衍生物2～10，并对化合物进行了体外抗日本血吸虫活性评价．结果显示，含有氯乙酰基取代的衍生物10表现了优于吡喹酮的杀虫活性，可以作为开发新型抗血吸虫病药物的先导化合物．

关键词：吡喹酮 1-甲基-1,2,3,4-四氢异喹啉衍生物日本血吸虫杀虫活性

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快速ELISA法诊断血吸虫病的应用研究

中国血吸虫病防治杂志 2011年第2期23卷 158-162页

作者：华万全余传信殷旭仁钱春艳江苏省血吸虫病防治研究所卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室无锡214064

目的对快速酶联免疫吸附试验(ELISA)的血吸虫病诊断实验条件进行优化,并观察其应用价值。方法同时将抗原、待测血清、HRP-SPA共置进行反应,替代常规ELISA法的分步反应。通过比较不同稀释度HRP-SPA的检测效果,确定其最佳工作浓度。观察... 详细信息

目的对快速酶联免疫吸附试验(ELISA)的血吸虫病诊断实验条件进行优化,并观察其应用价值。方法同时将抗原、待测血清、HRP-SPA共置进行反应,替代常规ELISA法的分步反应。通过比较不同稀释度HRP-SPA的检测效果,确定其最佳工作浓度。观察待测血清和HRP-SPA不同混合反应时间对检测效果的影响,优化快速ELISA法的检测条件。用快速ELISA法、常规ELISA法和胶体染料试纸条法(DDIA)平行检测慢性血吸虫病人、华支睾吸虫病人及健康人血清,观察快速ELISA法的血吸虫病诊断实用价值。结果 HRP-SPA的最佳工作浓度为1∶2 000,待测血清和HRP-SPA最佳混合反应条件是37℃同步反应60 min。快速ELISA法检测慢性血吸虫病人血清抗体阳性检出率为93.8%,与华支睾吸虫病人血清的交叉反应率为4.0%,检测健康人血清的假阳性率为1.5%,与常规ELISA法和DDIA检测结果相似。结论快速ELISA法具有快速、简便等优点,是一种简便实用的血吸虫病免疫诊断方法。

关键词：血吸虫病免疫诊断快速ELISA法金黄色葡萄球菌A蛋白