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作者：余丞浩中国中医科学院

学位级别：硕士

附子为毛茛科植物乌头(Aconitum carmichaelii Debx.)的子根加工品。在临床使用中,附子被广泛应用于治疗心力衰竭、急性心肌梗死、休克、支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病、关节炎等疾病,取得了良好疗效。在基础研究方面,根据对附子中次生... 详细信息

附子为毛茛科植物乌头(Aconitum carmichaelii Debx.)的子根加工品。在临床使用中,附子被广泛应用于治疗心力衰竭、急性心肌梗死、休克、支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病、关节炎等疾病,取得了良好疗效。在基础研究方面,根据对附子中次生代谢产物研究表明其主要有生物碱、附子脂酸、脂肪酸酯等成分。其中,生物碱类主要包括新乌头碱(mesaconitine, MAC)、乌头碱(aconitine, AC)、次乌头碱(hypaconitine, HAC)、去甲乌药碱(higenamine)、乌头原碱等。在临床广泛应用与治疗各种疾病的同时,附子也因其毒性在临床应用中受到较大限制。现代研究则提出,附子的主要活性成分乌头类生物碱既是附子的药效成分,也是主要的毒性成分。乌头类生物碱尤其是双酯型二萜类生物碱,如乌头碱、新乌头碱、次乌头碱等的毒性较大。上述三种双酯型乌头碱在以往研究中以乌头碱报道最多。乌头碱毒性主要表现为中枢神经系统和心血管系统,对心脏的毒性最为明显。在心脏上可出现多形性心律失常,如单源室性早搏、单源多形室性早搏、室速及室颤,病人常因心律失常及呼吸中枢麻痹死亡。乌头碱能够影响电压依赖性钠通道,在去极化过程中抑制钠通道构象改变,使得钠通道维持激活状态,膜电位持续去极化。但乌头碱所致的心律失常不能单纯用促进Na+电流内流来解释。触发活动(TA)是一种重要的心律失常诱发机制,因为其与自主性相关的自发去极化有关,包括早期后去极化(EAD)和延迟后去极化(DAD)。DADs不但可引发触发冲动,其也可直接导致自主性的心律失常。人们认为迟后除极(DADs)是在胞内Ca2+的积累状态下由肌浆网自发释放出Ca2+形成的。当前研究认为乌头碱致心率失常主要通过Nac-NCX途径：乌头碱导致钠通道(Na+ channel, NaC)开放时间增加,钠离子持续进入细胞内,使细胞内钠离子浓度增加,通过钠钙交换体(Na+/Ca2+ exchanger, NCX)逆向转运使细胞内钙离子浓度增加,导致细胞内钙超载,从而诱发心律失常;肌浆网的钙释放过程中,过量的Ca2+也会通过NCX贡献了胞内Na＋的去极化活动。如果内流的Na+足够产生DAD振幅的话,从而诱发一次新的细胞膜去极化。乌头碱对上述NaC-NCX途径结果,可以使动作电位时程(action potential duration, APD)延长,进而出现迟后除极和触发活动。在临床应用中,单纯的阻断钠通道仅能部分抑制心室动过速,有报道提出使用钙通道拮抗剂在药效上优于使用钠通道拮抗剂。在兴奋收缩耦联(excitation-contraction coupling, ECC)过程中,细胞膜去极化引起L型钙通道开放,使外钙进入细胞内,通过一种以钙致钙(calcium-induced calcium release, CICR)的方式激活RyR2将肌浆网内钙大量释放。当胞内钙离子过度增加时,造成钙超载,诱发钙波的频率增加,从而引起心率失常。有报道指出乌头碱诱导的心率失常可能跟RyR2的激活有直接的关系。最近的报道指出,乌头碱能够下调SERCA的蛋白表达,其可能使细胞在兴奋收缩耦联中不能及时消除胞浆内的钙离子而造成胞质内的钙聚集从而导致RyR开放频率增加,或者在肌浆网内钙含量增高时,RyR对钙离子的敏感性增加导致肌浆网(sarcoplasmic reticulum, SR)钙泄漏(calcium leak)增大,从而更容易诱发不节律钙释放。乌头碱通过多种途径能够引起细胞内钙离子增加可能是出现心律失常的一个原因,或使细胞RyR2对钙敏感性增加,更容易触发钙自肌浆网内释放,但这一结论尚无直接的证据证明。综上,本研究考察三种双酯型乌头碱对心肌细胞钙释放的影响,分别从毒性作用即诱导细胞自发性钙释放(spontaneous calcium release, S CR)、钙瞬变以及正性肌力作用角度考察药物的效应。探寻乌头碱导致自发性钙释放与升高细胞内钙、肌浆网内钙含量、肌浆网钙泄漏以及兴奋收缩耦联中SERCA和NCX的功能变化的关系,研究钙稳态失衡的机制,阐述乌头碱的毒性机理。通过阻断钠通道、钙通道、钠钙交换体以及肾上腺素能受体,检测能够有效消除乌头碱对心肌细胞自发性钙释放的干预方式,从钙转运角度阐述钙稳态失衡对心律失常的影响。同时本研究亦筛选具有潜在消除乌头碱心脏毒性的中药组分,主要包括已报道具有阻断上述离子通道或受体作用的中药单体或配伍组分。以期找到能够有效消除乌头碱致自发性钙释放的中药组分,为临床增效或减毒应用提供依据。第一部分三种双酯型乌头碱对心肌细胞钙释放研究目的：研究三种双酯型乌头碱(乌头碱,新乌头碱,次乌头碱)对心肌细胞钙释放的毒效关系,包括心肌细胞自发性钙释放的诱发率、舒张末期钙浓度(F0)、钙瞬变幅度(△F

关键词：乌头碱新乌头碱次乌头碱自发性钙释放心肌细胞

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基于五运六气理论的新型肺炎防治分析与探讨

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中国中医基础医学杂志 2020年第3期26卷 285-292页

作者：杨威余丞浩中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700 中国中医科学院西苑医院北京100091

五运六气理论对时令疫病的发生、发展及治疗防控具有系统阐述,强调天人气化、扶“正祛邪”是中医防治时令疫病的重要理论基础。新型冠状病毒(2019-nCoV)感染的肺炎属时令疫病范畴,2019年12月至2020年1月主体处于己亥年终之气,少阳相火内... 详细信息

五运六气理论对时令疫病的发生、发展及治疗防控具有系统阐述,强调天人气化、扶“正祛邪”是中医防治时令疫病的重要理论基础。新型冠状病毒(2019-nCoV)感染的肺炎属时令疫病范畴,2019年12月至2020年1月主体处于己亥年终之气,少阳相火内蕴,复被寒气阻遏,脾胃功能偏弱,适逢武汉本季气温偏高、湿度较大而诱发本病,为寒热错杂、脾虚湿困证之时令疫病。其防治原则需在清热透表、调畅枢机的同时兼顾脾胃、相火,重症者兼顾心阳。药物预防及轻症治疗推荐柴胡剂枢转气机、透热转气,日常调理首重饮食调控,避免食积助火、大剂苦寒重伤。大寒至立春前后进入庚子年五运六气格局,需关注时令转换与证候“拐点”的地域差异,适时调整防治策略。受金运太过、少阴君火司天及主客气影响,肺金肝木易失衡,脾胃功能渐趋恢复,疫情回落得益于时令转换及防控得力。2020年2~3月初春,春生之气被寒水客气郁遏,主症仍见外寒内热证,或由湿重渐转向燥症与燥湿相兼证,治宜泻肺宣气、疏散郁热、柔肝润燥,防控重点仍在青壮年人群,重症及年老体弱者仍需兼顾心阳、脾胃。初夏4~5月天气回暖,风火相扇,外感逐渐减少,防控重点应由呼吸道疾病转到心脑血管疾病;时有寒潮反复,届时高低年龄组人群仍需关注呼吸道疾病。基于五运六气理论分析,并相较于五运六气格局相似年份的中国疫病史料、近10年1~3月流行性感冒疫情及高病死月份的运气因素分析等,倾向于国富民安、时气小有异常、不具疫戾条件。

关键词：五运六气新型冠状病毒肺炎时令疫病防治原则趋势预判

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从阴火病络视角探讨泛血管疾病的发病机制

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北京中医药大学学报 2023年第9期46卷 1296-1300页

作者：申鑫惠杨宇峰余丞浩石岩辽宁中医药大学沈阳110847

泛血管医学是近年来的新兴学科,泛血管疾病是以动脉粥样硬化为共同病理特征的系统性血管疾病。目前,泛血管疾病研究存在病机认识不全面、作用机制阐述不清晰等问题。中医药在泛血管疾病的防治中具有一定优势。阴火理论是李东垣的重要思... 详细信息

泛血管医学是近年来的新兴学科,泛血管疾病是以动脉粥样硬化为共同病理特征的系统性血管疾病。目前,泛血管疾病研究存在病机认识不全面、作用机制阐述不清晰等问题。中医药在泛血管疾病的防治中具有一定优势。阴火理论是李东垣的重要思想,认为机体因脾胃受损,元气匮乏,气火失衡,阴火内生。络病理论是中医理论体系的重要组成部分,慢性疾病随着病程演变最终会发展成络病。阴火是络病的关键病理环节,络病是阴火发生发展的必然结果。本文在阴火理论与络病理论指导下,以创新理论推动中医药发展为出发点,从阴火病络角度提出泛血管疾病“气火失衡、浊瘀毒络”的病机,并对其进行理论探析。

关键词：泛血管疾病阴火理论络病理论动脉粥样硬化气火失衡

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淫羊藿的临床应用及作用机制

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中医学 2022年第2期11卷 167-175页

作者：邹亚楠余丞浩赵汉青河北大学中医学院河北保定天津中医药大学第一附属医院天津辽宁中医药大学辽宁沈阳

淫羊藿是传统补阳类中药,味辛、甘,性温,具有补肾壮阳,祛风除湿等功效,中医常用以治阳痿遗精,小便淋沥,筋骨痿软,风湿痹痛,麻木拘挛等。淫羊藿的主要化学成分包括黄酮类、木脂素类、多糖类等。现代药理学研究表明淫羊藿对骨代谢、免疫... 详细信息

淫羊藿是传统补阳类中药,味辛、甘,性温,具有补肾壮阳,祛风除湿等功效,中医常用以治阳痿遗精,小便淋沥,筋骨痿软,风湿痹痛,麻木拘挛等。淫羊藿的主要化学成分包括黄酮类、木脂素类、多糖类等。现代药理学研究表明淫羊藿对骨代谢、免疫系统、神经–内分泌系统有调节作用,并具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等药理活性,临床常以成方制剂或中药处方形式治疗骨骼、内分泌、生殖、循环等系统疾病及肿瘤疾病。本研究通过分析和总结近十年国内外淫羊藿相关研究文献,对淫羊藿临床应用及作用机制进行综述,以期为淫羊藿进一步研究和开发应用提供参考。

关键词：淫羊藿临床应用作用机制综述

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双龙方对大鼠肠系膜上动脉环舒缩功能的影响及机制探究

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中华中医药杂志 2018年第5期33卷 2080-2083页

作者：余丞浩李贻奎赵乐张金艳李连达中国中医科学院西苑医院北京100091

目的:研究双龙方对大鼠离体肠系膜动脉血管舒缩功能的影响,探讨其可能存在的机制。方法:应用离体微血管动力描记技术和离子通道特异性阻断方法,考察双龙方对大鼠肠系膜动脉环直接舒张作用,及对受体依赖型、电压依赖型钙通道功能的影响,... 详细信息

目的:研究双龙方对大鼠离体肠系膜动脉血管舒缩功能的影响,探讨其可能存在的机制。方法:应用离体微血管动力描记技术和离子通道特异性阻断方法,考察双龙方对大鼠肠系膜动脉环直接舒张作用,及对受体依赖型、电压依赖型钙通道功能的影响,和钾离子通道抑制剂对双龙方舒张血管作用的影响。结果:双龙方可舒张大鼠肠系膜上动脉,32、16、8g生药/L组与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01)。双龙方8g生药/L组5-HT最大收缩达到KCl预收缩高度(Emax),与空白对照组比较显著降低(P<0.01)。双龙方8、4、2g生药/L浓度组中,NA的Emax较空白对照组显著下降(P<0.01,P<0.05)。双龙方8、4g生药/L组KCl Emax较空白对照组均显著降低(P<0.01)。双龙方8g生药/L组Ca Cl2 Emax较空白对照组显著降低(P<0.01)。4种类型钾离子通道抑制剂4-氨基吡啶、氯化钡、格列苯脲、四乙胺干预后,双龙方20、10g生药/L组血管的舒张幅度与空白对照组比较,无显著性差异。结论:双龙方有显著的扩张血管作用,其舒张血管的作用机制与抑制电压依赖型钙离子通道功能及5-羟色胺、去甲肾上腺素受体有关。

关键词：双龙方肠系膜动脉环血管扩张作用

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生脉饮对糖尿病心肌病的保护作用

生脉饮对糖尿病心肌病的保护作用

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第十一届海峡两岸心血管科学研讨会、2017年全国心脑血管药理学术会议、中国卒中学会第一次新药研讨会

作者：石晓路余丞浩孙明杰中国中医科学院医学实验中心中国中医科学院西苑医院

糖尿病性心脏病中医称为"消渴病心病",中医认为它是由于消渴病不及时治疗,致使病情进一步发展演变而成的。作为消渴病之并发症,心脏病变的临床规律与消渴本病的发展密切关联,消渴病日久阴损耗气,因此病性主体以气阴两虚为主。国内学者... 详细信息

糖尿病性心脏病中医称为"消渴病心病",中医认为它是由于消渴病不及时治疗,致使病情进一步发展演变而成的。作为消渴病之并发症,心脏病变的临床规律与消渴本病的发展密切关联,消渴病日久阴损耗气,因此病性主体以气阴两虚为主。国内学者认为心气虚证是心衰的基本证候,而心肌能量代谢障碍又是心衰重要的病理基础,益气活血法可以改善心肌能量代谢,作为治疗心衰

关键词：生脉饮保护作用生脉散糖尿病心肌病

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乌头碱致急性自发性钙释放的机制研究

乌头碱致急性自发性钙释放的机制研究

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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛

作者：石晓路余丞浩于友华孙明杰北京市中医药防治重大疾病基础研究重点实验室中国中医科学院医学实验中心

【目的】研究乌头碱致心肌细胞急性白发性钙释放的作用及其基于钙信号的机制研究。【材料和方法】急性分离大鼠左心室心肌细胞,灌流含不同浓度的乌头碱溶液,使用多细胞钙瞬变检测系统检测心肌细胞的舒张末期钙浓度(F0)、钙瞬变幅度(ΔF... 详细信息

【目的】研究乌头碱致心肌细胞急性白发性钙释放的作用及其基于钙信号的机制研究。【材料和方法】急性分离大鼠左心室心肌细胞,灌流含不同浓度的乌头碱溶液,使用多细胞钙瞬变检测系统检测心肌细胞的舒张末期钙浓度(F0)、钙瞬变幅度(ΔF)变化和自发性钙释放(SCR)发生率。分析钠通道、钙通道、钠钙交换体、钙调蛋白激酶、肾上腺素能受体阻断下乌头碱诱导心肌细胞SCR发生率、F0、ΔF的变化。使用单细胞收缩与离子检测系统检测乌头碱对持续搏动状态下心肌细胞内钙,钙瞬变,SERCA和NCX功能、肌浆网钙容量及钙泄漏影响。化学发光法检测乌头碱作用下细胞胞浆cAMP含量,westenblot检测p-Ser16-PLB,PLB,SERCA-2a。【结果】0.3,1,3μmol·L乌头碱能浓度依赖性诱发心肌细胞出现自发性钙释放,发生率分别为9.2±8.2%,69.0±8.1%,80.1±5.6%;同时能够提高舒张末期钙浓度、钙瞬变幅度。利多卡因、KB-R7943及其联合应用下,利多卡因能够明显降低钙瞬变幅度但仍高于正常细胞,单独或联合使用KB-R7943能够使舒张期钙和钙瞬变恢复至正常水平,乌头碱诱导的心肌细胞SCR发生率均发生下降且三者之间无显著性差异。证明乌头碱主要通过钠通道-反向钠钙交换(NaC-rNCX)途径增加钙离子浓度并诱发自发性钙释放。硝苯地平能够降低SCR发生率同时大幅降低钙瞬变幅度,但其与利多卡因联用并未协同降低SCR发生率。说明L-型钙通道贡献的钙参与了钙不节律释放过程,但并非主导因素。阻断钙调蛋白激酶(CaMKⅡ)不能有效消除乌头碱致心肌细胞SCR发生率,而阻断肾上腺素能受体(AR)能够有效消除SCR发生率。联合应用AR阻断剂和钠通道阻滞剂能够达到消除SCR最佳效果,使乌头碱在1μmol·L的SCR发生率降低至9.0±1.4%。0.3μmol·L乌头碱能增加心肌收缩力及钙瞬变幅度和速率;加快舒张期的钙消除速率;增强SERCA蛋白活性并增加肌浆网内的钙容量,造成肌浆网钙泄漏水平增加;显著增加钙瞬变过程中钙从肌浆网释放占肌浆网内钙容量的比例。乌头碱能够导致细胞胞浆内cAMP含量升高,分子生物学结果显示乌头碱能够使Ser16-PLB磷酸化水平增加,调节SERCA2a使其活性增强,使肌浆网摄取钙增多,造成肌浆网内钙超载,使RyR受体对钙敏感性增加,钙泄漏增多。【结论】乌头碱致心肌细胞急性自发性钙释放不仅由于调控NaC-rNCX导致胞浆内钙升高,肾上腺素能受体介导的cAMP通路激活造成的肌浆网内钙超载和钙泄漏参与了乌头碱的毒性机制。

关键词：乌头碱肌浆网内钙钙泄漏肌浆网钙泵环磷酸腺苷

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双龙方对大鼠心肌缺血／再灌注后无复流影响的研究

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中国药理学通报 2018年第4期34卷 583-588页

作者：李峰杰李贻奎何萍郝新梅李超华赵乐郝伟余丞浩张金艳中国中医科学院西苑医院基础医学研究所中药药理北京市重点实验室北京100091

目的探索双龙方对大鼠心肌缺血/再灌注后无复流的影响。方法将200只大鼠随机分为5组,每组40只:模型组、假手术组、双龙方5 g生药/kg组、双龙方2.5 g生药/kg组、双龙方1.25 g生药/kg组。各组大鼠在造模前连续灌胃5 d,模型组和假手术组灌... 详细信息

目的探索双龙方对大鼠心肌缺血/再灌注后无复流的影响。方法将200只大鼠随机分为5组,每组40只:模型组、假手术组、双龙方5 g生药/kg组、双龙方2.5 g生药/kg组、双龙方1.25 g生药/kg组。各组大鼠在造模前连续灌胃5 d,模型组和假手术组灌胃同体积蒸馏水。给药结束后,对大鼠冠状动脉左前降支进行结扎,假手术动物只穿线不结扎。结扎后4 h,实施再灌注。再灌注4 h后,采用小动物高分辨率超声影像系统对各组大鼠行超声心动图检查和心肌声学造影;超声检查结束后,于腹主动脉取血,分离血清,测定血清cTnT、CRP、CK、LDH水平;大鼠取血完毕后,取出心脏,切片,分别用硫磺素S和硝基四氮唑蓝(N-BT)染色评估心肌无复流面积和梗死面积。结果与模型组比较,双龙方组的心肌无复流面积和梗死面积均明显减小(P<0.01或P<0.05);心脏B超显示心功能指标明显改善,左心室前壁缺血区厚度明显增加,收缩末期左心室内径和容积明显降低,短轴缩短率、射血分数和每搏输出量明显提高(P<0.01或P<0.05);心肌声学造影显示心肌血液灌注明显改善,左心室前壁心肌组织的微血管密度、血流速和血液灌注量明显增加(P<0.01或P<0.05);心肌损伤相关的血液学指标未见明显改善,血清cTnT、CRP、CK、LDH水平未见明显变化。结论双龙方可以明显减小大鼠的心肌梗死面积和无复流面积,可明显对抗心肌缺血/再灌注后的无复流,改善受损心肌组织的血液灌注,改善心功能,抑制心肌损伤。

关键词：双龙方大鼠心肌缺血/再灌注心肌梗死无复流超声心动图检查心肌声学造影

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大蒜辣素的急性降压作用及其与硫化氢相关的作用机制

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中华中医药杂志 2020年第5期35卷 2618-2622页

作者：崔天薇余丞浩刘伟宇李贻奎张金艳王建农中国中医科学院西苑医院基础医学研究所北京100091

目的:研究大蒜辣素一次性给药对正常大鼠和自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用,探讨其与硫化氢(H2S)相关的作用机制。方法:采用颈动脉插管法和无创鼠尾测压法测量正常大鼠和SHR血压;采用离体微血管动力描记技术测定大鼠肠系膜上动脉的舒... 详细信息

目的:研究大蒜辣素一次性给药对正常大鼠和自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用,探讨其与硫化氢(H2S)相关的作用机制。方法:采用颈动脉插管法和无创鼠尾测压法测量正常大鼠和SHR血压;采用离体微血管动力描记技术测定大鼠肠系膜上动脉的舒缩反应;观察大蒜辣素对血压及动脉舒缩反应的影响,并应用H2S合成酶抑制剂(PAG)探讨其与H2S相关的机制。结果:对于正常大鼠和SHR,与对照组比较,大蒜辣素组14mg/kg和大蒜辣素14mg/kg+PAG32mg/kg组的收缩压和舒张压均显著降低(P<0.05,P<0.01);大蒜辣素14mg/kg+PAG32mg/kg组的收缩压显著高于相同剂量的大蒜辣素组(P<0.05)。在离体血管实验中,大蒜辣素能剂量依赖性地舒张完整内皮和去内皮的大鼠肠系膜上动脉,大蒜辣素对去内皮组血管的最大舒张显著低于完整内皮组(P<0.01);PAG干预后,大蒜辣素对完整内皮血管的最大舒张显著减弱(P<0.01),对去内皮血管的舒张作用基本消失。结论:大蒜辣素能显著降低正常大鼠和SHR的血压,其降压机制与其扩血管作用有关。大蒜辣素的扩血管作用具有内皮依赖性,并与诱导H2S生成有关;不依赖于血管内皮的那部分舒张主要与诱导H2S生成有关。

关键词：大蒜辣素降压硫化氢血管舒张机制血管内皮

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双龙方对离体大鼠冠状动脉舒缩功能的影响及机制

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中国药业 2019年第11期28卷 11-15页

作者：余丞浩王建农张金艳中国中医科学院西苑医院

目的探讨双龙方对大鼠离体冠状动脉舒缩功能的影响及其作用机制。方法应用离体微血管动力描记技术和离子通道特异性阻断方法,考察双龙方对大鼠冠状动脉环的直接舒张作用,及其对电压依赖型、受体依赖型钙通道功能的影响。结果双龙方低、... 详细信息

目的探讨双龙方对大鼠离体冠状动脉舒缩功能的影响及其作用机制。方法应用离体微血管动力描记技术和离子通道特异性阻断方法,考察双龙方对大鼠冠状动脉环的直接舒张作用,及其对电压依赖型、受体依赖型钙通道功能的影响。结果双龙方低、中、高质量浓度组(相当于每1 L含8,16,32 g生药)大鼠冠状动脉均显著舒张,其舒张率与空白对照组比较,均有显著差异(P<0.01)。与空白对照组比较,双龙方高质量浓度组(相当于每1 L含8 g生药)氯化钾最大收缩达5-羟色胺(5-HT)预收缩高度(Emax)显著降低(P<0.05),双龙方高、中、低质量浓度组(相当于每1 L含8,4,2 g生药)中5-HT的Emax均显著降低(P<0.01),双龙方高、中质量浓度组(相当于每1 L含8,4 g生药)中血栓素A2受体激动剂(U46619)的Emax均显著降低(P<0.01)。结论双龙方可显著扩张血管,其作用机制与抑制电压依赖型钙离子通道开放及5-HT、血栓素A2受体激活有关。

关键词：双龙方冠状动脉环血管扩张 5-羟色胺血栓素A2 钙离子通道大鼠

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