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miR-1187靶向调节Caspase-8在干预细胞凋亡中的研究

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miR-1187靶向调节Caspase-8在干预细胞凋亡中的研究

人脐带间充质干细胞对急性肝功能衰竭小鼠肝组织微小核糖核酸-155和肿瘤坏死因子表达的影响

中华医学会第四次全国感染性疾病中青年学术会议

作者：余东山安方梅谢青上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科

目的通过miR-1187靶向调节Caspase-8的表达,进而干预细胞凋亡的发生。方法应用BALB/C小鼠构建重型肝炎模型,取肝组织进行LNA-miRNA微阵列分析。体外培养embryonic murine hepatocytecell line 2(BNL-CL2)细胞,分别予以凋亡诱导、转染miR...

目的通过miR-1187靶向调节Caspase-8的表达,进而干预细胞凋亡的发生。方法应用BALB/C小鼠构建重型肝炎模型,取肝组织进行LNA-miRNA微阵列分析。体外培养embryonic murine hepatocytecell line 2(BNL-CL2)细胞,分别予以凋亡诱导、转染miR-1187 mimic后再予以凋亡诱导、转染miR-1187 inhibitor后再予以凋亡诱导,各组标本均抽提总RNA及总蛋白质,应用RT-PCR、westernblot等方法检测miR-1 187、caspase-8 mRNA及caspase-8蛋白质的表达,并采用流式细胞技术测定

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中华传染病杂志 2014年第1期32卷 2-6页

作者：龚邦东安方梅景波余东山李婧房星星张晓宇程昉冯润谢青汤建平同济大学附属同济医院风湿免疫科上海200065 上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科同济大学干细胞中心

目的探讨间充质干细胞（MSC）对急性肝功能衰竭（ALF）小鼠肝组织中miRNA-155和TNF表达的影响，以及与MSC疗效间的关系。方法采用随机数字表法和随机数余数分组法将BALB／c清洁级小鼠96只分为4组，即健康对照组、急性肝功能衰竭组、MSC... 详细信息

目的探讨间充质干细胞（MSC）对急性肝功能衰竭（ALF）小鼠肝组织中miRNA-155和TNF表达的影响，以及与MSC疗效间的关系。方法采用随机数字表法和随机数余数分组法将BALB／c清洁级小鼠96只分为4组，即健康对照组、急性肝功能衰竭组、MSC治疗组和MSC预防组各24只。ALF组予以D—GaIN900mg／kg＋脂多糖10μg／kg腹腔注射建立模型；MSC治疗组在900mg／kg D—GalN＋10μg／kg脂多糖腹腔注射后2h，予以尾静脉注射MSC1×10^6；MSC预防组在900mg／kgDGalN＋10ug／kg脂多糖腹腔注射前予以尾静脉注射MSCl×10^6；健康对照组予以0．9％氯化钠溶液1mL腹腔注射。给药7h后每组处死小鼠12只，检测小鼠血清肝功能，ELISA法检测TNF水平，实时定量PCR检测肝组织miRNA-155、TNFmRNA。余下每组12只小鼠观察24h生存率。组间均数比较用单因素方差分析，相关性分析采用Pearson和Spearman相关分析。结果胁GalN／脂多糖诱导7h后，MSC预防和MSC治疗组小鼠ALT水平均较ALF组降低，差异均有统计学意义（q值分别为13．20和4．58，均P〈0．01）；MSC预防组和MSC治疗组AST水平均较ALF组降低，差异均有统计学意义（q值分别为18．90和9．83，均P〈0．01）。与ALF组相比，MSC预防组和MSC治疗组血清TNF水平均有所降低，差异均有统计学意义（q值分别为14．70和3．95，均P〈0．01）。健康对照组、ALF组、MSC治疗组和MSC预防组小鼠肝组织TNFmRNA表达水平分别为1．0±0．3、19．2±2．2、6．6±1．7和4．3±0．9，组间比较差异有统计学意义（F=72．24，P〈0．01）。与ALF组相比，MSC预防组和MSC治疗组小鼠肝组织TNFmRNA表达水平均有下调，差异均有统计学意义（q值分别为31．40和21．72，均P〈0．01）。与ALF组相比，MSC预防组和MSC治疗组小鼠肝组织miRNA-155水平均有下调，差异均有统计学意义（q值分别为19．40和9．58，均P〈0．01）。ALF组小鼠肝组织miRNA155上调和TNFmRNA诱导呈正相关（r=0．734，P=0．007）。MSC预防组和MSC治疗组miRNA-155和TNFmRNA的部分逆转亦呈正相关（r值分别为0．687和0．590，P值分别为0．014和0．044）。给药后24h，健康对照组、ALF组、MSC治疗组和MSC预防组各死亡0／12、10／12、6／12和3／12只，组间比较差异有统计学意义（χ2=19．078，P〈O．01）。结论在MSC干预小鼠AI。F发病过程中，可以部分逆转上调的肝组织miRNA155和TNF，且存在协同性，提示MSC治疗ALF可能通过对肝组织miRNA-155和TNF的调控发生作用。

关键词：造血干细胞微小核糖核酸肝衰竭,急性肿瘤坏死因子类小鼠,近交BALB c

白介素-7对小鼠肝纤维化模型肝组织病理的影响

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世界华人消化杂志 2014年第21期22卷 3077-3082页

作者：刘佩佩刘翠芸付文娟余东山陈明发罗杰姚雪兵席文娜高珍孙水林南昌大学第二附属医院感染性疾病科江西省南昌市330006

目的:观察白介素-7(interleukin-7,IL-7)对小鼠肝纤维化模型肝组织病理的影响.方法:用CCl4诱导形成小鼠肝纤维化模型.将♀Balb/c小鼠18只随机分成3组,每组6只,A组(生理盐水对照组);B组(纤维化模型组);C组(IL-7干预组).造模4 wk末处死小... 详细信息

目的:观察白介素-7(interleukin-7,IL-7)对小鼠肝纤维化模型肝组织病理的影响.方法:用CCl4诱导形成小鼠肝纤维化模型.将♀Balb/c小鼠18只随机分成3组,每组6只,A组(生理盐水对照组);B组(纤维化模型组);C组(IL-7干预组).造模4 wk末处死小鼠,取肝组织肉眼及组织病理形态学法(常规HE染色、网状纤维染色及Masson染色)观察肝组织标本,并采用Ishaki评分系统对小鼠肝组织炎症活动度及纤维化程度进行评分.结果:成功建立小鼠肝纤维化模型,表现为汇管区周围纤维化明显,有芒状纤维和纤维间隔形成,组织病理:HE染色、网状纤维染色及Masson染色显示均显示C组与B组相比,肝组织炎症及肝纤维化程度明显减轻,肝脏坏死性炎症分级Ishaki评分A组(0-3分)6只;B组(7-9分)1只,(10-14分)2只,(15-18分)3只;C组(4-6分)1只,(7-9分)3只,(10-14分)2只;3组炎症活动度得分有统计学差异(HC=14.14,P<0.01).肝纤维化分期Ishaki评分A组中0分5只,1分1只;B组4分2只,5分2只,6分2只;C组1分1只,2分1只,3分2只,4分2只;3组纤维化得分有统计学差异(HC=15.2,P<0.01).结论:IL-7能够阻断CCl4诱导的小鼠肝纤维化,减轻肝脏炎症反应.

关键词：白介素-7 四氯化碳肝纤维化

微小RNA在肿瘤坏死因子α介导的急性肝功能衰竭小鼠体内的表达谱及其作用

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中华传染病杂志 2010年第12期28卷 705-711页

作者：安方梅余东山龚邦东赵钢德王晖郭清俞红谢青上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科 200025

目的了解微小RNA（miRNA）在急性肝功能衰竭小鼠模型中的表达谱及对其发病机制的调控作用。方法将BALB／c小鼠85只分为4组，模型组40只用D-氨基半乳糖（D-GalN）联合脂多糖（LPS）腹腔注射建立肝功能衰竭模型，D-GalN单药组20只、LPS单... 详细信息

目的了解微小RNA（miRNA）在急性肝功能衰竭小鼠模型中的表达谱及对其发病机制的调控作用。方法将BALB／c小鼠85只分为4组，模型组40只用D-氨基半乳糖（D-GalN）联合脂多糖（LPS）腹腔注射建立肝功能衰竭模型，D-GalN单药组20只、LPS单药组20只和对照组5只分别予D-GalN、LPS和0．9％NaCl溶液腹腔注射。在给药后0、5和7h观察小鼠肝脏组织学变化，0、1、3、5、7和9h留取小鼠血清和肝脏组织标本。采用实时定量PCR方法检测小鼠血清及肝组织中炎性细胞因子（TNF-α和IL一6）表达水平；采用mIRNA微阵列（microarray）检测小鼠肝脏中miRNA的表达谱，实时定量PCR验证其表达。体外LPS诱导小鼠巨噬细胞Raw264．7活化，诱导不同时间点收集细胞检测细胞miRNA的表达情况。组间均数比较用单因素方差分析，相关性分析采用Pearson和Spearman相关分析。结果miRNA微阵列发现小鼠急性肝功能衰竭发病过程中miRNA的表达谱发生了明显变化，与对照组相比，模型组有97个miRNA表达变化显著（P〈0．01），其中21个miRNA在给药后5h和7h均表达上调，27个miRNA均表达下调，进一步PCR验证得到miR-146a和miR-155随给药时间延长表现为持续性上调，且miR-155表达与TNF—α和IL-6表达均具有良好的相关性。体外实验进一步发现miR-146a和miR-155在活化的巨噬细胞中表达上调。结论在小鼠急性肝功能衰竭发病过程中，伴随着miRNA表达谱的变化，炎性反应相关miR-146a和miR-155明显上调，可能在急性肝功能衰竭的免疫发病机制中发挥重要的调控作用。

关键词：寡核苷酸序列分析微RNAs 小鼠肝功能衰竭急性肿瘤坏死因子α

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三峡大学成功研制超薄晶硅电池 006

绳索取芯液动锤在新疆和静县铁铜多金属矿复杂地层钻探中的应用

湖北日报

作者：唐宜贵陈俊玲余东山

湖北日报讯（记者唐宜贵、通讯员陈俊玲、余东山）6月29日，三峡大学接到通知，该校材料与化工学院谭新玉教授课题组，与德国卡尔斯鲁厄理工学院严文生博士合作，成功设计和制备了基体厚度仅为16微米（1微米=0.001毫米）的超薄晶硅电...

湖北日报讯（记者唐宜贵、通讯员陈俊玲、余东山）6月29日，三峡大学接到通知，该校材料与化工学院谭新玉教授课题组，与德国卡尔斯鲁厄理工学院严文生博士合作，成功设计和制备了基体厚度仅为16微米（1微米=0.001毫米）的超薄晶硅电池。据介绍，这一国际领先的重大科研?

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西部探矿工程 2015年第8期27卷 56-59页

作者：余桂红赵尊亭余东山李晓丹河南地质矿产勘查开发局第三地质勘查院河南洛阳471000

新疆和静县铁铜多金属矿区岩石破碎强烈,绳索回转钻进经常出现内管岩芯堵塞,打捞频繁现象,造成钻探效率低下。采用绳索液动锤冲击回转钻进,不但提高了钻探效率,而且钻孔质量好,钻头寿命长,取得了良好的经济与社会效益。

关键词：岩石破碎绳索取芯液动锤冲击回转钻进

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培育“人才库” 打造“科技源” 009

湖北日报

作者：唐宜贵张乐克周燕琼余东山

为安琪集团、葛洲坝集团举办海外员工培训，助力地方企业国际化发展；与水电水利规划设计总院共建技术标准研究中心，培养国际技术标准领域人才，推动中国技术标准“走出去”；与南漳等地签订战略合作协议，助力地方经济社会发展……这...

为安琪集团、葛洲坝集团举办海外员工培训，助力地方企业国际化发展；与水电水利规划设计总院共建技术标准研究中心，培养国际技术标准领域人才，推动中国技术标准“走出去”；与南漳等地签订战略合作协议，助力地方经济社会发展……这是三峡大学近年来服务湖北经济社会发

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IL-7的多样化功能研究现状及进展

国际免疫学杂志 2012年第6期35卷 457-460页

作者：余东山席文娜孙水林南昌大学第二附属医院感染科 330006

白细胞介素-7（IL-7）是一种具有广泛免疫效应的淋巴因子。近来研究发现IL-7在免疫细胞增殖、成熟及活化过程中具有举足轻重的作用，并能促进干扰素、肿瘤坏死因子等促炎性细胞因子的分泌，在抗病毒免疫应答中发挥重要的作用。同时，IL-... 详细信息

白细胞介素-7（IL-7）是一种具有广泛免疫效应的淋巴因子。近来研究发现IL-7在免疫细胞增殖、成熟及活化过程中具有举足轻重的作用，并能促进干扰素、肿瘤坏死因子等促炎性细胞因子的分泌，在抗病毒免疫应答中发挥重要的作用。同时，IL-7在抗肿瘤免疫应答、调节自身免疫性疾病免疫应答、抗纤维化等研究领域亦有重要发现。IL-7已成为当前科研热点之一，其在治疗病毒感染性疾病、免疫和细胞因子疗法及抗纤维化治疗等方向或将有重要的研究价值和意义。

关键词： IL-7 免疫细胞免疫疗法抗纤维化

微小RNA-1187对半胱天冬氨酸蛋白酶-8介导的肝细胞凋亡调控的作用

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中华传染病杂志 2011年第7期39卷 385-389页

作者：余东山安方梅龚邦东赵钢德项晓刚林兰意俞红王晖谢青上海交通大学医学院附属瑞金医院感染科 200025

目的通过微小RNA-1187（miR-1187）靶向调节半胱天冬氨酸蛋白酶-8（caspase-8）mRNA的表达,观察miR-1187对肝细胞凋亡的调控作用.方法应用D-氨基半乳糖联合脂多糖构建BALB/c小鼠急性肝功能衰竭模型,取肝组织进行锁核酸（LNA）-miRNA... 详细信息

目的通过微小RNA-1187（miR-1187）靶向调节半胱天冬氨酸蛋白酶-8（caspase-8）mRNA的表达,观察miR-1187对肝细胞凋亡的调控作用.方法应用D-氨基半乳糖联合脂多糖构建BALB/c小鼠急性肝功能衰竭模型,取肝组织进行锁核酸（LNA）-miRNA微阵列分析和miRNA靶基因功能分析.体外培养胚胎小鼠肝细胞株2（BNL-CL2细胞）,予以TNFα联合D-氨基半乳糖分别诱导转染miR-1187模拟物组及未转染组,以正常生长细胞为对照,应用实时（RT）-PCR、Western印迹等方法检测各组细胞miR-1187、caspase-8 mRNA及caspase-8蛋白的表达,并采用流式细胞技术测定细胞凋亡率.组间均数比较采用t检验.结果 miR-1187的信号值随急性肝功能衰竭进展明显下降.miR-1187与caspase-8 mRNA的3＇非编码端（3＇UTR）有直接的结合位点关系;miR-1187在未转染组表现为显著下调,在转染组下调减缓（t=6.371,P〈0.01）;caspase-8 mRNA 在未转染组表达显著增高.在转染组上升明显减少（t=4.539,P〈0.01）;转染组细胞凋亡率明显低于未转染组（t=3.365,P〈0.05）.结论 miR-1187为肝细胞凋亡的抑制因子之一;高表达miR-1187通过靶向调节caspase-8 mRNA的表达,阻抑肝细胞凋亡的发生.

关键词：肝功能衰竭,急性细胞凋亡半胱天冬氨酸蛋白酶-8 微小RNA-1187