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铁基纳米酶增强H9N2禽流感病毒灭活疫苗的黏膜免疫效果评价

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农村科学实验 2024年第19期 163-165页

作者：何随彬刘海上海市浦东新区畜牧水产技术推广中心上海201299

H9N2禽流感病毒主要通过禽类的呼吸道和消化道向外排毒,对我国养禽业造成了极大的威胁。该研究探究了铁基纳米酶对接种H9N2灭活疫苗小鼠局部黏膜和全身系统性免疫应答水平的影响。该研究首先通过水热合成法合成壳聚糖修饰铁基纳米酶(CS-... 详细信息

H9N2禽流感病毒主要通过禽类的呼吸道和消化道向外排毒,对我国养禽业造成了极大的威胁。该研究探究了铁基纳米酶对接种H9N2灭活疫苗小鼠局部黏膜和全身系统性免疫应答水平的影响。该研究首先通过水热合成法合成壳聚糖修饰铁基纳米酶(CS-IONzyme)及铁基纳米酶(IONzyme),然后将CS-IONzyme和IONzyme与灭活H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 WIV)在室温下搅拌连接后,滴鼻免疫小鼠,第0 d和14 d免疫。首免后28 d,收集小鼠血清和鼻腔、气管、肺脏涮洗液,采用间接ELISA方法检测H9N2亚型禽流感病毒特异性抗体水平、HI试验检测HI抗体水平。结果显示,与单独H9N2 WIV组相比,“IONzyme+H9N2WIV”和“CS-IONzyme+H9N2 WIV”组小鼠的鼻腔、气管、肺脏涮洗液中H9N2禽流感病毒特异性IgA抗体水平显著上调,血清抗体水平(IgG、IgG1和IgG2a/c)及HI抗体水平显著上调。与其他组相比,“CSIONzyme+H9N2 WIV”组小鼠的抗体水平更高。这表明,IONzyme和CS-IONzyme可以作为鼻腔黏膜佐剂,配合H9N2禽流感病毒灭活疫苗,可以显著提高小鼠局部黏膜和全身系统性免疫应答水平,为H9N2禽流感病毒的防控提供指导。

关键词：铁基纳米酶 H9N2 禽流感病毒黏膜免疫

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鸡毒支原体醛缩酶的原核表达及膜定位鉴定

中国兽医科学 2013年第1期43卷 42-46页

作者：何随彬谭磊包世俊郭小琴仇旭升宋翠萍费荣梅丁铲南京农业大学动物医学院江苏南京210095 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

为了探明醛缩酶在支原体中的定位,根据已发表的鸡毒支原体醛缩酶(fba)基因序列设计特异性的引物,以鸡毒支原体Rlow株基因组为模板,通过Overlap PCR点突变扩增鸡毒支原体醛缩酶fba基因,将fba克隆至pET-28a(+)载体后进行序列测定和分析。... 详细信息

为了探明醛缩酶在支原体中的定位,根据已发表的鸡毒支原体醛缩酶(fba)基因序列设计特异性的引物,以鸡毒支原体Rlow株基因组为模板,通过Overlap PCR点突变扩增鸡毒支原体醛缩酶fba基因,将fba克隆至pET-28a(+)载体后进行序列测定和分析。结果表明,fba基因全长873bp,编码290个氨基酸。将构建的重组表达质粒pET28a-fba转化至大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功获得表达融合蛋白rMGfba,大小约为33ku。纯化蛋白并对蛋白进行酶活性检测,结果显示该酶在体外具有与阳性对照醛缩酶相同的催化功能。用该蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体,提取鸡毒支原体膜蛋白,Western-blot分析结果显示FBA多抗可与疏水性膜蛋白特异性结合,说明FBA位于鸡毒支原体膜表面。

关键词：鸡毒支原体醛缩酶原核表达酶活性膜定位

猪关节病重要病原体多重PCR检测方法的建立及应用

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畜牧与兽医 2016年第9期48卷 100-103页

作者：文德亮俞向前叶承荣何随彬陈亮朱建国浦坚华宋德义上海市浦东新区动物疫病预防控制中心上海201299 上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240 上海市浦东新区农业服务中心上海201299

为了同时检测引起猪关节病的猪链球菌2型(Streptococcus suis type2,SS2)、副猪嗜血杆菌(Haempohlius parasuis,HPS)和猪丹毒丝菌(Erysipelothrix rosenbach),分别设计针对SS2的cps2J基因、HPS和猪丹毒丝菌的16S rRNA基因的3对特异性引物,建立了同时检测以上3种病原的多重PCR方法,并对反应条件进行优化,测试多重PCR方法的特异性和灵敏度。对采自8个规模猪场的猪关节病病料进行检测,从72份猪关节液样品中检出2株猪链球菌2型、1株副猪嗜血杆菌和2株猪丹毒丝菌,结果显示与常规PCR检测结果一致,表明建立的多重PCR方法敏感、特异、快速,可用于猪关节病重要病原体的检测。

关键词：猪链球菌2型副猪嗜血杆菌猪丹毒丝菌多重PCR

一例宠物犬二尖瓣反流型心脏病病例的诊断与治疗

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上海畜牧兽医通讯 2023年第3期 63-66页

作者：华亚何随彬罗本宽何弘上海市浦东新区周浦镇经济发展服务中心上海201323 上海市浦东新区畜牧水产技术推广中心上海201299 上海市浦东新区川沙新镇瑞琪动物诊所上海201299

二尖瓣反流型心脏病是老年小型犬的一种常见病。文中介绍了1例京巴犬二尖瓣反流型心脏病病例的诊断和治疗情况,以供同行参考。

关键词：犬二尖瓣反流心脏病

2020—2023年上海地区犬钩端螺旋体血清流行病学调查与分析

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中国兽医杂志 2024年第1期 48-54页

作者：张玉杰何随彬徐锋庄源王晓旭沈莉萍向蒙杨显超王建上海市动物疫病预防控制中心上海市浦东新区畜牧水产技术推广中心上海市疾病预防控制中心

为了解上海地区犬钩端螺旋体的免疫和临床感染情况，同时明确犬携带钩端螺旋体的优势血清群，为上海地区犬钩端螺旋体病的防控提供重要的数据支撑。本试验采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对2020—2023年收集的3 920份犬血清样本（3 557... 详细信息

为了解上海地区犬钩端螺旋体的免疫和临床感染情况，同时明确犬携带钩端螺旋体的优势血清群，为上海地区犬钩端螺旋体病的防控提供重要的数据支撑。本试验采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对2020—2023年收集的3 920份犬血清样本（3 557份流浪犬血清样本、176份免疫家养犬血清样本和187份未免疫家养犬血清样本）进行血清学检测，采用显微凝集试验（MAT）对ELISA检测阳性的80份血清样本进行钩端螺旋体血清群检测，同时对血清阳性率和血清群数据进行统计分析。结果显示，流浪犬的钩端螺旋体血清阳性率为52.38%（95%CI：51.22%～53.54%），家养犬的钩端螺旋体血清阳性率为19.28%（95%CI：15.2%～23.4%）。血清分群结果显示，流浪犬血清样本所含血清群的占比为犬群>澳洲群>黄疸出血群>拜伦群>40%，未发现流感伤寒群；家养犬血清样本中15种血清群均有发现，其中未免疫家养犬血清样本所含血清群的占比为黄疸出血群>秋季群=回归热群>犬群>50%，免疫家养犬血清样本所含血清群的占比为拜伦群>波摩那群>致热群>50%（与疫苗有关的黄疸出血群和犬群不用于优势血清群的比较）；统计分析结果显示，未免疫家养犬的感染血清群数量存在地区差异（P<0.05），流浪犬和家养犬的血清阳性率和感染血清群类型（澳洲群、波摩那群、流感伤寒群和塔拉索夫群）存在显著差异（P<0.05），免疫家养犬和未免疫家养犬感染的血清群类型（拜伦群、致热群和秋季群）存在显著差异（P<0.05）。结果表明，上海地区不同犬种群的钩端螺旋体优势血清群不同，且流浪犬血清阳性率较高，应当注意防范流浪犬带来的潜在公共卫生安全。

关键词：犬钩端螺旋体血清群流浪犬家养犬

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一株动物源碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌基因组及耐药质粒水平扩散研究

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中国动物传染病学报 2023年

作者：王晓旭张玉杰沈莉萍徐锋齐新永刘健何随彬赵洪进上海市动物疫病预防控制中心上海市浦东新区畜牧水产技术推广中心

肺炎克雷伯菌(KP)可引起呼吸道、泌尿生殖系感染，创伤、败血症及腹泻，是一种重要的人畜共患病原体。本研究利用细菌基因组三代测序技术和生物信息学平台，对前期工作中分离出的奶牛场养殖环节来源肺炎克雷伯碳青霉烯耐药菌KP329进行... 详细信息

肺炎克雷伯菌(KP)可引起呼吸道、泌尿生殖系感染，创伤、败血症及腹泻，是一种重要的人畜共患病原体。本研究利用细菌基因组三代测序技术和生物信息学平台，对前期工作中分离出的奶牛场养殖环节来源肺炎克雷伯碳青霉烯耐药菌KP329进行了基因组分析及碳青霉烯耐药机制研究。结果显示，KP329染色体总长度为5337963bp，共编码5163个基因，GC含量为57.3%，含有23个耐药基因，MLST分型显示KP329为肺炎克雷伯菌ST101型。KP329携带3个质粒，大小分别为291962bp(KP329-1)105109bp(KP329-2)，以及4572bp(KP329-3)，其中，KP329-1为多重耐药质粒，含有10个耐药基因：aac(3)-IIa、qnrS1、LAP-2、sul1、qacEdelta1、sul2、dfrA1、tet(A)、aph(6)-Id 、 aph(3’’)-Ib，KP329-2只含有1个耐药基因(blaKPC-2)，而KP329-3不含有任何已知耐药基因。尽管KP329外膜蛋白OmpK35/OmpK36/ OmpK37发生了氨基酸突变，但对KP329碳青霉烯药物敏感性并无显著影响。细菌结合转移实验则表明，KP329-2质粒可在不同种属细菌发生水平转移，增加宿主菌对碳青霉烯及其他抗生素的抵抗性，具有较高的环境扩散风险。

关键词：肺炎克雷伯碳青霉烯耐药基因组分析

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全基因组关联分析研究现状及展望

上海畜牧兽医通讯 2017年第3期 12-15页

作者：何随彬瞿瑜萍俞向前曹杰叶承荣上海市浦东新区动物疫病预防控制中心上海201299 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

全基因组关联分析(Genome-Wide Association Study,GWAS)是近年来迅速兴起的一种新型基因组分析方法,它利用全基因组范围内筛选出高密度的分子标记对所研究的群体进行扫描,分析扫描得出的分子标记数据与表型性状之间关联关系的方法。GWA... 详细信息

全基因组关联分析(Genome-Wide Association Study,GWAS)是近年来迅速兴起的一种新型基因组分析方法,它利用全基因组范围内筛选出高密度的分子标记对所研究的群体进行扫描,分析扫描得出的分子标记数据与表型性状之间关联关系的方法。GWAS的出现为全面系统地研究基因组学打开了新的篇章,目前主要应用于人、动植物以及微生物主要疾病复杂性状的分析,已成为研究基因组学的关键手段。本文主要针对GWAS的概念、近年来GWAS在动物疾病模型和致病菌中的研究、存在问题及未来发展进行阐述。

关键词：全基因组关联分析(GWAS) 单核苷酸多态性(SNP) 畜禽细菌

2019—2021年上海市浦东新区犬狂犬病免疫情况分析

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中国兽医杂志 2022年第12期58卷 40-44页

作者：华亚何随彬朱苗红瞿瑜萍龚志亮上海市浦东新区周浦镇经济发展服务中心上海浦东201323 上海市浦东新区畜牧水产技术推广中心上海浦东201299 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

为掌握上海市浦东新区犬只狂犬病免疫情况,本试验对浦东新区2019—2021年犬只狂犬病免疫数量、血清学检测数据进行了统计和回顾性分析。结果显示,各街镇犬只狂犬病年均免疫数量差别较大,防疫人员数量与免疫量呈正相关;血清学检测结果显... 详细信息

为掌握上海市浦东新区犬只狂犬病免疫情况,本试验对浦东新区2019—2021年犬只狂犬病免疫数量、血清学检测数据进行了统计和回顾性分析。结果显示,各街镇犬只狂犬病年均免疫数量差别较大,防疫人员数量与免疫量呈正相关;血清学检测结果显示,近3年该区犬只狂犬病平均免疫合格率为89.23%(95%CI:87.42%~91.04%);各年度免疫抗体水平的时间分析和规模场、散养户、诊疗场所等不同场点的群间分析显示,犬只狂犬病免疫抗体合格率均高于87%,且差异不显著(P>0.05);空间分析显示,各镇免疫抗体合格率极显著高于各街道平均值(P<0.001)。本分析结果为浦东新区犬类狂犬病的免疫、监测和防控提供了科学依据。

关键词：犬狂犬病免疫抗体免疫情况

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中兽药治疗鸡毒支原体病研究进展

上海畜牧兽医通讯 2017年第3期 19-21页

作者：瞿瑜萍何随彬金耀忠孔广欢上海市浦东新区动物疫病预防控制中心上海201299 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

鸡毒支原体病也称鸡慢性呼吸道病（Chronic Respiratory Disease，CRD），是由鸡毒支原体（My-coplasma gallisepticum，MG）引起的一种接触性、传染性呼吸道疾病，临床上以咳嗽、流鼻涕、呼吸时发出哕音、窦部肿胀、呼吸困难或张口呼... 详细信息

鸡毒支原体病也称鸡慢性呼吸道病（Chronic Respiratory Disease，CRD），是由鸡毒支原体（My-coplasma gallisepticum，MG）引起的一种接触性、传染性呼吸道疾病，临床上以咳嗽、流鼻涕、呼吸时发出哕音、窦部肿胀、呼吸困难或张口呼吸等为特征。既可水平传播又可垂直传播，疾病发展缓慢，病程长，有的呈隐性感染，长期在鸡群中蔓延。

关键词：鸡毒支原体病传染性呼吸道疾病鸡慢性呼吸道病中兽药治疗呼吸困难垂直传播水平传播