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sPD-1和sPD-Ls在结缔组织病发病机制中的作用

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中南大学学报（医学版） 2023年第3期48卷 444-454页

作者：何豪华何晓宇周明骏汤迎凯代丽谢卓贝王元元谢长好蚌埠医学院第一附属医院风湿免疫科安徽蚌埠233099 蚌埠医学院临床医学系安徽蚌埠233030 蚌埠医学院人体解剖学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院组织学与胚胎学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院显微形态实验中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

膜结合型程序性死亡受体1(membrane-bound programmed cell death-1,mPD-1)及膜结合型程序性死亡受体配体(membrane-bound programmed cell death-ligands,mPD-Ls)存在可溶性形式,分别为可溶性程序性死亡受体1(soluble programmed cell death-1,sPD-1)和可溶性程序性死亡受体配体(soluble programmed cell death-ligands,sPD-Ls)[包括可溶性程序性死亡受体配体1(soluble programmed cell death-ligand 1,sPD-L1)和可溶性程序性死亡受体配体2(soluble programmed cell death-ligand 2,sPD-L2)]。sPD-1和sPD-L2主要由PD-1 mRNA的选择性剪接异构体翻译产生,而sPD-L1则是由基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)剪切膜结合型程序性死亡受体配体1(membrane-bound programmed cell death-ligand 1,mPD-L1)产生。sPD-1和sPD-Ls通过阻断mPD-1/mPD-L1通路在自身免疫调节中起重要作用,而结缔组织病(connective tissue disease,CTD)是由自身免疫反应等引起的一类疾病,并且多种自身免疫性疾病在发生、发展过程中均可出现mPD-1/mPD-L1的功能异常。故sPD-1和sPD-Ls通过阻断mPD-1/mPD-L1通路,在由自身免疫反应引起的CTD发病机制中起重要作用。了解sPD-1和sPD-Ls在CTD中的作用机制和临床价值对改善患者的生活质量具有重要的现实意义。

关键词：可溶性程序性死亡受体1 可溶性程序性死亡受体配体结缔组织病发病机制

系统性红斑狼疮患者外周血CD19^(+)CD25^(+)Breg比例和细胞表面PD-1和PD-L1的表达及其与临床指标的相关性

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第2期40卷 148-157页

作者：谢卓贝代丽何豪华洪登校王元元徐文艳陈中新李柏青谢长好蚌埠医科大学第一附属医院风湿免疫科安徽蚌埠23300 徐州医科大学第二附属医院老年科江苏徐州221000 蚌埠医科大学组织与胚胎学教研室安徽蚌埠233000 蚌埠医科大学第一附属医院检验科安徽蚌埠233000 慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室安徽蚌埠233000 炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室安徽蚌埠233000

目的研究程序性死亡蛋白1(PD-1)与其配体PD-L1在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD19^(+)CD25^(+)调节性B细胞(Breg)的表达及临床意义。方法收集50例SLE患者和41例健康人(HC)外周血标本,采用流式细胞仪检测外周血中CD19^(+)CD25^(+)Bre... 详细信息

目的研究程序性死亡蛋白1(PD-1)与其配体PD-L1在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD19^(+)CD25^(+)调节性B细胞(Breg)的表达及临床意义。方法收集50例SLE患者和41例健康人(HC)外周血标本,采用流式细胞仪检测外周血中CD19^(+)CD25^(+)Breg的比例,以及CD19^(+)CD25^(+)Breg的PD-1、PD-L1表达,同时采集患者的临床表现和实验室指标等临床信息。使用免疫磁珠分选CD4^(+)T细胞与CD19^(+)B细胞,体外细胞共培养,检测Breg的分化。结果SLE患者活动组外周血中CD19^(+)CD25^(+)Breg比例低于HC,CD25^(+)B细胞PD-1、PD-L1的表达高于HC;SLE患者有胸腔积液、关节炎、C反应蛋白(CRP)上升的患者Breg频率高于对应阴性组;SLE患者有IgM下降、抗核糖核蛋白(RNP)抗体阳性的患者Breg频率低于对应阴性组;SLE患者有感染、发热、关节炎、IgA上升的患者CD19^(+)CD25^(+)PD-1^(+)细胞频率高于对应阴性组;SLE患者有感染、发热、IgA上升的患者CD19^(+)CD25^(+)PD-L1^(+)细胞频率高于对应阴性组;活化的CD4^(+)T细胞有利于CD19^(+)B细胞表面CD25的表达。结论SLE患者外周血中CD19^(+)CD25^(+)Breg降低,但细胞表面PD-1与PD-L1的表达增加,并且与相关临床表现及实验室参数存在一定的关系。活化的CD4^(+)T细胞促进Breg的分化。

关键词：系统性红斑狼疮(SLE) CD19^(+)CD25^(+)调节性B细胞(Breg) 程序性死亡蛋白1(PD-1) 程序性死亡蛋白1配体1(PD-L1)

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合成染料化工废水的处理研究

中文科技期刊数据库（全文版）工程技术 2016年第12期 223-223页

作者：何豪华朱敬鑫浙江龙盛化工研究有限公司浙江绍兴312300

随着我国建筑纺织等行业的发展,合成染料的运用越来越广泛,这些染料化工废水会导致生态环境破坏。因此,本文针对合成染料进行了简单的介绍,然后分析了其废水处理的工艺流程,最后探讨了具体的处理措施,以供参考。

关键词：合成染料化工废水处理

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精细化工中固相有机合成技术的应用

石油石化物资采购 2020年第13期 40-40页

作者：王江峰何豪华牟平浙江龙盛化工研究有限公司

固相有机合成技术作为一种拥有绿色环保和可持续等优点的化学技术,在精细化工中得到了广泛的应用。但是由于精细化工对技术要求较高,目前固相有机合成技术在精细化工丝应用中还存在一定的局限性,如何通过技术优化与更新来改善这些问题... 详细信息

固相有机合成技术作为一种拥有绿色环保和可持续等优点的化学技术,在精细化工中得到了广泛的应用。但是由于精细化工对技术要求较高,目前固相有机合成技术在精细化工丝应用中还存在一定的局限性,如何通过技术优化与更新来改善这些问题对促进精细化工产业的发展具有重要的作用。

关键词：固相有机合成精细化工应用

绿色精细化工中超临界萃取分离技术的应用研究

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石油石化物资采购 2020年第19期 41-41页

作者：牟平王江峰何豪华浙江龙盛化工研究有限公司

随着科学技术日新月异和人们对可持续发展、绿色减排等环保意识不断增强,化工行业对于绿色发展技术提出了更高要求。近几年,精细化工行业一直在寻找替代传统分离方法的新型环保分离技术,而超临界萃取技术作为当代绿色环保的典型技术,是... 详细信息

随着科学技术日新月异和人们对可持续发展、绿色减排等环保意识不断增强,化工行业对于绿色发展技术提出了更高要求。近几年,精细化工行业一直在寻找替代传统分离方法的新型环保分离技术,而超临界萃取技术作为当代绿色环保的典型技术,是一种新型、清洁、高效的绿色分离方法、绿色工艺,具有制造工艺简单、溶剂安全性高并且容易回收、产品的提取率相对较高、生产提取过程对原有物质的化学成分不会造成损伤,并且加工提炼全程绿色无污染存在等诸多优势。本文首先对超临界萃取技术原理和性质进行了详细的说明,然后在此基础上介绍了其在绿色精细化工领域内的应用。

关键词：超临界萃取分离绿色精细化工

仿生催化氧化在有机精细化工中间体合成中的应用研究

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石油石化物资采购 2020年第14期 3-3页

作者：何豪华牟平王江峰浙江龙盛化工研究有限公司

从国内外有机精细化工中间体的技术研究和合成路线来看,通过新的催化体系实现绿色工艺、清洁生产是有机精细化工中间体合成技术的发展方向。尤其仿生催化氧化具有良好的开发和应用前景。而从环保要求看,工艺的绿色化是现有有机精细化工... 详细信息

从国内外有机精细化工中间体的技术研究和合成路线来看,通过新的催化体系实现绿色工艺、清洁生产是有机精细化工中间体合成技术的发展方向。尤其仿生催化氧化具有良好的开发和应用前景。而从环保要求看,工艺的绿色化是现有有机精细化工中间体合成的迫切要求。

关键词：仿生催化氧化有机精细化工中间体绿色合成

含铼CoNiCrAlY合金氧化层中的相转变

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稀有金属材料与工程 2006年第7期35卷 1071-1074页

作者：何豪杰杨志刚清华大学北京100084

对一种加3%～5%（质量分数）金属Re的CoNiCrAly合金在1000℃空气中进行了恒温氧化实验,利用X射线衍射、扫描电镜和能谱分析研究其氧化行为.结果表明：与不加Re的合金相比,加Re合金在初期氧化阶段增重较低;并且金属Re加速了亚稳过渡相θ-... 详细信息

对一种加3%～5%（质量分数）金属Re的CoNiCrAly合金在1000℃空气中进行了恒温氧化实验,利用X射线衍射、扫描电镜和能谱分析研究其氧化行为.结果表明：与不加Re的合金相比,加Re合金在初期氧化阶段增重较低;并且金属Re加速了亚稳过渡相θ-Al2O3向稳定相α-Al2O3的转变,有利于快速生成致密的α-Al2O3保护膜.

关键词： Re θ-Al2O3 α-Al2O3 CoNiCrAlYRe合金氧化

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《中国漆器全集》读后记

文物 2003年第4期 78-84页

作者：何豪亮四川美术学院

20世纪90年代出版的《中国漆器全集》(福建人民出版社),将我国近半个多世纪出土的数以万计的漆器和过去数百年间的传世漆器,进行了系统的归纳、研究,对我国漆文化的产生和发展提供了形象具体的资料。但作者认为,书中有一些问题还需研究... 详细信息

20世纪90年代出版的《中国漆器全集》(福建人民出版社),将我国近半个多世纪出土的数以万计的漆器和过去数百年间的传世漆器,进行了系统的归纳、研究,对我国漆文化的产生和发展提供了形象具体的资料。但作者认为,书中有一些问题还需研究探讨,并提出这些问题和错误主要是由于对漆器工艺制作不熟悉和对漆器原材料使用不了解而造成的。

关键词：《中国漆器全集》中国漆器底胎工艺漆艺金银材料斑文漆犀皮漆雕填款彩铭文工种汉代素工上工漆工画工

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KRAS蛋白突变体核酸适配体的筛选与鉴定

KRAS蛋白突变体核酸适配体的筛选与鉴定

作者：何豪苏州大学

学位级别：硕士

KRAS基因作为最常见的致癌基因之一,在多种人类恶性肿瘤中发生突变,已成为癌症进展中的标志事件。突变后的KRAS蛋白维持在与三磷酸鸟苷(GTP)结合的活化状态,持续激活下游信号通路,影响细胞的增殖和存活,在肿瘤代谢中发挥着关键作用。然... 详细信息

KRAS基因作为最常见的致癌基因之一,在多种人类恶性肿瘤中发生突变,已成为癌症进展中的标志事件。突变后的KRAS蛋白维持在与三磷酸鸟苷(GTP)结合的活化状态,持续激活下游信号通路,影响细胞的增殖和存活,在肿瘤代谢中发挥着关键作用。然而,目前靶向KRAS突变体的抑制剂由于耐药性及药物毒性等问题均止步于临床试验阶段。同时,现有的针对KRAS突变的检测方法大多存在灵敏度低、成本高等方面的局限性。指数富集的配体系统进化(SELEX)技术主要是从体外合成的随机单链核酸文库中筛选出与靶标具有高亲和力和特异性的适配体。随机文库包含数万亿以上的单链核酸分子,易折叠形成多种三维空间结构,作用靶标范围几乎涵盖了自然界中的所有分子。因此,本研究主要基于SELEX技术,以KRAS常见突变类型G12D蛋白为靶分子,建立相应的筛选体系,分离并鉴定该突变体蛋白的核酸适配体。主要研究内容和结果如下:(1)通过定点突变构建KRAS G12D突变质粒,运用蛋白表达纯化技术获得了纯度较高的KRAS野生型及突变体G12D蛋白,分别作为后续SELEX筛选过程中的反筛与正筛靶标。(2)设计并合成含有随机序列的DNA文库,利用不同种类的磁珠,实现蛋白的固定、核酸的洗脱、双链DNA的分离,从而建立完整的SELEX体系。结果显示,增大筛选压力后,洗脱的核酸文库均得到了有效扩增,回收纯化得到了高纯度的单链DNA,可作为下一轮筛选的文库,表明该靶向KRAS G12D蛋白突变体的SELEX流程可以成功运行。(3)SELEX结束后,对最后两次改变筛选压力的第17、21轮核酸文库进行克隆测序。序列比对分析发现存在保守基序框和4条重复序列,表明与靶蛋白结合的序列实现了一定的富集。将重复的序列命名为a1、a2、a3、a4,作为候选适配体。二级结构模拟显示4条适配体均带有多个茎环结构,推测这些结构可能是与靶蛋白KRAS G12D结合的重要部分。(4)通过FAM基团标记的引物,制备带有荧光信号的第17、21轮核酸文库与4条候选适配体,进行与靶蛋白KRAS G12D的亲和力检测。荧光显微镜成像结果显示,随着筛选的进行,核酸文库与靶蛋白KRAS G12D的相互作用增强,而与KRAS野生型蛋白无明显结合,表明存在一定的特异性。通过全波长酶标仪检测一系列浓度的适配体与靶蛋白孵育后的荧光强度,并作曲线拟合得到适配体的解离常数(Kd),其中适配体a3与靶蛋白亲和力最高,Kd值为53.9 nM。本研究筛选分离的核酸适配体为开发识别KRAS蛋白突变体的探针提供了新的思路,这将有助于KRAS突变相关癌症的早筛诊断和药物研发。

关键词： KRAS蛋白突变体 SELEX技术核酸适配体