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香蕉枯萎病菌生理小种鉴定及其SCAR标记

植物病理学报 2006年第1期36卷 28-34页

作者：刘景梅陈霞王璧生何自福彭埃天蔡曼珊广东省农业科学院植物保护研究所广州510640

通过室内人工接种蕉类鉴别寄主,对采集于广东蕉区的18个蕉类枯萎病菌菌株进行鉴定,KP021、KP022、GZ981和 JL021 4个菌株属Race 1,其余14个菌株属Race 4,说明广东蕉区同时存在尖孢镰刀菌古巴专化型Race 1和Race 4。用 RAPD技术对上述18... 详细信息

通过室内人工接种蕉类鉴别寄主,对采集于广东蕉区的18个蕉类枯萎病菌菌株进行鉴定,KP021、KP022、GZ981和 JL021 4个菌株属Race 1,其余14个菌株属Race 4,说明广东蕉区同时存在尖孢镰刀菌古巴专化型Race 1和Race 4。用 RAPD技术对上述18个菌株进行分析,从200条随机引物中筛选出8条引物可产生生理小种RAPD标记12个,其中标记 Race 1的8个,标记Race 4的4个。对这些RAPD标记带分别进行回收、克隆、测序,根据这些特异片段序列分别设计相应的SCAR引物,通过对18个菌株的PCR扩增检验,有4个RAPD标记成功地转化为SCAR标记,其中Race 1-SCAR标记1 个、Race 4-SCAR标记2个、同时能鉴定出2个小种的SCAR标记1个。应用这4个SCAR标记同时对采自田间的9个病菌分离物进行检测,能够准确地鉴定出广东蕉区的尖孢镰刀菌古巴专化型Race 1和Race 4,这为下一步开展香蕉枯萎病菌生理小种的分子鉴定及各生理小种田问流行动态监测奠定了基础。

关键词：香蕉枯萎病尖孢镰刀菌古巴专化型 RAPD标记 SCAR标记

侵染广东黄秋葵的木尔坦棉花曲叶病毒及伴随卫星DNA的分子特征

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华南农业大学学报 2012年第1期33卷 33-39页

作者：董迪朱艳华何自福柴兆祥佘小漫罗方芳广东省农业科学院植物保护研究所广东广州510640 甘肃农业大学草业学院甘肃兰州730070

从广东省表现黄脉曲叶的黄秋葵病株上分离到病毒分离物Okra06,PCR检测结果显示,该病毒属双生病毒科Geminiviridae菜豆金色花叶病毒属Begomovirus.基因克隆及序列分析结果表明,其基因组仅含A组分(DNA-A),全长为2 737 nt,推导编码6个开放... 详细信息

从广东省表现黄脉曲叶的黄秋葵病株上分离到病毒分离物Okra06,PCR检测结果显示,该病毒属双生病毒科Geminiviridae菜豆金色花叶病毒属Begomovirus.基因克隆及序列分析结果表明,其基因组仅含A组分(DNA-A),全长为2 737 nt,推导编码6个开放阅读框(Open reading frame,ORF).该组分与木尔坦棉花曲叶病毒(Cotton leafcurl Multan virus,CLCuMV)分离物G6的核苷酸序列相似性最高,为99.7%;二者编码的6个ORF相似性分别为100%、100%、99.6%、99.8%、100%和99.7%.该病毒还伴随有卫星分子β(DNAβ),全长为1 346 nt,推导其互补链上编码1个ORF(C1).该分子与伴随CLCuMV分离物G6 DNAβ的核苷酸序列相似性也最高(99.5%).DNAβ系统进化分析显示,Okra06 DNAβ与CLCuMV-[G6]DNAβ、CLCuMV-[Gx08]DNAβ亲缘关系最近,三者形成一个独立分支;进一步与其他CLCuMV DNAβ和CLCuV DNAβ聚类在一起.这些结果证明,侵染广东黄秋葵的病毒分离物Okra06属于CLCuMV,且该分离物与引起广东朱槿曲叶病的CLCuMV-G6应同属木尔坦棉花曲叶病毒朱槿株系.

关键词：黄秋葵黄脉曲叶病木尔坦棉花曲叶病毒 DNA—A 卫星DNA β

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入侵我国的木尔坦棉花曲叶病毒及其危害

入侵我国的木尔坦棉花曲叶病毒及其危害

第三届全国生物入侵大会

作者：何自福董迪佘小漫罗方芳广东省农业科学院植物保护研究所

2006年以来,本研究团队先后在国内发现了朱槿曲叶病和黄秋葵黄脉曲叶病。朱槿(又称扶桑、大红花等)和黄秋葵(又称秋葵、羊角豆等)均属锦葵科,前者广泛种植于广东、广西和海南等华南地区,是重要的园林植物;后者是近年来中国大陆从我国台... 详细信息

2006年以来,本研究团队先后在国内发现了朱槿曲叶病和黄秋葵黄脉曲叶病。朱槿(又称扶桑、大红花等)和黄秋葵(又称秋葵、羊角豆等)均属锦葵科,前者广泛种植于广东、广西和海南等华南地区,是重要的园林植物;后者是近年来中国大陆从我国台湾及日本引进种植的一种蔬菜作物。由于这2种病害症状与国外报道的棉花曲叶病毒病症状十分类似,为了弄清其病原,进

关键词：木尔坦棉花曲叶病毒朱槿曲叶病黄秋葵黄脉曲叶病

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鲤肠黄脉病样中烟粉虱传双生病毒的检测

鲤肠黄脉病样中烟粉虱传双生病毒的检测

中国植物病理学第七届青年学术讨论会

作者：何自福虞皓毛明杰佘小漫广东省农业科学院植物保护研究所广东省植物保护新技术重点实验室广东省农业科学院植物保护研究所广东省植物保护新技术重点实验室广东省农业科学院植物保护研究所广东省植物保护新技术重点实验室广东省农业科学院植物保护研究所广东省植物保护新技术重点实验室

在严重发生番茄曲叶病的田间,发现主要杂草鲤肠表现出叶脉褪绿黄化、叶片皱缩或卷曲等症状,田间病株率达63%;用烟粉虱传双生病毒兼并引物对随机采集的20个鲤肠病样进行PCR检测,结果发现,从这些病样中均能扩增出1条356 bp的特异片段;室... 详细信息

在严重发生番茄曲叶病的田间,发现主要杂草鲤肠表现出叶脉褪绿黄化、叶片皱缩或卷曲等症状,田间病株率达63%;用烟粉虱传双生病毒兼并引物对随机采集的20个鲤肠病样进行PCR检测,结果发现,从这些病样中均能扩增出1条356 bp的特异片段;室内人工接种试验结果显示,鲤肠分离物可以侵染番茄而引起曲叶症状。因此,鲤肠可能是广东番茄曲叶病毒的自然中间寄主。

关键词：鲤肠黄脉病烟粉虱传双生病毒 PCR检测

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广东茄科雷尔氏菌菌株生化变种的测定

广东茄科雷尔氏菌菌株生化变种的测定

中国植物病理学会2008年学术年会

作者：佘小漫何自福李华平虞皓广东省农业科学院植物保护研究所华南农业大学资源环境学院

本文测定了分离自广东各地番茄、茄子、烟草、辣椒、空心菜、沙姜、生姜、马铃薯、花生、菊花、桑树和藿香等12种作物21个茄科雷尔氏菌菌株对3种二糖(乳糖、麦芽糖、纤维二糖)和3种己醇(甘露醇、山梨醇、甜醇)利用情况,进而明确这些菌... 详细信息

本文测定了分离自广东各地番茄、茄子、烟草、辣椒、空心菜、沙姜、生姜、马铃薯、花生、菊花、桑树和藿香等12种作物21个茄科雷尔氏菌菌株对3种二糖(乳糖、麦芽糖、纤维二糖)和3种己醇(甘露醇、山梨醇、甜醇)利用情况,进而明确这些菌株的生化变种归属。结果表明:马铃薯菌株 HZ-1属生化变种Ⅱ,番茄菌株 ZCZ-2、茄子菌株 LZ-3、辣椒菌株 GY-1和GY-2、马铃薯菌株 HZ-2、烟草菌株 NX-1和 NX-5、花生菌株 RR-1、沙姜菌株 YC-33、桑树菌株 MA 和藿香菌株 PC 等11个菌株均属生化变种Ⅲ,番茄菌株 SSF-4、茄子菌株 DG-2、花生菌株 RR-2、空心菜菌株 PY-10和 GY0501、沙姜菌株 YC-5、生姜菌株 CW-1和 CW-10及菊花菌株 FC-1等9个菌株均属生化变种Ⅳ。因此,生化变种Ⅲ和Ⅳ是广东茄科雷尔氏菌的优势生化变种。

关键词：茄科雷尔氏菌生化变种

黄瓜资源对黄瓜绿斑驳病毒广东分离物的抗性水平鉴定

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生物安全学报 2016年第3期25卷 209-213页

作者：汤亚飞何自福佘小漫林毓娥蓝国兵广东省农业科学院植物保护研究所广东广州510640 广东省植物保护新技术重点实验室广东广州510640 广东省农业科学院蔬菜研究所广东广州510640

【背景】黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是严重威胁葫芦科作物生产的毁灭性病原之一,该病毒已入侵我国十多个省份,危害西瓜、黄瓜等作物并造成严重的经济损失。早在2009年广东即发现CGMMV为害西瓜和黄瓜... 详细信息

【背景】黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是严重威胁葫芦科作物生产的毁灭性病原之一,该病毒已入侵我国十多个省份,危害西瓜、黄瓜等作物并造成严重的经济损失。早在2009年广东即发现CGMMV为害西瓜和黄瓜,但黄瓜等葫芦科作物对其抗性情况尚不清楚。【方法】采用人工机械摩擦接种方法,测定了14份黄瓜种质资源对CGMMV广东分离物的抗性水平。【结果】从广东葫芦病样中分离获得CGMMV,该病毒分离物MP基因序列与国内报道的各分离物同源率均在99%以上;14份黄瓜种质资源对该病毒分离物均表现为感病。【结论与意义】广东主要黄瓜资源对CGMMV均表现为感病,这为我省防控该病毒病提供了科学依据,也为黄瓜抗病育种提供了指导。

关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒黄瓜种质资源抗性水平

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广东马铃薯黑胫病的病原鉴定

植物病理学报 2015年第5期45卷 449-454页

作者：佘小漫蓝国兵何自福汤亚飞杜振国罗方芳广东省农业科学院植物保护研究所广州510640 广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

通过对分离自马铃薯黑胫病的病原菌在选择性CVP培养基上菌落形态观察、致病性测定及16S r DNA序列比较,鉴定出引起广东省冬种马铃薯黑胫病的病原为γ-变形菌门肠杆菌科果胶杆菌属黑腐果胶杆菌(Pectobacterium atrosepticum)。生理生化... 详细信息

通过对分离自马铃薯黑胫病的病原菌在选择性CVP培养基上菌落形态观察、致病性测定及16S r DNA序列比较,鉴定出引起广东省冬种马铃薯黑胫病的病原为γ-变形菌门肠杆菌科果胶杆菌属黑腐果胶杆菌(Pectobacterium atrosepticum)。生理生化试验表明,该病原菌菌株不能在37℃生长,能使明胶液化,具有运动性、耐盐性(5%Na Cl),对红霉素不敏感;过氧化氢酶和蔗糖还原试验反应均为阳性,氧化酶、吲哚产生和磷酸酶活性试验均为阴性;可利用乳糖、麦芽糖、棉籽糖、蜜二糖、纤维二糖、柠檬酸盐和α-甲基酮葡萄糖苷,不能利用山梨醇、d-阿拉伯糖和丙二酸盐。研究结果可为广东冬种马铃薯黑胫病的综合防治提供科学依据。

关键词：马铃薯黑胫病黑腐果胶杆菌病原鉴定生理生化特征

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广东番茄上烟粉虱传双生病毒的PCR检测

广东番茄上烟粉虱传双生病毒的PCR检测

中国植物病理学会第六届青年学术研讨会

作者：何自福虞皓罗方芳广东省农业科学院植物保护研究所

根据已报道的烟粉虱传双生病毒DNA序列保守区,设计了用于扩增该保守区片段的简并引物,用该引物对广东番茄上似双生病毒病样本进行PCR检测,可以扩增出预期大小的356bp特异片段;利用NCBI中的BLAST程序对该特异片段序列进行比较分析,结果表... 详细信息

根据已报道的烟粉虱传双生病毒DNA序列保守区,设计了用于扩增该保守区片段的简并引物,用该引物对广东番茄上似双生病毒病样本进行PCR检测,可以扩增出预期大小的356bp特异片段;利用NCBI中的BLAST程序对该特异片段序列进行比较分析,结果表明,该特异片段是双生病毒DNA片段。因此,可以用该引物来检测广东番茄上烟粉虱传双生病毒。试验结果还显示,广东番茄上烟粉虱传双生病毒该特异片段与已报道的双生病毒及广西番茄上双生病毒间的同源率均小于82%,说明广东番茄上烟粉虱传双生病毒与它们可能存在较大的差异。

关键词：烟粉虱传双生病毒 PCR检测序列分析

广东省番茄黄化曲叶病毒的分子鉴定及序列分析

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植物保护 2019年第4期45卷 143-148页

作者：汤亚飞佘小漫李正刚于琳蓝国兵邓铭光何自福广东省农业科学院植物保护研究所广州510640 广东省植物保护新技术重点实验室广州510640

番茄黄化曲叶病毒病是世界番茄生产上一种毁灭性病害,番茄黄化曲叶病毒Tomato yellow leaf curl virus(TYLCV)是引起该病害的主要病原病毒之一。本文采用滚环扩增及基因克隆方法,获得了侵染广东佛山和肇庆番茄的TYLCV 4个分离物全基因组... 详细信息

番茄黄化曲叶病毒病是世界番茄生产上一种毁灭性病害,番茄黄化曲叶病毒Tomato yellow leaf curl virus(TYLCV)是引起该病害的主要病原病毒之一。本文采用滚环扩增及基因克隆方法,获得了侵染广东佛山和肇庆番茄的TYLCV 4个分离物全基因组;它们均为2 781 nt,编码6个ORF,其中病毒链上编码AV1和AV2,互补链上编码AC1、AC2、AC3和AC4。同源性比较结果表明,4个广东分离物基因组序列两两间同源性为99%以上;与已报道的TYLCV各分离物同源性在90%以上,而与来自中国不同地区的TYLCV分离物的同源率均在98%以上。系统进化分析显示,广东分离物与来自中国不同地区的TYLCV分离物亲缘关系较近,并聚类在一个分支。因此,侵染引起广东佛山和肇庆番茄黄化曲叶病的病毒应来自国内其他地区。本研究是对TYLCV广东分离物分子特征的首次报道。

关键词：番茄黄化曲叶病毒分子鉴定序列分析