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培养条件对小鼠髓源性树突状细胞生物特性影响的观察

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中华肿瘤防治杂志 2013年第18期20卷 1391-1394页

作者：何秋山张燕何敬波龚志敏易铁男湖北文理学院医学院附属医院肿瘤中心湖北襄阳441000

目的:明确GM-CSF浓度、IL-4及细胞起始培养密度对培养的小鼠髓源性DC生物特性的影响。方法:分离小鼠骨髓细胞,用100、20和2ng/mL GM-CSF联合或不联合IL-4以及起始细胞培养密度为2.5×105和7.5×105 mL-1进行体外诱导DC细胞培养,培养7d... 详细信息

目的:明确GM-CSF浓度、IL-4及细胞起始培养密度对培养的小鼠髓源性DC生物特性的影响。方法:分离小鼠骨髓细胞,用100、20和2ng/mL GM-CSF联合或不联合IL-4以及起始细胞培养密度为2.5×105和7.5×105 mL-1进行体外诱导DC细胞培养,培养7d后收集细胞进行计数,同时用流式细胞仪检测CD11c+及CD11c+CD80+细胞的比例,并对GM-CSF联合或不联合IL-4培养的DC细胞吞噬肿瘤细胞的能力进行检测。此外以混合淋巴细胞反应(MLR)检测培养的DC细胞对淋巴细胞的剌激能力。结果:2ng/mL GM-CSF扩增的DC细胞为起始培养细胞浓度的0.21±0.05倍,与100ng/mL的0.52±0.10倍(t=10.311,P<0.001)及20ng/mL的0.46±0.04倍(t=6.934,P<0.001)差异均有统计学意义,但100ng/mL与20ng/mL组之间差异无统计学意义,t=1.333,P=0.152。此外,100ng/mL GM-CSF组CD11c细胞的比例低于低2ng/mL组,t=2.571,P=0.034;但100ng/mL与20ng/mL组差异无统计学意义,t=0.913,P=0.39。在20ng/mL GM-CSF时,IL-4的加入与否对培养的DC细胞扩增、纯度、成熟、吞噬及活化淋巴细胞的能力均无影响,起始培养细胞密度可影响细胞的扩增。结论:小鼠髓源DC细胞的培养中,GM-CSF浓度对细胞的扩增及成熟均很重要,高浓度GM-CSF有利于DC的扩增及成熟,而在GM-CSF为20ng/mL时,IL-4对DC细胞的培养并不是必需的。

关键词：树突状细胞骨髓细胞因子动物实验

可溶性肿瘤坏死因子受体II-脂联素球部融合蛋白的真核表达及生物学活性检测

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生物工程学报 2010年第2期26卷 207-215页

作者：陈素云何秋山董小岩吴小兵高基民温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室温州325035 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室北京100052 南方医科大学生物技术学院广州510515 北京五加和分子医学研究有限公司北京100176

本研究设计和构建了一种人肿瘤坏死因子受体II胞外区与人脂联素球部的融合基因sTNFRII-gAD,且相应的融合蛋白在哺乳动物细胞BHK-21S的无血清培养体系中实现了表达,并对该融合蛋白进行了初步鉴定。首先,用RT-PCR方法从人的外周血淋巴细胞... 详细信息

本研究设计和构建了一种人肿瘤坏死因子受体II胞外区与人脂联素球部的融合基因sTNFRII-gAD,且相应的融合蛋白在哺乳动物细胞BHK-21S的无血清培养体系中实现了表达,并对该融合蛋白进行了初步鉴定。首先,用RT-PCR方法从人的外周血淋巴细胞总RNA中扩增人肿瘤坏死因子II型受体胞外区基因片段,与脂联素球部基因片段融合,克隆至pAAV2neo表达载体中,构建成pAAV2neo-sTNFRII-gAD。随后,用pAAV2neo-sTNFRII-gAD转染BHK-21S细胞获得G418抗性细胞BHK-21S/pAAV2neo-sTNFRII-gAD;然后,将原来含有血清的培养液换成无血清的化学成分限定的培养液,细胞从贴壁培养方式转换成悬浮培养方式;最后,收集BHK-21S/pAAV2neo-sTNFRII-gAD无血清悬浮培养24h后的培养上清,进行sTNFRII-gAD融合蛋白的鉴定分析。酶切鉴定和测序结果显示,所构建的pAAV2neo-sTNFRII-gAD质粒结构正确,sTNFRII-gAD序列与预期一致;分别用抗人肿瘤坏死因子受体II和抗人脂联素球部的单克隆抗体检测pAAV2neo-sTNFRII-gAD瞬时转染的BHK-21S细胞,免疫荧光呈现阳性;免疫印迹分析在pAAV2neo-sTNFRII-gAD稳定转染的BHK-21S细胞上清中检测到sTNFRII-gAD融合蛋白的表达,并以单体、三聚体和三聚体以上的多聚体形式存在。活性测定结果表明,sTNFRII-gAD融合蛋白具有显著抑制TNFα杀伤L929细胞的活性。因此,本研究为下一步大量制备sTNFRII-gAD融合蛋白用于体内外功能研究提供了良好基础。

关键词：肿瘤坏死因子α拮抗剂可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ 脂联素融合蛋白真核表达

地塞米松预处理导管对预防PICC送管困难的作用

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实用医学杂志 2015年第13期31卷 2220-2221页

作者：谷小燕徐海英何秋山姚丽湖北省襄阳市中心医院湖北文理学院附属医院肿瘤治疗中心441021

目的:观察地塞米松溶液预处理导管预防中心静脉导管(PICC)送管困难的效果。方法:将入选的562例患者按随机数字表法分成观察组和对照组各281例,观察组采用0.25 mg/m L地塞米松溶液预处理导管,对照组采用0.9%氯化钠注射液预处理导管,两组... 详细信息

目的:观察地塞米松溶液预处理导管预防中心静脉导管(PICC)送管困难的效果。方法:将入选的562例患者按随机数字表法分成观察组和对照组各281例,观察组采用0.25 mg/m L地塞米松溶液预处理导管,对照组采用0.9%氯化钠注射液预处理导管,两组导管浸泡时间均≥3 min,且均按标准操作置入PICC。比较两组送管困难发生率及平均送管完成时间。结果:观察组送管困难发生率为2.14%,对照组为8.19%,观察组平均送管时间为(31.451±4.606)s,对照组为(90.472±10.353)s,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 :地塞米松预处理导管能有效预防PICC送管困难。

关键词：地塞米松 PICC 血管痉挛送管困难

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脐血体外红系定向扩增和分化的研究进展

国外医学（输血及血液学分册） 2002年第5期25卷 429-432页

作者：何秋山广州医学院 510182

通过选择合适的培养条件,诱导脐血干/祖细胞定向扩增和分化,产生大量所需的功能细胞,以满足基础研究和临床应用,这已成为目前脐血体外培养研究的新热点。本文就脐血体外红系定向扩增和分化的研究作一综述。

关键词：体外培养细胞分化造血干/祖细胞脐血红系定向扩增研究进展

胃肠道恶性肿瘤患者营养状况评价及影响因素分析

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东南大学学报（医学版） 2016年第2期35卷 208-211页

作者：陈满宇吕龙何秋山襄阳市中心医院湖北文理学院附属医院湖北襄阳441021

目的:探讨胃肠道恶性肿瘤患者的营养状况,并分析胃肠道恶性肿瘤患者营养不良的影响因素,为患者营养支持治疗提供依据。方法:选择200例胃肠道恶性肿瘤患者作为研究对象,应用简易营养评估法(mini nutritional assessment,MNA)对患者的营... 详细信息

目的:探讨胃肠道恶性肿瘤患者的营养状况,并分析胃肠道恶性肿瘤患者营养不良的影响因素,为患者营养支持治疗提供依据。方法:选择200例胃肠道恶性肿瘤患者作为研究对象,应用简易营养评估法(mini nutritional assessment,MNA)对患者的营养状况进行综合评价,采用多因素Logistic回归分析筛选可能影响胃肠道恶性肿瘤患者营养状况的相关因素。结果:200例胃肠道恶性肿瘤患者的MNA均分为(20.10±3.59)分;其中营养状况正常(MNA≥24)者46例(23.0%),潜在营养不良(17≤MNA≤23.5)者99例(49.5%),营养不良(MNA<17)者55例(27.5%)。多因素Logistic回归分析结果显示:年龄(OR=2.213)、罹患感染性疾病(OR=2.905)、总蛋白缺乏(OR=8.907)、低蛋白血症(OR=7.152)、未服用营养粉/蛋白粉(OR=0.443)是胃肠道恶性肿瘤患者营养不良发生的独立危险因素。结论:胃肠道恶性肿瘤患者营养不良的现患率较高,针对胃肠道恶性肿瘤患者营养不良的相关影响因素制定有针对性的临床干预措施可以有效地降低患者营养不良的发生。

关键词：胃肠道恶性肿瘤营养状况评价影响因素

美罗华一线治疗非霍奇金氏淋巴瘤复发后行自体造血干细胞移植(附1例报告)

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现代肿瘤医学 2007年第3期15卷 420-421页

作者：何秋山易铁男华中科技大学同济医学院附属襄樊医院肿瘤化疗科湖北襄樊441000

美罗华联合CHOP方案(R-CHOP)化疗不仅可以提高疗效,减少复发,而且提高总的生存率,从而使其成为一线治疗侵袭性NHL的新标准.但对于R-CHOP方案一线治疗失败或复发病例的解救治疗尚不清楚,现将我科新近确诊一例弥漫性大B细胞非霍金氏淋巴瘤... 详细信息

美罗华联合CHOP方案(R-CHOP)化疗不仅可以提高疗效,减少复发,而且提高总的生存率,从而使其成为一线治疗侵袭性NHL的新标准.但对于R-CHOP方案一线治疗失败或复发病例的解救治疗尚不清楚,现将我科新近确诊一例弥漫性大B细胞非霍金氏淋巴瘤,以R-CHOP方案一线治疗完全缓解后出现短期内复发并脑转移,行自体造血干细胞移植挽救治疗的临床资料及治疗体会报告如下.

关键词：美罗华非霍奇金氏淋巴瘤自体造血干细胞移植

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肿瘤淋巴管增生与淋巴结转移的研究进展

国外医学（肿瘤学分册） 2005年第10期32卷 742-745页

作者：何秋山易铁男毛平华中科技大学同济医学院附属襄樊医院肿瘤化疗科襄樊441000

淋巴结转移是肿瘤转移的重要途径,也是判断预后的重要依据。随着淋巴管生成因子及许多淋巴管特异性标记物的发现,肿瘤新生淋巴管调控与淋巴道转移机制研究得以深入开展。临床病理学标本及动物实验模型研究也显示,肿瘤源性VEGF-C 和VEGF... 详细信息

淋巴结转移是肿瘤转移的重要途径,也是判断预后的重要依据。随着淋巴管生成因子及许多淋巴管特异性标记物的发现,肿瘤新生淋巴管调控与淋巴道转移机制研究得以深入开展。临床病理学标本及动物实验模型研究也显示,肿瘤源性VEGF-C 和VEGF-D 可诱导肿瘤内淋巴管生成,进而促进淋巴结转移。现综述肿瘤淋巴管增生与淋巴结转移的相关研究进展。

关键词：淋巴转移肿瘤转移内皮生长因子

脐血单个核细胞体外红系定向扩增和分化的研究

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临床血液学杂志 2004年第5期17卷 280-282页

作者：何秋山毛平莫文健襄樊市中心医院肿瘤二科湖北襄樊441000 广州医学院附属广州市第一人民医院血液肿瘤科

目的 :探讨利用脐血单个核细胞 (MNCs)体外定向诱导扩增和分化为成熟红细胞以期作为临床输血源的可行性。方法 :10例脐血MNC在无血清无基质的液体培养条件下 ,在含SCF、IL 3、EPO和地塞米松 (DEX)等因子不同组合的A(空白对照 )、B(SCF加... 详细信息

目的 :探讨利用脐血单个核细胞 (MNCs)体外定向诱导扩增和分化为成熟红细胞以期作为临床输血源的可行性。方法 :10例脐血MNC在无血清无基质的液体培养条件下 ,在含SCF、IL 3、EPO和地塞米松 (DEX)等因子不同组合的A(空白对照 )、B(SCF加EPO)、C(SCF加EPO加IL 3)和D(SCF加EPO加IL 3加DEX)四组进行培养 14d。结果 :在第 10天时 ,B组、C组和D组中红系祖细胞扩增数均达到最高点 ,而含有SCF加IL 3加EPO加DEX的D组中红系祖细胞扩增了 4 .6± 0 .4倍 ,明显高于其他三组 (P <0 .0 1) ;结论 :①脐血MNC在含有SCF加IL 3加EPO加DEX的因子组合的无血清培养中能使红系祖细胞得到有效的扩增 ,且红系祖细胞扩增数在第 10天时达到最高。②采用分步的培养方法不仅获得更多更纯的红系细胞 ,而且能加速红系的分化 ,获得更高比例的成熟红细胞。

关键词：脐血单核细胞红细胞无血清诱导分化

临床路径在恶性肿瘤医疗保险费用控制中的作用

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现代医院管理 2010年第4期8卷 40-42页

作者：张燕何秋山任群华中科技大学同济医学院附属襄樊医院湖北省襄樊市441000

恶性肿瘤患者住院比例及医疗费用越来越高,给医保基金带来沉重的负担。通过分析目前恶性肿瘤医疗费用管理中的不足,探索以临床路径来加强管理的可行性。

关键词：恶性肿瘤医疗保险费用控制临床路径