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一株海洋细菌的紫外诱变及其产酶特性的研究

一株海洋细菌的紫外诱变及其产酶特性的研究

作者：何正文大连工业大学

学位级别：硕士

随着科学技术的发展,海洋微生物的研究和利用也越来越受到人们的重视,海洋中的微生物有着独特的特点,这些特点使得它们更容易被人们利用。随着人们对胶原蛋白的需求量的增加,胶原蛋白酶的研究也逐渐深入,常规提取胶原蛋白酶的微生物产... 详细信息

随着科学技术的发展,海洋微生物的研究和利用也越来越受到人们的重视,海洋中的微生物有着独特的特点,这些特点使得它们更容易被人们利用。随着人们对胶原蛋白的需求量的增加,胶原蛋白酶的研究也逐渐深入,常规提取胶原蛋白酶的微生物产量比较小,不容易提取。在前期工作中由本实验室筛选出来一株产胶原蛋白酶的DL-12沙雷氏菌是一株来自海洋的微生物。本实验中利用紫外诱变的方法处理DL-12嗜虫沙雷氏菌,定向筛选出高产胶原蛋白酶的菌株,对其产酶特性进行研究。对DL-12菌种进行紫外诱变处理,通过透明圈法进行初筛,鱼皮水解实验复筛,确定高产胶原蛋白酶的诱变菌株。通过对筛选出来的菌株进行酶活力比较,确定最佳诱变时间为455s。选出酶活力比出发菌有明显提高的3种菌株DL-12(50s)-3,DL-12(50s)-4和DL-12(55s)-5。然后对这3种菌株的产酶稳定性进行测定和比较,最后确定诱变菌种DL-12(50s)-4为实验菌种。诱变菌种DL-12(50s)-4产生胶原蛋白酶活力比出发菌有明显提高,并在其传代中稳定遗传。对DL-12(50s)-4诱变菌株进行培养基成分及条件优化。结果为:蔗糖4 g;牛肉膏10 g;氯化钠5 g;去离子水1L;pH:7.7。在最佳条件下进行培养测其胶原蛋白酶活力为98.76 U/ml。在最佳条件下对DL-12(50s)-4进行大量发酵培养,培养42 h后对发酵液进行离心,用磷酸缓冲液进行溶解,放入透析袋中进行透析得到粗酶液,酶活力可以达到483.9U/ml。胶原蛋白酶具有着重要应用研究价值。诱变菌种DL-12(50s)-4在培养中,将胶原蛋白酶可分泌到其胞外,因此通过液体发酵可大量获得胶原蛋白酶,同时容易分离纯化。现在生产胶原蛋白酶的产生菌源较少,因此将诱变菌DL-12(50s)-4用于生产胶原蛋白酶有很大的应用价值。

关键词：紫外诱变胶原蛋白酶菌种筛选明胶菌落

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双目标突发事件应急救援前摄性调度优化

运筹与管理 2012年第1期21卷 124-130页

作者：何正文贾涛徐渝西安交通大学管理学院陕西西安710049

本文以救援时间最短化与计划鲁棒性最大化为目标,研究突发事件应急救援前摄性调度优化问题。作者首先对所研究问题进行界定,其中计划鲁棒性定义为各活动开始时间可调整时差的总和,任务是在应急预算和救援期限的约束下,确定活动执行模式... 详细信息

本文以救援时间最短化与计划鲁棒性最大化为目标,研究突发事件应急救援前摄性调度优化问题。作者首先对所研究问题进行界定,其中计划鲁棒性定义为各活动开始时间可调整时差的总和,任务是在应急预算和救援期限的约束下,确定活动执行模式与开始时间以实现上述两个目标。随后,构建问题的0-1规划优化模型,鉴于其强NP-hard属性,设计禁忌搜索启发式算法。最后用一个算例对研究进行说明,得到如下结论:救援时间随应急预算的增加而缩短,随救援期限的放宽而延长;计划鲁棒性随应急预算的增加或救援期限的放宽而提高;当权重分配系数增大时,应急救援时间先保持不变而后缩短,计划鲁棒性则呈减小趋势。本文研究可为突发事件应急救援的组织与协调提供决策支持。

关键词：应急管理前摄性调度优化优化模型禁忌搜索启发式算法突发事件应急救援

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基于资源随机中断的反应性多模式项目调度优化

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运筹与管理 2015年第6期24卷 44-50页

作者：李佳媛何正文西安交通大学管理学院陕西西安710049

资源中断是项目实施过程中一种常见现象,它会导致项目进度计划的变更并引起额外的成本。本文研究资源随机中断下的项目调度问题,目标是对基准进度计划进行合理的调整,以最小化由此所造成的额外成本。作者首先对研究问题进行界定,随后构... 详细信息

资源中断是项目实施过程中一种常见现象,它会导致项目进度计划的变更并引起额外的成本。本文研究资源随机中断下的项目调度问题,目标是对基准进度计划进行合理的调整,以最小化由此所造成的额外成本。作者首先对研究问题进行界定,随后构建问题的优化模型。针对模型的NP-hard属性,设计禁忌搜索启发式算法。最后以基准列表算法和随机生成算法为参照,在随机生成的标准算例集合上对算法进行测试,得到如下结论:在可接受的计算时间范围内,禁忌搜索获得的满意解质量明显高于其他两种启发式算法;算法的平均计算时间随着项目活动数的增加而增加,随着网络复杂度、资源强度或资源中断次数的增加而减小;满意解的平均目标函数值,随着项目活动数或网络复杂度的增加而增加,随着资源中断次数的增加而减小,与资源强度无明显关系。

关键词：反应性项目调度优化模型禁忌搜索资源随机中断

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FAE模拟装置温度场参数实验研究

弹道学报 2007年第1期19卷 48-50页

作者：解立峰何正文严峰苑鸿志南京理工大学化工学院南京210094

通过外场实验,运用Mikroanscan7200V型红外热成像仪分别对TNT、SEFAE和DEFAE同量级的模拟装置爆炸火球的表面温度进行了测量,分析了同量级的TNT、L SEFAE、G SEFAE、DEFAE炸药的温度场的分布情况,结果表明,DEFAE表面温度最高,高温(≥1 ... 详细信息

通过外场实验,运用Mikroanscan7200V型红外热成像仪分别对TNT、SEFAE和DEFAE同量级的模拟装置爆炸火球的表面温度进行了测量,分析了同量级的TNT、L SEFAE、G SEFAE、DEFAE炸药的温度场的分布情况,结果表明,DEFAE表面温度最高,高温(≥1 000℃)持续的时间也最长;DEFAE的温度场效应要比SEFAE、TNT高;TNT、L SEFAE、G SEFAE和DEFAE在温度场接近最大温度时的火球平均直径的排序为-DDEFAE>-DL-SEFAE>-DG-SEFAE>-DTNT.

关键词：燃料空气炸药爆炸火球温度场

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基于产品创新的科研人员组合激励研究

科学学与科学技术管理 2004年第5期25卷 105-108页

作者：朱少英徐渝何正文冯锋山西大同大学西安交通大学管理学院

基于对现存激励理论的评述,通过分析科研人员利益目标的特殊要求,指出企业与科研人员在利益目标上的非完全一致性,构建了一个基于利益目标的组合激励模型,分析了物质激励与精神激励的替代关系,从理论上阐明了组合激励均衡的有效性。

关键词：产品创新道德风险组合激励模型

基于量子化学理论的热解温度对木质素二聚体热解产物分布的影响

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材料导报 2020年第6期34卷 180-185页

作者：何正文田红黄章俊胡章茂刘威长沙理工大学能源与动力工程学院

为了探究热解温度对木质素热解产物分布的影响,本工作采用密度泛函方法B3LYP/6-31G(d,p),以β-O-4型木质素二聚体为模化物,在不同热解温度下,对该模化物两种主要热解反应途径中的反应物、产物、中间体和过渡态进行了能量梯度全优化以及... 详细信息

为了探究热解温度对木质素热解产物分布的影响,本工作采用密度泛函方法B3LYP/6-31G(d,p),以β-O-4型木质素二聚体为模化物,在不同热解温度下,对该模化物两种主要热解反应途径中的反应物、产物、中间体和过渡态进行了能量梯度全优化以及振动频率计算。根据计算结果中的动力学和热力学参数的变化规律,分析了热解温度对热解产物分布的影响。计算结果表明:Cβ-O键均裂的反应是主要的反应路径,当热解温度低于700 K时,主要产物为化合物4、化合物7、化合物15以及小分子甲醛和乙烯,化合物10、化合物11、化合物13、化合物14和CO在产物中的含量所占比例相对较少;当热解温度高于700 K时,产物中化合物15和乙烯继续占据主要产物的地位,且含量持续升高,同时,化合物7和甲醛的含量所占比例减少,而化合物10、化合物11和CO含量增多,成为主要产物;Cα-Cβ键均裂的反应是主要的竞争反应,随热解温度升高,其主要生成物化合物4和乙醛含量持续升高,而化合物25和甲醛在产物中所占比例变化不大,化合物20和CO的比例则明显减少。

关键词：木质素热解温度热解产物分布密度泛函理论

随机活动工期下基于总不确定成本的项目前摄性调度与反应性调度集成优化

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系统管理学报 2021年第2期30卷 215-226页

作者：王艳婷何正文索琪青岛科技大学经济与管理学院山东青岛266061 西安交通大学管理学院过程控制与效率工程教育部重点实验室西安710049

从成本经济角度研究活动工期随机中断下前摄性调度与反应性调度在应对不确定因素干扰中的集成优化问题,目标是最小化项目计划与实施过程的总成本。构建以总成本最优为目标的前摄性与反应性调度集成优化模型;针对模型特征设计混合变邻域... 详细信息

从成本经济角度研究活动工期随机中断下前摄性调度与反应性调度在应对不确定因素干扰中的集成优化问题,目标是最小化项目计划与实施过程的总成本。构建以总成本最优为目标的前摄性与反应性调度集成优化模型;针对模型特征设计混合变邻域随机禁忌搜索启发式算法,并在ProGen生成的算例上进行全因子测试。结果表明:基于随机属性的混合启发式算法在算例规模较大时可以发挥较好的作用;通过合理设置基准进度中缓冲分配方案,可以通过牺牲部分鲁棒性的方式获得项目总成本的最优。

关键词：前摄性-反应性项目调度成本经济变邻域搜索随机禁忌搜索随机工期

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超声波介导的大肠杆菌转化技术研究

超声波介导的大肠杆菌转化技术研究

作者：何正文江苏大学

学位级别：硕士

现代发酵工程和技术是21世纪的一项重要技术,而作为新技术革命的标志之一,它已受到世界各国的普遍重视。现代发酵工程能在解决人类所面临的资源、环境、能源、人口以及粮食等压力和危机上提供最有希望的解决途径。且现代发酵工程与化学... 详细信息

现代发酵工程和技术是21世纪的一项重要技术,而作为新技术革命的标志之一,它已受到世界各国的普遍重视。现代发酵工程能在解决人类所面临的资源、环境、能源、人口以及粮食等压力和危机上提供最有希望的解决途径。且现代发酵工程与化学工业、食品、能源、医药、环境保护甚至农牧业等许多领域关系密切,因此对发酵工程新技术的的开发具有很高的经济效益。现代发酵工程采用现代工程技术和手段来利用微生物的某些特定功能,为人类生产所需要的产品或直接将微生物应用于工业生产。通过发酵工业化生产的几十年时间,发酵工艺已经有了很大的发展,然而仍然存在许多约束其进一步提高生产效率的因素。而作为现代发酵工程的两大支柱:DNA重组技术和生物反应器,也是目前急待突破的两大瓶颈。现代发酵工程中菌种选育时经常会将经过遗传改良后的基因导入目的微生物中表达,然后扩大培养用以大量生产所需的代谢产物。然而在这一过程中存在一些缺陷:(1)转化方法过程较为繁琐,用时较长。(2)菌种在冷冻保存过程中会导致菌种活力衰退,在需要用到时必须经过一个复苏的过程。(3)在大规模工业生产时,扩大培养过程所需生产周期长且操作繁琐。我们希望有一种新的转化技术可以在生物反应器中直接大量高效的对目的基因进行转化:既能快速有效地实现转化又能避免扩大培养这一繁琐的过程。而应用超声波将目的基因导入微生物细胞的技术作为一种新型但尚不成熟的转化技术进入了我们的视野。超声波介导微生物转化的方法的基本原理:利用低频超声波(波长2000k Hz)所产生的能量在液体中产生声学微泡和气穴,微泡破裂时目的基因通过微泡破裂形成的微孔进入微生物细胞中。与传统DNA转化方法相比,应用超声波将目的基因导入微生物细胞的技术在空间通量和尺度、实验可操作性、仪器的可操控性、宿主细胞普适性、还有成本投入等方面具有潜在的优势。因此开发并利用这项新的转化技术有利于解决上述问题,提高微生物发酵的生产效率。同时本研究利用低频超声波来介导大肠杆菌的转化技术,对于推动分子生物学,发酵工程等学科发展具有积极作用。在前人研究的基础上本研究致力进一步简化和完善超声波转化技术,用以解决现代发酵工程中遇到的问题。目前取得的结果如下:以E.coli BL21(DE3)为载体,在简化的超声波转化法下成功的将质粒p ET-20b(+)转入细胞中。测得这种简化的超声波转化法在不同标准下的最适转化条件,且在OD600=9,质粒浓度为0.5 ng/?l,超声功率30 w,最适转化时间180 s时可得到最高转化率为42转化子/?g质粒。

关键词：发酵工程大肠杆菌超声波转化

基于量子化学理论的苯丙氨酸热解过程中NO_(x)前驱体生成机理研究

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太阳能学报 2021年第10期42卷 317-323页

作者：田红何正文刘亮黄章俊徐慧芳长沙理工大学能源与动力工程学院长沙410114 可再生能源电力技术湖南省重点实验室长沙410114

选取苯丙氨酸为含氮模型化合物,针对其结构特点设计2种反应路径。采用密度泛函理论的B3LYP方法和6-31G(d,p)基组,对热解过程中所有的反应物、中间体、过渡态及产物进行几何构型的全优化及频率计算,并采用热重-红外联用(TGFTIR)的实验方... 详细信息

选取苯丙氨酸为含氮模型化合物,针对其结构特点设计2种反应路径。采用密度泛函理论的B3LYP方法和6-31G(d,p)基组,对热解过程中所有的反应物、中间体、过渡态及产物进行几何构型的全优化及频率计算,并采用热重-红外联用(TGFTIR)的实验方法对苯丙氨酸热解产生的NO_(x)前驱体进行在线监测。结合理论计算和实验结果对苯丙氨酸的整个热解反应路径进行分析,并据此研究不同结构氨基酸的热解过程和热解产物分布的差异,结果表明苯丙氨酸热解有2种反应路径:第1种为反应物苯丙氨酸结合化合物8并脱去氨形成化合物2,再经过脱羧反应,最终形成含N芳香化合物异喹啉5;第2种为化合物8经过脱水缩合,形成2,5-哌嗪二酮,再通过2种不同的开环方式,最终形成HNCO、HCN等小分子气体。NO_(x)前驱体的释放分为2个阶段——第1阶段NH_(3)、HCN和HNCO均大量析出,而第2阶段HCN为主要析出的气体。从整个热解阶段来看,HCN的析出量最大,NH_(3)次之,HNCO析出量最小;链式结构的简单氨基有利于NH_(3)的形成,含杂环的氨基酸则更有利于HCN的产生,而含苯环结构的氨基酸会使得更多的N进入焦油和焦炭中。

关键词：生物质能苯丙氨酸热解 NO_(x)前驱体密度泛函理论 TG-FTIR