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在cDNA文库构建中探究癌症病人血浆外泌体miRNA的特异性扩增

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生物工程学报 2022年第6期38卷 2213-2223页

作者：王娜何飞郁宏伟何栾樱熊国良卢建东喻长远王诗卉北京化工大学生命科学与技术学院北京100029 深圳市中医院广东深圳518000

血浆外泌体微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs)与癌症的发生、诊断和治疗密切相关,但其分子机制尚不明晰。本研究探讨了癌症病人血浆外泌体miRNAs在cDNA文库构建中非特异性扩增的解决方案。在酶切法中,采用核酸外切酶T (exonuclease T, EX... 详细信息

血浆外泌体微小核糖核酸(microRNAs,miRNAs)与癌症的发生、诊断和治疗密切相关,但其分子机制尚不明晰。本研究探讨了癌症病人血浆外泌体miRNAs在cDNA文库构建中非特异性扩增的解决方案。在酶切法中,采用核酸外切酶T (exonuclease T, EXOT)和phi29 DNA聚合酶降解引物;在磁珠法中,利用DNA结合磁珠分离模板和引物。随后,采取琼脂糖凝胶电泳和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测磁珠分离情况,运用RT-qPCR检测癌症病人血浆外泌体miRNA和不同连接物的含量变化。结果显示,非特异性扩增来源于miRNA的连接物USR5SR;核酸外切酶T (EXOT)和phi29 DNA聚合酶虽可降解USR5SR,但模板链也会发生降解;磁珠分离法中以9%PEG沉淀引物片段、15%PEG沉淀模板链效果最佳。综上所述,磁珠分离法能够高效解决cDNA文库构建中的非特异性扩增,从而实现293T细胞和癌症病人血浆外泌体miRNA cDNA文库的成功构建。

关键词： microRNAs cDNA文库磁珠分离非特异性扩增

基于cDNA文库的构建探究癌症病人血浆外泌体miRNA特异性扩增

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生物工程学报 2022年

作者：王娜何飞郁宏伟何栾樱喻长远熊国良卢建东王诗卉北京化工大学生命科学与技术学院深圳市中医院

血浆外泌体微小核糖核酸（microRNAs， miRNAs）与癌症的发生、诊断和治疗密切相关，但其分子机制尚不明晰。本文探讨了癌症病人血浆外泌体miRNAs在cDNA文库模板构建中非特异性扩增的解决方案。在酶切法中，采用核酸外切酶T（EXOT）和ph...

血浆外泌体微小核糖核酸（microRNAs， miRNAs）与癌症的发生、诊断和治疗密切相关，但其分子机制尚不明晰。本文探讨了癌症病人血浆外泌体miRNAs在cDNA文库模板构建中非特异性扩增的解决方案。在酶切法中，采用核酸外切酶T（EXOT）和phi29 DNA聚合酶降解引物；在磁珠法中，利用DNA结合磁珠分离模板和引物。随后，采取琼脂糖凝胶电泳和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测磁珠分离情况，运用RT-qPCR检测癌症病人血浆外泌体miRNA和不同连接物的含量变化。结果显示，非特异性扩增来源于miRNA的连接物USR5SR；核酸外切酶T（EXOT）和phi29 DNA聚合酶虽可降解USR5SR，但模板链也会发生降解；磁珠分离法中以9% PEG沉淀引物片段、15% PEG沉淀模板链效果最佳。综上，磁珠分离法能够高效解决cDNA文库构建中的非特异性扩增，从而实现293T细胞和癌症病人血浆外泌体miRNA cDNA文库模板的成功构建。

关键词：

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基于灵芝双向固体发酵雷公藤减毒持效的研究

北京化工大学学报（自然科学版） 2021年第4期48卷 48-56页

作者：何栾樱林子淳卢建东熊国良王诗卉北京化工大学生命科学与技术学院北京100029 深圳市中医院深圳518000

传统中药雷公藤具有抗炎和免疫抑制的作用,但因毒性强而极大地限制了其临床应用。以灵芝为药用真菌,采用双向固体发酵技术发酵雷公藤,并对发酵过程中得到的灵雷菌质进行抗炎活性和肝毒性评价。结果表明,接种量10 mL/100 mL、发酵30天得... 详细信息

传统中药雷公藤具有抗炎和免疫抑制的作用,但因毒性强而极大地限制了其临床应用。以灵芝为药用真菌,采用双向固体发酵技术发酵雷公藤,并对发酵过程中得到的灵雷菌质进行抗炎活性和肝毒性评价。结果表明,接种量10 mL/100 mL、发酵30天得到的灵雷菌质(N2-G30)在3.75μg/mL的质量浓度下表现出减毒持效的作用,相比于雷公藤,可抑制脂多糖诱导的小鼠RAW264.7细胞释放促炎因子TNF-α和IL-6,并且可减轻对人正常肝细胞L02增殖的抑制作用。通过液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析雷公藤发酵前后主要成分的含量变化,结果显示,与发酵前相比,发酵后雷公藤甲素、雷公藤红素、雷酚内酯的含量增加,雷公藤内酯甲的含量减少,这些成分的含量变化与N2-G30的减毒持效作用有关。

关键词：雷公藤灵芝双向固体发酵抗炎作用肝毒性

雷公藤甲素与雷公藤红素对小胶质细胞炎症反应的影响机制

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北京化工大学学报（自然科学版） 2020年第5期47卷 83-88页

作者：宋海红毕滢何栾樱闫培丽安文林喻长远王诗卉北京化工大学生命科学与技术学院北京100029 北京化工大学秦皇岛环渤海生物产业研究院秦皇岛066000

雷公藤甲素与雷公藤红素是雷公藤的主要生物活性成分,具有多种潜在的药理作用与毒性。神经炎症是各种神经退行性疾病的共同特征,小胶质细胞的激活是中枢神经系统神经炎症的主要组成部分。本文用雷公藤甲素与雷公藤红素处理小胶质细胞(HM... 详细信息

雷公藤甲素与雷公藤红素是雷公藤的主要生物活性成分,具有多种潜在的药理作用与毒性。神经炎症是各种神经退行性疾病的共同特征,小胶质细胞的激活是中枢神经系统神经炎症的主要组成部分。本文用雷公藤甲素与雷公藤红素处理小胶质细胞(HMO6),探究其对小胶质细胞增殖、细胞膜完整性的影响,以及雷公藤甲素对小胶质细胞M1、M2极化的影响。结果表明:与对照组相比,雷公藤红素(10^-4 mol/L)处理HMO6后,细胞增殖抑制率可高达(71.91±16.28)%(P<0.01,n=3),当浓度为10^-5 mol/L时,乳酸脱氢酶(LDH)释放量明显增加(8.58±1.56)%(P<0.01,n=4);与对照组相比,雷公藤甲素处理HMO6后,对细胞膜完整性无显著影响,但当浓度为10^-5 mol/L时,细胞增殖抑制率可高达(94.31±0.62)%(P<0.01,n=5),与脂多糖(LPS)组相比,雷公藤甲素浓度为10^-7 mol/L时人肿瘤坏死因子-α(TNF-α)释放量显著减少至(264.83±64.25)pg/mL(P<0.01,n=3),人白细胞介素-10(IL-10)释放量减少至(63.48±16.79)pg/mL(P<0.05,n=3)。

关键词：雷公藤甲素雷公藤红素小胶质细胞免疫功能神经毒性

为何逆差越拉越大？中国农产品国际贸易结构、逆差逻辑与破局之道

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中国农业资源与区划 2024年

作者：何邦路雷志樱吴秀敏四川农业大学管理学院延安大学经济管理学院

[目的]当前我国农产品国际贸易已迈入新的发展阶段，农业国际贸易规模稳步提升，农业对外开放也处于全球领先行列，国际农产品市场日益成为保障国内农产品稳定供应的重要组成部分，但同时也为维护国家农产品安全带来了一系列前所未有的... 详细信息

[目的]当前我国农产品国际贸易已迈入新的发展阶段，农业国际贸易规模稳步提升，农业对外开放也处于全球领先行列，国际农产品市场日益成为保障国内农产品稳定供应的重要组成部分，但同时也为维护国家农产品安全带来了一系列前所未有的非传统压力和挑战，集中反映出低出口、高进口和高逆差并存的“一低两高”特征。[方法]文章以中国农业国际贸易逆差持续扩大为视角，基于2000-2022年中国农产品国际贸易数据，全面比较分析了中国农产品国际贸易的发展与变化，揭示了贸易逆差持续扩大的内在逻辑，并基于农产品出口大国的成功经验，提出了扩大我国优势农产品出口、扭转贸易逆差的破局之路。[结果]当前，我国农业国际贸易逆差达到历史最高水平，由于内需缺口扩大和比较优势逐渐消失，逆差在中长期不能得到缓解。区域上，逆差水平呈现南美洲>北美洲>大洋洲>欧洲的状态（非洲基本实现贸易平衡，亚洲呈小幅顺差），贸易对象上，逆差主要来源于巴西、美国、澳大利亚、新西兰、加拿大、泰国和阿根廷等国家；贸易产品上，大豆、畜产品、棉花和谷物等成为逆差主要来源产品。这种高额逆差成因上，既包含内部技术体系不成熟，出口产品缺乏核心竞争力；内源性产能不足，个别产品缺口明显；国际组织能力不强，缺乏农业国际话语权；农产品市场开放度高，保护性措施不足等因素引发的农产品“难以出去”“不得不进”“难以竞争”“难以调配”和“难以抵挡”的情况，也包含外部外源性竞争激烈，市场容量压缩；特异性壁垒高筑，出口面临“围城”的“难以抗衡”和“不得而出”的困境。[结论]因此，在新一轮更高水平开放背景下，亟需转型思维、构建多元农产品安全战略保障体系。一方面，从需求端强化技术支撑稳定提升国内供给能力，完善贸易规则保护国内市场；另一方面，从供给端细分出口市场，扩大优势农产品出口，发展多元出口项目规避国际壁垒，从而有效缩小逆差推动我国农业国际贸易高质量发展。

关键词：农产品国际贸易贸易逆差 WTO 农业现代化高质量发展

新冠疫情与俄乌冲突背景下世界玉米海运格局变化研究

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北京大学学报(自然科学版) 2024年

作者：赵鹏军尹昭有张梦竹牛樱楠何张源北京大学城市与环境学院北京大学深圳研究生院城市规划与设计学院

采用2019、2021和2022年的国际玉米贸易数据，通过矩阵构建和算法设计进行数据映射，探究新冠疫情与俄乌冲突背景下全球玉米海运格局变化，以期为全球粮食安全治理提供新的视角和科学依据。研究发现: ①泛地中海、西北太平洋近岸海... 详细信息

采用2019、2021和2022年的国际玉米贸易数据，通过矩阵构建和算法设计进行数据映射，探究新冠疫情与俄乌冲突背景下全球玉米海运格局变化，以期为全球粮食安全治理提供新的视角和科学依据。研究发现: ①泛地中海、西北太平洋近岸海域和加勒比海海域是世界玉米航运的三个核心; ②疫情和俄乌冲突对世界玉米航运结构的影响有限，局域变动大于整体变动，冲突对世界玉米航运格局的影响集中于泛地中海地区，玉米航运格局演化量变积累仍在持续; ③疫情和俄乌冲突都对航道玉米运量和运价产生双重效应，俄乌冲突干扰了疫情缓和后世界玉米航运反弹，考虑全球航运玉米单价上涨，黑海相关航道经济价值下降明显，南美经好望角至东亚、东南亚的大洋航道等经济价值增长态势良好; ④泛地中海海域航道具有高度的综合价值，非洲大陆西侧岸线等航道虽然经济价值较低，但具有较高的国际服务价值。

关键词：玉米海运俄乌冲突新冠疫情粮食安全

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挡风墙对风区隧道火灾排烟效果的影响研究

铁道科学与工程学报 2024年第5期21卷 1979-1989页

作者：栾蝶范传刚中南大学土木工程学院湖南长沙410075 轨道交通工程结构防灾减灾湖南省重点实验室湖南长沙410075

烟气是隧道火灾中的最致命因素。针对处于风区的隧道受环境风影响,火灾烟气无法有效排出导致隧道内热量积聚和人员受困的问题,建议在风区隧道出口设置合理尺寸的挡风墙。以标准的2车道公路隧道为例,基于对公路隧道火灾载荷的调研,借助FD... 详细信息

烟气是隧道火灾中的最致命因素。针对处于风区的隧道受环境风影响,火灾烟气无法有效排出导致隧道内热量积聚和人员受困的问题,建议在风区隧道出口设置合理尺寸的挡风墙。以标准的2车道公路隧道为例,基于对公路隧道火灾载荷的调研,借助FDS(Fire Dynamics Simulator)软件建立典型的2车道公路隧道火灾模型,考虑风区10,20和30 m/s 3种横风速度,分别讨论有无挡风墙时的隧道内火灾烟气运动情况。无挡风墙时,横风会将烟气封堵在隧道内,造成隧道内热量的积聚,同时,隧道下部空间被烟气侵蚀,对人员逃生和救援工作产生不利的影响。进一步探讨不同宽度和高度的挡风墙对隧道内火灾烟气运动、隧道顶部温度、能见度及烟气层高度参数的影响,从而确定适合风区2车道公路隧道的最佳挡风墙尺寸。研究结果表明,隧道出口设置挡风墙可以有效促进风区隧道火灾烟气的排出,且能够大大降低隧道顶部温度。这是由于风流经过挡风墙时发生边界层分离,挡风墙内部形成负压驱使火灾烟气从隧道排出。当横风速度较大时,烟气倾向于全部从风区一侧排出,非风区一侧形成完全干净的空间,此时人员逃生和灭火救援可以从非风区侧进行。此外,挡风墙的尺寸并非越大越好,基于3个隧道火灾安全疏散指标,提出了优化的风区2车道公路隧道的挡风墙尺寸为4 m(宽)×8 m(高)。

关键词：隧道挡风墙横风烟气排出优化设计

低渗透油藏地质工程一体化高效建产--以东营凹陷N25区块为例

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钻采工艺 2024年第3期47卷 90-96页

作者：任泽樱中国石化胜利油田分公司东胜精攻石油开发集团股份有限公司

东营凹陷低渗透油藏分布散、埋藏深、品位低,开发过程中注不进、采不出矛盾突出,效益建产面临单井产能低、自然递减大、采收率低等问题,高效开发难度大。以东营凹陷牛庄洼陷沙三段中亚段N25-42A低渗透浊积砂岩油藏为例,通过实施以储层... 详细信息

东营凹陷低渗透油藏分布散、埋藏深、品位低,开发过程中注不进、采不出矛盾突出,效益建产面临单井产能低、自然递减大、采收率低等问题,高效开发难度大。以东营凹陷牛庄洼陷沙三段中亚段N25-42A低渗透浊积砂岩油藏为例,通过实施以储层精细刻画、复杂缝网压裂改造储层、正向压驱注水补能、钻井与地面工程优化设计施工为核心的地质工程一体化建产方案,有效提高地质甜点刻画精度,大幅缩短钻井周期,形成复杂缝网提高波及体积,快速补充地层能量,改善驱油效果。N25区块实施地质工程一体化建产方案后,平均单井产油量增加0.6倍,单井控制可采储量增加6倍,实现少井高产,投资大幅缩减。实践证明,地质工程一体化开发技术对于提升断陷盆地低渗透油藏的动用率、推动低品质油藏的产能建设具有一定应用价值和参考意义。

关键词：低渗透油藏地质工程一体化储层甜点压驱注水效益开发产能建设

基于核磁共振技术测量研究锂电池正极导电浆料的分散性

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计量学报 2024年第4期45卷 580-585页

作者：周萍栾振超厦门市计量检定测试院福建厦门361000 北京化工大学北京软物质科学与工程高精尖创新中心北京100029

采用核磁共振(NMR)技术研究了不同类型导电颗粒制备的锂电池正极导电浆料。通过测量导电浆料的弛豫时间和弛豫谱,发现了在同等研磨分散条件下炭黑浆料的弛豫时间与比表面积(BET)值呈负相关性,且炭黑浆料弛豫谱为单峰结构,说明炭黑更容... 详细信息

采用核磁共振(NMR)技术研究了不同类型导电颗粒制备的锂电池正极导电浆料。通过测量导电浆料的弛豫时间和弛豫谱,发现了在同等研磨分散条件下炭黑浆料的弛豫时间与比表面积(BET)值呈负相关性,且炭黑浆料弛豫谱为单峰结构,说明炭黑更容易得到分散;而碳纳米管(CNT)浆料的弛豫谱全部为多峰结构,说明CNT的分散性较差。研究结果表明,CNT浆料的固含量越大,颗粒的比表面积越大,那么弛豫谱主峰的弛豫时间就越大,主峰信号占比就越低,说明CNT在溶剂中就越容易发生纠缠和团聚。

关键词：电学计量导电浆料锂电池分散性核磁共振弛豫时间弛豫谱