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SIRT1信号通路介导薯蓣皂苷元在骨性关节炎软骨细胞代谢中的作用机制

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中南大学学报（医学版） 2017年第2期42卷 121-127页

作者：刘军何晓乐甄平陈慧周胜虎田琦王荣李旭升兰州军区总医院全军骨科中心关节外科兰州730050 第四军医大学西京医院老年病科西安710032 甘肃省中医药大学研究生院兰州730000

目的:在小鼠骨性关节炎(osteoarthritis,OA)模型中观察沉默信息转录调控因子1(sirtuin type 1,SIRT1)信号通路对软骨细胞代谢的影响以及线粒体抗氧化应激能力的改变,探讨SIRT1信号通路及薯蓣皂苷元(diosgenin,Dgn)在OA过程中的作用。方... 详细信息

目的:在小鼠骨性关节炎(osteoarthritis,OA)模型中观察沉默信息转录调控因子1(sirtuin type 1,SIRT1)信号通路对软骨细胞代谢的影响以及线粒体抗氧化应激能力的改变,探讨SIRT1信号通路及薯蓣皂苷元(diosgenin,Dgn)在OA过程中的作用。方法:选择10只C57BL/6小鼠(13.5~18.0 g)建立OA模型,4周后取材,培养软骨细胞并随机分为4组:OA组、Dgn+OA组、Dgn+Sirtinol(SIRT1通路阻断剂)+OA组及Sirtinol+OA组。运用Western印迹法检测各组细胞SIRT1,乙酰化-调节叉头转录因子1(acetylation-regulated transcription factor 1,Ac-FOXO1)和Bax蛋白的表达,同时检测各组线粒体氧化应激指标琥珀酸脱氢酶(succinate dehydrogenase,SDH)、细胞色素C氧化酶(cytochrome C oxidase,COX)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)水平的改变。结果:与OA组比较,Dgn明显增高SIRT1表达水平(P<0.05),降低Ac-FOXO1和Bax蛋白表达水平(P<0.05),SDH和COX蛋白表达水平及SOD含量均升高(P<0.05);而与OA+Dgn组相比,Sirtinol明显降低SIRT1的表达,增高Ac-FOXO1蛋白和Bax蛋白表达水平,降低SDH和COX蛋白表达水平及SOD含量(P<0.05)。结论:SIRT1信号通路和OA中软骨细胞变化密切相关,Dgn通过激活SIRT1通路,有效减轻OA病理过程中软骨细胞的线粒体氧化应激损伤,从而发挥抗OA中软骨细胞保护作用。

关键词：骨I生关节炎软骨细胞沉默信息转录调控因子1 薯蓣皂苷元氧化应激

西安四条河流急流—深潭—河滩系统底泥微生物多样性及退化河流恢复策略

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西安四条河流急流—深潭—河滩系统底泥微生物多样性及退化河流恢...

作者：何晓乐长安大学

学位级别：硕士

急流-深潭-河滩系统是河流结构的基本单元,这一系统所包含的三种生境在河流多样化的环境中具有代表性和可比性。急流-深潭-河滩系统的研究多集中在景观格局、空间结构特征和对水质的影响。然而,微生物在急流-深潭-河滩系统中的分布是否... 详细信息

急流-深潭-河滩系统是河流结构的基本单元,这一系统所包含的三种生境在河流多样化的环境中具有代表性和可比性。急流-深潭-河滩系统的研究多集中在景观格局、空间结构特征和对水质的影响。然而,微生物在急流-深潭-河滩系统中的分布是否具有差异性,急流-深潭-河滩系统不同生境中的环境因子是如何影响微生物分布的,这些问题还没有开展研究。已知河流水体及沉积物中的细菌随季节变化明显,但河流沉积物中的细菌还有真核微生物尤其是真菌在急流-深潭-河滩系统中的空间分布是怎样的,其群落多样性及结构组成是否存在空间变化,其变化规律等还不了解。本研究收集了西安市的4条河流(渭河、沣河、灞河、浐河)共计36个急流-深潭-河滩系统108个采样点的水样和表层沉积物,测定了共计20个水样和沉积物中的理化因子,同时利用16S r DNA和ITS扩增子测序研究了沉积物中的细菌及真菌的分布规律。主要结果如下:(1)河流的地理空间差异和急流-深潭-河滩系统生境差异显著影响了微生物生长的水质和底质环境,但前者的影响更大。对108个采样点的水样和沉积物指标分析,结果发现河流间水体和沉积物的环境质量差异性明显大于急流、深潭和河滩间环境质量差异性。具体地,除了流速、水体氨氮、沉积物总氮、沉积物总有机碳指标,其余参数在4条河流间均具有显著差异性。不考虑不同河流的情况下,比较4条河流急流、深潭和河滩生境差异对水质和底质环境的影响,发现急流流速和溶解氧含量显著大于深潭,水深和氧化还原电位深潭显著大于急流;沉积物和水体中总氮、总磷在急流、深潭和河滩间具有显著差异性,深潭与河滩底质总氮、总磷含量大于急流,而水体中总氮、总磷含量是急流大于深潭。(2)河流的地理空间差异和急流-深潭-河滩系统生境差异造成了细菌多样性分布差异。在4条河沉积物样品中共检测出43个门,79个纲,112个目,270个科,916个属,1798个种的细菌。其中,变形菌门是绝对优势物种(47.33%),然后是拟杆菌门(14.48%),厚壁菌门(7.13%)。统计分析表明,河流之间具有显著差异的物种明显多于急流、深潭和河滩之间;而在急流-深潭-河滩系统内,河滩拥有最多差异的物种,急流拥有差异的物种最少。多样性指数分析表明,河流之间的Shannon指数和Simpson指数具有显著差异性,Observed species、Chao1指数、ACE指数在急流、深潭和河滩之间存在显著差异性。Beta多样性分析显示,渭河与其余三条支流之间有显著差异,其中灞河的各个生境差异最为明显。Mantel test结果表明环境因子整体和细菌群落物种组成具有相关性(r=0.45,p=0.0001);单因子中电导率和物种组成相关性最高(r=0.39,p=0.01)。(3)河流的地理空间差异和急流-深潭-河滩系统生境不同对真核微生物多样性具有显著影响。测序结果表明除了获得真菌多样性信息,还得到了植物界(Plantae)、藻界(Chromista)、有孔虫界(Rhizaria)以及少量的后生动物(Metazoa)相关物种信息。植物界绿藻(Chlorophyta,16.86%)和真菌界子囊菌门(Ascomycota,15.21%)是在各类群中的优势物种。对多样性指数进行差异分析,表明各多样性指数在河流之间具有显著差异性,但是在急流、深潭和河滩之间没有显著差异。河流中沣河的群落丰富度和多样性最高,急流、深潭和河滩三种生境中,深潭最低。对所有样本进行PLS-DA判别分析,表明河流之间和急流、深潭和河滩之间都具有明显的差异。(4)河流的地理空间差异和急流-深潭-河滩系统生境不同对微生物基因功能具有显著影响。利用PICRUSt软件结合COG数据库对细菌物种功能预测和分析,结果表明共计25个基因功能家族均具有数值,其中基本功能预测占比最高为12.07%。同时对基因功能家族进行差异分析,河流之间的差异家族(20个)明显多于急流、深潭和河滩之内的差异家族(5个)。利用FUNGuild真菌功能注释数据库,对真菌功能进行预测,得到了有关真菌的21个生态功能群,相对丰度最高的是未定义腐生菌群(Undefined Saprotroph)。共计7个生态功能群在不同河流间具有显著差异,只有2个生态功能群在急流、深潭和河滩之间具有显著差异。

关键词：生境急流-深潭-河滩系统沉积物细菌真菌高通量测序技术

JAK2/STAT3信号通路介导薯蓣皂苷元对骨性关节炎软骨细胞代谢的影响

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浙江大学学报（医学版） 2016年第5期45卷 453-460页

作者：刘军何晓乐甄平周胜虎李旭升兰州军区兰州总医院全军骨科中心关节外科甘肃兰州730050 第四军医大学西京医院老年病科陕西西安710032

目的：在小鼠骨性关节炎（OA）模型中观察薯蓣皂苷元（Dgn）通过酪氨酸蛋白激酶2／信号转导子和转录激活子3（JAK2／STAT3）信号通路对软骨细胞代谢和线粒体抗氧化应激能力的影响，以及Dgn在此过程中的作用。方法：15只C57BL／6小鼠随... 详细信息

目的：在小鼠骨性关节炎（OA）模型中观察薯蓣皂苷元（Dgn）通过酪氨酸蛋白激酶2／信号转导子和转录激活子3（JAK2／STAT3）信号通路对软骨细胞代谢和线粒体抗氧化应激能力的影响，以及Dgn在此过程中的作用。方法：15只C57BL／6小鼠随机分为健康对照组、模型对照纽和Dgn组，相应处理4周后取材，采用免疫组织化学法观察各组大体标本形态学变化，电子显微镜下观察软骨组织超微结构变化。将模型对照组培养软骨细胞随机分为四组：①模型对照组；②Dgn组；@Dgn＋阻断剂组；④阻断剂对照组。运用蛋白质印迹法检测各纽软骨细胞中P-JAK2、p-STAT3、Bax、琥珀酸脱氢酶（SDH）和细胞色素C氧化酶（COX）蛋白表达，并用比色法测定线粒体中超氧化物歧化酶（SOD）的含量及活性。结果：软骨组织形态学方面，模型对照组软骨细胞变化最明显，Dgn组细胞形态维持较好，软骨细胞膜完整；电镜下观察发现，模型对照组软骨组织标本表面损伤较为严重，而Dgn组软骨组织标本表面平整。与模型对照组比较，Dgn组p-JAK2、PSTAT3蛋白表达水平上升（均P〈0．05），Bax蛋白表达水平降低（P〈0．05），SDH、COX蛋白表达水平、SOD含量均较模型对照组增加（均P〈0．05）；而与Dgn组比较，Dgn＋阻断剂组P．JAK2和P-STAT3蛋白的表达减少，Bax蛋白表达增加，SDH、COX蛋白表达水平及SOD含量降低（均P〈0．05）。结论：JAK2／STAT3信号通路与OA软骨细胞病理变化密切相关。Dgn可以通过激活JAK2／STAT3通路，有效减轻OA病理过程中软骨细胞的线粒体氧化应激损伤和细胞凋亡，发挥对OA软骨细胞的保护作用。

关键词：骨关节炎/病理学薯蓣皂甙/药理学 STAT3转录因子蛋白酪氨酸激酶类软骨细胞病理学氧化性应激

机体炎症因子和氧化应激标志物介导姜黄素抑制骨性关节炎的作用机制

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浙江大学学报（医学版） 2016年第5期45卷 461-468页

作者：刘军何晓乐甄平周胜虎李旭升兰州军区兰州总医院全军骨科中心关节外科兰州730050 第四军医大学西京医院老年病科陕西西安710032

目的：探讨骨性关节炎（OA）关节软骨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、CD47、L-选择素及高级氧化蛋白产物（AOPP）表达的变化以及姜黄素（Cur）的干预作用。方珐：建立C57BIM6小鼠OA模型，20只小鼠随机分为手... 详细信息

目的：探讨骨性关节炎（OA）关节软骨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、CD47、L-选择素及高级氧化蛋白产物（AOPP）表达的变化以及姜黄素（Cur）的干预作用。方珐：建立C57BIM6小鼠OA模型，20只小鼠随机分为手术对照组、模型对照组、Cur25组和Cur50组（术后分别每日接受25μmol／L和50μmol／L浓度姜黄素腹腔注射）。4周后取材，采用免疫组织化学法观察各组大体标本形态学变化，电子显微镜下观察软骨组织超微结构；培养各组软骨细胞，运用蛋白质印迹法检测各组MMP-2、MCP-1和CD47表达，ELISA和分光光度法检测L-选择素水平及AOPP浓度变化。结果：软骨组织标本形态学变化模型对照组最明显，Cur25组次之；与手术对照组比较，模型对照组、Cur25组、cur50组软骨细胞MMP-2、MCP-1表达均增多（均P〈0．05），CD47表达均下降（均P〈0．05），L．选择素水平及AOPP浓度均增加（均P〈0．05）；与模型对照组比较，Cur25组和Cur50组软骨细胞MMP-2、MCP-1、L-选择素及AOPP的表达下降（均P〈0．05），CIM7的表达上升（均P〈0．05），且与Cur25组比较，Cur50组的上述变化更为显著（均P〈0．05）。结论：MMP-2、MCP—1、CD47、L-选择素及AOPP的异常表达与OA软骨退变的病理过程相关。姜黄素可缓解关节软骨的退变，减轻软骨炎症，提高软骨细胞的代谢活性，且此作用与姜黄素的浓度有关。

关键词：骨关节炎/病理学姜黄素/药理学姜黄素/投药和剂量基质金属蛋白酶2 趋化因子CCL2 抗原,CD47 L选择素蛋白水解产物疾病模型,动物

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老年高血压患者性别差异的相关性研究

中华老年心脑血管病杂志 2014年第10期16卷 1015-1018页

作者：程珂何晓乐王波王晓明第四军医大学西京医院老年病科西安710032 军事预防医学院流行病学教研室

目的：探讨老年高血压患者的性别差异。方法通过随机整群抽样的方法，选择西安局部地区老年高血压患者329例，其中男性185例，女性144例。对不同性别老年高血压患者进行一般人口学特征、慢性病、辅助检查及心理健康等调查，并比较和分... 详细信息

目的：探讨老年高血压患者的性别差异。方法通过随机整群抽样的方法，选择西安局部地区老年高血压患者329例，其中男性185例，女性144例。对不同性别老年高血压患者进行一般人口学特征、慢性病、辅助检查及心理健康等调查，并比较和分析影响因素。结果男性与女性老年高血压患者在教育程度、吸烟、饮酒、慢性阻塞性肺病、骨关节病、空腹血糖、TG、TC、HDL-C、LDL-C、尿酸、肌酐、抑郁症状等方面比较，差异有统计学意义（P＜0．05，P＜0．01）。生活不规律、受教育程度是男性老年高血压患者的影响因素（OR＝1．609，95％ CI：1．018～2.542，P＝0．042；OR＝0．678，95％ CI：0．553～0．832，P＝0．000），高 TG、受教育程度是女性老年高血压患者的影响因素（OR＝1．486，95％ C I：1．131～1．950，P＝0．004；OR＝0．710，95％ C I：0．597～0．844，P＝0．000）。结论受教育程度是男性和女性老年高血压患者共同保护因素。男性影响因素为生活不规律，女性为高TG。

关键词：高血压患病率教育程度性别因素吸烟

PDCA循环联合微格教学法在全科规培内科基本技能培训中的应用效果评价

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医学教育研究与实践 2022年第2期30卷 246-250页

作者：李红杜艳梅任婷葛伟何晓乐孙阳空军军医大学第一附属医院全科医学科陕西西安710032

目的探讨PDCA循环联合微格教学法在全科规培内科基本技能培训中的应用。方法选取2018年10月至2020年10月在我院参加规培的220名全科医师作为研究对象,随机分为两组,每组110名医师,对照组采用传统教学方法培训,实验组采用PDCA循环联合微... 详细信息

目的探讨PDCA循环联合微格教学法在全科规培内科基本技能培训中的应用。方法选取2018年10月至2020年10月在我院参加规培的220名全科医师作为研究对象,随机分为两组,每组110名医师,对照组采用传统教学方法培训,实验组采用PDCA循环联合微格教学法培训,对两组规培医师的技能操作考核成绩进行比较,并根据规培医师对培训过程的满意度及带教医师对规培医师的培训表现满意度进行教学效果评价。结果实验组技能考核成绩(89.26±4.52)分,显著高于对照组(79.68±2.38)分,二者差异有统计学意义(P<0.05);在培训方式方法满意度、技能操作掌握程度、师生互动状态、参与度及对培训整体满意度方面,实验组优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);带教医师对实验组整体表现满意度高于对照组。结论PDCA循环联合微格教学法可以增加全科规培医师的学习兴趣,提升参与度,提高全科规培内科技能操作考核成绩,提升培训效果,进一步推广到全科其他技能操作培训项目,可全面提高全科医师的临床实践能力。

关键词： PDCA循环微格教学法全科规培内科基本技能操作

JAK2/STAT3信号通路介导姜黄素在骨性关节炎软骨细胞代谢中的影响

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中国骨伤 2016年第12期29卷 1104-1109页

作者：李旭升陈慧甄平李慎松周胜虎田琦石杰何晓乐刘军兰州军区总医院全军骨科中心关节外科甘肃兰州730050 甘肃省中医药大学甘肃兰州730000 第四军医大学西京医院老年病科陕西西安710032

目的：探讨酪氨酸蛋白激酶2/信号转导和转录激活子3（JAK2/STAT3）信号通路对软骨细胞代谢的影响以及线粒体抗氧化应激能力的改变,及JAK2/STAT3信号通路在此过程中的作用以及姜黄素对其影响。方法：选取雄性SPF级C57BL/6小鼠15只,体重1... 详细信息

目的：探讨酪氨酸蛋白激酶2/信号转导和转录激活子3（JAK2/STAT3）信号通路对软骨细胞代谢的影响以及线粒体抗氧化应激能力的改变,及JAK2/STAT3信号通路在此过程中的作用以及姜黄素对其影响。方法：选取雄性SPF级C57BL/6小鼠15只,体重10.05~15.00 g,平均12.80 g,随机分为对照组、OA组（Glasson法建立OA模型）及姜黄素＋OA组（在OA组处理的基础上,术后每日腹腔注射100 mg/kg姜黄素）,每组各5只。4周后用脱颈法处死3组小鼠取材,观察各组大体标本形态学变化及采用免疫组织化学法观察标本改变;采用Western blot蛋白印迹法检测各组p-JAK2、p-STAT3和Bax蛋白的表达,同时检测各组线粒体氧化应激指标琥珀酸脱氢酶（SDH）及细胞色素C氧化酶（COX）改变。结果：4周后,在软骨组织标本形态学方面,对照组软骨组织呈半透明状,无肿胀、充血,软骨细胞数量多,胞核呈椭圆形,染色质分布均匀;姜黄素＋OA组关节轻微肿胀,无充血,软骨细胞形态较规则,细胞数量略减少;OA组关节面粗糙,表面变薄、有轻度破损现象,细胞排列稍紊乱,视野下可见核消失,染色不均匀。与对照组相比,OA组和姜黄素＋OA组软骨细胞p-JAK2、p-STAT3蛋白表达降低（P〈0.05）、Bax蛋白表达升高（P〈0.05）,SDH和COX蛋白水平表达均降低（P〈0.05）;与OA组比较,姜黄素＋OA组软骨细胞p-JAK2、p-STAT3蛋白表达升高,Bax蛋白表达降低,SDH和COX蛋白水平表达均升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：JAK2/STAT3信号通路与骨性关节炎软骨退变的病理过程密切相关,姜黄素可激活JAK2/STAT3信号通路,增加软骨细胞线粒体抗氧化应激能力,明显缓解关节软骨的退变,降低OA进展水平。

关键词：骨关节炎姜黄素软骨细胞代谢

高屈曲假体加延长杆在晚期类风湿关节炎伴重度膝外翻畸形和严重骨质疏松患者中的临床疗效研究

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中国全科医学 2017年第23期20卷 2852-2857页

作者：刘军甄平周胜虎田琦陈慧何晓乐王伟李旭升兰州军区总医院全军骨科中心关节外科甘肃省兰州市730050 第四军医大学西京医院老年病科陕西省西安市710032 宁夏医科大学研究生院宁夏回族自治区银川市750000

目的探讨晚期类风湿关节炎(RA)伴重度膝外翻畸形和严重骨质疏松患者膝关节置换术假体选择及临床效果。方法选取2008—2014年兰州军区总医院全军骨科中心关节外科采用髌旁内侧入路、常规截骨加单纯外侧软组织松解方法治疗晚期RA伴重度膝... 详细信息

目的探讨晚期类风湿关节炎(RA)伴重度膝外翻畸形和严重骨质疏松患者膝关节置换术假体选择及临床效果。方法选取2008—2014年兰州军区总医院全军骨科中心关节外科采用髌旁内侧入路、常规截骨加单纯外侧软组织松解方法治疗晚期RA伴重度膝外翻畸形和严重骨质疏松患者27例(32膝)。18例(20膝)采用不保留后十字韧带型后稳定型常规假体:Nex Gen HF-Flex常规膝(后稳定型组),9例(12膝)采用Nex Gen HF-Flex常规膝+延长杆(后稳定型+延长杆组)。采用术前及末次随访时膝关节屈曲挛缩、关节活动度、股胫角等评价手术效果。结果手术时间60~120 min,平均75 min。随访时间2.0~7.5年,平均4.9年。后稳定型组和后稳定型+延长杆组末次随访时膝关节屈曲挛缩较术前减少、关节活动度较术前提高(P0.05)。所有患者外翻畸形得到纠正,后稳定型组和后稳定型+延长杆组末次随访时股胫角较术前减小(P0.05)。术后3例(3膝)有膝关节外侧不稳症状,给予膝关节支具保护;2例(3膝)术后1个月出现下肢静脉血栓,给予放置下腔静脉滤网;1例(1膝)术后发生腓总神经麻痹。其余患者随访期间未发生假体感染、假体周围骨折、异位骨化、假体松动及外翻等术后并发症。结论对晚期RA伴重度膝外翻畸形和严重骨质疏松患者在假体选择方面,后稳定型假体与后稳定型假体+延长杆在纠正外翻屈曲畸形、关节活动度和股胫角疗效等方面,未见差异,所有患者近期疗效满意,但对于此类患者而言,后稳定型假体+延长杆组稳定性较好,受RA病程进展影响较低。

关键词：关节成形术,置换关节炎,类风湿膝外翻骨质疏松

基于16S rRNA测序分析银屑病小鼠皮肤及肠道微生态菌群

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中国麻风皮肤病杂志 2024年第1期40卷 15-20页

作者：张雨婷赵慧霞孟欣赵佳乐何晓园长治医学院山西长治046000 长治医学院附属和济医院皮肤科山西长治046000

目的:基于16S rRNA分析银屑病小鼠与对照组皮肤及肠道微生态菌群的不同,探讨银屑病发病的关键菌群。方法:12例小鼠随机分为实验组和对照组,收集皮肤及粪便样本,采用16S rRNA测序方法检测。结果:与对照组相比,实验组皮肤菌群中相对丰度... 详细信息

目的:基于16S rRNA分析银屑病小鼠与对照组皮肤及肠道微生态菌群的不同,探讨银屑病发病的关键菌群。方法:12例小鼠随机分为实验组和对照组,收集皮肤及粪便样本,采用16S rRNA测序方法检测。结果:与对照组相比,实验组皮肤菌群中相对丰度降低的有拟杆菌门、红蝽菌纲、毛螺菌目、理研菌科等,相对丰度升高的有厚壁菌门、芽孢杆菌纲、葡萄球菌目等,实验组肠道中相对丰度降低的有拟杆菌门、α-变形菌纲、乳杆菌目等,相对丰度升高的有弯曲杆菌门、梭状芽孢杆菌纲、毛螺菌目等。LefSe分析表明,小鼠皮肤菌群中红蝽菌纲、拟杆菌纲、乳杆菌目、葡萄球菌目等起主要作用,肠道菌群中拟杆菌纲、梭状芽孢杆菌纲、肠杆菌目、毛螺菌目等起主要作用。MetagenomeSeq分析结果显示,两组皮肤和肠道菌群的物种组成及功能在门、纲、目、科、属、种水平上均存在差异,有统计学意义。结论:银屑病小鼠免疫系统受累,皮肤及肠道屏障功能破坏,菌群丰度发生改变,进一步验证了肠-免疫-皮肤轴的相关性。

关键词：银屑病皮肤菌群肠道菌群 16S rRNA