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桑叶水提物对2型糖尿病小鼠皮下脂肪组织氧化应激的影响及机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 43-50页

作者：张慧琳安永铖何昶昊黄艳付宛鑫王梦璐单子轶杜雨航解佳美贾占红赵保胜北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学生命科学学院北京102488 北京中医药大学北京中医药研究院北京100029

目的:观察桑叶水提物(MLE)对2型糖尿病(T2DM)小鼠脂肪组织氧化应激的影响,并探讨其作用机制。方法:24只雄性db/db小鼠按血糖、体质量随机分为模型组、二甲双胍组、桑叶水提物低剂量(MLE-L)组和桑叶水提物高剂量(MLE-H)组,每组6只;另设6... 详细信息

目的:观察桑叶水提物(MLE)对2型糖尿病(T2DM)小鼠脂肪组织氧化应激的影响,并探讨其作用机制。方法:24只雄性db/db小鼠按血糖、体质量随机分为模型组、二甲双胍组、桑叶水提物低剂量(MLE-L)组和桑叶水提物高剂量(MLE-H)组,每组6只;另设6只C57BLKS/JGpt同窝野生型(m/m)小鼠为正常组。二甲双胍组给予200 mg·kg^(-1)二甲双胍溶液,MLE-L组、MLE-H组分别给予2、4 g·kg^(-1)MLE,正常组和模型组均给予等体积去离子水,每日灌胃1次,连续给药8周。测定小鼠体质量、皮下脂肪指数、空腹血糖(FBG)及口服糖耐量水平,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠皮下脂肪组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)、NADPH氧化酶4(NOX4)蛋白的表达水平。结果:与空白组比较,T2DM小鼠经桑叶水提物给药后,空腹血糖水平、口服糖耐量水平(OGTT)、脂肪组织指数均明显下降(P<0.05,P<0.01);血清抗氧化物酶SOD、GSH含量明显上升,氧化应激损伤标志物MDA水平明显下降(P<0.05,P<0.01);脂肪组织中SIRT1蛋白表达显著上升、NOX4蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论:桑叶水提物可通过缓解T2DM小鼠脂肪组织氧化应激状态,从而降低血糖,改善糖尿病的作用。

关键词：桑叶水提物 2型糖尿病氧化应激脂肪组织

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桑叶水提物对db/db糖尿病小鼠肾脏的保护作用及其机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 51-59页

作者：黄艳张慧琳何昶昊安永铖付宛鑫王梦璐单子轶杜雨航解佳美贾占红赵保胜北京中医药大学生命科学学院北京102488 北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学北京中医药研究院北京100029

目的:观察桑叶水提物(MLE)对db/db糖尿病小鼠肾脏的保护作用,并探讨其机制。方法:24只雄性C57BLKS/JGpt-Leprdb/Leprdb(db/db)小鼠按空腹血糖(FBG)值随机分为模型组、二甲双胍组、桑叶水提物低剂量(MLE-L)组和桑叶水提物高剂量(MLE-H)组... 详细信息

目的:观察桑叶水提物(MLE)对db/db糖尿病小鼠肾脏的保护作用,并探讨其机制。方法:24只雄性C57BLKS/JGpt-Leprdb/Leprdb(db/db)小鼠按空腹血糖(FBG)值随机分为模型组、二甲双胍组、桑叶水提物低剂量(MLE-L)组和桑叶水提物高剂量(MLE-H)组,每组6只;另设6只C57BLKS/JGpt同窝野生型(m/m)小鼠作为正常组。各给药组小鼠灌胃相应药物,正常组和模型组小鼠均给予等体积去离子水,每日灌胃1次,连续给药8周。测定小鼠体质量、双侧肾脏绝对重量、FBG,并进行口服葡萄糖耐量实验(OGTT),苏木素-伊红染色、过碘酸雪夫染色观察肾脏组织病理变化,检测血清肌酐(SCr)、血清尿素氮(BUN)含量,酶联免疫吸附测定法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和尿微量白蛋白(U-mAlb)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量、肾脏绝对重量、FBG、OGTT曲线下面积(AUC)显著升高(P<0.01),SCr、BUN、U-mAlb含量显著升高(P<0.01),血清TNF-α、IL-6含量显著升高(P<0.01),肾组织出现肾小球基底膜增厚,炎性细胞浸润明显,肾组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠体质量差异无统计学意义;MLE-H组、二甲双胍组小鼠肾脏绝对重量明显降低(P<0.05,P<0.01);第4~8周二甲双胍组、MLE-L组、MLE-H组FBG明显降低(P<0.05,P<0.01);MLE-H组、二甲双胍组小鼠AUC显著降低(P<0.01),MLE-L组小鼠AUC呈下降趋势,差异无统计学意义;MLE-H组、二甲双胍组小鼠SCr、BUN、U-mAlb含量显著降低(P<0.01),MLE-L组小鼠SCr、U-mAlb含量显著降低(P<0.01);MLE-H组、二甲双胍组小鼠血清TNF-α、IL-6含量显著降低(P<0.01);各给药组小鼠肾组织病变均得到不同程度改善;MLE-H组小鼠肾组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:桑叶水提物可改善db/db糖尿病小鼠肾组织结构和功能,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。

关键词：桑叶水提物 2型糖尿病糖尿病肾病 Toll样受体4(TLR4) 髓样分化因子88(MyD88) 核转录因子-κB p65(NF-κB p65)

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基于NF-κB信号通路的糖尿病病理机制及中医药干预研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 246-255页

作者：王梦璐石璐何昶昊安永铖吕迎兰王晨李慧敏张慧琳黄艳付宛鑫单子轶赵保胜北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学生命科学学院北京102488 北京中医药大学北京中医药研究院北京100029

随着人民生活水平的提高,糖尿病的发展形势日益严峻。糖尿病是一种慢性炎症性疾病,患者体内伴随着核转录因子-κB(NF-κB)的表达异常。NF-κB存在于多种组织细胞中,参与调节与免疫功能和炎症有关的多种基因,在机体受到外界刺激的情况下... 详细信息

随着人民生活水平的提高,糖尿病的发展形势日益严峻。糖尿病是一种慢性炎症性疾病,患者体内伴随着核转录因子-κB(NF-κB)的表达异常。NF-κB存在于多种组织细胞中,参与调节与免疫功能和炎症有关的多种基因,在机体受到外界刺激的情况下可被多种因子激活,从而使机体产生炎症等反应。以往对于NF-κB的研究更多的是在癌症领域,尚未对相关信号通路治疗糖尿病的病理机制及中医药治疗进展做系统阐述。查阅国内外相关文献资料发现,在糖尿病发生发展过程中,NF-κB并不是孤立的,而与炎症、氧化应激、能量代谢相关信号分子均有关联并参与介导炎症、胰岛β细胞凋亡、胰岛素信号传导等生理功能。因此阻断NF-κB信号通路的传导有利于治疗糖尿病。目前西医的治疗手段主要包括口服降糖药和注射胰岛素,但不良反应较明显,中医药在治疗糖尿病方面具有靶点多、作用广、疗效优等特点,具有补气活血、理气化痰、清热解毒、滋阴润燥功效的中药及复方可以通过抗炎等作用有效干预NF-κB信号通路在体内的异常表达。该文总结NF-κB信号通路及其与糖尿病的关联关系,并就近5年来中医药干预NF-κB信号通路治疗糖尿病的现代研究进展进行综述,以期为基于NF-κB信号通路探讨糖尿病新的病理机制奠定实验室基础,为糖尿病防治及相关中药新药研发提供新的作用靶点与研究方向。

关键词：核转录因子-κB 信号通路糖尿病炎症中医药

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风药羌活治疗阳痿功用探析

环球中医药 2024年第1期17卷 95-97页

作者：陈晓莹何昶昊张晓萌王舒冉赵章弟王磊胡素敏北京中医药大学中医学院 100029

羌活味辛、性温,功善解表散寒,祛风除湿,止痛。羌活在现行各版《中药学》教材均被列为解表药,常用来治疗风寒感冒、头痛项强、风寒湿痹、肩背酸痛等病症。然而,羌活的临床应用不限于此,如其被广泛运用于阳痿证治中。本文通过分析、研究... 详细信息

羌活味辛、性温,功善解表散寒,祛风除湿,止痛。羌活在现行各版《中药学》教材均被列为解表药,常用来治疗风寒感冒、头痛项强、风寒湿痹、肩背酸痛等病症。然而,羌活的临床应用不限于此,如其被广泛运用于阳痿证治中。本文通过分析、研究本草古籍以及古今医家的医案,发现羌活治疗阳痿的机理主要是:辛而辛散起痿,可宣散湿邪以畅达阳气,行散瘀血以畅通宗筋,疏散肝郁以畅调气机;温可温振起痿,鼓动肾阳,宣振郁阳,以开通阳道,从而达到起痿用事的目的。

关键词：羌活阳痿风药辛散起痿温振起痿临床验案

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基于“阴阳自和”探讨自噬在生精细胞辐射损伤中的作用

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中华中医药学刊 2023年第4期41卷 68-71页

作者：张晓萌陈晓莹何昶昊王磊胡素敏北京中医药大学中医学院北京100029 中国中医科学院中医临床基础医学研究所北京100070

在电离辐射的影响下,生精细胞中会产生大量受损的大分子物质,诱导细胞凋亡,进而导致生精功能障碍。自噬是真核细胞溶酶体清除细胞受损成分,并为细胞提供营养与能量,维持细胞功能和内环境稳态的过程。这一过程蕴含了中医“阴阳自和”的... 详细信息

在电离辐射的影响下,生精细胞中会产生大量受损的大分子物质,诱导细胞凋亡,进而导致生精功能障碍。自噬是真核细胞溶酶体清除细胞受损成分,并为细胞提供营养与能量,维持细胞功能和内环境稳态的过程。这一过程蕴含了中医“阴阳自和”的理论内涵。生精功能的发挥有赖于阴阳平衡,辐射致生精功能的损伤是阴阳失和的体现,而自噬在参与调控细胞生命进程中的作用,与阴阳自和维持阴平阳秘的中医平衡观相一致。从“阴阳自和”角度探讨自噬在电离辐射致生精功能损伤过程中的作用,拟为防治电离辐射生精功能损伤提供一些新思路。

关键词：电离辐射生精功能阴阳自和自噬

益气解毒方对6 GyCo γ射线致小鼠血睾屏障损伤的防护效应

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北京中医药大学学报 2022年

作者：叶一帆闫玥王磊陈晓莹何昶昊张晓萌石中玉姜荟茜庄鑫丽胡素敏北京中医药大学中医学院

目的观察6GyCoγ射线一次性全身照射对C57BL/6J小鼠血睾屏障的损伤，以及益气解毒方的防护效应。方法80只C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、安多霖组(0.54g/kg)和益气解毒方组(16.58g/kg)，每组20只。预防性给药10d后，除空白...

目的观察6GyCoγ射线一次性全身照射对C57BL/6J小鼠血睾屏障的损伤，以及益气解毒方的防护效应。方法80只C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、安多霖组(0.54g/kg)和益气解毒方组(16.58g/kg)，每组20只。预防性给药10d后，除空白组外，其余各组小鼠均给予6GyCoγ射线一次性全身照射，并于照射后第4天持续给药至照射后第11天。分别于照射后2d及12d处死小鼠，称量睾丸和附睾质量，HE染色观察睾丸及附睾病理变化、测量睾丸生精小管直径和生精上皮厚度，ELISA法检测血清抑制素B(INHB)水平，Westernblotting检测小鼠睾丸中紧密连接蛋白-11及闭锁蛋白表达水平。结果与空白组比较，模型组、安多霖组及益气解毒方组小鼠睾丸和附睾质量在照射后2 d差异没有统计学意义，而照射后12 d均下降(P＜0.01)；模型组小鼠睾丸和附睾组织在照射后2 d即出现病理损伤，照射后12 d损伤加重，且在这两个时间点，生精小管直径和生精上皮厚度均较空白组下降(P＜0.01)。益气解毒方组小鼠睾丸及附睾组织病理损伤均比模型组改善，且生精小管直径和生精上皮厚度较模型组均上升(P＜0.01)。在照射后12 d，模型组小鼠血清INH B含量较空白组下降(P＜0.05)；益气解毒方组小鼠血清INH B含量较模型组上升(P＜0.01)。照射后2 d及12 d，模型组小鼠睾丸中紧密连接蛋白-11、闭锁蛋白含量均较空白组下降(P＜0.05，P＜0.01)；而益气解毒方组小鼠睾丸中紧密连接蛋白-11、闭锁蛋白含量均较模型组上升(P＜0.01)。结论 6 GyCo γ射线一次性全身照射导致雄性C57BL/6J小鼠血睾屏障严重损伤，益气解毒方能有效减轻该损伤，并促进生精功能的恢复，具有一定的防护效应。

关键词：

益气解毒方对6 Gy 60Co γ射线致小鼠血睾屏障损伤的防护效应

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北京中医药大学学报 2022年第11期45卷 1151-1159页

作者：叶一帆闫玥王磊陈晓莹何昶昊张晓萌石中玉姜荟茜庄鑫丽胡素敏北京中医药大学中医学院北京102488

目的观察6 Gy60Coγ射线一次性全身照射对C57BL/6J小鼠血睾屏障的损伤,以及益气解毒方的防护效应。方法 80只C57BL/6J雄性小鼠根据体质量随机分为空白组、模型组、安多霖组(0.54 g/kg)和益气解毒方组(16.58 g/kg),每组20只。预防性给药... 详细信息

目的观察6 Gy60Coγ射线一次性全身照射对C57BL/6J小鼠血睾屏障的损伤,以及益气解毒方的防护效应。方法 80只C57BL/6J雄性小鼠根据体质量随机分为空白组、模型组、安多霖组(0.54 g/kg)和益气解毒方组(16.58 g/kg),每组20只。预防性给药10 d后,除空白组外,其余各组小鼠均给予6 Gy60Coγ射线一次性全身照射,并于照射后第4天持续给药至第11天。分别于照射后第2、12天处死小鼠,称量睾丸和附睾质量,HE染色观察睾丸及附睾病理变化、测量睾丸生精小管直径和生精上皮厚度,ELISA法检测血清抑制素B(INH B)水平,Western blotting检测小鼠睾丸中紧密连接蛋白-11及闭锁蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组、安多霖组及益气解毒方组小鼠睾丸和附睾质量在照射后第2天差异无统计学意义,而照射后第12天均下降(P<0.01);模型组小鼠睾丸和附睾组织在照射后第2天即出现病理损伤,照射后第12天损伤加重,且在这2个时间点,生精小管直径和生精上皮厚度均较空白组下降(P<0.01)。益气解毒方组小鼠睾丸及附睾组织病理损伤均较模型组改善,且生精小管直径和生精上皮厚度较模型组均增加(P<0.01)。在照射后12 d,模型组小鼠血清INH B含量较空白组下降(P<0.05);益气解毒方组小鼠血清INH B含量较模型组上升(P<0.01)。照射后第2、12天,模型组小鼠睾丸中紧密连接蛋白-11、闭锁蛋白含量均较空白组下降(P<0.05,P<0.01),益气解毒方组小鼠睾丸中紧密连接蛋白-11、闭锁蛋白含量均较模型组上升(P<0.01)。结论 6 Gy60Coγ射线一次性全身照射导致雄性C57BL/6J小鼠血睾屏障严重损伤,益气解毒方能有效减轻该损伤,并促进生精功能的恢复,具有一定的防护效应。

关键词：益气解毒方电离辐射支持细胞血睾屏障小鼠

TGF-β相关信号通路在糖尿病病理机制中的作用及中医药干预研究进展

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中国实验方剂学杂志 2022年第21期28卷 254-263页

作者：王晨程龙石璐何昶昊安永诚段钰卉代泓钰李慧敏吕迎兰付宛鑫黄艳张慧琳赵保胜北京中医药大学中药学院生命科学学院中医药研究院北京100029

现代社会生活方式的改变,特别是高脂饮食和运动量减少使糖尿病发病率日益升高,已成为全球性的公共卫生问题,寻找有效的糖尿病治疗方法日益迫切。转化生长因子-β(TGF-β)信号通路与糖尿病并发症、肿瘤关系的研究较多,但其在糖尿病发生... 详细信息

现代社会生活方式的改变,特别是高脂饮食和运动量减少使糖尿病发病率日益升高,已成为全球性的公共卫生问题,寻找有效的糖尿病治疗方法日益迫切。转化生长因子-β(TGF-β)信号通路与糖尿病并发症、肿瘤关系的研究较多,但其在糖尿病发生的作用尚未阐明。TGF-β信号通路可被多种因素激活,直接或间接导致胰岛β细胞凋亡和胰岛素抵抗(IR),有望成为糖尿病治疗的重要新靶点。TGF-β相关信号通路包括腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、糖基化终产物受体、c-Myc、SnoN、Smurf1、miR-335-5P等信号分子,参与IR、胰岛β细胞凋亡、胰岛素分泌障碍、脂肪细胞纤维化表型及脂肪细胞代谢障碍的发生发展,并抑制白色脂肪棕色化,在人类糖尿病病理过程中发挥重要作用。中医认为糖尿病的病机为气阴两虚,后期除气虚外兼有阳虚血瘀,治以益气养阴,后期兼有温阳活血。研究发现部分中药和复方治疗糖尿病的作用与其对TGF-β信号通路的抑制高度相关。现综述TGF-β信号分子相关多条信号通路,阐明其在糖尿病形成过程中的病理机制,并就治疗糖尿病的中药复方与TGF-β信号通路相关性进行展望性分析。为治疗糖尿病的研究提供一定的理论依据。

关键词：转化生长因子-(βTGF-β) 糖尿病胰岛素抵抗胰岛β细胞

芦丁促进3T3-L1前脂肪细胞棕色化及其机制

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中国实验方剂学杂志 2023年第5期29卷 137-143页

作者：吕迎兰程龙石璐代泓钰段钰卉安永铖李慧敏王晨何昶昊黄艳张慧琳付宛鑫孟闫燕赵保胜北京中医药大学中药学院北京102488 北京中医药大学生命科学学院北京102488 北京中医药大学北京中医药研究院北京100029

目的:观察芦丁对3T3-L1前脂肪细胞棕色化效应的影响,并探讨其机制。方法:细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测不同浓度芦丁(3.125、6.25、12.5、25、50、100、200μmol·L^(-1))对3T3-L1细胞活性影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测... 详细信息

目的:观察芦丁对3T3-L1前脂肪细胞棕色化效应的影响,并探讨其机制。方法:细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测不同浓度芦丁(3.125、6.25、12.5、25、50、100、200μmol·L^(-1))对3T3-L1细胞活性影响,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同浓度芦丁(12.5、25、50μmol·L^(-1))对脂肪细胞产热相关蛋白解偶联蛋白1(UCP1)、PR结构域蛋白16(PRDM16)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)表达的影响。确定芦丁最佳浓度后,油红O染色观察芦丁对脂肪细胞中脂滴生成的影响,Western blot检测线粒体生物合成标志性蛋白核呼吸因子1(NRF1)、核呼吸因子2(NRF2)和线粒体转录因子A(TFAM)的表达。结果:与空白组比较,200μmol·L^(-1)芦丁显著抑制3T3-L1细胞活性(P<0.01);在12.5、25、50μmol·L^(-1)浓度下,50μmol·L^(-1)芦丁显著促进产热蛋白(UCP1、PRDM16、PGC-1α)表达(P<0.01),确定为最佳浓度。与空白组比较,芦丁50μmol·L^(-1)显著增加3T3-L1细胞线粒体UCP1蛋白的免疫荧光强度(P<0.01)及线粒体生物合成标志性蛋白NRF1、NRF2和TFAM的表达(P<0.01),显著抑制3T3-L1脂肪细胞脂滴生成(P<0.01)。结论:芦丁可抑制3T3-L1脂肪细胞脂滴沉积,增加产热相关蛋白(UCP1、PRDM16和PGC-1α)及线粒体生物合成标志性蛋白(NRF1、NRF2和TFAM)的表达,从而诱导3T3-L1脂肪细胞棕色化,为开发安全调节白色细胞棕色化的药物提供实验室基础。

关键词：芦丁 3T3-L1前脂肪细胞脂肪细胞棕色化肥胖线粒体生物合成