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麦角菌发酵物中α麦角隐亭的RP-HPLC测定方法

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中国药学杂志 2000年第4期35卷 260-261页

作者：朱平赵鸿莲朱慧欣王全何惠霞中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所卫生部天然药物生物合成重点实验室北京100050

目的 :建立麦角菌发酵产物α麦角隐亭的RP HPLC定量测定方法 ,对在一定条件下α麦角隐亭发酵生产的峰值进行初步探索。方法 :色谱柱 (2 5 0mm× 4.6mm ,填料 :YWG C18,10 μm) ;流动相为甲醇磷酸盐缓冲液 (pH7.0 ) 乙酸乙酯 (75∶2 5... 详细信息

目的 :建立麦角菌发酵产物α麦角隐亭的RP HPLC定量测定方法 ,对在一定条件下α麦角隐亭发酵生产的峰值进行初步探索。方法 :色谱柱 (2 5 0mm× 4.6mm ,填料 :YWG C18,10 μm) ;流动相为甲醇磷酸盐缓冲液 (pH7.0 ) 乙酸乙酯 (75∶2 5∶1) ;流速为 1.0ml·min-1;检测波长为 312nm。建立回归方程 ,进行方法精密度测定和加样回收率试验。结果 :回归方程A =190 5 8.5 4M +135 2 .6 6 ,r =0 .9997,在 0 .6 375～ 6 .4375 μg范围内线性关系良好 ;日内和日间相对标准偏差 (RSD)分别为1.15 %和 0 .44 % ;标准品浓度为 12 2 ,2 44和 488μg·ml-1时加样回收率分别为 10 8.48% ,10 5 .15 % ,10 9.5 3%。用该方法测得α麦角隐亭发酵生产的峰值一般在发酵的第 15～ 17d。结论 :该方法在定量测定麦角菌发酵产物α麦角隐亭方面灵敏、准确。

关键词： α麦角隐亭 RP-HPLC 麦角菌发酵物

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α-麦角隐亭产生菌的原生质体诱变育种

真菌学报 1996年第3期15卷 215-219页

作者：何惠霞朱平李焕娄中国医学科学院

为了提高在一般培养条件下不易产生分生孢子的黑麦麦角菌(Claviceps purpurea)的产碱率,对原生质体诱变的可行性进行了探讨。实验表明,对α-麦角隐亭(α-Ergokryptine)产生菌的原生质体采用紫外线(UV)照射9分钟,γ-射线(^(60)Co)10万伦... 详细信息

为了提高在一般培养条件下不易产生分生孢子的黑麦麦角菌(Claviceps purpurea)的产碱率,对原生质体诱变的可行性进行了探讨。实验表明,对α-麦角隐亭(α-Ergokryptine)产生菌的原生质体采用紫外线(UV)照射9分钟,γ-射线(^(60)Co)10万伦琴/20分钟辐射,亚硝基胍(NTG)6mg/ml 60分钟进行诱变处理,均可获得较稳定的高产突变株。经过上述三种方法的交替诱变处理,α-麦角隐亭的产率由原始菌株的40mg/L,提高到524mg/L,增加了12倍,说明用原生质体进行诱变处理,配合田间复壮,对提高*** α-麦角隐亭的产率是可行的。

关键词：麦角菌 α-麦角隐亭原生质体诱变育种

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麦角菌和雀稗麦角菌原生质体的形成与再生

真菌学报 1992年第4期11卷 272-278页

作者：朱平何惠霞岳德超中国医学科学院药物研究所北京100050

本文报道了快速制备麦角菌(Claviceps purpurea)和雀稗麦角菌(Claviceps paspali)原生质体的方法及影响原生质体形成的若干因素。用适当方法培养菌丝体,利用商品溶壁酶制剂(10mg/ml),以0.7mol/l KCl为原生质体高渗液,28℃为酶解温度,处... 详细信息

本文报道了快速制备麦角菌(Claviceps purpurea)和雀稗麦角菌(Claviceps paspali)原生质体的方法及影响原生质体形成的若干因素。用适当方法培养菌丝体,利用商品溶壁酶制剂(10mg/ml),以0.7mol/l KCl为原生质体高渗液,28℃为酶解温度,处理时间仅需1—2h,菌丝体细胞壁即被彻底消化而释放出大量原生质体。在适当的固体再生培养基上,两种麦角菌原生质体的再生频率分别为7.7%和13.2%左右。培养基中添加25mg/l脱氧胆酸钠有利于形成易于计数和分离的小菌落。本文还就CaCl_2,MgCl_2及低温保藏(3—4℃,30天)对于原生质体稳定性与再生的影响作了初步探讨,并证实溶壁酶对原生质体有明显的破坏作用。

关键词：麦角菌属原生质体

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麦角碱生物合成研究

中国药学杂志 1992年第6期27卷 327-330页

作者：何惠霞朱平岳德超中国医学科学院药物研究所

本文综述了麦角碱类生物合成的研究进展。在生物合成机理方面,证实了 L-色氨酸和甲羟戊酸作为前体物参与了麦角碱生物转化过程。二甲基烯丙色氨酸、裸麦角碱-I-醛、野麦角碱及雀稗草酸等为麦角胺及麦角酰胺的转化中间体。肽类麦角碱的... 详细信息

本文综述了麦角碱类生物合成的研究进展。在生物合成机理方面,证实了 L-色氨酸和甲羟戊酸作为前体物参与了麦角碱生物转化过程。二甲基烯丙色氨酸、裸麦角碱-I-醛、野麦角碱及雀稗草酸等为麦角胺及麦角酰胺的转化中间体。肽类麦角碱的生物合成研究表明:可能是在没有任何游离中间体存在的情况下,以协同方式在多酶复合体上形成肽链。对于被结合的底物,多功能酶复合物具有一定的可变性,因而在培养基中加入某种氨基酸,可以控制麦角碱的生物合成。

关键词：麦角碱生物合成

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麦角碱的类型、药理活性及临床应用

中国药学杂志 1992年第4期27卷 198-201页

作者：何惠霞朱平岳德超中国医学科学院药物研究所

麦角碱是一类具广泛药理活性的生物碱。其母核与5-羟色胺,去甲肾上腺素和多巴胺的化学结构类似。麦角碱分子结构上的细微差别或修饰,可使其作用于不同的受体,或改变与受体的亲和性,因而导致其生理活性上的差异。只有8位上β-构型的(+)-... 详细信息

麦角碱是一类具广泛药理活性的生物碱。其母核与5-羟色胺,去甲肾上腺素和多巴胺的化学结构类似。麦角碱分子结构上的细微差别或修饰,可使其作用于不同的受体,或改变与受体的亲和性,因而导致其生理活性上的差异。只有8位上β-构型的(+)-麦角酸衍生物才具有药理活性,其差向异构体即(+)-异麦角酸衍生物则无药理活性。迄今已有10余种麦角碱类药物被用于临床。本文简要介绍这些药物的临床应用及药理作用特征。

关键词：麦角碱药理临床受体

双歧三联活菌辅助美沙拉嗪治疗难治性溃疡性结肠炎的临床观察

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中国药房 2015年第12期26卷 1634-1636页

作者：何惠霞叶全忠江山市贺村中心卫生院内科浙江江山324109 衢州市人民医院消化内科浙江衢州324000

目的:观察双歧三联活菌辅助美沙拉嗪治疗难治性溃疡性结肠炎(RUC)的临床疗效和安全性。方法:78例RUC患者随机均分为对照组和联合组。对照组患者给予美沙拉嗪肠溶片1 g,餐前口服,每日3次;联合组患者在对照组治疗的基础上给予双歧三联活... 详细信息

目的:观察双歧三联活菌辅助美沙拉嗪治疗难治性溃疡性结肠炎(RUC)的临床疗效和安全性。方法:78例RUC患者随机均分为对照组和联合组。对照组患者给予美沙拉嗪肠溶片1 g,餐前口服,每日3次;联合组患者在对照组治疗的基础上给予双歧三联活菌胶囊420 mg,餐前口服,每日3次。两组患者疗程均为8周。观察两组患者的临床疗效、治疗前后各临床症状评分、疾病活动指数(DAI)、C反应蛋白(CRP)水平,记录复发情况及不良反应发生情况。结果:联合组患者总有效率显著高于对照组,复发率显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者各临床症状评分、DAI、CRP水平均显著低于同组治疗前,且联合组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。联合组患者不良反应发生率显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:双歧三联活菌辅助美沙拉嗪治疗RUC的疗效显著,可降低患者复发率,且安全性更好。

关键词：双歧三联活菌美沙拉嗪难治性溃疡性结肠炎疗效安全性

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麦角菌的遗传学和菌种选育

中国药学杂志 1991年第1期26卷 3-6页

作者：何惠霞朱平岳德超中国医学科学院药物研究所

本文概述了麦角菌的遗传学特征。麦角菌菌株产生生物碱的类型是受遗传因素决定的,同种菌株往往产生生物碱的混合物,而混合生物碱的生成比率则依赖于环境因素。本文还结合有关研究进展,较系统地介绍了麦角菌菌种的选育程序及方法。对于... 详细信息

本文概述了麦角菌的遗传学特征。麦角菌菌株产生生物碱的类型是受遗传因素决定的,同种菌株往往产生生物碱的混合物,而混合生物碱的生成比率则依赖于环境因素。本文还结合有关研究进展,较系统地介绍了麦角菌菌种的选育程序及方法。对于广泛来源的野生菌株进行初筛,然后,采用人工诱变的选育方法进行菌株的优化选育,是获取所需生物碱高产菌株的有效手段。

关键词：麦角菌遗传学诱变选育菌种

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创伤性休克263例扩容救治体会

解放军医学情报 1994年第1期8卷 13-14页

作者：董文学何惠霞空军西安医院西安710054 武警陕西医院

1982年5月至1993年4月,我们救治创伤性休克263例,死亡14例,取得了较好效果。在诊断过程中,注重以“快”而“准”为原则,采用了:一看、二摸、三测压、四检查的方法。即一看面色表情;二摸脉搏和肢温;三测血压、脉压及红细胞压积;四查重要... 详细信息

1982年5月至1993年4月,我们救治创伤性休克263例,死亡14例,取得了较好效果。在诊断过程中,注重以“快”而“准”为原则,采用了:一看、二摸、三测压、四检查的方法。即一看面色表情;二摸脉搏和肢温;三测血压、脉压及红细胞压积;四查重要体征、

关键词：休克创伤性扩充血容量急救

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蝎毒镇痛活性肽在毕赤酵母中表达条件的优化

药学学报 2009年第1期44卷 91-94页

作者：杨金玲何惠霞朱慧新程克棣朱平中国医学科学院、北京协和医学院药物研究所卫生部天然药物生物合成重点实验室教育部中草药物质基础与资源利用重点实验室北京100050

采用单因子和正交试验对毕赤酵母重组菌产生蝎毒镇痛活性肽BmK AngM1的发酵过程进行优化,确定了最佳发酵条件:1.2%甲醇,0.6%酪蛋白水解物,初始pH6.0,3×接种量。在此发酵条件下,BmK AngM1在毕赤酵母重组菌中的表达量可超过500mg.L-1,比... 详细信息

采用单因子和正交试验对毕赤酵母重组菌产生蝎毒镇痛活性肽BmK AngM1的发酵过程进行优化,确定了最佳发酵条件:1.2%甲醇,0.6%酪蛋白水解物,初始pH6.0,3×接种量。在此发酵条件下,BmK AngM1在毕赤酵母重组菌中的表达量可超过500mg.L-1,比对照提高了两倍以上。本研究为大规模发酵制备BmK AngM1奠定了基础,更好地满足了BmK AngM1的理论研究及新药开发的需要。

关键词：东亚钳蝎 BmK AngM1 毕赤酵母基因表达发酵